梅毒的实验室诊断与临床意义讲稿.ppt
关于梅毒的实验室关于梅毒的实验室诊断与临床意义诊断与临床意义第一页,讲稿共二十七页哦 梅毒的历史梅毒的历史梅毒的起源地:美洲梅毒的传播:1492年哥伦布第一次航行到美洲带回欧洲,然后传向全世界。进入中国时间:1505年葡萄牙商人进入广州,将此病传遍大江南北。中国旧称此病为:霉疮或杨梅疮第二页,讲稿共二十七页哦 梅毒病原体梅毒病原体梅毒病原体为:梅毒螺旋体(TP)由德国的霍夫曼和谢文定在1905年首先发现.因透明不易染色,所以又称为苍白螺旋体。第三页,讲稿共二十七页哦梅毒流行病学统计梅毒流行病学统计梅毒是世界三大慢性传染病之一(梅毒、麻风、结核)。1999年全国报告梅毒80406例。2009年全国报告梅毒327433例。2010年全国报告梅毒385678例.2012年全国报告梅毒448620 例.2012年广东全省报告新发梅毒病例数为53043例,是全国第一。2012年,在甲乙类传染病上报病例中梅毒位居第三。(病毒性肝炎、结核、梅毒)第四页,讲稿共二十七页哦梅毒的疫情分析梅毒的疫情分析梅毒发病率呈逐年大幅梅毒发病率呈逐年大幅上升趋势,疫情形势严上升趋势,疫情形势严竣。竣。也说明实验室的检测范围也说明实验室的检测范围扩大和技术水平的提高,扩大和技术水平的提高,从而发现确诊了更多梅毒从而发现确诊了更多梅毒病例。病例。中国预防与控制梅毒规划中国预防与控制梅毒规划2010202020102020年,要把梅毒年,要把梅毒病例每年的增速控制在病例每年的增速控制在5%以下。以下。第五页,讲稿共二十七页哦梅毒实验室检查示意图梅毒实验室检查示意图梅毒实验室检查显微镜检查法血清学检查暗视野显微镜检查法非梅毒螺旋体抗原血清试验镀银染色检查法梅毒螺旋体抗原血清试验VDRLUSRRPRTRUSTFTA-ABSTPHATPPA 核酸DNA检测-PCR第六页,讲稿共二十七页哦各期梅毒取材部位与检查方法各期梅毒取材部位与检查方法 临床表现临床表现临床表现临床表现 取材部位取材部位取材部位取材部位 检查方检查方检查方检查方法法法法 一期梅毒一期梅毒一期梅毒一期梅毒 溃疡、淋巴结溃疡、淋巴结溃疡、淋巴结溃疡、淋巴结 显微镜检查显微镜检查显微镜检查显微镜检查 血液血液血液血液 血清学检查血清学检查血清学检查血清学检查 二期梅毒二期梅毒二期梅毒二期梅毒 皮损、淋巴结皮损、淋巴结皮损、淋巴结皮损、淋巴结 显微显微显微显微镜检查镜检查镜检查镜检查 血液血液血液血液 血清学检查血清学检查血清学检查血清学检查 隐性梅毒隐性梅毒隐性梅毒隐性梅毒 血液血液血液血液 血清学检查血清学检查血清学检查血清学检查 三期梅毒三期梅毒三期梅毒三期梅毒 血液、脑脊液血液、脑脊液血液、脑脊液血液、脑脊液 血清血清血清血清学检查学检查学检查学检查 神经梅毒神经梅毒神经梅毒神经梅毒 血液血液血液血液 、脑脊液、脑脊液、脑脊液、脑脊液 血清学检血清学检血清学检血清学检查查查查 第七页,讲稿共二十七页哦梅毒显微镜检查法梅毒显微镜检查法梅毒显微镜检查法可分二类:1.暗视野显微镜检查法2.镀银染色检查法第八页,讲稿共二十七页哦暗视野显微镜检查法暗视野显微镜检查法溃疡部位取材,查找苍白螺旋体。取材方法:1.清洗干净 2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.加一滴生理盐水 5.送实验室检查 注意:取材后需十分钟内立即送检实验室暗视野显微镜直接查找活动的苍白螺旋体。第九页,讲稿共二十七页哦暗视野显微镜下的苍白螺旋体暗视野显微镜下的苍白螺旋体第十页,讲稿共二十七页哦镀银染色检查法镀银染色检查法溃疡部位取材,镀银染色查找苍白螺旋体。取材方法:1.清洗干净 2.取组织液或渗出液 3.刮取或压片 4.送实验室镀银染色 实验室普通显微镜下查找染成棕褐色的梅毒螺旋体。第十一页,讲稿共二十七页哦镀银染色梅毒螺旋体镜下形态镀银染色梅毒螺旋体镜下形态第十二页,讲稿共二十七页哦梅毒显微镜检查的临床意义梅毒显微镜检查的临床意义 阳性:有诊断价值阳性:有诊断价值,可确认梅毒感染。可确认梅毒感染。阴性:无否定价值,无诊断价值。阴性:无否定价值,无诊断价值。方法学优点:方法学优点:1.1.取材方便取材方便 2.2.制作简单制作简单 3.3.结果快速结果快速 方法学缺点:1.阳性率仅阳性率仅303060%,漏检率高,且只适,漏检率高,且只适 于一期、二期梅毒的筛查于一期、二期梅毒的筛查.2.2.受制于取材不当、制片不当等因受制于取材不当、制片不当等因素。素。3.3.需暗视野显微镜,基层医院一般需暗视野显微镜,基层医院一般无此无此 设备。设备。4.4.对检验技师技术经验水平要求较对检验技师技术经验水平要求较高。高。第十三页,讲稿共二十七页哦梅毒实验室血清学检查梅毒实验室血清学检查梅毒的实验室血清学检查方法有很多,可分为二类:1.非梅毒螺旋体抗原血清试验2.梅毒螺旋体抗原血清试验这二类试验都是以检测梅毒患者体内产生的相应梅毒抗体,从而推断是否感染梅毒螺旋体。第十四页,讲稿共二十七页哦梅毒螺旋体抗体的产生梅毒螺旋体抗体的产生人感染梅毒螺旋体后,第1414天产生第一次感染后的体液免疫应答,特异性特异性抗体抗体lgMlgM,四周左右达到高峰,以反应素抗体为主,此四周左右达到高峰,以反应素抗体为主,此抗体治疗后可消失。抗体治疗后可消失。第3 3周开始产生出现周开始产生出现特异性抗体lgGlgG,4,45 5周达到高峰,周达到高峰,可保留终生。可保留终生。第第3030天开始产生出现天开始产生出现非特异性抗体非特异性抗体lgM,很快达到高,很快达到高峰,以反应素抗体为主,治疗后可消失。峰,以反应素抗体为主,治疗后可消失。第第40天开始产生出现非特异性抗体非特异性抗体lgG,很快上升,很快上升,1 1年年后达到高峰,治疗后可消失后达到高峰,治疗后可消失.第十五页,讲稿共二十七页哦梅毒抗体的产生时间与波峰图梅毒抗体的产生时间与波峰图人感染梅毒后,各抗体出现的时间与波峰图第十六页,讲稿共二十七页哦非梅毒螺旋体抗原试验非梅毒螺旋体抗原试验非梅毒螺旋体抗原试验包括以下几种:VDRL 性病研究实验室(玻片试验)性病研究实验室(玻片试验)USR USR 血清不需加热的反应素(玻片试验)血清不需加热的反应素(玻片试验)RPR 快速血浆反应素(环状卡片试验)快速血浆反应素(环状卡片试验)TRUST TRUST 甲苯胺红血清不需加热试验甲苯胺红血清不需加热试验 原理:用一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物作为非原理:用一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物作为非特异性梅毒螺旋体抗原,与患者血清中的抗体作抗原抗体结特异性梅毒螺旋体抗原,与患者血清中的抗体作抗原抗体结合反应试验,来检测患者体内的抗类脂类抗原的抗体(即非合反应试验,来检测患者体内的抗类脂类抗原的抗体(即非特异性梅毒螺旋体抗体)特异性梅毒螺旋体抗体)第十七页,讲稿共二十七页哦非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义 1.1.适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查;2.2.抗体水平与疾病严重程度成正比;抗体水平与疾病严重程度成正比;3.3.评价、监测治疗效果,此抗体治愈后可消失。评价、监测治疗效果,此抗体治愈后可消失。4.4.此抗体不具有特异性此抗体不具有特异性,全身性疾病的活动期如全身性疾病的活动期如:红红斑狼疮斑狼疮,风湿病,类风湿关节炎,病毒性肝炎类风湿关节炎,病毒性肝炎,麻风病,自身免疫性疾病等,都有可能出现。自身免疫性疾病等,都有可能出现。现在临床医学实验室基本上都采用现在临床医学实验室基本上都采用TRUSTTRUST或或RPR来做梅来做梅毒螺旋体的非特异性抗体检测。毒螺旋体的非特异性抗体检测。第十八页,讲稿共二十七页哦梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验包括以下几种:FTA-ABS 荧光螺旋体抗体吸收(试验)TPHA 梅毒螺旋体血凝试验TPPA 梅毒螺旋体颗粒凝集试验原理:都是以梅毒螺旋体为抗原,与患者血清中的抗体作抗原抗体结合反应试验,来检测患者体内的特异性梅毒螺旋体抗体。以上各试验只是抗原的制备方法和结果显示方法上略有不同,基本原理都相同。第十九页,讲稿共二十七页哦梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义1.适用于梅毒筛查、及非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的确证试验。2.特异性抗体可终生存在,故试验阳性不能作为疗效观察的指标。3.试验阳性不能区分既往感染和现症感染,需结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行现症确认诊断。现在绝大多数医学实验室采用TPPA来做梅毒螺旋体的特异性抗体检测。第二十页,讲稿共二十七页哦梅毒血清学检验结果判读总结梅毒血清学检验结果判读总结 非梅毒抗原血清试验非梅毒抗原血清试验 梅毒抗原血清试验梅毒抗原血清试验 临床意义临床意义(非特异性抗体)(特异性抗体)(非特异性抗体)(特异性抗体)阳性(阳性(+)阳性(阳性(+)诊断确认现症梅毒诊断确认现症梅毒感染感染 阳性(阳性(+)阴性(阴性(-)排除梅毒,提示排除梅毒,提示其他疾病其他疾病 阴性(阴性(-)阳性(阳性(+)曾有感染,已治疗或曾有感染,已治疗或自愈自愈 阴性(阴性(-)阴性(阴性(-)健康人群健康人群第二十一页,讲稿共二十七页哦梅毒检验结果判读示总结图梅毒检验结果判读示总结图梅毒实验室检查显微镜检查法血清学检查阳性:确认诊断 梅毒感染非梅毒螺旋体抗原血清试验阴性:无否定价值梅毒螺旋体抗原血清试验阳性:提示有活动 性疾病阳性:确认梅毒感染 或曾经感染阴性:有否定价值(早期1月内感染除外)阴性:有否定价值,可排除梅毒感染第二十二页,讲稿共二十七页哦梅毒筛查策略梅毒筛查策略梅毒筛查策略一:TRUST(TRUST(阳性阳性)TPPA()TPPA(阳性阳性)诊断确认梅毒诊断确认梅毒 TRUST(TRUST(阴性阴性)终止终止 检查检查 特点特点:传统方法传统方法,简便快速简便快速,漏检率高漏检率高,适合于健康人群批量筛查适合于健康人群批量筛查.梅毒筛查策略二:TPPA(TPPA(阳性阳性)TRUST()TRUST(阳性阳性)诊断确认梅毒诊断确认梅毒 TPPA(TPPA(阴性阴性)否定梅毒否定梅毒 特点特点:敏感性高敏感性高,特异性强特异性强,操作烦琐操作烦琐,不适宜大规模批量检查不适宜大规模批量检查.因此建议采取策略二做临床病人的梅毒筛查因此建议采取策略二做临床病人的梅毒筛查.第二十三页,讲稿共二十七页哦(先天)胎传梅毒(先天)胎传梅毒(先天)胎传梅毒:梅毒螺旋体通过母体胎盘传染给胎(先天)胎传梅毒:梅毒螺旋体通过母体胎盘传染给胎儿。早期胎传梅毒儿。早期胎传梅毒2 2岁;晚期胎传梅毒岁;晚期胎传梅毒2 2岁;19971997年我国共报告先天梅毒年我国共报告先天梅毒109109例,发病率为0.53/100.53/10万活产数;万活产数;2009年我国共报告先天梅毒年我国共报告先天梅毒1075710757例,发病例,发病率为率为64.41/1064.41/10万活产数。每年发病率增长万活产数。每年发病率增长49.2%.49.2%.对于疑似早期胎传梅毒的,尤其是新生儿,实验室检查对于疑似早期胎传梅毒的,尤其是新生儿,实验室检查TRUST阳性和阳性和TPPATPPA阳性者,不能过早下确认诊断结论,因为婴儿体内抗体有可能来自来母体,非胎儿自身产生。研究调查:对9999例检查例检查TPPATPPA为阳性的新生儿随访,为阳性的新生儿随访,6 6个月内自动转阴率为个月内自动转阴率为18.6%18.6%,2 2年内转阴率为年内转阴率为74.4%.第二十四页,讲稿共二十七页哦区分梅毒抗体来源区分梅毒抗体来源那么如何区分抗体是来自母体还是婴儿自身感染产生呢?和所有的细菌及病毒感染一样,在梅毒中特异性lgM抗体的合成是初次感染后的体液免疫应答,最先产生,随后才产生lgG抗体。lgM抗体分子量大(97万道尔顿),其不能通过胎盘屏障进入婴儿体内,lgG抗体分子量小(15万道尔顿)能通过胎盘。所以只要在婴儿体内检查到特异性梅毒lgM抗体,即可确认为先天梅毒感染。第二十五页,讲稿共二十七页哦(先天)胎传梅毒的实验室诊断(先天)胎传梅毒的实验室诊断当母亲为梅毒患者时,婴儿具有下列实验室3个指标之一,可确诊为胎传梅毒:1.患儿检出19S-lgM(特异性梅毒lgM抗体)。2.暗视野显微镜检查发现梅毒螺旋体。3.患儿TRUST和TPPA均阳性,且抗体滴度持续升高。第二十六页,讲稿共二十七页哦感感谢谢大大家家观观看看第二十七页,讲稿共二十七页哦