第13章维生素类药物的分析课件.ppt

第13章维生素类药物的分析第1页，此课件共160页哦 概述概述维生素：维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。微量营养物资。人体不能合成维生素。人体不能合成维生素。如果人体缺少某种维生如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。常生理机能。如：人体缺少如：人体缺少VA,夜盲症夜盲症.人体缺少人体缺少VC,坏血病坏血病.第2页，此课件共160页哦 VitA、D2、D3、E、K1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 VitB族族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺、叶酸、烟酸、烟酰胺VitMVitPP对维生素类药物的分类，目前仍按它们的溶解性质分为第3页，此课件共160页哦-H 维生素维生素A醇醇-COCH3 维生素维生素A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯R:第一节第一节脂溶性维生素类药物的分析脂溶性维生素类药物的分析一、维生素A的分析（一）化学结构与性质1、化学结构第4页，此课件共160页哦为一个具有共轭多烯侧链的为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯环己烯（一）（一）结构与性构与性质一、一、v 具有具有UV吸收吸收v 存在多种立体异构化合物存在多种立体异构化合物第5页，此课件共160页哦维生素维生素A 325.5 100%新维生素新维生素Aa 328 75%新维生素新维生素Ab 320.5 24%新维生素新维生素Ac 310.5 15%异维生素异维生素Aa 323 21%异维生素异维生素Ab 324 24%相对生物效价相对生物效价第6页，此课件共160页哦VitA2VitA3v 易易发生脱生脱氢、脱水、聚合反、脱水、聚合反应第7页，此课件共160页哦鲸醇鲸醇第8页，此课件共160页哦v 或有金属离子存在时氧化或有金属离子存在时氧化共轭多烯侧链共轭多烯侧链 易被氧化易被氧化（二）（二）第9页，此课件共160页哦环氧化物环氧化物VitA醛醛VitA酸酸第10页，此课件共160页哦（三）（三）与三氯化锑发生呈色反应与三氯化锑发生呈色反应CHCl3溶解性溶解性（四）（四）不溶于水不溶于水易溶于有机溶剂和植物油等易溶于有机溶剂和植物油等第11页，此课件共160页哦三氯化锑反应三氯化锑反应（一）（一）条件条件 无水无醇无水无醇CHCl3鉴别鉴别二、二、第12页，此课件共160页哦蓝色蓝色紫红紫红第13页，此课件共160页哦（BP（1998）max为为326nm一个吸收峰一个吸收峰UV法法（二）（二）max为为350390nm三个吸收峰三个吸收峰第14页，此课件共160页哦去水去水VitA（VitA3）VitA第15页，此课件共160页哦第16页，此课件共160页哦USP 显色剂显色剂 磷钼酸磷钼酸 规定斑点颜色和规定斑点颜色和Rf值值BP 对照品法照品法显色色剂三三氯化化锑TLC法法（三）（三）第17页，此课件共160页哦含量测定含量测定三、三、紫外分光光度法三点校正法紫外分光光度法三点校正法 维生素A的含量测定，过去曾用SbCl3比法。但由于SbCl3比色法呈色极不稳定，测定结果受水份、温度影响较大，反应专属性差，目前已被紫外分光光度法所替代。但由于SbCl3比色法操作简便、快速，所以目前对食品或饲料中维生素A的测定仍常用SbCl3比色法。这里我们主要介绍紫外分光光度法。第18页，此课件共160页哦l（一）（一）UV法法l由于在维生素A的分子中具有共轭多烯的结构，所以具有特征的紫外吸收。这样，就可以用紫外分光光度法测定维生素A的含量。l但是，由于在维生素A中，有很多结构相似的相关物质，这些相关物质在维生素A的最大吸收波长附近也有吸收（相关物质产生的吸收叫不相关吸收），这些吸收对测定有影响。l为了消除不相关吸收的影响，准确测出维生素A的含量，Morton和Stubbs等人提出了一个校正公式三点校正法，用来测定维生素A的含量 l杂质：立体异构体、氧化产物及光照产物、合成中间体、去氢维生素A（VitA2）、去水维生素A（VitA3）第19页，此课件共160页哦三点校正法三点校正法1.条件：条件：（1）杂质的吸收在）杂质的吸收在310340nm波波长范围内呈一条直线，且随波长长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。）物质对光的吸收具有加和性。第20页，此课件共160页哦2.波长的选择：波长的选择：1.三点校正法，即用三个波长点的吸光度对维生素三点校正法，即用三个波长点的吸光度对维生素A样品的样品的吸光度进行校正。所以在测定时，需要选择三个测定波长。吸光度进行校正。所以在测定时，需要选择三个测定波长。这三个波长的选择方法是：这三个波长的选择方法是：（1）1 VitA的的 max（328nm）（2）2 3 分别在分别在 1的两侧各选一点的两侧各选一点第21页，此课件共160页哦l这两个波长分别在这两个波长分别在 1两侧十几个两侧十几个nm处，即处，即l（等波长差法）（等波长差法）lVA在这两个波长下的吸光度应该等在这两个波长下的吸光度应该等于于 1下的吸光度的下的吸光度的6/7，即，即A2=A3=6/7A1（等吸光度法）（等吸光度法）l当然，在这三个波长的范围内，杂质的吸收应为一条直线 第22页，此课件共160页哦测定对象测定对象 VitA醋酸酯醋酸酯第一法第一法 等波长差法等波长差法第23页，此课件共160页哦第24页，此课件共160页哦第二法第二法 等吸收度法等吸收度法(皂化法皂化法)测定对象测定对象 VitA醇醇第25页，此课件共160页哦3.测定法测定法4.（1）基本步骤）基本步骤:v第一步第一步 A选择选择选择依据：选择依据：所选所选A值中杂质的干扰已基本消除值中杂质的干扰已基本消除第26页，此课件共160页哦注意：注意：C 为混合样品的浓度为混合样品的浓度 第二步第二步 求求第27页，此课件共160页哦第三步第三步 求效价求效价换算因数由纯品计算而得：换算因数由纯品计算而得：第28页，此课件共160页哦第29页，此课件共160页哦第30页，此课件共160页哦第四步：求标示量第四步：求标示量第31页，此课件共160页哦 方法：方法：（2）第一法第一法维生素维生素A醋酸酯醋酸酯第32页，此课件共160页哦 判断判断 是否在是否在326329nm之间之间在在326329nm之间之间改用第二法改用第二法是是否否 求算求算 并与规定值比较并与规定值比较第33页，此课件共160页哦 规定值规定值 差值差值第34页，此课件共160页哦 判断差值是否超过规定值的判断差值是否超过规定值的有一个以上超有一个以上超过过无超过无超过 计算计算 A328（校正）（校正）用用A328计算计算第35页，此课件共160页哦第36页，此课件共160页哦03%15%3%第二法第二法第二法第二法第37页，此课件共160页哦 VitAD胶丸中胶丸中VitA的含量测定的含量测定 精密称取本品精密称取本品(规格规格10000VitAIU/丸丸)装装量差异项下（平均装量量差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容丸）的内容物物 0.2399g 至至250ml量瓶中，用环己烷稀释量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一，置另一20 ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为，并在下列波长处测得吸收度为第38页，此课件共160页哦A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300/A328 ：0.555A316/A328 ：0.907A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中维生素求本品中维生素A的含量？的含量？第39页，此课件共160页哦A300/A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 +0.010.01 0+0.02+0.04=第40页，此课件共160页哦第41页，此课件共160页哦适用于维生素适用于维生素A醇醇（等吸收度法）（等吸收度法）第一法无法消除杂质干扰时用此法第一法无法消除杂质干扰时用此法 皂化法、皂化法、6/7A法法（3）第二法）第二法第42页，此课件共160页哦水溶性水溶性脂溶性脂溶性第43页，此课件共160页哦 判断判断 max是否在是否在323327nm之间之间取未皂化样品取未皂化样品采用色谱法纯采用色谱法纯化后再测定化后再测定 计算计算是是否否第44页，此课件共160页哦 判断判断 A300/A325 是否大于是否大于0.73是是否否取未皂化样品采取未皂化样品采用色谱法纯化后用色谱法纯化后再测定再测定 计算计算A325(校正校正)第45页，此课件共160页哦第46页，此课件共160页哦03%3%第47页，此课件共160页哦三氯化锑比色法三氯化锑比色法（二）（二）优点优点 简便简便 快速快速max 618nm620nm标准曲线法标准曲线法缺点缺点呈色不稳定呈色不稳定（5 10s内）内）水分干扰水分干扰与标准曲线温差与标准曲线温差1专属性差专属性差三氯化锑有腐蚀性三氯化锑有腐蚀性第48页，此课件共160页哦第49页，此课件共160页哦苯并二氢吡喃醇苯并二氢吡喃醇三三 维生素维生素E 第50页，此课件共160页哦名名 称称R1R2相对活性相对活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1*第51页，此课件共160页哦生物效价生物效价 右旋体右旋体 ：消旋体消旋体 =1.4：10（天然品）（天然品）（合成品）（合成品）dl生育酚醋酸酯生育酚醋酸酯第52页，此课件共160页哦结构与性质结构与性质一、一、苯环苯环+二氢吡喃环二氢吡喃环+饱和烃链饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键、酯键 易水解易水解第53页，此课件共160页哦7515（一）（一）硝酸反应硝酸反应橙红色橙红色鉴别鉴别二、二、第54页，此课件共160页哦（橙红色）（橙红色）生育红生育红生育酚生育酚HNO3强氧化剂强氧化剂第55页，此课件共160页哦 取本品约取本品约30mg，加无水乙，加无水乙醇醇10ml溶解后，加硝酸溶解后，加硝酸2ml，摇，摇匀，在匀，在75加热加热15分钟，溶液应分钟，溶液应显橙红色。显橙红色。第56页，此课件共160页哦三氯化铁联吡啶反应三氯化铁联吡啶反应O（二）（二）第57页，此课件共160页哦生育酚生育酚对对-生育醌生育醌O弱氧化剂弱氧化剂第58页，此课件共160页哦红色红色第59页，此课件共160页哦 =41.045.5max=284nmmin=254nm0.01%无水乙醇中无水乙醇中UV法法（三）（三）第60页，此课件共160页哦维生素维生素EUV图图第61页，此课件共160页哦薄层板薄层板 硅胶硅胶G展开剂展开剂 环己烷环己烷-乙醚（乙醚（4 ：1）显色剂显色剂 硫酸（硫酸（105 5）VitE Rf =0.7TLC法法（四）（四）第62页，此课件共160页哦游离生育酚游离生育酚 硫酸铈滴定液（硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫）利用游离生育酚的还原性，利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈将硫酸铈还原成硫酸亚铈 检查检查 三、三、原理原理（一）（一）试剂试剂（二）（二）第63页，此课件共160页哦（M生育酚生育酚=430.8）例例 取本品取本品0.10g，加无水乙醇，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液溶解后，加二苯胺试液1滴，滴，用硫酸铈液（用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，）滴定，消耗硫酸铈液（消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过）不得过 1.0ml。第64页，此课件共160页哦2.15限量限量（三）（三）第65页，此课件共160页哦药典规定药典规定消耗硫酸铈液（消耗硫酸铈液（0.01mol/L）1.0ml设：应消耗硫酸铈液设：应消耗硫酸铈液 V ml0.011.0 实际浓度实际浓度 V若硫酸铈液浓度不是若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L，应重新计算硫酸铈的消耗量应重新计算硫酸铈的消耗量第66页，此课件共160页哦例例 Ce(SO4)2=0.01020mol/L第67页，此课件共160页哦四、四、含量测定含量测定GC法法（一）（一）GC特点特点1、选择性好选择性好灵敏度高灵敏度高速度快速度快分离效能好分离效能好挥发性低、不稳挥发性低、不稳定、极性强定、极性强衍衍生化易受样品蒸生化易受样品蒸气压限制气压限制第68页，此课件共160页哦载气载气N2固定液固定液硅酮（硅酮（OV-17）担体担体硅藻土或高分子多孔小球硅藻土或高分子多孔小球柱温柱温265检测器检测器氢火焰离子化检测器氢火焰离子化检测器(FID)内标内标正三十二烷正三十二烷 n 500 R2VitE测定的色谱条件测定的色谱条件2、内标法加校正因子内标法加校正因子第69页，此课件共160页哦第70页，此课件共160页哦内标法内标法供试液（样品供试液（样品+内标）内标）内标物内标物对照液（对照对照液（对照+内标）内标）是样品中不存在的物质是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近与被测组分峰靠近能与各组分完全分离能与各组分完全分离与被测组分的量接近与被测组分的量接近第71页，此课件共160页哦校正因子：校正因子：第72页，此课件共160页哦实际工作中的计算方法实际工作中的计算方法第73页，此课件共160页哦例例内标液内标液 取正三十二烷加正己烷溶解取正三十二烷加正己烷溶解 并稀释成并稀释成1.0mg/ml溶液溶液对照液对照液 精密称取精密称取VitE对照品对照品0.2011g 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内 标液标液10ml，密塞，振摇使溶解，取，密塞，振摇使溶解，取 13ul注入注入GC仪，测定，计算仪，测定，计算供试液供试液 精密称取供试品精密称取供试品0.1998g置棕置棕 色具塞锥形瓶中，精密加入内标液色具塞锥形瓶中，精密加入内标液 10ml，密塞，振摇使溶解，取，密塞，振摇使溶解，取13ul 注入注入GC仪，测定，计算仪，测定，计算第74页，此课件共160页哦对照液对照液供试液供试液0.3730.368本品含本品含C31H52O3应为应为96.0 102.0%第75页，此课件共160页哦BP GC 内标内标 正三十二烷正三十二烷 R1.4USP GC 内标内标 十六酸十六醇酯十六酸十六醇酯 R1.0JP HPLC 外标外标 dl生育酚生育酚 R1.4第76页，此课件共160页哦利用生育酚的易氧化性利用生育酚的易氧化性还原型还原型氧化型氧化型二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫）原理原理1、铈量法铈量法（二）（二）指示剂指示剂2、第77页，此课件共160页哦防止防止Ce(SO4)2的水解的水解减慢生育酚被减慢生育酚被O2氧化速度氧化速度C、酸性条件酸性条件Ce(SO4)2易溶于水易溶于水生育酚易溶于醇生育酚易溶于醇B、溶剂、溶剂分子量较大，反应慢分子量较大，反应慢 易被易被O2氧化氧化A、反应速度、反应速度H2SO4讨论讨论3、第78页，此课件共160页哦含量计算含量计算4、MVitE =472第79页，此课件共160页哦样品样品 dl生育酚生育酚固定相固定相十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶流动相流动相甲醇甲醇-水（水（49 ：1）检测波长检测波长292nm R2.6 RSD0.8%JP-RP-HPLC法（外标法）法（外标法）（三）（三）第80页，此课件共160页哦测定对象测定对象血清中血清中VitA和和VitE固定相固定相十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶流动相流动相甲醇甲醇-水（水（96 ：4）检测波长检测波长 8前前330nm 8后后292nmRP-HPLC法（外标法）法（外标法）（四）（四）第81页，此课件共160页哦氨基嘧啶环氨基嘧啶环氨基嘧啶环氨基嘧啶环CH2噻唑环噻唑环噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)第二节第二节 水溶性维生素类药物的分析水溶性维生素类药物的分析HClCl-一、维生素B1第82页，此课件共160页哦（一）（一）溶解性溶解性1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性（二）（二）UV共轭双键共轭双键max=246nm结构与性质结构与性质一、一、第83页，此课件共160页哦嘧啶环嘧啶环 伯氨伯氨噻唑环噻唑环 季铵季铵1、可与酸成盐、可与酸成盐2、与生物碱、与生物碱3、含量测定、含量测定 非水碱量法非水碱量法（三）（三）硫色素反应硫色素反应（四）（四）碱性碱性第84页，此课件共160页哦ChP鉴别试验鉴别试验二、二、（一）（一）硫色素反应硫色素反应第85页，此课件共160页哦第86页，此课件共160页哦硫色素硫色素2H第87页，此课件共160页哦VitB1H+H+H+H+（二）（二）沉淀反应沉淀反应第88页，此课件共160页哦S元素反应元素反应Cl-反应反应（三）（三）其他反应其他反应第89页，此课件共160页哦三、三、含量测定含量测定喹那啶红亚甲蓝喹那啶红亚甲蓝 （紫红（紫红天蓝）天蓝）（一）（一）非水溶液滴定法非水溶液滴定法第90页，此课件共160页哦第91页，此课件共160页哦UV法法（二）（二）第92页，此课件共160页哦片剂、注射剂片剂、注射剂=421（每片）相当于标示量的（每片）相当于标示量的%=A=ECL规格规格g/片片g/100mlgChP第93页，此课件共160页哦（每（每ml）相当于标示量的）相当于标示量的%=规格规格g/mlml第94页，此课件共160页哦准确度高准确度高灵敏度低灵敏度低操作繁琐操作繁琐设备简单设备简单（三）（三）硅钨酸重量法硅钨酸重量法重量法特点重量法特点1、第95页，此课件共160页哦原理原理2、第96页，此课件共160页哦2337.273479.22第97页，此课件共160页哦 取本品约取本品约50mg，精密称定，加水，精密称定，加水50ml溶解后，加盐酸溶解后，加盐酸2ml，煮沸，立即滴，煮沸，立即滴加硅钨酸试液加硅钨酸试液4ml，继续煮沸，继续煮沸2分钟，用分钟，用80恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀先用恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀先用煮沸的盐酸溶液（煮沸的盐酸溶液（120）20ml分次洗涤，分次洗涤，再用水再用水10ml洗涤洗涤1次，最后用丙酮洗涤次，最后用丙酮洗涤2次，次，每次每次5ml，在，在80干燥至恒重，精密称定，干燥至恒重，精密称定，所得重量与所得重量与0.1939相乘，即得相乘，即得测定方法测定方法3、第98页，此课件共160页哦例例 精密称取本品精密称取本品0.0519g，加水，加水50 ml溶解，加盐酸溶解，加盐酸2ml煮沸，立即滴加煮沸，立即滴加硅钨酸试液硅钨酸试液4 ml，继续煮沸，继续煮沸2分钟，用分钟，用80恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀先用煮沸的盐酸溶液（先用煮沸的盐酸溶液（120）20 ml 分次洗涤，再用水分次洗涤，再用水10ml 洗涤洗涤1次，后次，后用丙酮洗涤用丙酮洗涤2次，每次次，每次5ml。在。在80干干燥至恒重，称得沉淀重量为燥至恒重，称得沉淀重量为0.2557g。求本品的含量按干燥品计算为多少？求本品的含量按干燥品计算为多少？第99页，此课件共160页哦(本品干燥失重项下测定结果为本品干燥失重项下测定结果为3.73%)第100页，此课件共160页哦A.取样量取样量50mg 提高灵敏度提高灵敏度B.80 保持保持4个个H2OC.HCl 增大沉淀颗粒增大沉淀颗粒D.硅钨酸硅钨酸 ：VitB1=8 ：1 使沉淀完全使沉淀完全E.硅钨酸硅钨酸边搅拌边缓慢加入边搅拌边缓慢加入 增大沉淀颗粒增大沉淀颗粒实验条件实验条件4、第101页，此课件共160页哦NaOH（四）（四）硫色素荧光法硫色素荧光法原理原理1、第102页，此课件共160页哦激发波长激发波长365nm发射波长发射波长435nm方法与计算方法与计算2、第103页，此课件共160页哦+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾+异丁醇异丁醇+NaOH+异丁醇异丁醇+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾+异丁醇异丁醇+NaOH+异丁醇异丁醇SdAb对照液对照液供试液供试液第104页，此课件共160页哦特点特点3、（1）灵敏度高，线性范围宽）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于）代谢产物不干扰，适用于 体液分析体液分析第105页，此课件共160页哦二二 维生素维生素CL抗坏血酸抗坏血酸第106页，此课件共160页哦1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性结构与性质结构与性质一、一、（一）（一）溶解性溶解性第107页，此课件共160页哦二烯醇结构二烯醇结构二酮基结构二酮基结构二烯醇结构二烯醇结构（二）（二）强还原性强还原性第108页，此课件共160页哦有活性有活性有活性有活性无活性无活性第109页，此课件共160页哦糖类的显色反应糖类的显色反应50结构与糖类相似结构与糖类相似（三）（三）具糖的性质具糖的性质第110页，此课件共160页哦C3OH的的pKa=4.17C2OH的的pKa=11.57酸性酸性（四）（四）一元酸一元酸第111页，此课件共160页哦L(+)抗坏血酸抗坏血酸活性最强活性最强手性手性C（C4、C5）（五）（五）光学活性光学活性*第112页，此课件共160页哦与碱反应与碱反应（六）（六）水解反应水解反应第113页，此课件共160页哦第114页，此课件共160页哦（七）（七）UV特征特征第115页，此课件共160页哦与氧化剂的反应与氧化剂的反应（一）（一）鉴别试验鉴别试验二、二、第116页，此课件共160页哦1、与、与AgNO3反应反应2、与、与2，6-二氯靛酚反应二氯靛酚反应(ChP2000)氧化型氧化型玫瑰红色玫瑰红色还原型还原型蓝色蓝色OH(ChP2000)第117页，此课件共160页哦（玫瑰色）玫瑰色）（无色）（无色）第118页，此课件共160页哦3、与碱性酒石酸铜反应、与碱性酒石酸铜反应USP4、与、与KMnO4反应反应第119页，此课件共160页哦糖类的反应糖类的反应（二）（二）或盐酸或盐酸50吡咯吡咯USP第120页，此课件共160页哦第121页，此课件共160页哦（蓝色）（蓝色）(糠醛糠醛)（戊糖）（戊糖）50(吡咯吡咯)第122页，此课件共160页哦UV（三）（三）BP0.01mol/L HCl第123页，此课件共160页哦指示剂指示剂 淀粉指示液淀粉指示液原理原理1、碘量法碘量法（一）（一）含量测定含量测定三、三、第124页，此课件共160页哦H+第125页，此课件共160页哦 取本品约取本品约0.2g，精密称定，加新，精密称定，加新沸过的冷水沸过的冷水100ml与稀醋酸与稀醋酸10ml使溶使溶解，加淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴，立即用碘滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝）滴定，至溶液显蓝色，在色，在30秒内不褪。每秒内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg的的C6H8O6方法方法2、第126页，此课件共160页哦第127页，此课件共160页哦（1）酸性环境）酸性环境 d.HCl （2）新沸冷新沸冷H2O减慢减慢VitC被被O2氧化速度氧化速度讨论讨论4、（3）立即滴定）立即滴定 赶走水中赶走水中O2减少减少O2的干扰的干扰第128页，此课件共160页哦（4）附加剂干扰的排除）附加剂干扰的排除片剂片剂 滑石粉滑石粉 过滤过滤注射剂注射剂 抗氧剂抗氧剂 丙酮丙酮甲醛甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 第129页，此课件共160页哦CHHOOaS3a S O+H2N H ON2252HO NH COS3a第130页，此课件共160页哦2，6-二氯靛酚钠滴定法法二氯靛酚钠滴定法法（二）（二）USPJP原理原理1、第131页，此课件共160页哦自身指示终点法自身指示终点法方法方法2、第132页，此课件共160页哦（2）快速滴定）快速滴定 2min内内 （1）酸性环境）酸性环境 HPO3-HAc 稳定稳定VitC防止其他还原性物质干扰防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定）剩余比色测定 （定量过量）（定量过量）（测剩余染料）（测剩余染料）讨论讨论3、第133页，此课件共160页哦（4）缺点）缺点 需经常标定需经常标定贮存贮存一周一周不稳定不稳定干扰多干扰多 氧化力较强氧化力较强第134页，此课件共160页哦HPLC法法（三）（三）1、HPLC的优点的优点灵敏度高灵敏度高选择性高选择性高分离分析同步分离分析同步微量分析微量分析干扰少干扰少 快速快速第135页，此课件共160页哦2、HPLC法分离法分离VitC常用方法及测常用方法及测 定对象定对象 对象对象 制剂、生物样品、果汁制剂、生物样品、果汁方法方法 离子交换色谱法离子交换色谱法 离子对色谱法离子对色谱法 分配色谱法（正、反相）分配色谱法（正、反相）血、尿、组织、细胞等血、尿、组织、细胞等第136页，此课件共160页哦例例多种维生素片中多种维生素片中VitA、VitB1、VitB2、VitB6、烟酰胺、烟酰胺、VitC、VitE的含量测定的含量测定色谱柱色谱柱 ODS流动相流动相 A、水、水-甲醇（甲醇（4 ：1）B、甲醇、甲醇 （梯度洗脱）（梯度洗脱）抗氧剂抗氧剂 二巯基丙烷磺酸钠二巯基丙烷磺酸钠第137页，此课件共160页哦水溶性维生素水溶性维生素 离子对色谱法（樟脑磺酸）离子对色谱法（樟脑磺酸）内标法内标法+校正因子校正因子 内标物内标物苯酚苯酚脂溶性维生素脂溶性维生素 外标法外标法第138页，此课件共160页哦108在三氯醋酸或盐酸存在下，经在三氯醋酸或盐酸存在下，经 水解、脱羧、失水后，加入吡水解、脱羧、失水后，加入吡 咯即产生蓝色产物的药物应是咯即产生蓝色产物的药物应是 A.氯氮卓氯氮卓 B.维生素维生素A C.普鲁卡因普鲁卡因 D.盐酸吗啡盐酸吗啡 E.维生素维生素C第139页，此课件共160页哦99：88中国药典（中国药典（2000年版）采用年版）采用 以下何法测定维生素以下何法测定维生素E含量含量 A.酸碱滴定法酸碱滴定法 B.氧化还原法氧化还原法 C.紫外分光光度法紫外分光光度法 D.气相色谱法气相色谱法 E.非水滴定法非水滴定法第140页，此课件共160页哦98：79中国药典（中国药典（2000年版）采用年版）采用 气相色谱法测定维生素气相色谱法测定维生素E含含 量，内标物质为量，内标物质为 A.正二十二烷正二十二烷 B.正二十六烷正二十六烷 C.正三十烷正三十烷 D.正三十二烷正三十二烷 E.正三十六烷正三十六烷 第141页，此课件共160页哦99：77.下列药物的碱性溶液，加入下列药物的碱性溶液，加入 铁氰化钾后，再加正丁醇，铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是显蓝色荧光的是 A.维生素维生素A B.维生素维生素B1 C.维生素维生素C D.维生素维生素D E.维生素维生素E第142页，此课件共160页哦97：77既具有酸性又具有还原性的既具有酸性又具有还原性的 药物是药物是 A.维生素维生素A B.咖啡因咖啡因 C.苯巴比妥苯巴比妥 D.氯丙嗪氯丙嗪 E.维生素维生素C第143页，此课件共160页哦99m：132.维生素维生素C的鉴别反应，常采的鉴别反应，常采 用的试剂有用的试剂有 A.碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜 B.硝酸银硝酸银 C.碘化铋钾碘化铋钾 D.乙酰丙酮乙酰丙酮 E.三氯醋酸和吡咯三氯醋酸和吡咯第144页，此课件共160页哦99m：84.测定维生素测定维生素C注射液的含量注射液的含量 时，在操作过程中要加入时，在操作过程中要加入 丙酮，这是为了丙酮，这是为了 A.保持维生素保持维生素C的稳定的稳定 B.增加维生素增加维生素C的溶解度的溶解度 C.使反应完全使反应完全 D.加快反应速度加快反应速度 E.消除注射液中抗氧剂的干扰消除注射液中抗氧剂的干扰第145页，此课件共160页哦98：85.能发生硫色素特征反应的药物能发生硫色素特征反应的药物 是是 A.维生素维生素A B.维生素维生素B1 C.维生素维生素C D.维生素维生素E E.烟酸烟酸第146页，此课件共160页哦97：81使用碘量法测定维生素使用碘量法测定维生素C的的 含量含量,已知维生素已知维生素C的分子量的分子量 为为176.13，每，每1ml碘滴定液碘滴定液 (0.1mol/L)相当于维生素相当于维生素C 的量为的量为 A.17.61mg B.8.806mg C.176.1mg D.88.06mg E.1.761mg第147页，此课件共160页哦97：121125（99：121125）可发生以下反应或现象的药物为可发生以下反应或现象的药物为 A.维生素维生素B1 B.维生素维生素C C.两者均能两者均能 D.两者均不能两者均不能 121.与碘化汞钾生成黄色沉淀与碘化汞钾生成黄色沉淀 122.麦芽酚反应麦芽酚反应 123.在乙醚中不溶在乙醚中不溶 124.与与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失二氯靛酚反应使颜色消失 125.硫色素反应硫色素反应ADCBA第148页，此课件共160页哦115维生素维生素A的鉴别试验为的鉴别试验为 A.三氯化铁反应三氯化铁反应 B.硫酸锑反应硫酸锑反应 C.2,6-二氯靛酚反应二氯靛酚反应 D.三氯化锑反应三氯化锑反应 E.间二硝基苯的碱性乙醇液反间二硝基苯的碱性乙醇液反 应应第149页，此课件共160页哦77中国药典（中国药典（2000年版）规定维生年版）规定维生 素素A的测定采用紫外分光光度法的测定采用紫外分光光度法 （三点校正法），此法又分为（三点校正法），此法又分为 A等波长差法等波长差法 B等吸收度法等吸收度法 C6/7 A法法 D差示分光法差示分光法 E双波长法双波长法第150页，此课件共160页哦78维生素维生素E的鉴别试验有的鉴别试验有 A硫色素反应硫色素反应 B硝酸氧化呈色反应硝酸氧化呈色反应 C硫酸硫酸-乙醇呈色反应乙醇呈色反应 D碱性水解后加三氯化铁乙醇碱性水解后加三氯化铁乙醇 液与液与2,2-联吡啶乙醇液呈色反联吡啶乙醇液呈色反 应应 EMarquis反应反应第151页，此课件共160页哦80.下面哪些描述适用于维生素下面哪些描述适用于维生素A A.分子具有长二烯醇侧链，易被氧化分子具有长二烯醇侧链，易被氧化 B.具有较长的全反式共轭多烯结构具有较长的全反式共轭多烯结构 C.含酯键，经水解后产生苯并二氢吡含酯键，经水解后产生苯并二氢吡 喃衍生物，易被氧化喃衍生物，易被氧化 D.与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳 定兰色，很快转变为紫红色定兰色，很快转变为紫红色 E.样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加 热后，呈橙红色热后，呈橙红色 第152页，此课件共160页哦 维生素维生素A与与 反应即显蓝色，反应即显蓝色，渐变成紫红色；反应需在渐变成紫红色；反应需在 条件下进行。条件下进行。（）维生素维生素A分子中由于具有共轭分子中由于具有共轭多烯侧链，因而其性质很稳定，不易多烯侧链，因而其性质很稳定，不易被氧化变质。被氧化变质。三氯化锑三氯化锑无水无水第153页，此课件共160页哦 维维生生素素E在在酸酸性性或或碱碱性性溶溶液液中中加加热热可可水水解解生生成成游游离离 ，当当有有氧氧或或其其他他氧氧化化剂剂存存在在时时，则则进进一一步步被被氧氧化化成成醌醌型型化化合合物，尤其在碱性下更易发生。物，尤其在碱性下更易发生。生育酚生育酚第154页，此课件共160页哦 维生素维生素B1 的噻唑环在的噻唑环在 介质介质中可开环，再与嘧啶环上氨基缩合中可开环，再与嘧啶环上氨基缩合环合，然后经环合，然后经 等氧化剂氧等氧化剂氧化生成具有荧光的化生成具有荧光的 ，加，加 荧荧光消失，加光消失，加 荧光又显出；此反应荧光又显出；此反应称为称为 反应。反应。碱性碱性铁氰化钾铁氰化钾硫色素硫色素酸酸碱碱硫色素硫色素第155页，此课件共160页哦 维生素维生素C是是 元弱酸，具有强元弱酸，具有强 性，易被氧化剂氧化，常用性，易被氧化剂氧化，常用作其它制剂的作其它制剂的 剂。剂。一一还原还原抗氧抗氧第156页，此课件共160页哦 维生素维生素E中游离生育酚的检查时中游离生育酚的检查时规定消耗硫酸铈滴定液（规定消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）不得过不得过1.0ml，现硫酸铈滴定液的实，现硫酸铈滴定液的实际浓度为际浓度为0.01053mol/L，应不得超过，应不得超过多少多少ml？A.0.95 B.0.97 C.0.99 D.0.92 E.1.05第157页，此课件共160页哦 中国药典维生素中国药典维生素C的含量测定的含量测定 取本品约取本品约0.2g，精密称定，加，精密称定，加新新沸过的冷水沸过的冷水100ml与与稀醋酸稀醋酸10ml使溶使溶解，加淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即立即用碘滴用碘滴定液定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝色，滴定，至溶液显蓝色，在在30秒内不褪。每秒内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg的的C6H8O6。已知：取样量为已知：取样量为0.2084g，消耗碘滴，消耗碘滴定液（定液（0.09981mol/L）22.75ml。第158页，此课件共160页哦要求：（要求：（1）解释划线部分）解释划线部分 （2）计算本品的含量是否符合）计算本品的含量是否符合 规定规定（规定本品含（规定本品含C6H8O6应不低于应不低于99.0%）第159页，此课件共160页哦VitB1片片UV法含量测定法含量测定 取本品取本品20片，精片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于密称定，研细，精密称取适量（约相当于VitB1 25mg），置），置100ml量瓶中，加盐酸量瓶中，加盐酸溶液溶液(91000)约约70ml，振摇，振摇15分钟，加分钟，加盐酸溶液盐酸溶液(91000)稀释至刻度。用干稀释至刻度。用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置，置另一另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液量瓶中，再加盐酸溶液(91000)稀释至刻度，摇匀，在稀释至刻度，摇匀，在246nm处测定吸收度，按处测定吸收度，按C12H17ClN4OSHCl的的吸收系数（吸收系数（）为）为421计算，即得。计算，即得。第160页，此课件共160页哦