第八章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析课件.ppt

第八章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第1页，此课件共65页哦一、一、基本结构与典型药物基本结构与典型药物*第一节 苯乙胺类药物结构与性质第2页，此课件共65页哦苯乙胺类药物举例第3页，此课件共65页哦苯乙胺类典型药物(8种)第4页，此课件共65页哦盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇苯乙胺类典型药物(8种)第5页，此课件共65页哦结构分析脂烃氨基具有弱碱性邻苯二酚(或苯酚)结构*手性碳原子,具旋光性UV、IR第6页，此课件共65页哦 二、主要化学性质1.弱碱性：弱碱性：烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。烃胺基侧链，仲胺氮弱碱性。游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水w可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。测定含量。2.酚羟基特性：酚羟基特性：易氧化变色，可与易氧化变色，可与FeCl3反应反应;3.光学活性：光学活性：多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光性。性。4.UV5.IR第7页，此课件共65页哦一、与三氯化铁、甲醛一、与三氯化铁、甲醛-硫酸的反应硫酸的反应药物三氯化铁甲醛-硫酸肾上腺素肾上腺素翠绿色翠绿色,加氨试液显紫色加氨试液显紫色紫红色紫红色红色红色重酒石酸去甲重酒石酸去甲肾上腺素肾上腺素翠绿色翠绿色,加碳酸氢钠试液显加碳酸氢钠试液显蓝色蓝色红色红色淡红色淡红色盐酸去氧肾上盐酸去氧肾上腺素腺素紫色紫色玫瑰红玫瑰红 橙红橙红深深棕红棕红盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上腺素腺素深绿色深绿色,加新制碳酸氢钠液加新制碳酸氢钠液,显蓝紫色显蓝紫色红色红色棕色棕色暗紫色暗紫色硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇紫色紫色,加新制碳酸氢钠液加新制碳酸氢钠液,显显黄色浑浊黄色浑浊第二节 苯乙胺类药物的鉴别试验第8页，此课件共65页哦 二、还原性反应加盐酸加盐酸加盐酸加盐酸(pH=33.5pH=33.5)盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上盐酸异丙肾上腺素腺素腺素腺素盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺盐酸去氧肾上腺素素素素加酒石酸氢钾加酒石酸氢钾加酒石酸氢钾加酒石酸氢钾饱和液饱和液饱和液饱和液(pH=3.56pH=3.56)重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾上腺素上腺素上腺素上腺素在中性或酸性条件在中性或酸性条件在中性或酸性条件在中性或酸性条件,红色红色红色红色,放置可变为放置可变为放置可变为放置可变为棕色多聚体棕色多聚体棕色多聚体棕色多聚体肾上腺素肾上腺素肾上腺素肾上腺素II2 2药物药物I I2 2+NaNa2 2S S2 2OO3 3无色无色无色无色微红色微红色微红色微红色淡紫色淡紫色淡紫色淡紫色+I I2 2NaNa2 2S S2 2OO3 3红棕色红棕色红棕色红棕色第9页，此课件共65页哦 脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应三、与亚硝基铁氰化钠反应（RiminiRimini反应反应）重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水溶解溶解亚硝基铁氰化钠试液亚硝基铁氰化钠试液丙酮数滴，碳酸氢钠少量丙酮数滴，碳酸氢钠少量红紫色红紫色红紫色红紫色重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基第10页，此课件共65页哦 四四、双缩脲反应、双缩脲反应侧链有侧链有氨基醇氨基醇结构结构盐酸麻黄碱NaOH乙醚双缩脲反应是盐酸麻黄碱专属性反应其他有该反应的药物醚层不显色蓝紫色紫红色第12页，此课件共65页哦（四）紫外特征吸收与红外吸收光谱我国药典规定，利用我国药典规定，利用紫外特征吸收光谱紫外特征吸收光谱进行鉴进行鉴别的药物见下表：别的药物见下表：P226用于红外吸收光谱的药物有：用于红外吸收光谱的药物有：盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸苯盐酸去氧肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、盐酸苯乙双胍、盐酸麻黄碱、硫酸沙丁胺醇乙双胍、盐酸麻黄碱、硫酸沙丁胺醇第13页，此课件共65页哦药物药物溶剂溶剂浓度浓度(mg/ml)(mg/ml)nmnm(nm)(nm)吸收度吸收度 (A)(A)重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺水水0.100.10272272盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素水水0.050.052802800.500.50盐酸多巴胺盐酸多巴胺0.5%0.5%硫酸硫酸0.030.03280280盐酸芬氟拉明盐酸芬氟拉明0.1mol/L0.1mol/L盐酸盐酸0.250.25263,270263,270盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍水水0.010.012342340.600.60盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗0.1mol/L0.1mol/L盐酸盐酸0.030.03243,296243,296硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇水水0.080.08274274盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱水水0.500.50251,257,263251,257,263（四）紫外特征吸收与红外吸收光谱第14页，此课件共65页哦例1：下列苯乙胺类药物中，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是A 硫酸苯丙胺硫酸苯丙胺B 盐酸甲氧明盐酸甲氧明C 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素D 盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗E 盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍第15页，此课件共65页哦例2：下列药物中，可显双缩脲反应的是A 盐酸多巴胺盐酸多巴胺B 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱C 苯苯 佐卡因佐卡因D 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸E 氧烯洛尔氧烯洛尔第16页，此课件共65页哦例3：下列药物中，可显Rimini反应的是A 盐酸多巴胺盐酸多巴胺B 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱C 苯苯 佐卡因佐卡因D 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸E 重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺第17页，此课件共65页哦例4：下列药物中，属于苯乙胺类药物是A 盐酸利多卡因盐酸利多卡因B 氨甲苯酸氨甲苯酸C 盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗D 苯佐卡因苯佐卡因E 乙酰水杨酸乙酰水杨酸第18页，此课件共65页哦例5：盐酸去氧肾上腺素常用的鉴别反应有A 重氮化重氮化-偶合反应偶合反应B 三氯化铁显色反应三氯化铁显色反应C 双缩脲反应双缩脲反应D 氧化反应氧化反应E Rimini反应反应第19页，此课件共65页哦例6：肾上腺素可选用的鉴别方法有A 重氮化重氮化-偶合反应偶合反应B 三氯化铁显色反应三氯化铁显色反应C 制备衍生物测定熔点制备衍生物测定熔点D 氧化反应氧化反应E 氯化反应氯化反应第20页，此课件共65页哦例7：下列药物中，中国药典（2010年版）采用三氯化铁反应鉴别的有A 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素B 盐酸丁卡因盐酸丁卡因C 肾上腺素肾上腺素D 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因E 盐酸多巴胺盐酸多巴胺第21页，此课件共65页哦1.重酒石酸肾上腺素2.肾上腺素3.盐酸麻黄碱4.盐酸去氧肾上腺素A 与甲醛与甲醛-硫酸反应显玫瑰红硫酸反应显玫瑰红-橙红橙红-深棕红的深棕红的变化过程变化过程B 加碘试液产生明显红棕色加碘试液产生明显红棕色C 与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应D 与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色CB D A 第22页，此课件共65页哦一、酮体检查一、酮体检查肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素等肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素等都是由相应的都是由相应的酮体氢化还原酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易带入酮制得，若氢化不完全，易带入酮体杂质，故这些药物均要检查酮体。体杂质，故这些药物均要检查酮体。来源：H2Pd肾上腺酮肾上腺素第三节 特殊杂质检查第23页，此课件共65页哦1 肾上腺素 2 酮体第24页，此课件共65页哦利用酮体在紫外利用酮体在紫外利用酮体在紫外利用酮体在紫外310nm310nm处有最大吸收，而药物本身在此波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处有最大吸收，而药物本身在此波长几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体。几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体。几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体。几乎没有吸收的特点，用紫外分光光度法检查酮体。原理方法UV法法第25页，此课件共65页哦例例中中国国药药典典（2010年年版版）规规定定肾肾上上腺腺素素中中检检查查酮酮体体的的方方法法为为：取取本本品品，加加盐盐酸酸溶溶液液（92000）制制成成每每1ml中中含含2.0mg的的溶溶液液，于于310nm波波长长处处测测定定，吸吸光光度度不不得得过过0.05，已已知知酮酮体体在在310nm波波长长处处的的百百分分吸吸收收系系数数为为453，肾肾上上腺腺素素在在该该波波长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。第26页，此课件共65页哦第27页，此课件共65页哦二、光学纯度的检查二、光学纯度的检查P226第28页，此课件共65页哦 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇TLC盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍-PC盐酸氨溴索盐酸氨溴索HPLC采用采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。法中的高低浓度对比法进行检查。三、有关物质的检查第29页，此课件共65页哦盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检检查查方方法法：纸纸色色谱谱法法（PC）分分离离后后，甲甲醇醇萃萃取取，紫紫外外-可可见见分分光光光光度度法法于于232nm波波长长处处测测定定吸吸光光度度，控制吸光度以控制有关双胍的量控制吸光度以控制有关双胍的量 第30页，此课件共65页哦供试样品制备供试样品制备供试样品制备供试样品制备：本品：本品：本品：本品流动相溶解（流动相溶解（流动相溶解（流动相溶解（1mg/ml1mg/ml）对照样品制备对照样品制备对照样品制备对照样品制备：供试品溶液：供试品溶液：供试品溶液：供试品溶液对照溶液（对照溶液（对照溶液（对照溶液（0.01mg/ml0.01mg/ml）系统适用性样品系统适用性样品系统适用性样品系统适用性样品：本品：本品：本品：本品甲醇溶解甲醇溶解甲醇溶解甲醇溶解加甲醛溶液加甲醛溶液加甲醛溶液加甲醛溶液加热加热加热加热吹干吹干吹干吹干溶剂溶剂溶剂溶剂用水和流动相溶解用水和流动相溶解用水和流动相溶解用水和流动相溶解HPLCHPLC分析（分析（分析（分析（R R4 4）色谱条件色谱条件色谱条件色谱条件：RP-HPLC0.01mol/lNHRP-HPLC0.01mol/lNH4 4HH2 2POPO4 4-CH-CH3 3CN(50:50);248nmCN(50:50);248nm分析分析分析分析：对照溶液主成分峰为满量程的：对照溶液主成分峰为满量程的：对照溶液主成分峰为满量程的：对照溶液主成分峰为满量程的202025%25%，记录至主成，记录至主成，记录至主成，记录至主成分峰保留时间的分峰保留时间的分峰保留时间的分峰保留时间的2 2倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的倍，注入供试品溶液，如有杂峰，各杂峰的面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。面积之和不得大于对照液主峰面积的三分之一。盐酸氨溴索的检查方法第31页，此课件共65页哦MainpeakMainpeak第32页，此课件共65页哦例：中国药典（2010年版）规定下列药物需检查特殊杂质是1.盐酸普鲁卡因2.肾上腺素A 对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸 B 酮体酮体C 对氨基酚对氨基酚 D 间氨基酚间氨基酚E 酮胺酮胺AB 第33页，此课件共65页哦w原原料：非水溶液滴定法、料：非水溶液滴定法、溴量法溴量法w制制剂：提取酸碱滴定法、高效液相色谱剂：提取酸碱滴定法、高效液相色谱法、紫外分光光度法法、紫外分光光度法 第三节第三节 含量测定含量测定第34页，此课件共65页哦一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性脂烃胺侧链，具弱碱性 第35页，此课件共65页哦非水溶液滴定法弱碱类药物及其盐的含量测定弱碱类药物及其盐的含量测定1.基本原理基本原理当当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第36页，此课件共65页哦（二）一般方法供试品+冰醋酸10ml30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结果高氯酸滴定液滴定高氯酸滴定液滴定以空白试验校正P230 2.Ch.P.(2010)：尽：尽量避免使用醋酸汞量避免使用醋酸汞,通过选用酸度较通过选用酸度较强溶剂方法替代强溶剂方法替代.+规定试液第37页，此课件共65页哦一般采用半微量法。一般采用半微量法。中中国国药药典典（2010年年版版）的的第第一一法法：精精密密称称取取供供试试品品适适量量约约消消耗耗高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）8ml，加加冰冰醋醋酸酸1030ml使使溶溶解解，加加各各品品种种项项下下规规定定的的试试液液（醋醋酐酐或或醋醋酸酸汞汞试试液液）指指示示液液12滴滴，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L）滴滴定定。终终点点颜颜色色以以电电位位滴滴定定时时的的突突跃跃点点为为准准，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正。正。第38页，此课件共65页哦（三）问题讨论（有机碱盐）(1)适用范围适用范围Kb 10-8的有机碱盐的有机碱盐Kb为为10-810-10选冰醋酸作溶剂选冰醋酸作溶剂Kb为为10-1010-12选冰醋酸和醋酐作溶剂选冰醋酸和醋酐作溶剂Kb 10-12选醋酐作溶剂选醋酐作溶剂 3.第39页，此课件共65页哦(2)酸根的影响酸根的影响HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3水中酸强度相等。水中酸强度相等。HAc中酸强度不相同中酸强度不相同.HClO4HBrH2SO4HClHNO3其它其它弱酸弱酸第40页，此课件共65页哦采取措施HX加加HgAcHgX2硫酸盐类药物在冰醋酸中，只硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可直接滴定。能滴定至硫酸氢盐，可直接滴定。H2SO4盐盐HNO3盐盐在冰醋酸中酸性不强，可直接滴定。在冰醋酸中酸性不强，可直接滴定。因氧化指示剂，因氧化指示剂，用电位法指示终点。用电位法指示终点。磷酸、有机磷酸、有机酸盐酸盐无需处理，直接滴定。无需处理，直接滴定。第41页，此课件共65页哦(3)滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性水的膨胀系数是水的膨胀系数是0.2110-3/C冰冰HAc膨膨胀胀系系数数是是1.110-3/C，较较大大，体体积随温度变化较大，且还具有挥发性。积随温度变化较大，且还具有挥发性。测测定定样样品品与与标标定定标标准准溶溶液液时时温温度度不不同同，应应对对浓浓度度进进行行校校正正。超超过过10 C时时，则则应应重重新新标定。标定。第42页，此课件共65页哦常用电位法和指示剂法。常用电位法和指示剂法。Ch.P.收载的本类收载的本类药物大多采用药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，结晶紫指示剂指示终点，少数少数采用电位法指示终点。采用电位法指示终点。(4)终点指示方法终点指示方法第43页，此课件共65页哦(1)(1)加醋酸汞试液的目的是消除盐酸的干扰。加醋酸汞试液的目的是消除盐酸的干扰。(2)(2)在冰醋酸中加入适量的醋酐在冰醋酸中加入适量的醋酐,目的是增加丁卡因目的是增加丁卡因的碱性的碱性,使滴定突跃明显。使滴定突跃明显。(3).(3).为了消除非水滴定的误差为了消除非水滴定的误差,滴定结果用空白试滴定结果用空白试验校正。验校正。2(CH2(CH3 3CO)CO)2 2OO(CH(CH3 3CO)CO)3 3OO+CH+CH3 3COOCOO-BHCl+Hg(Ac)BHCl+Hg(Ac)2 2BHAc+HgClBHAc+HgCl2 2BHAc+HClOBHAc+HClO4 4BHClOBHClO4 4+HAc+HAc(4)(4)非水滴定法属于半微量法。非水滴定法属于半微量法。讨论:第44页，此课件共65页哦盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱Ch.P.（2010）取本品约取本品约0.15g，精密称定，加冰，精密称定，加冰醋酸醋酸10ml温热溶解，加醋酸汞试液温热溶解，加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴滴，用高氯酸滴定液（定液（0.1mol/L）滴定至翠绿色，并）滴定至翠绿色，并将滴定结果用空白试验校正将滴定结果用空白试验校正第45页，此课件共65页哦盐酸麻黄碱反应摩尔比为11第46页，此课件共65页哦测定方法测定方法（约（约8ml）半微量法半微量法溶剂溶剂冰醋酸冰醋酸滴定剂滴定剂高氯酸高氯酸(0.1mol/L)指示终点的方法指示终点的方法电位法电位法指示剂法指示剂法第47页，此课件共65页哦 本类药物的原料药多采用此法。本类药物的原料药多采用此法。本类药物的原料药多采用此法。本类药物的原料药多采用此法。1.1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于相当于相当于相当于B B的有机酸盐可直接滴定。的有机酸盐可直接滴定。的有机酸盐可直接滴定。的有机酸盐可直接滴定。2.2.盐酸盐：如盐酸多巴酚丁胺、盐酸苯乙双胍、盐酸甲氧明盐酸盐：如盐酸多巴酚丁胺、盐酸苯乙双胍、盐酸甲氧明盐酸盐：如盐酸多巴酚丁胺、盐酸苯乙双胍、盐酸甲氧明盐酸盐：如盐酸多巴酚丁胺、盐酸苯乙双胍、盐酸甲氧明 相当于相当于相当于相当于B B的的的的HXHX酸盐，需通过选用酸度较强的溶剂或加酸盐，需通过选用酸度较强的溶剂或加酸盐，需通过选用酸度较强的溶剂或加酸盐，需通过选用酸度较强的溶剂或加入醋酸汞试液后滴定。入醋酸汞试液后滴定。入醋酸汞试液后滴定。入醋酸汞试液后滴定。3.3.硫酸沙丁醇的测定硫酸沙丁醇的测定硫酸沙丁醇的测定硫酸沙丁醇的测定相当于相当于相当于相当于B B的的的的HH2 2SOSO4 4盐可直接滴定盐可直接滴定盐可直接滴定盐可直接滴定,也可处理后滴定。也可处理后滴定。也可处理后滴定。也可处理后滴定。测定注测定注测定注测定注意：加冰醋酸溶解样品后，意：加冰醋酸溶解样品后，意：加冰醋酸溶解样品后，意：加冰醋酸溶解样品后，应放冷的条件下再加入醋应放冷的条件下再加入醋应放冷的条件下再加入醋应放冷的条件下再加入醋酐酐酐酐。注意。注意。注意。注意滴定度。滴定度。滴定度。滴定度。非水溶液滴定法高氯酸滴定液第50页，此课件共65页哦 二、溴量法（含苯酚结构）二、溴量法（含苯酚结构）盐酸去氧肾上腺素及其注射液采用溴量法测定含盐酸去氧肾上腺素及其注射液采用溴量法测定含量量第51页，此课件共65页哦计算：数量关系：计算公式：反应摩尔比1：6计量计量第52页，此课件共65页哦取本品约取本品约0.1g,精密称定精密称定,置碘量瓶中置碘量瓶中,加水加水20ml使溶解使溶解,精密加溴滴定液精密加溴滴定液(0.05mol/L)50ml,再加盐酸再加盐酸5ml,立即密立即密塞塞,放置放置15min并振摇并振摇,注意微开瓶塞注意微开瓶塞,加碘化钾试液加碘化钾试液10ml,立即密塞立即密塞,振摇后振摇后,用硫代硫酸钠液用硫代硫酸钠液(0.1mol/L)滴滴定定,至近终点时至近终点时,加淀粉指示液加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失继续滴定至蓝色消失,并并将滴定结果用空白试验校正。每将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液溴滴定液(0.05mol/L)相当于相当于3.395mg的的C9H12NO2.HCl测定方法:第53页，此课件共65页哦计算：第54页，此课件共65页哦三、紫外分光光度法及比色法三、紫外分光光度法及比色法 （一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法盐酸甲氧明注射液盐酸甲氧明注射液 精精密密量量取取本本品品适适量量（约约相相当当于于盐盐酸酸甲甲氧氧明明100mg），置置250ml量量瓶瓶中中，加加水水稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀；精精密密量量取取10ml，置置100ml量量瓶瓶中中，加加水水稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，照照紫紫外外-可可见见分分光光 光光 度度 法法，在在290nm的的 波波 长长 处处 测测 定定 吸吸 光光 度度，按按C11H17NO3HCL的吸收系数的吸收系数 为为137计算，即得。计算，即得。第55页，此课件共65页哦三、紫外分光光度法及比色法三、紫外分光光度法及比色法（二）比色法（二）比色法 盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓 具具芳芳伯伯氨氨基基，可可发发生生重重氮氮化化偶偶合合反应反应第56页，此课件共65页哦对照法定量对照法定量第57页，此课件共65页哦偶合剂偶合剂N-（1-萘基）萘基）-乙二胺遇乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂合试剂N-（1-萘基）萘基）-乙二胺。乙二胺。第58页，此课件共65页哦取本品取本品20粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于盐酸粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于盐酸克仑特罗克仑特罗0.36mg），置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷），置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷20ml使溶解，使溶解，用盐酸溶液（用盐酸溶液（9100）振摇提取）振摇提取3次（次（20ml、15ml、10ml），分取酸提），分取酸提取液，置取液，置50ml量瓶中，用盐酸溶液（量瓶中，用盐酸溶液（9100）稀释至刻度，摇匀，滤过，）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，取续滤液，作为供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（加盐酸溶液（9100）溶解并定量稀释制成每）溶解并定量稀释制成每1ml中含中含7.2 g的溶液，的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml，分别置，分别置25ml量瓶中，各加盐酸溶液（量瓶中，各加盐酸溶液（9100）5ml与与0.1%亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液1ml，摇，摇匀，放置匀，放置3分钟，分钟，各加各加0.5%氨基磺酸铵溶液氨基磺酸铵溶液1ml，摇匀，时时振摇，摇匀，时时振摇10分钟，分钟，再各加再各加0.1%盐酸萘乙二胺溶液盐酸萘乙二胺溶液1ml，摇匀，放置，摇匀，放置10分钟，分钟，用盐酸溶液用盐酸溶液（9100）稀释至刻度，摇匀，照紫外）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光光度法（附录可见分光光光度法（附录IVA），），在在500nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得。的波长处分别测定吸光度，计算，即得。第59页，此课件共65页哦四、四、HPLC 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 外标法定量外标法定量 调调节节溶溶液液pH为为3.00.1，加加入入离离子对试剂庚烷磺酸钠子对试剂庚烷磺酸钠第60页，此课件共65页哦色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠剂；以庚烷磺酸钠溶液（取庚烷磺酸钠1.76g，加水，加水800ml使使溶解）溶解）-甲醇（甲醇（80 20），用），用1mol/L磷酸溶液调节磷酸溶液调节pH值至值至3.0为流动相；检测波长为为流动相；检测波长为280nm。取重酒石酸肾上腺素。取重酒石酸肾上腺素对照品适量，加含对照品适量，加含1%焦亚硫酸钠的流动相溶解并稀释焦亚硫酸钠的流动相溶解并稀释制成每制成每1ml中含中含0.2mg的溶液作为溶液（的溶液作为溶液（1），取盐酸异丙），取盐酸异丙肾上腺素对照品适量，加肾上腺素对照品适量，加0.1%焦亚硫酸钠溶液溶解并稀焦亚硫酸钠溶液溶解并稀释制成每释制成每1ml中含中含0.02mg的溶液作为溶液（的溶液作为溶液（2），取溶液），取溶液（1）1ml与溶液（与溶液（2）18ml，混匀，作为系统适用性试验溶，混匀，作为系统适用性试验溶液。取液。取20l，注入液相色谱仪，理论板数按盐酸异丙肾上腺素，注入液相色谱仪，理论板数按盐酸异丙肾上腺素峰计算不低于峰计算不低于2000，重酒石酸肾上腺素峰与盐酸异丙肾上腺，重酒石酸肾上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰的分离度应大于素峰的分离度应大于3.5。第61页，此课件共65页哦测定法测定法精密量取本品精密量取本品2ml，置，置50ml量瓶中，量瓶中，用用0.1%焦亚硫酸钠溶液焦亚硫酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，稀释至刻度，摇匀，精密量取精密量取20l，注入液相色谱仪，记录色谱，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取盐酸异丙肾上腺素对照品，同法测图。另取盐酸异丙肾上腺素对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。定。按外标法以峰面积计算，即得。第62页，此课件共65页哦例例1.能能和和重重酒酒石石酸酸去去甲甲肾肾上上腺腺素素发发生生颜颜色色反应的试液为（反应的试液为（D）A.浓硫酸浓硫酸B.甲醛试液甲醛试液C.氨试液氨试液D.甲醛甲醛硫酸试液硫酸试液E.茚三酮试液茚三酮试液第63页，此课件共65页哦例例2.盐盐酸酸异异丙丙肾肾上上腺腺素素的的检检查查项项目目是是（E）A.有关物质有关物质B.二苯酮二苯酮C.盐酸盐酸D.醛醛E.酮体酮体第64页，此课件共65页哦7.能能和和重重酒酒石石酸酸去去甲甲肾肾上上腺腺素素发发生生颜颜色色反反应应的的试试液为（液为（）A.浓硫酸浓硫酸B.甲醛试液甲醛试液C.氨试液氨试液D.甲醛甲醛硫酸试液硫酸试液第65页，此课件共65页哦