皮肤性病科真菌检查技术操作规范.docx

皮肤性病科真菌检查技术操作规范一、真菌直接镜检是一种方便、准确诊断真菌病的检测方法。此法简便易行，阳性可明确真菌 是否存在，结合临床表现可确诊皮肤真菌病，但一般不能确定致病菌种类，而且 阴性不能完全排除真菌病诊断。【适应证】各种浅部、深部真菌病。【禁忌证】无特殊禁忌。【操作方法及程序】1 .用钝刀刮取皮损边缘部的皮屑，或用小刀刮取变色松脆的甲屑，用拔毛镒 拔取病发，置载玻片上，加1滴10%的KOH溶液，盖上盖玻片后在酒精灯上微 微加热，待榇本溶解，轻轻加压盖玻片使标本透明，然后在显微镜下观察。2 .检查时应遮去强光，先在低倍镜下观察有无真菌菌丝和抱子，然后用高倍 镜观察抱子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。3 .典型真菌镜检所见花斑癣：短粗、两头钝圆、稍弯曲的菌丝，成堆的圆形或卵圆形厚壁抱 子，有时有芽胞。(2)头癣黄癣：黄癣痂，发内抱子、鹿角状菌丝，可见气沟、气泡。白癣：断发外菌鞘由镶嵌或成堆圆形狗子组成。 黑癣:发内链状抱子。体股癣、手足癣：分支分隔的长菌丝。(4)甲癣：分支分隔的长菌丝，常断裂为关节抱子样。念珠菌病，假菌丝、圆形或椭圆形芽胞。(6)隐球菌病：圆形或椭圆形双壁狗子，外围有一层透光荚膜，在黑色背景 下极为明亮。着色芽生菌病:棕色圆形厚壁分隔泡子。暗色丝抱霉病，棕色分支分隔菌丝或酵母样细胞。(9)链状芽生菌病:链状出芽抱子。(10)毛霉病:宽大菌丝，不分隔。【注意事项】1 .取材应在损害活动区，如环形损害的边缘、水庖顶部，量要充足。2 .体液标本应离心后取沉渣镜检。有条件者应同时进行真菌培养。3 .取材前皮损部位应尽量避免涂药。二、真菌培养目的是进一步提高病原体检出的阳性率，同时确定致病菌的种类，一旦发现 肯定的致病菌如红色毛癣菌或新型隐球菌时，诊断即可确立。但如果分离出条件 致病菌如白色念珠菌或烟曲霉时，应结合临庞进行判断。从无菌部位如血液或脑 脊液中分离出条件致病菌常提示肯定的感染，但对来自于脓、痰或尿的标本则应 谨慎解释结果，单靠一次培养阳性往往不能确定诊断、有时还须结合直接镜检的 结果，因此强调直接镜检与培养检查相结合的重要性。【适应证】1 .疑似真菌感染的标本。2 .进一步确定感染真菌种类。【禁忌证】无特殊禁忌。【操作方法及程序】1 .在无菌操作下，将标本接种于沙氏葡萄糖琼脂(SDA),置25s27摄氏度温 箱内培养4s6周。2 .如怀疑有深部真菌，应同时在3537摄氏度培养。3 .菌落出现后，应定期观察其生长情况。4 .常规分离鉴定使用的培养基为SDA斜面培养基，加0.005%氯霉素，对皮 肤癣菌，还应添加0.05%放线菌酮。5 .对分离到的真菌，应结合菌落和显微镜下形态学特点将其鉴定到种。真菌 常用形态学鉴定，而酵母常以形态学和生理生化学方法结合进行鉴定。6 .常见真菌培养所见：念珠菌病:奶油色酵母样菌落隐球菌病：乳白色酵母样菌落，而后为浅橘黄色，质地呈黏液状。抱子丝菌病:棕色至棕黑色菌落。曲霉病:黄绿色毛状菌落。芽生菌病：真菌相为白色棉花样菌落，酵母相为奶油色或棕色菌落。暗色丝抱霉病:棕黑色菌落。诺卡菌病:橘黄色或红色菌落，有泥土气味。【注意事项】1 .应与直接镜检结果综合进行判断。2 .严格无菌操作，避免污染。3 .提倡多管（点卜多次培养，确保结果可信性。