药物杂质检查技术.pptx
（三）杂质限量计算 L：杂质限量V：标准溶液体积S：供试品的量C：标准溶液浓度第1页/共91页取取本本品品，加加水水100ml，加加热热溶溶解解后后，冷冷却却、滤滤过过，取取滤滤液液25ml，依依法法检检查查，与与标标准准硫硫酸酸钾钾溶溶液液（100g/ml SO4）制制成成的的对对照照液液比比较较，不不得得更更浓浓。计计算算硫硫酸酸盐盐的的限量。限量。对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查第2页/共91页取取本本品品，置置100ml量量瓶瓶中中，加加盐盐酸酸溶溶液液(92000)溶溶解解，并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，在在310nm处处测测定定吸吸光光度度，不不得得超过，超过，E为为453，求酮体的限量。，求酮体的限量。肾上腺素中肾上腺酮的检查第3页/共91页1.1.药物中的杂质主要由 和 引入2.2.杂质限量是指药物中所含杂质的 。通常用 或 来表示3.3.杂质限量的检查方法主要有 、和 三种点滴积累 第4页/共91页第二节 一般杂质的检查 第5页/共91页温故知新简述下列概念药物的杂质一般杂质特殊杂质第6页/共91页一般杂质一般杂质：在自然界中分布较广，多数药物的生在自然界中分布较广，多数药物的生产和贮存过程中容易引入的杂质产和贮存过程中容易引入的杂质方法：方法：2015版药典将一般杂质的检查方法收载于版药典将一般杂质的检查方法收载于四部通则中。四部通则中。注意：遵循注意：遵循平行原则平行原则第7页/共91页（一）原理：对照法（比浊法）一、氯化物检查法第8页/共91页1.1.标准氯化钠溶液的制备 2.2.供试品溶液的制备 3.3.对照溶液的制备4.4.比浊 5.5.记录和结果判断 （二）检查方法第9页/共91页（二）检查方法（二）检查方法供试品供试品稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml标准标准溶液溶液稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml暗处放置暗处放置5min(避免避免AgCl分解分解)第10页/共91页1.1.供试品管和对照液管的操作需要注意什么问题？2.2.加入硝酸的目的是什么？3.3.如何观察？4.4.供试品溶液如带颜色怎么处理？5.5.供试液如不澄清怎么处理？（三）注意事项 第11页/共91页（三）注意事项（三）注意事项一、氯化物检查一、氯化物检查注意事项注意事项内内 容容加入稀硝酸加入稀硝酸目的：加速氯化银混浊的生成目的：加速氯化银混浊的生成,避免避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。稀硝酸稀硝酸10ml为宜为宜先中和为中性后再检查先中和为中性后再检查避免硝酸避免硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银。化银。反应，观察方反应，观察方式式暗处反应，黑色背景，从上向下观暗处反应，黑色背景，从上向下观察察第12页/共91页（三）注意事项（三）注意事项一、氯化物检查一、氯化物检查注意事项注意事项内内 容容供试品处理供试品处理药物药物不溶解不溶解：溶液溶液有颜色有颜色：内消色法：内消色法水或水，加热水或水，加热使所含氯化物溶解使所含氯化物溶解过滤过滤除去不溶物除去不溶物药物药物取滤液检查取滤液检查第13页/共91页供试品供试品2 2倍量倍量量量量量样品样品 过滤至澄清过滤至澄清对照对照二者平行试验，比较对照与样品的浑浊程度二者平行试验，比较对照与样品的浑浊程度内消色法（倍量法）：内消色法（倍量法）：20ml20ml稀硝酸稀硝酸1ml1ml硝酸银硝酸银标准标准ClCl-和和1ml1ml硝酸银硝酸银1ml1ml硝酸银硝酸银一、氯化物检查一、氯化物检查（三）注意事项：（三）注意事项：第14页/共91页1mlAgNO1mlAgNO3 3过滤过滤对照管对照管样品管样品管2 2倍倍HNOHNO3 31mlAgNO1mlAgNO3 31mlAgNO1mlAgNO3 32 2倍量样品倍量样品1/21/21/21/2一、氯化物检查一、氯化物检查（三）注意事项：（三）注意事项：内消色法示意图内消色法示意图标准标准ClCl-第15页/共91页A.所用比色管需配套所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置避光放置5分钟分钟D.用硝酸银标准溶液做对照用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察在白色背景下观察 互动：下列哪些为药物中氯化物检查的必要条件第17页/共91页（一）原理：对照法（比浊法）二、硫酸盐检查法第18页/共91页硫酸盐检查法的操作流程与氯化物检查法相同，包括：标准硫酸钾溶液的制备供试品溶液和对照溶液的制备加入沉淀试剂25%25%氯化钡溶液比浊记录和结果判断等（二）检查方法 第19页/共91页（二）检查方法（二）检查方法P150P150二、硫酸盐检查二、硫酸盐检查供试品供试品标准标准溶液溶液稀稀HCl 2ml稀稀HCl 2mlH2OH2O25%BaCl21ml25%BaCl21mlH2OH2O摇匀，放置摇匀，放置10min第20页/共91页试品管和对照液管的操作应注意什么问题？2.2.加入盐酸的目的是什么？3.3.如何观察？4.4.供试品溶液如带颜色怎么处理？5.5.供试液如不澄清怎么处理？（三）注意事项 第21页/共91页（三）注意事项 注意事项注意事项内内 容容标准标准硫酸钾溶液硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液：标准硫酸钾溶液：0.1mgSO42-/ml比浊范围：比浊范围：0.1-0.5mg/50ml标准硫酸钾溶液取量：标准硫酸钾溶液取量：1.0-5.0ml酸性条件酸性条件加入盐酸，防止加入盐酸，防止CO32-、PO43-与与Ba2+生成沉生成沉淀干扰淀干扰，以，以50ml中含稀盐酸中含稀盐酸2ml为宜，酸为宜，酸度超过，灵敏度会下降度超过，灵敏度会下降第22页/共91页A.标准氯化钡标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液 E.以上都不对以上都不对 互动：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液互动：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液第23页/共91页（一）原理：对照法（比色法）三、铁盐检查法第24页/共91页标准铁溶液的制备供试品溶液和对照溶液的制备加入显色剂30%30%硫氰酸铵溶液比色记录和结果判断等（二）检查方法第25页/共91页（二）检查方法（二）检查方法三、铁盐检查三、铁盐检查供试品供试品显色，立即与同法制显色，立即与同法制成的对照溶液比较成的对照溶液比较加水溶解加水溶解25ml稀稀HCl 4ml过硫酸铵过硫酸铵 50mg加水稀释加水稀释35ml30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml加水定容加水定容第26页/共91页1.1.加入硫酸的目的是什么？2.2.加入盐酸的目的是什么？3.3.加入过硫酸铵的目的是什么？过量的目的又是什么？（三）注意事项第27页/共91页三、铁盐检查法三、铁盐检查法 HClHCl防止防止FeFe3+3+水解水解氧化氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+防止硫氰酸铁受光照还原或分解防止硫氰酸铁受光照还原或分解 过量过量第28页/共91页 A.使药物中铁盐都转变为使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C.使产生的红色产物颜色更深使产生的红色产物颜色更深 D防止干扰防止干扰 E便于观察、比较便于观察、比较 互动：中国药典规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的第30页/共91页重金属系指在试验条件下，能够与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。如银、锑、汞、铅、铜、铋、铬、锡、锌等重金属影响用药安全或药物的稳定性，必须严格控制其限量四、重金属检查法 第31页/共91页四、重金属检查四、重金属检查重金属：在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠重金属：在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色的金属杂质试液作用而显色的金属杂质。以铅为代表。以铅为代表 方法方法适用范围适用范围硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法无需有机破坏，在酸性条件下可溶解的无色无需有机破坏，在酸性条件下可溶解的无色药物中的重金属检查药物中的重金属检查炽灼法炽灼法含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物中的重金属检查有机药物中的重金属检查硫化钠法硫化钠法溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物中重金属杂质的检查的药物中重金属杂质的检查第32页/共91页中国药典2015年版采用比色法检查，共收载了3种检查方法。主要讲解第一法 第一法：硫代乙酰胺法（一）原理：对照法（比色法）第一法原理第34页/共91页1.1.标准铅溶液的制备 2.2.检查溶液的制备 对照溶液的制备（甲管）供试品溶液的制备（乙管）监控管溶液的制备（丙管）3.3.比色 4.4.结果判断（二）检查方法 第35页/共91页第一法第一法供试品供试品标准标准溶液溶液醋酸盐缓冲溶液醋酸盐缓冲溶液2mlH2O硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液2ml供供+标标醋酸盐缓冲溶液醋酸盐缓冲溶液2mlH2O醋酸盐缓冲溶液醋酸盐缓冲溶液2mlH2O甲甲乙乙丙丙当丙管中显当丙管中显出的颜色不出的颜色不浅于甲管时，浅于甲管时，乙管中显示乙管中显示的颜色与甲的颜色与甲管比较，不管比较，不得更深。如得更深。如丙管中显出丙管中显出的颜色浅于的颜色浅于甲管，应取甲管，应取样按第二法样按第二法重新检查重新检查第36页/共91页第二法第二法 缓缓炽灼缓缓炽灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品供试品 炭化炭化 加热加热 HNO3 500-600H2SO4 除尽除尽 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按第一法检查按第一法检查 蒸干蒸干 氨试液氨试液注意：注意：做空白试验做空白试验 第38页/共91页第三法第三法供试品供试品标准标准溶液溶液NaOH5ml20mlH2O5滴滴Na2S试液试液摇匀摇匀NaOH5ml20mlH2O5滴滴Na2S试液试液第39页/共91页（三）注意事项（三）注意事项注意事项注意事项内内 容容反应环境反应环境醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液(pH 3.5)标准铅溶液标准铅溶液Pb(NO3)2 10g/ml炽灼温度炽灼温度在用第二法检查时在用第二法检查时,炽灼温度控制在炽灼温度控制在500600，温度太低灰化不完全，温度过高重，温度太低灰化不完全，温度过高重金属挥发损失金属挥发损失硫化钠临用现配硫化钠临用现配第三法中，显色剂硫化钠试液对玻璃有一第三法中，显色剂硫化钠试液对玻璃有一定的腐蚀性，而且久置会产生絮状物，应定的腐蚀性，而且久置会产生絮状物，应临用前配制临用前配制四、重金属检查四、重金属检查第40页/共91页 A.硫化氢试液硫化氢试液 B.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 C.硫化钠试液硫化钠试液 D.氰化钾试液氰化钾试液 E.硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液互动：重金属检查法中，所使用的显色剂第41页/共91页A.用硫代乙酰胺为标准对照液用硫代乙酰胺为标准对照液B.用用10ml稀硝酸稀硝酸/50ml酸化酸化C.在醋酸盐缓冲溶液中在醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下比较结果需在黑色背景下比较互动：葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件第42页/共91页 现现有有一一药药物物为为苯苯巴巴比比妥妥，欲欲进进行行重重金金属属检检查查，应应采采用用中国药典中国药典上收载的重金属检查的哪种方法？上收载的重金属检查的哪种方法？互动：重金属检查方法选择第43页/共91页1、口服碳酸氢钠原料药中氯化物的检查方法：取本品，加水溶解使成25ml滴加HNO3使成微酸性后，置水浴中加热除尽CO2，放冷依法检查，与对照标准氯化钠溶液（10ug/ml）制成的对照液比较，不得更浓，计算氯化物的限量。第44页/共91页2、对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查方法：取本品加水100ml，加热溶解后冷却，滤过，取滤液25ml依法检查，与标准硫酸钾溶液（100ug/ml）对照液比较，不得更浓，计算杂质限量。第45页/共91页取乙酰唑胺2g，加水100ml，加热溶解后，迅速放冷，滤过，取续滤液25ml，依法检查氯化物，规定含氯化物不得超过0.014%，应取标准氯化钠溶液（每1ml相当于0.01mg CL）多少毫升？第46页/共91页砷的危害五、砷盐检查法 第47页/共91页第一法（古蔡氏法）检砷装置：五、砷盐检查法 醋酸铅棉花醋酸铅棉花药物药物避免避免硫化物硫化物的干扰的干扰HgBrHgBr2 2试纸试纸HCl+SnClHCl+SnCl2 2+KI+KI10min10min砷斑砷斑第48页/共91页AsAs3+3+3Zn 3Zn 3H3H+3Zn 3Zn2+2+AsHAsH3 3AsOAsO3 33-3-3Zn 3Zn 9H9H+3Zn 3Zn2+2+3H3H2 2O O AsHAsH3 3AsOAsO4 43-3-4Zn 4Zn 11H11H+4Zn 4Zn2+2+4H4H2 2O O AsHAsH3 3砷化氢与溴化汞试纸作用生成色斑：AsHAsH3 3+2HgBr+2HgBr2 2 2HBr+AsH(HgBr)2HBr+AsH(HgBr)2 2 （黄色）AsHAsH3 3+3HgBr+3HgBr2 2 3HBr+As(HgBr)3HBr+As(HgBr)3 3 （棕色）（一）原理：对照法（比较色斑颜色）1 1、原理：、原理：三价三价AsAs五价五价AsAsZn+HClZn+HClAsHAsH3 3HgBrHgBr2 2试纸试纸砷斑砷斑五价砷的反应较慢，需先还原为三价砷五价砷的反应较慢，需先还原为三价砷 黄棕色黄棕色第49页/共91页1.1.标准砷溶液的制备 2.2.标准砷斑的制备 3.3.供试品砷斑的制备 4.4.比色 5.5.结果判断（二）检查方法第50页/共91页1.1.在反应液中加入碘化钾和酸性氯化亚锡的目的2.2.在检砷装置的导气管中装入醋酸铅棉花的目的3.3.醋酸铅棉花的装填要求4.4.所用仪器和试液等照本法检查，均不应生成砷斑，或至多生成仅可辨认的斑痕 （三）注意事项第51页/共91页（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDCAg-DDC法）法）1 1、原理：、原理：加入有机碱三乙胺有利于反应向右进行加入有机碱三乙胺有利于反应向右进行 红色胶态银红色胶态银三价三价AsAs五价五价AsAsZn+HClZn+HClAsHAsH3 3目视比色法目视比色法510nm 510nm 测定测定A A值值第52页/共91页（二）（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）法）2.检查方法检查方法Ag(DDC)红色胶态银红色胶态银五、砷盐检查五、砷盐检查第53页/共91页（二）（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）法）3.优点：优点：（1）灵敏度高）灵敏度高（2）Sb干扰小：实验条件下，干扰小：实验条件下，500g锑不干扰锑不干扰（3）可限量（对照法）、可定量（比较法）可限量（对照法）、可定量（比较法）五、砷盐检查五、砷盐检查第54页/共91页A.除去除去I2 B.除去除去AsH3C.除去除去H2S D.除去除去HBrE.除去除去SbH3互动：在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的第55页/共91页 A将将As5+还原为还原为As3+B有利于有利于AsH3生成反应生成反应 C抑制抑制SbH3的生成的生成 D形成形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气齐以均匀而连续地发生氢气 E催化加速生成催化加速生成AsH3互动：古蔡氏法检查砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用第56页/共91页主要检查检查药物中的酸性、碱性杂质（一）指示剂法 在供试品溶液中加入规定的指示液，根据指示液的颜色变化来控制酸性、碱性杂质的限量（二）酸碱滴定法 在一定指示液条件下，以消耗一定量的酸或碱滴定液来控制药物中的碱性、酸性杂质的限量六、酸碱度检查法第57页/共91页主要检查检查药物中的酸性、碱性杂质（三）pHpH测定法 按照中国药典20102010年版通则中的规定用电位法（使用酸度计）测定溶液的pHpH，以控制其酸碱性杂质的限量 六、酸碱度检查法第58页/共91页干燥失重系指药物在规定的条件下，经干燥后所减失重量的百分率，该法主要检查吸湿水、结晶水及在该条件下能挥发减失的物质(如乙醇等)七、干燥失重测定法第59页/共91页常用的干燥方法有：1.1.恒温常压干燥法（烘箱干燥法）2.2.干燥剂干燥法 3.3.恒温减压干燥法 （一）操作方法第60页/共91页（一）常压恒温干燥法（一）常压恒温干燥法适用范围：受热较稳定的药物适用范围：受热较稳定的药物操作方法：扁形称量瓶操作方法：扁形称量瓶(W1)、干燥箱（烘箱）、干燥箱（烘箱）供试品（研细）平铺于扁形称量瓶中，厚度不超过供试品（研细）平铺于扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，精密称定(W2)。干燥温度一般为。干燥温度一般为105，达，达指定温度后干燥指定温度后干燥24小时，取出置干燥器中放冷至小时，取出置干燥器中放冷至室温室温,称重，再干燥（称重，再干燥（1h），直至恒重，称重），直至恒重，称重W3。六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法第61页/共91页（一）常压恒温干燥法（一）常压恒温干燥法六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法 干燥失重干燥失重%=W2-W3W2-W1100%第62页/共91页六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法（一）常压恒温干燥法（一）常压恒温干燥法1.药物含有较大量的水分，熔点又低硫代硫酸钠Na2S2O35H2O先在4050加热，使结晶水缓缓释去；然后逐渐升高温度，在105干燥至恒重，减失重量不得超过32.0%2.药物含有较大量的水分，熔点较高枸橼酸钠（2个结晶水）：180 干燥特殊情况第63页/共91页六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法（二二）干燥剂干燥剂干燥法干燥法适用范围：适用范围：受热易分解或易挥发的药物受热易分解或易挥发的药物操作方法：将供试品置于干燥器内，利用干燥器操作方法：将供试品置于干燥器内，利用干燥器内的干燥剂（内的干燥剂（变色硅胶，硫酸和五氧化二磷变色硅胶，硫酸和五氧化二磷）吸收供试品中的水分，干燥至恒重吸收供试品中的水分，干燥至恒重第64页/共91页六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法（三三）减压减压干燥法干燥法1.减压恒温干燥法减压恒温干燥法适用范围：适用范围：熔点低，受热不稳定、能耐受一定温熔点低，受热不稳定、能耐受一定温度及水分难赶除的药物度及水分难赶除的药物2.减压室温干燥法减压室温干燥法适用范围：适用范围：熔点低并且不能加热的熔点低并且不能加热的药物药物第65页/共91页六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法（三三）减压减压干燥法干燥法减压干燥器减压干燥器真空干燥箱真空干燥箱第66页/共91页甲睾酮，熔点：甲睾酮，熔点：163167规定取本品，在规定取本品，在105干燥干燥2h，减失重量不得超过，减失重量不得超过1.0%。苯佐卡因，熔点：苯佐卡因，熔点：8891规规定定在在五五氧氧化化二二磷磷干干燥燥器器中中干干燥燥至至恒恒重重，减减失失重重量量不得超过不得超过0.5%。布洛芬，熔点：布洛芬，熔点：77.5规规定定在在五五氧氧化化二二磷磷干干燥燥器器中中减减压压干干燥燥至至恒恒重重，减减失失重量不得超过重量不得超过0.5%。互动：干燥失重测定方法选择第67页/共91页六、干燥失重测定法六、干燥失重测定法（四四）热重分析法热重分析法热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温度关系的一种技术度关系的一种技术记录质量变化对温度的关系曲线即热重曲线。记录质量变化对温度的关系曲线即热重曲线。G第68页/共91页（二）记录和结果计算 第69页/共91页1.1.供试品干燥时应注意的问题2.2.从干燥器中取出供试品后应注意的问题3.3.干燥器中常用的干燥剂为硅胶、五氧化二磷或无水氯化钙。干燥剂应及时更换,使其保持有效状态（三）注意事项第70页/共91页氯化物检查、硫酸盐检查、铁盐检查、重金属检查、砷盐检查常用的沉淀（显色）剂、标准溶液分别是什么？反应的现象是什么？点滴积累第71页/共91页感谢您的观看！第91页/共91页
