高中生物实验复习.ppt
专题专题七七生物专题实验生物专题实验第一讲第一讲 教材基础实验教材基础实验第二讲第二讲 综合探究实验综合探究实验 实验与探究能力实验与探究能力 (1)(1)能独立完成课本上的必做实验,包能独立完成课本上的必做实验,包括括理解理解实验实验目的目的、原理原理、方法方法和操作和操作步骤步骤,掌握掌握相关的操作相关的操作技能技能,并能将这些实验涉及,并能将这些实验涉及的方法和技能进行的方法和技能进行综合的运用综合的运用。(2)(2)具备具备验证验证简单生物学事实的能力,简单生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行并能对实验现象和结果进行解释解释、分析分析和和处处理理。(3)(3)具有对一些生物学问题进行初步具有对一些生物学问题进行初步探探究究的能力,包括的能力,包括确认变量、作出假设和预期、确认变量、作出假设和预期、设计可行设计可行的的研究方案、处理和解释数据、根研究方案、处理和解释数据、根据数据作出合理的判断据数据作出合理的判断等。等。(4)(4)能对一些简单的实验方案作出恰当能对一些简单的实验方案作出恰当的的评价和修改评价和修改。1111年大纲对年大纲对实验部分实验部分的要求的要求(四个层次)四个层次)考试大纲对实验与探究能力要求考试大纲对实验与探究能力要求考生具有以考生具有以探究能力探究能力为核心的为核心的四种实四种实验能力验能力即:即:技能实验技能实验(方法和技能)(方法和技能)验证实验验证实验(对照和原理)(对照和原理)探究实验探究实验(对照处理和(对照处理和分析结果分析结果)评价实验评价实验(纠正错误、完善方案纠正错误、完善方案)高考生物实验考查的高考生物实验考查的两两种意向种意向以以实验技能实验技能为主为主以以方案设计方案设计为主为主生物制片和普通生物制片和普通显微镜观察技能。显微镜观察技能。组织细胞内组织细胞内物质物质分离分离或或鉴定鉴定技能。技能。探究实验方案探究实验方案,包,包括假设与依据、设计括假设与依据、设计与预期、分析与结论与预期、分析与结论等等调查研究方案调查研究方案,包,包括提纲与问卷或记录括提纲与问卷或记录表表遗传育种方案遗传育种方案实验题的分类实验题的分类课内课内课外课外实验题实验题学生学生操作操作实验实验题题经典经典实验变形题实验变形题信息信息分析实验题分析实验题设计设计类实验题类实验题(探究探究和和验证)验证)评价评价类实验类实验(纠错、完善)(纠错、完善)(20052005年全国理综卷年全国理综卷)植物叶片表皮植物叶片表皮上分布有大量的气孔,气孔结构如图所示。上分布有大量的气孔,气孔结构如图所示。当组成气孔的细胞(保卫细胞)吸水后,会当组成气孔的细胞(保卫细胞)吸水后,会膨胀变形,气孔开启;反之细胞失水收缩,膨胀变形,气孔开启;反之细胞失水收缩,气孔关闭。气孔关闭。请以请以放置一小段时间放置一小段时间的的菠菜菠菜为材料设计为材料设计一个实验,一个实验,证明气孔具有证明气孔具有开启开启和和关闭关闭的功能的功能。要求写出要求写出实验材料实验材料与与主要用具主要用具、实验步骤实验步骤、预测预测实验结果实验结果并作出并作出解释解释。:1 1、实验材料与主要用具:、实验材料与主要用具:菠菜、清水、浓盐水、盖玻片、载玻片、菠菜、清水、浓盐水、盖玻片、载玻片、显微镜、吸水纸、滴管、镊子等。显微镜、吸水纸、滴管、镊子等。2 2、实验步骤:、实验步骤:取菠菜叶,用镊子剥取表皮。取菠菜叶,用镊子剥取表皮。在载玻片上滴一滴清水,将表皮放入清水中,在载玻片上滴一滴清水,将表皮放入清水中,盖上盖玻片,制成临时装片。盖上盖玻片,制成临时装片。将临时装片放在显微镜的载物台上,先用低将临时装片放在显微镜的载物台上,先用低倍镜下找到气孔,移到视野中央,再换高倍镜进倍镜下找到气孔,移到视野中央,再换高倍镜进行观察,记录观察到的气孔状态。行观察,记录观察到的气孔状态。在盖玻片的一侧滴上浓盐水,再另一侧用吸在盖玻片的一侧滴上浓盐水,再另一侧用吸水纸吸取盖玻片下的液体,反复几次。水纸吸取盖玻片下的液体,反复几次。继续观察气孔的变化,并做记录。继续观察气孔的变化,并做记录。3 3、实验实验结果结果及及解释解释:在在清水清水中气孔应中气孔应开启开启,因为当,因为当细胞液浓度细胞液浓度大于大于细胞外溶液细胞外溶液浓度时,保卫细胞吸水膨浓度时,保卫细胞吸水膨胀变形,气孔开启。胀变形,气孔开启。1、学生实验、学生实验(必修部分必修部分)在在浓盐水浓盐水中气孔应中气孔应关闭关闭,因为当,因为当细胞液浓细胞液浓度度小于小于细胞外溶液细胞外溶液浓度时,保卫细胞失水浓度时,保卫细胞失水收缩,气孔关闭。收缩,气孔关闭。必修必修1 1-01-01用显微镜用显微镜观察观察多种多样的细胞(多种多样的细胞(7 7页)页)必修必修1-021-02检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质(1818页)页)必修必修1-031-03观察观察DNA DNA、RNARNA在细胞中的分布(在细胞中的分布(26 26页)页)必修必修1-041-04体验制备细胞膜的方法(体验制备细胞膜的方法(4040页)页)必修必修1-051-05观察观察线粒体和叶绿体(线粒体和叶绿体(4747页)页)必修必修1-061-06观察观察植物细胞的吸水和失水(植物细胞的吸水和失水(6161页)页)必修必修1-071-07探究探究过氧化氢在不同条件下的分解(过氧化氢在不同条件下的分解(7878页)页)必修必修1-081-08探究探究影响酶活性的条件(影响酶活性的条件(8383页)页)必修必修1-091-09探究探究酵母菌细胞的呼吸方式(酵母菌细胞的呼吸方式(9191页)页)必修必修1-101-10绿叶中色素的提取和分离(绿叶中色素的提取和分离(9797页)页)必修必修1-111-11探究探究环境因素对光合作用强度的影响(环境因素对光合作用强度的影响(104104页)页)必修必修1-121-12细胞大小与物质运输的关系(细胞大小与物质运输的关系(110110页)页)必修必修1 1-13-13观察观察根尖分生组织细胞的有丝分裂(根尖分生组织细胞的有丝分裂(115115页)页)必修必修-0-0观察观察细胞的减数分裂(细胞的减数分裂(2121页)页)必修必修-0-0低温诱导染色体加倍(低温诱导染色体加倍(8888页)页)必修必修-0-0调查调查常见的人类遗传病(常见的人类遗传病(9191页)页)必修必修-0-0 生物体维持生物体维持PHPH稳定的机制(稳定的机制(9 9页)页)必修必修-02-02探究探究生长素类似物对扦插枝条生根的作用生长素类似物对扦插枝条生根的作用(5151页)页)必修必修-03-03调查调查种群密度(种群密度(6161页)页)必修必修-04-04培养液中酵母菌数量的动态变化培养液中酵母菌数量的动态变化(6868页)页)必修必修-05-05土壤中动物类群丰富度的研究(土壤中动物类群丰富度的研究(7575页)页)必修必修-06-06土壤中微生物的分解作用(土壤中微生物的分解作用(102102页)页)必修必修-07-07设计制作生态缸,观察稳定性(设计制作生态缸,观察稳定性(112112页)页)序号序号课题内容课题内容选修选修-0 1-0 1 胡萝卜的组织培养(胡萝卜的组织培养(3434页)页)、学生实验、学生实验(选修部分选修部分)一、注意对课本中的实验方法进行归类一、注意对课本中的实验方法进行归类 、生化鉴定法:、生化鉴定法:、对照实验法、对照实验法:、观察法:、观察法:材料要透光,观察的结构最好有颜色。材料要透光,观察的结构最好有颜色。没有颜色的材料要染色没有颜色的材料要染色4 4、提提取取或或分分离离的的方方法法:绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离探究或验证型实验当中,作为反应结果的检验。探究或验证型实验当中,作为反应结果的检验。如何证明如何证明唾液淀粉唾液淀粉酶是蛋白酶是蛋白质?质?观察观察植物细胞的吸水和失水植物细胞的吸水和失水温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响5 5、调查法:、调查法:调查调查种群密度种群密度调查调查常见的人类遗传病常见的人类遗传病光学光学显微镜显微镜电子电子显微镜显微镜镜筒镜筒压片压片夹夹载物台载物台遮光器与光圈遮光器与光圈反光镜反光镜镜座镜座镜柱镜柱镜臂镜臂细准焦螺旋细准焦螺旋粗准焦螺旋粗准焦螺旋物镜物镜目镜目镜一一、光光学学显微镜显微镜的结构的结构 物镜和目镜的放大倍数目镜:插在镜筒、没有螺纹目镜:插在镜筒、没有螺纹物镜:拧在转换器上,带螺纹物镜:拧在转换器上,带螺纹目镜:镜头越长,放大倍数越目镜:镜头越长,放大倍数越。物镜:镜头越物镜:镜头越长长,放大倍数越,放大倍数越大大小小粗准焦螺旋和细准焦螺旋粗粗准焦螺旋准焦螺旋-转动时,镜转动时,镜筒升降范筒升降范围大,故只用于围大,故只用于低低倍镜调焦。倍镜调焦。细细准焦螺旋准焦螺旋-转动时,镜转动时,镜筒升筒升降范围小,降范围小,低、高倍镜调焦时均可用,低、高倍镜调焦时均可用,但但高倍镜调焦时只能用细准焦螺旋。高倍镜调焦时只能用细准焦螺旋。显微镜的放大倍数显微镜的放大倍数放大倍数:是指放大物体的放大倍数:是指放大物体的长度或宽度。长度或宽度。而不是面积和体积。而不是面积和体积。放大倍数放大倍数=目镜放大倍数目镜放大倍数*物镜放大倍数物镜放大倍数 视视野野观观察察到到每每个个细细胞胞的的大大小小与与总总放放大大倍倍数成数成 比。比。细胞数目多少与总放大倍数成细胞数目多少与总放大倍数成 比;比;物镜放大倍数越高,镜头和盖玻片(载玻物镜放大倍数越高,镜头和盖玻片(载玻片)之间的距离越片)之间的距离越 。正正反反近近细胞数目的推算(一)细胞数目的推算(一)10*1010*40视野直径中的细胞数目视野直径中的细胞数目8个个放大倍数的放大倍数的倍数倍数=?放大倍数越大,放大倍数越大,视野直径视野直径中的细胞越中的细胞越?2、当显微镜的目镜为、当显微镜的目镜为10X、物镜、物镜为为40X时,在视野直径范围内看到时,在视野直径范围内看到一行相连的一行相连的4个细胞。若目镜不变,个细胞。若目镜不变,物镜换成物镜换成10X时,则在视野中可时,则在视野中可能看到这行细胞中的能看到这行细胞中的A1个个B4个个C16个个D64个个C C细胞数目的推算(二)细胞数目的推算(二)10*1010*40视野面积中的细胞数目视野面积中的细胞数目64个个放大倍数的放大倍数的倍数倍数的的平方平方4=?2放大倍数越大,视野面积中的细胞越放大倍数越大,视野面积中的细胞越?显微镜的使用显微镜的使用调节亮度:调节亮度:反光镜:提供光源反光镜:提供光源光光圈:控制透光量圈:控制透光量观察颜色较浅的结构用观察颜色较浅的结构用暗暗光光。观察颜色较深的结构用观察颜色较深的结构用强强光光。显微镜的使用步骤显微镜的使用步骤(二)对光(二)对光 3 3、转动转换器,低倍镜对准通光孔、转动转换器,低倍镜对准通光孔(低倍镜、目镜、通光孔、光圈一条线)(低倍镜、目镜、通光孔、光圈一条线)4 4、大的圈对准通光孔,左眼注视目镜,、大的圈对准通光孔,左眼注视目镜,同时调节反光镜,直到看到明亮的视野。同时调节反光镜,直到看到明亮的视野。(三)观察(三)观察(一)取镜和安放(一)取镜和安放 1 1、右手握住镜臂,左手托住镜座。、右手握住镜臂,左手托住镜座。2 2、安放在实验台距边缘、安放在实验台距边缘7 7厘米处。厘米处。低倍镜观察低倍镜观察5 5、把玻片标本放在载物台的通、把玻片标本放在载物台的通光孔上,用压片夹压住。光孔上,用压片夹压住。6 6、转动、转动粗粗准焦螺旋,使镜筒缓准焦螺旋,使镜筒缓缓缓下降下降,直到物镜接近玻片标,直到物镜接近玻片标本为止(本为止(眼睛从侧面看着物镜眼睛从侧面看着物镜下降下降)。)。7 7、左眼观察目镜内,同时、左眼观察目镜内,同时反方反方向向转动转动粗粗准焦螺旋准焦螺旋 ,使,使镜筒镜筒缓缓缓缓上升上升直到看清物像为止。直到看清物像为止。也可以略微转动细准焦螺旋,也可以略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。使看到的物像更加清晰。高倍镜的使用注意事项:高倍镜的使用注意事项:物象不在视野中或不在视物象不在视野中或不在视野中间,野中间,移动装片至视野移动装片至视野中央。中央。调节清晰物象,调节清晰物象,转换转换转换转换器到高倍镜。器到高倍镜。调节亮度调节亮度(反光镜和光圈)(反光镜和光圈)调节焦距调节焦距(只能用(只能用细细准焦准焦螺旋螺旋)换高倍镜前的操作换高倍镜前的操作-移动装片移动装片高倍镜的视野变化和显微镜成像特点高倍镜的视野变化和显微镜成像特点3 3 是使用操作显微镜的几个步骤。是使用操作显微镜的几个步骤。下图为显微镜观察中的两个视野,其中细胞甲下图为显微镜观察中的两个视野,其中细胞甲为主要观察对象,由左视野到右视野时,正确为主要观察对象,由左视野到右视野时,正确的操作顺序是的操作顺序是 转动粗准焦螺旋转动粗准焦螺旋 转动细准焦螺旋转动细准焦螺旋 调节光圈调节光圈 转动转换器转动转换器 移动玻片移动玻片 A A B B C C D D 甲甲C生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1 1、实验原理:、实验原理:某些某些化学试剂化学试剂能够使生物组织中的能够使生物组织中的有关有机化合物产生有关有机化合物产生特定的颜色反应特定的颜色反应。蛋白蛋白质质(肽键肽键)+双双缩脲试剂缩脲试剂紫色反紫色反应应脂脂肪肪+苏苏丹丹IV红红色色脂脂肪肪+苏苏丹丹III橘黄色橘黄色还还原糖原糖+斐林斐林试剂试剂砖红砖红色沉淀色沉淀Cu2O 葡萄糖、果糖、麦芽糖葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素淀粉、蔗糖、纤维素都是都是非非还原性糖,还原性糖,但它们但它们都可以水解生成还原性糖都可以水解生成还原性糖。水浴水浴加热加热2.2.试剂及作用试剂及作用l斐林试剂:与还原性糖反应成斐林试剂:与还原性糖反应成砖红色砖红色;l双缩脲试剂:与蛋白质反应成双缩脲试剂:与蛋白质反应成紫色紫色;l苏丹苏丹(或苏丹(或苏丹):):l把脂肪微粒染成把脂肪微粒染成橘黄色(或红色)橘黄色(或红色)l50%50%酒精:洗去浮色。酒精:洗去浮色。甲液:甲液:0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液:乙液:0.05g/mlCuSO0.05g/mlCuSO4 4溶液。溶液。现配现用,等量混合。现配现用,等量混合。A A液:液:0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液:液:0.00.01 1g/mlCuSOg/mlCuSO4 4溶液。溶液。先先A A,后,后B B,A液液1mL,B液液4滴滴。3 3、实验材料的选择、实验材料的选择(1 1)含有)含有丰富丰富被鉴定的物质;被鉴定的物质;(2 2)是否出现)是否出现颜色颜色掩盖;掩盖;(3 3)易)易操作操作如:梨、苹果;大豆、蛋清;花生、蓖麻、芝麻如:梨、苹果;大豆、蛋清;花生、蓖麻、芝麻如:如番茄不适宜用于鉴定还原糖如:如番茄不适宜用于鉴定还原糖如:如芝麻不适宜用于鉴定脂肪如:如芝麻不适宜用于鉴定脂肪4 4、检测的方法与步骤:、检测的方法与步骤:l用吸水纸吸去薄片周围染液,用用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%50%酒精洗去浮酒精洗去浮色,吸去酒精。不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪色,吸去酒精。不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的胞中的脂肪颗粒脂肪颗粒溶解成溶解成油滴油滴。l用切片在显微镜下观察脂肪时,要考虑材料中脂用切片在显微镜下观察脂肪时,要考虑材料中脂肪的含量和是否容易进行切片操作。肪的含量和是否容易进行切片操作。如花生与芝麻如花生与芝麻哪个材料好?哪个材料好?l观察脂肪的装片不宜久放或实验时间不宜过长。观察脂肪的装片不宜久放或实验时间不宜过长。原因原因时间太长,油滴会溶解在乙醇中时间太长,油滴会溶解在乙醇中。l蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。l斐林试剂斐林试剂要现配现用要现配现用,并且等量的甲液和乙液,并且等量的甲液和乙液混混合加入合加入目的是生成新鲜的目的是生成新鲜的Ca(OH)Ca(OH)2 2;l双缩脲试剂要双缩脲试剂要现配现用现配现用,并且,并且A A液和液和B B液液分别加入分别加入目的是创造碱性环境;目的是创造碱性环境;注意:斐林试剂和双缩脲试剂的区别注意:斐林试剂和双缩脲试剂的区别l鉴定还原性糖的过程需要水浴鉴定还原性糖的过程需要水浴加热加热才能生成砖红才能生成砖红色沉淀;色沉淀;l取材时要考虑材料中被检物质的丰富含量的取材时要考虑材料中被检物质的丰富含量的程度程度及是否出现颜色干扰及是否出现颜色干扰等;等;如番茄鉴定还原糖好吗如番茄鉴定还原糖好吗l苹果或梨组织液必须临时制备,原因苹果中苹果或梨组织液必须临时制备,原因苹果中多酚多酚氧化酶氧化酶含量高,组织液很易被氧化成含量高,组织液很易被氧化成褐色褐色,将产生,将产生的的颜色掩盖颜色掩盖。一一、检测生物组织中还原糖检测生物组织中还原糖 过程:过程:二二氧氧化化硅硅5060度水浴加热度水浴加热脂肪鉴定方法一脂肪鉴定方法一(化学法):(化学法):待测组织样液+3滴苏丹 观察样液颜色变化沉淀沉淀脂肪的鉴定原理:脂肪的鉴定原理:苏丹苏丹与脂肪的亲和力大于苏丹与脂肪的亲和力大于苏丹,因因此此苏苏丹丹染染色色3分分钟钟,而而苏苏丹丹染染色色时时间间只只有有1分钟。分钟。脂肪鉴定方法二(脂肪鉴定方法二(机械机械化学法):化学法):制片制片1 1、现有下列生物材料:、现有下列生物材料:苹果苹果 黄豆种子黄豆种子 梨梨 花生种子花生种子 蛋清蛋清 马铃薯块茎。最适于用来马铃薯块茎。最适于用来鉴定还原性糖的有()鉴定还原性糖的有()A A、B B、C C、D D、C2.2.某些单子叶植物某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料作实验材料,原因是:原因是:.叶绿体中的色素会遮盖反应的真实颜色叶绿体中的色素会遮盖反应的真实颜色过关练习过关练习还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定2.在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是()A甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根、马铃薯块茎等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用予茎等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用予进行可溶性还原糖的鉴定进行可溶性还原糖的鉴定B花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料鉴定的理想材料C大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料的理想植物组织材料D鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料物材料(实验选材、试剂、步骤)实验选材、试剂、步骤)A3.关于实验操作步骤的叙述中,正确的是关于实验操作步骤的叙述中,正确的是(2006广东生物广东生物14)A用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定B脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴成橘黄色的脂肪滴C鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试荆鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试荆甲液摇匀后,再加入乙液甲液摇匀后,再加入乙液D用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现用且必须现混现用(1)生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(实验选材、试剂、步骤)实验选材、试剂、步骤)B4 4使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是制组织样液制组织样液 加入加入2ml 0.1g/ml2ml 0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 加入加入0.01g/mlCuSO0.01g/mlCuSO4 4溶液溶液加入加入0.05g/ml CuSO0.05g/ml CuSO4 4 溶液溶液 煮沸煮沸2 2 分钟分钟 出现砖红色沉淀出现砖红色沉淀A A B B(+)C C D D(+)D5 5用斐林试剂鉴定还原性糖时,溶液颜色变化过程为用斐林试剂鉴定还原性糖时,溶液颜色变化过程为A A浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色 B B无色无色浅蓝色浅蓝色棕色棕色C C砖红色砖红色浅蓝色浅蓝色棕色棕色 D D棕色棕色绿色绿色无色无色A实验二、观察实验二、观察DNA DNA、RNARNA在细胞中的分布在细胞中的分布(p26)(p26)实验原理实验原理染色剂染色剂染色颜色染色颜色 主要存在部位主要存在部位DNARNA吡罗红吡罗红甲基绿甲基绿红色红色绿色绿色主要在细胞核主要在细胞核,线粒线粒体、叶绿体含少量体、叶绿体含少量主要在细胞质主要在细胞质盐酸能够盐酸能够改变细胞膜的通透性改变细胞膜的通透性,加速染,加速染色剂进入细胞,同时使色剂进入细胞,同时使染色体中的染色体中的DNADNA与与蛋白质分离蛋白质分离,有利于,有利于DNADNA与染色剂结合与染色剂结合取口腔上皮细胞制片取口腔上皮细胞制片水解水解冲洗涂片冲洗涂片(10S)染色染色(5m)观观察察(先低倍后高倍先低倍后高倍)30mL 30mL?%HCl的作用?的作用?人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞DNADNA、RNARNA分布分布洋葱鳞片叶内表皮洋葱鳞片叶内表皮细胞细胞DNADNA、RNARNA分布分布(?水)(?水)(?%的的NaClNaCl)能改变细胞膜的通透性,同时使能改变细胞膜的通透性,同时使DNA与蛋白质分离。与蛋白质分离。方法步骤2 2、“观察观察DNADNA和和RNARNA在细胞中的分布在细胞中的分布”的实验中,没有用的实验中,没有用的试剂的试剂 NaCl B.8NaCl B.8的的HClHCl C.C.吡罗红、甲基绿染色剂吡罗红、甲基绿染色剂 D.D.斐林试剂斐林试剂1 1、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在显微镜下观察,可以看到显微镜下观察,可以看到 A.A.细胞核内呈现红色,细胞质内呈现绿色细胞核内呈现红色,细胞质内呈现绿色 B.B.细胞核内呈现绿色,细胞质内呈现红色细胞核内呈现绿色,细胞质内呈现红色 C.C.细胞核和细胞质都呈现绿色细胞核和细胞质都呈现绿色 D.D.细胞核和细胞质都呈现红色细胞核和细胞质都呈现红色观察线粒体和叶绿体的观察线粒体和叶绿体的实验实验(p7)一、实验原理一、实验原理 1.高等绿色植物的叶绿体存在于高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质细胞质基质中,叶绿体一般是中,叶绿体一般是 色的,扁平的色的,扁平的 形或形或 形,可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。形,可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。2.健那绿健那绿染液是染液是专一性专一性的的活活细胞染料。可以细胞染料。可以使活细胞的使活细胞的线粒体呈现线粒体呈现 色。色。绿绿蓝绿蓝绿球球椭球椭球三、方法步骤与注意事项三、方法步骤与注意事项 观察观察叶绿体叶绿体装片:装片:取材:取材:取一片取一片 。(叶片薄且叶绿体大而少)(叶片薄且叶绿体大而少)制片:制片:滴清水,放叶片,加盖玻片,制临时装片滴清水,放叶片,加盖玻片,制临时装片.观察:观察:先先 倍镜找到叶片细胞后用高倍镜观倍镜找到叶片细胞后用高倍镜观察叶绿体(形态和分布)察叶绿体(形态和分布)光强度的变化光强度的变化与叶绿体的位置关系与叶绿体的位置关系绘图:绘图:用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞清楚的叶肉细胞藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮 低低显微镜下的显微镜下的藓类藓类细胞细胞注意事项:注意事项:选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮(稍带叶肉)作观察叶绿体的实验材料是(稍带叶肉)作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键实验成功的关键。原因:藓类属原因:藓类属阴生阴生植物,菠菜叶的下植物,菠菜叶的下表皮是菠菜叶的表皮是菠菜叶的背阳面背阳面,这样的细胞中的,这样的细胞中的叶绿体叶绿体大大且数目且数目少少,便于观察。,便于观察。植物细胞的植物细胞的失水失水 (质壁分离)和(质壁分离)和吸水吸水(质壁分离复原)(质壁分离复原)细胞液浓度细胞液浓度 外界溶液浓度时,细外界溶液浓度时,细胞吸水,质壁分离复原。胞吸水,质壁分离复原。原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性,因原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收缩幅度大,造成质壁分离。而收缩幅度大,造成质壁分离。1实验原理实验原理紫色紫色洋葱磷片叶(洋葱磷片叶(液泡大液泡大且且有颜色有颜色易观察)易观察)2、实验材料及试剂、实验材料及试剂0.3g/ml的蔗糖溶液的蔗糖溶液=30%的蔗糖溶液的蔗糖溶液正常细胞正常细胞初始初始质壁分离质壁分离显著显著质壁分离质壁分离观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原四组同学实验:四组同学实验:质量分数为质量分数为30%和和50%的蔗糖溶液的蔗糖溶液,1mol/LKNO3溶溶液液和和lmol/L的盐酸溶液的盐酸溶液制作了制作了4组临时装片,用显微镜组临时装片,用显微镜随时观察。发现前随时观察。发现前3组在组在2min后发生部分质壁分离,后发生部分质壁分离,5min后质壁分离现象明显,而第后质壁分离现象明显,而第4组无质壁分离现象。组无质壁分离现象。观察到前观察到前3组出现明显的质壁分离现象后,再过组出现明显的质壁分离现象后,再过5min观察,发现观察,发现1、2组无变化,而第组无变化,而第3组自动发生了组自动发生了质壁分离复原现象。质壁分离复原现象。然后对前然后对前2组装片滴加清水,用显微镜观察,发现组装片滴加清水,用显微镜观察,发现第第1组组45min后恢复原状,而第后恢复原状,而第2组无变化,不能发生组无变化,不能发生复原。复原。请分析各组实验装片发生变化的请分析各组实验装片发生变化的原因原因。例题解析例题解析(上海高考试题)(上海高考试题)B B2、在在生生物物学学实实验验中中,关关于于引引流流法法的的叙叙述述正确的是正确的是A、在在盖盖玻玻片片一一侧侧滴滴加加试试剂剂,然然后后将将装装片倾斜片倾斜B、引流目的是让试剂渗到盖玻片下、引流目的是让试剂渗到盖玻片下C、还还原性糖鉴定实验中需要用引流法原性糖鉴定实验中需要用引流法D、引流法可防止装片中产生气泡、引流法可防止装片中产生气泡1.将紫色洋葱磷片叶表皮细胞分别浸入到不同浓度的蔗糖溶将紫色洋葱磷片叶表皮细胞分别浸入到不同浓度的蔗糖溶液中,观察各叶片表皮细胞质壁分离及复原的情况;结果如下:液中,观察各叶片表皮细胞质壁分离及复原的情况;结果如下:溶液浓度(溶液浓度(g/mL)0.030.040.050.100.300.50质壁分离质壁分离时间时间(秒)(秒)不发生不发生不发生不发生240602212质壁分离复原质壁分离复原情况情况能能能能能能不能不能(1)()(4分)紫色洋葱磷片叶表皮细胞液浓度约为:分)紫色洋葱磷片叶表皮细胞液浓度约为:_。最适合本实验的蔗糖溶液浓度为。最适合本实验的蔗糖溶液浓度为_。(2)()(4分)将紫色洋葱磷片叶表皮细胞分别浸入浓度为分)将紫色洋葱磷片叶表皮细胞分别浸入浓度为0.05g/mL的蔗糖溶液、葡萄糖溶液、氯化钠溶液中,短时间内的蔗糖溶液、葡萄糖溶液、氯化钠溶液中,短时间内使质壁分离发生的速度最快的是使质壁分离发生的速度最快的是。原因是:原因是:_。(3)()(2分)在此实验中细胞的含水量对质壁分离速度影响分)在此实验中细胞的含水量对质壁分离速度影响较为明显。细胞含水量与质壁分离速度呈较为明显。细胞含水量与质壁分离速度呈_比关系,外界比关系,外界溶液浓度一定时,细胞含水量越高,质壁分离速度越溶液浓度一定时,细胞含水量越高,质壁分离速度越_。0.04g/mL0.5g/mL0.30g/mL0.05g/mL0.05g/mL的氯化钠溶液的氯化钠溶液离子的总浓度大于前两者的分子浓度离子的总浓度大于前两者的分子浓度正正快快植物细胞质壁分离及复原实验的拓展和应用:植物细胞质壁分离及复原实验的拓展和应用:1、判断细胞死活:、判断细胞死活:待测细胞的生活状态-发生质壁分离是活2、测定细胞液浓度范围:、测定细胞液浓度范围:不同浓度梯度的分离剂、发育状态相似的细胞、未发生质壁分离与刚发生质壁分离的浓度之间。3、比较不同植物细胞的细胞液浓度、比较不同植物细胞的细胞液浓度:4、比较未知浓度溶液的浓度大小、比较未知浓度溶液的浓度大小:同一植物成熟细胞-刚发生质壁分离质壁分离时间长短待测细胞的生活状态:待测细胞的生活状态:发生质壁分离是活。发生质壁分离是活。不同浓度梯度的分离剂、细胞液浓度相同的多个不同浓度梯度的分离剂、细胞液浓度相同的多个成熟成熟细胞、细胞、依据未发生质壁分离与刚发生质壁分离的浓度之间。依据未发生质壁分离与刚发生质壁分离的浓度之间。1.1.同一浓度的分离剂、能否发生质壁分离或分离的程度同一浓度的分离剂、能否发生质壁分离或分离的程度2.2.同一浓度的分离剂、刚发生质壁分离所需的同一浓度的分离剂、刚发生质壁分离所需的时间时间若干细胞液浓度相同的多个若干细胞液浓度相同的多个成熟成熟细胞细胞、刚发生质壁分离时间长短或质壁分离细胞刚发生质壁分离时间长短或质壁分离细胞比例比例比较过氧化氢在不同条件的分解比较过氧化氢在不同条件的分解(p78)1 1、实验原理:、实验原理:新鲜肝脏中含有过氧化氢酶,和新鲜肝脏中含有过氧化氢酶,和FeFe3+3+一样,能一样,能催化过氧化氢分解成水和氧,但二者效率不一样。催化过氧化氢分解成水和氧,但二者效率不一样。2 2、实验方法与步骤、实验方法与步骤(1 1)取两支洁净的试管,编号,各注入)取两支洁净的试管,编号,各注入2ml2ml过氧化氢溶液过氧化氢溶液(2 2)向)向1 1号试管内滴入号试管内滴入2 2滴肝脏研磨液;向滴肝脏研磨液;向2 2号对照试管内号对照试管内 滴入滴入2 2滴氯化铁溶液。滴氯化铁溶液。(3 3)堵住试管口,轻轻地振荡两支试管,使试管内的物质)堵住试管口,轻轻地振荡两支试管,使试管内的物质 混合均匀。观察并记录哪支试管产生的气泡多。混合均匀。观察并记录哪支试管产生的气泡多。(4 4)将点燃但无火焰的卫生香分别放入)将点燃但无火焰的卫生香分别放入1 1、2 2号试管内液面号试管内液面 的上方,观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。的上方,观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。比较过氧化氢在不同条件的分解比较过氧化氢在不同条件的分解(p78)4 4、注意事项、注意事项肝脏要新鲜,并要研磨肝脏要新鲜,并要研磨(不新鲜的肝脏中,过氧化不新鲜的肝脏中,过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。研磨液效果好,氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。研磨液效果好,因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积)因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积)滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。过氧化氢有腐蚀性;实验注意安全。过氧化氢有腐蚀性;实验注意安全。实验时实验时将点燃的卫生香插入试管处,不要插入太将点燃的卫生香插入试管处,不要插入太深,防止受潮熄灭。深,防止受潮熄灭。3 3、实验结果与结论、实验结果与结论 两支试管均有气泡产生,但两支试管均有气泡产生,但1 1号试管产生得快号试管产生得快而且多,两支卫生香均燃烧,但而且多,两支卫生香均燃烧,但1 1号试管口的更猛号试管口的更猛烈。以上的一组对比实验可以烈。以上的一组对比实验可以证明酶的高效性证明酶的高效性。补充:探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用补充:探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用(证明酶的专一性)(证明酶的专一性)1、实验原理:、实验原理:淀粉和蔗糖都没有还原性,淀粉酶将淀粉和蔗糖都没有还原性,淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性;蔗糖淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性;蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性,水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性,但淀粉酶不能将蔗糖水解。但淀粉酶不能将蔗糖水解。2、实验材料:、实验材料:质量分数为质量分数为3的可溶性的可溶性淀粉淀粉溶液和溶液和蔗糖蔗糖溶液;溶液;质量分数为质量分数为2的新鲜的新鲜淀粉酶淀粉酶溶液。溶液。3、实验方法与步骤、实验方法与步骤(1 1)取两支)取两支洁净洁净的试管,的试管,编号编号,然后向,然后向1 1号号管注入管注入2ml2ml可溶性淀粉溶液和可溶性淀粉溶液和2ml2ml新鲜淀粉酶新鲜淀粉酶溶液。向溶液。向2 2号管注入号管注入2ml2ml蔗糖溶液和蔗糖溶液和2ml2ml新鲜淀新鲜淀粉酶溶液。粉酶溶液。(2 2)轻轻振荡两支试管,使试管内的液体混)轻轻振荡两支试管,使试管内的液体混合均匀,然后将试管的下半部浸到合均匀,然后将试管的下半部浸到60600 0C C左右左右的热水中的热水中,保温保温5min5min。(3 3)取出试管,各加入)取出试管,各加入2ml2ml斐林试剂斐林试剂。(4 4)将两支试管的下半部放进盛有热水的大)将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热,烧杯中,用酒精灯加热,煮沸煮沸并保持并保持1min1min(5 5)观察并记录观察并记录两支试管内的变化。两支试管内的变化。5、注意事项、注意事项做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度;做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度;实验中要将试管的下半部浸入到实验中要将试管的下半部浸入到600C的温水中;的温水中;制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却。制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却。4、实验结果与分析、实验结果与分析1号有砖红色沉淀,号有砖红色沉淀,2号没有颜色变化。号没有颜色变化。即淀粉被淀粉酶水解,而蔗糖没有被水解。即淀粉被淀粉酶水解,而蔗糖没有被水解。酶作用有专一性。酶作用有专一性。1.1.下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解作用实验原理的叙述中,不正确的是:解作用实验原理的叙述中,不正确的是:A.A.淀粉和蔗糖都是非还原糖,在加热条件下淀粉和蔗糖都是非还原糖,在加热条件下与斐林试剂作用不产生砖红色沉淀与斐林试剂作用不产生砖红色沉淀 B.B.淀粉能在淀粉酶的催化下水解成还原糖淀粉能在淀粉酶的催化下水解成还原糖 C.C.蔗糖能在淀粉酶的催化下水解成还原糖葡蔗糖能在淀粉酶的催化下水解成还原糖葡萄糖萄糖 和果糖和果糖 D.D.淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通过有无还原糖特定的颜色反应而证明的过有无还原糖特定的颜色反应而证明的C2 2下列关于下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验的叙述中正确的是验的叙述中正确的是 ()A A 淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通过有无还原糖特定的颜色反应而证明的过有无还原糖特定的颜色反应而证明的B B 本实验有两次控制温度,目的是一样的本实验有两次控制温度,目的是一样的C C 本实验也可用碘液替代斐林试剂的作用本实验也可用碘液替代斐林试剂的作用D D 蔗糖的纯度与新鲜程度如何并不影响实验蔗糖的纯度与新鲜程度如何并不影响实验A(三)探索影响酶活性的因素(三)探索影响酶活性的因素1、实验原理、实验原理淀粉具有遇碘变蓝的特性,淀粉酶在适宜的条件下淀粉具有遇碘变蓝的特性,淀粉酶在适宜的条件下可使淀粉水解,遇碘不再变蓝;但麦芽糖和葡萄糖能可使淀粉水解,遇碘不再变