醌类化合物的提取分离实例.ppt

醌类化合物的提取分离实例现在学习的是第1页，共32页实例 白雪花粗粉加水浸泡水蒸气蒸馏馏出液放置 结晶抽滤 结晶甲醇重结晶蓝雪醌（mp：7576）现在学习的是第2页，共32页2.有机溶剂提取法有机溶剂提取法n n常用甲醇或乙醇提取，可将不同极性或类型的醌类成分都提取出来，得到总醌类再进行分离。n n1、用于提取苷元（游离醌类）。n n2、可用苯、氯仿等极性较小的溶剂提取。现在学习的是第3页，共32页实例：实例：大黄中总蒽醌成分的提取大黄中总蒽醌成分的提取大黄粗粉大黄粗粉100g置置1000ml 圆底烧瓶中，加入圆底烧瓶中，加入95%乙醇乙醇250ml，回流提取，回流提取2hr，趁热抽滤，趁热抽滤醇液醇液药渣药渣加入加入95%乙醇乙醇200ml，回流提取，回流提取1.5hr，趁热，趁热抽滤抽滤醇液醇液药渣药渣现在学习的是第4页，共32页乙醇提取液乙醇提取液静置冷却，抽滤静置冷却，抽滤滤液滤液 减压回收乙醇至糖浆状，将浓缩物转移减压回收乙醇至糖浆状，将浓缩物转移至至250ml三角瓶中三角瓶中 乙醇总提物乙醇总提物放冷，加入乙醚放冷，加入乙醚60ml冷浸，振摇冷浸，振摇20将乙醚液将乙醚液倾入倾入500ml三角瓶中三角瓶中 乙醚层乙醚层浸膏浸膏40ml乙醚乙醚+16ml丙酮冷浸三次（每次丙酮冷浸三次（每次15）乙醚层乙醚层浸膏浸膏乙醚总提液乙醚总提液现在学习的是第5页，共32页实例实例现在学习的是第6页，共32页3.碱提酸沉法n n适用于具有酚羟基的醌类化合物，由于其可溶于碱液，加酸后又沉淀出。n n1、用于提取带游离酚羟基的醌类化合物。n n2、利用酚羟基与碱成盐溶于碱水中，酸化后沉淀析出。现在学习的是第7页，共32页现在学习的是第8页，共32页4.超声提取法n n研究超声波技术对大黄中蒽醌类成分提取率的影响研究超声波技术对大黄中蒽醌类成分提取率的影响,并与传统提取方法做比较.n n方法方法:以超声波强化提取法为试验组以超声波强化提取法为试验组,以常规煎煮法及乙醇回流法对对照组,进行平行试验进行平行试验.n n结果结果:以水为提取溶剂以水为提取溶剂,采用超声波强化提取采用超声波强化提取10 min10 min对游离蒽醌的提取率即与水煎煮法煎煮60 min60 min提取效果提取效果相当相当;以乙醇为提取溶剂的提取效果明显好于水,几几种方法相比较种方法相比较,以乙醇作为提取溶剂超声波萃取法对大黄蒽醌的提取效果最好.n n结论结论:超声波法提取大黄蒽醌类成分具有提取效率高、操作简便、省时等优点,值得推广应用值得推广应用.现在学习的是第9页，共32页5.微波提取法n n优选微波技术提取大黄游离蒽醌的工艺。优选微波技术提取大黄游离蒽醌的工艺。n n方法：先采用单因素考察方法：先采用单因素考察,然后采用正交试验法考察微然后采用正交试验法考察微波输出功率、乙醇浓度、浸出时间、料液比波输出功率、乙醇浓度、浸出时间、料液比4 4个因素对个因素对提取率的影响提取率的影响,优选大黄游离蒽醌的最佳浸出方案。优选大黄游离蒽醌的最佳浸出方案。n n结果：采用结果：采用70%70%乙醇溶液在微波输出功率中高火,用用70%70%乙醇乙醇,料液比为18,18,提取提取5 min,5 min,提取提取2 2次次,大黄游离蒽醌提取率为1.31%,1.31%,相对提取率达到相对提取率达到88.52%。n n结论：用微波浸提法提取大黄中的蒽醌类成分效率高、结论：用微波浸提法提取大黄中的蒽醌类成分效率高、操作简便、省时。操作简便、省时。现在学习的是第10页，共32页游离醌类化合物的分离分离方法现在学习的是第11页，共32页1、羟基蒽醌的酸性差别很大时，采用PH梯度萃取法。由于蒽醌羟基位置、数目及羧基的有无，其酸度大小是有区别的，可分别溶于不同碱性的水液，故可采用梯度PH萃取法。此法为分离游离蒽醌衍生物的经典方法，也为常用方法。5%NaHCO35%NaHCO3液液 含含-COOH-COOH及两个以上及两个以上-酚酚OHOH 5%Na2CO35%Na2CO3液液 含一个含一个-酚酚OHOH蒽醌类蒽醌类1%NaOH1%NaOH液 含两个含两个a-a-酚酚OHOH蒽醌类蒽醌类5%NaOH5%NaOH液液 含一个含一个a-a-酚酚OHOH蒽醌类蒽醌类现在学习的是第12页，共32页现在学习的是第13页，共32页现在学习的是第14页，共32页实例 大黄中蒽醌类化学成分的提取分离技术 根据大黄中的根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸羟基蒽醌苷经酸水解成游离苷元，水解成游离苷元，苷元可溶于氯仿苷元可溶于氯仿而被提出的原理。而被提出的原理。再利用各羟基蒽再利用各羟基蒽醌类化合物酸性醌类化合物酸性不同，采用不同，采用pHpH梯梯度萃取法度萃取法分离而得分离而得各单体苷元。各单体苷元。现在学习的是第15页，共32页五、应用举例五、应用举例实例 番泻叶中蒽醌类化学成分的提取分离技术 番泻苷番泻苷番泻苷番泻苷A A A A不溶于水、不溶于水、苯、乙醚或氯仿，难苯、乙醚或氯仿，难溶于甲醇、乙醇或丙溶于甲醇、乙醇或丙酮，但在与水相混酮，但在与水相混的有机溶剂中的溶解的有机溶剂中的溶解度随含水量的增加而度随含水量的增加而增大，溶剂中含水量增大，溶剂中含水量达达30%30%时时溶解度溶解度最大。最大。采用采用大孔吸附大孔吸附大孔吸附大孔吸附树脂法树脂法树脂法树脂法进行分离。进行分离。现在学习的是第16页，共32页现在学习的是第17页，共32页 PH梯度萃取法对蒽衍生物进行初步分离，对性质相似，酸性强弱相差不大的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分后再结合色谱法进一步分离。多用硅胶为吸附剂，有时也用聚酰胺，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝，因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合物，难以洗脱。2、羟基蒽醌的酸性差别不大时，采用色谱方法，可得到彻底分离。现在学习的是第18页，共32页实例：建立了以苯酚为原料合成对苯二酚过程中各物质的高效液相色谱(HPLC)及气相色谱(GC)分析方法。HPLC 方法采用 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm250 mm,10m),流动相组成:V(甲醇):V(水):V(改性剂)=20:80:0.15,流动相流速为1.0 mL/min,定量环进样20L,Prostar 紫外检测器检测波长为254 nm,实现了对低含量对苯二酚、对苯醌、邻苯二酚及苯酚4种物质的分离测定;同时,采用氢火焰离子化检测器对上述4种物质在较高浓度下进行了 GC 分析,测定快速准确。现在学习的是第19页，共32页实例：建立了同时测定化妆品中蒽醌类含量的HPLC法，以评价化妆品的美容功效。采用甲醇超声提取，HPLC法分离测定。结果为3种被测物在11min内均得到良好的分离。在1gmL-250gmL均与其各自对应的峰面积呈良好线性关系（R09997）。在添加质量浓度为05gmL50gmL，回收率在920-1025，精密度RSD21，最低检出限（SN=3）为芦荟苷05160gmL，芦荟大黄素00864gmL，大黄酚01016gmL。该法简便、快速、准确，可用于化妆品中蒽醌类含量的检测。现在学习的是第20页，共32页实例：硅胶柱色谱法分离大黄酚、大黄素-6-甲醚 装柱：用石油醚乙酸乙酯（9.8:0.2）浸泡200300目硅胶约20 g，搅拌均匀，尽量赶出气泡。一次性倒入1.8 cm X 28 cm 的层析柱中，轻轻敲打使硅胶均匀下沉，至硅胶界面不再下降为止。上样：将离大黄酚和大黄素-6-甲醚的混合物用乙醇加热溶解，伴入少量硅胶，水浴60左右烘干，加到已装好的硅胶柱顶端，最后在样品带上盖上一层硅胶或棉花，以保护样品界面不受干扰。洗脱：先用100 ml石油醚乙酸乙酯（9.8:0.2）洗脱，至第一条黄色色带洗下来，再换用100 ml石油醚乙酸乙酯（9.5:0.5）洗脱下第二条色带。现在学习的是第21页，共32页（一）从大黄中提取分离羟基蒽醌类还可采用下列方法 用80%80%乙醇室温渗漉提取，回收溶剂，得浸膏后依次以乙醇室温渗漉提取，回收溶剂，得浸膏后依次以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯甲烷部分再分别上硅胶色谱柱以石油醚甲烷部分再分别上硅胶色谱柱以石油醚-乙酸乙酯（乙酸乙酯（955955）和）和（90109010）洗脱，分离得到大黄素甲醚、大黄酚及大黄素、芦）洗脱，分离得到大黄素甲醚、大黄酚及大黄素、芦荟大黄素单体。工艺流程如下：荟大黄素单体。工艺流程如下：现在学习的是第22页，共32页现在学习的是第23页，共32页（二）从大黄中提取分离（二）从大黄中提取分离（二）从大黄中提取分离（二）从大黄中提取分离总总总总蒽蒽蒽蒽醌类醌类醌类醌类可采用下列方法可采用下列方法可采用下列方法可采用下列方法 工工工工艺艺艺艺一：一：一：一：工工工工艺艺艺艺二：二：二：二：现在学习的是第24页，共32页3.3.PHPH梯梯度度萃萃取取法法对对蒽蒽衍衍生生物物进进行行初初步步分分离离，对对性性质质相相似似，酸酸性性强强弱弱相相差差不不大大的的羟羟基基蒽蒽醌醌类类则则不不能能很很好好分分离离，故故初初分分后后再再结结合合层层析析法法进进一一步步分分离离。多多用用吸吸附附柱柱层层析析，以以硅硅胶胶、磷磷酸酸氢氢钙钙、聚聚酰酰胺胺粉粉为为吸吸附附剂剂，不不宜宜用用氧氧化化铝铝，尤尤其其是是碱碱性性氧氧化化铝铝，因因为为羟羟基基蒽蒽醌醌能能与与氧氧化化 铝铝 形形 成成 牢牢 固固 螯螯 合合 物物，难难 以以 洗洗 脱脱。现在学习的是第25页，共32页现在学习的是第26页，共32页现在学习的是第27页，共32页蒽醌苷类的分离n n由于蒽醌苷类水溶性较强，分离精制较困难，故现多需进行预处理。n n溶剂法是用中等极性的有机溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，从除去游离蒽醌衍生物的水溶液中，将蒽醌苷萃取出来，再作进一步分离。现在学习的是第28页，共32页虎杖浸膏的水溶液虎杖浸膏的水溶液氯仿回流氯仿回流氯仿液氯仿液 （含大黄素等（含大黄素等游离蒽醌游离蒽醌脂溶成分）脂溶成分）水液水液EtOAcEtOAc萃取萃取 EtOAc EtOAc液液（含大黄素苷等（含大黄素苷等蒽醌苷蒽醌苷极性成分）极性成分）溶剂法：溶剂法：现在学习的是第29页，共32页 铅盐法：铅盐法：中药粉中药粉90%90%乙醇加热提取乙醇加热提取提取液提取液浓缩浓缩浓缩液浓缩液氯仿（或乙醚、苯）萃取氯仿（或乙醚、苯）萃取 氯仿液氯仿液（游离蒽醌）（游离蒽醌）水层水层加加醋酸铅溶醋酸铅溶液，过滤液，过滤滤液滤液沉淀沉淀水洗，悬浮于水中，通水洗，悬浮于水中，通H H2 2S S脱铅过滤脱铅过滤沉淀（沉淀（PbPb2 2S S）滤液滤液蒽醌苷蒽醌苷现在学习的是第30页，共32页现在学习的是第31页，共32页 补充实例补充实例补充实例补充实例 用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：结晶结晶：1,3,6-三羟基三羟基-2-甲基蒽醌甲基蒽醌结晶结晶：1,3,6-三羟基三羟基-2-甲基蒽醌甲基蒽醌-3-O-D-吡喃葡萄糖苷吡喃葡萄糖苷结晶结晶：1,3,6-三羟基三羟基-2-甲基蒽醌甲基蒽醌-3-O-D-吡喃木糖（吡喃木糖（12）-（6-O-乙乙 酰基）吡喃葡萄糖苷酰基）吡喃葡萄糖苷结晶结晶：1,2-二羟基蒽醌二羟基蒽醌-2-O-D-吡喃木吡喃木 糖（糖（16）-D-吡喃葡萄糖苷吡喃葡萄糖苷结晶结晶：1,3-二羟基二羟基-2-羟甲基蒽醌羟甲基蒽醌-3-O-D-吡喃木糖（吡喃木糖（16）-D-吡喃葡吡喃葡 萄糖苷萄糖苷流程说明：流程说明：采用溶剂提取法进行提取，系统溶剂法采用溶剂提取法进行提取，系统溶剂法进行粗分，得到不同极性部分。对各极性部分进行粗分，得到不同极性部分。对各极性部分应用色谱法如硅胶色谱法、反相柱色谱法进行应用色谱法如硅胶色谱法、反相柱色谱法进行分离。分离。现在学习的是第32页，共32页