药物分析吩噻嗪类含量测定.pptx

性质性质：弱碱性、紫外光吸收特性、金属离子配合呈色测定方法测定方法：酸碱滴定法、分光光度法、高效液相色谱法和液相色谱-质谱联用技术第1页/共23页一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法(一一)非水溶液滴定法非水溶液滴定法结构结构：母核上：母核上1010位取代基的位取代基的烃胺烃胺-NR2-NR2、哌嗪基及哌、哌嗪基及哌啶基啶基具有具有碱性碱性 1.HClO1.HClO4 4非水溶液滴定法基本原理非水溶液滴定法基本原理当当HAHA酸性较强酸性较强时，反应不能定量时，反应不能定量完成，必须完成，必须除去或降低除去或降低HAHA的酸性的酸性，使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第2页/共23页10ml30ml若供试品为若供试品为氢卤酸氢卤酸盐盐再加再加5%5%醋酸汞醋酸汞的的冰醋酸液冰醋酸液3ml5ml供供试试品品+冰冰醋醋酸酸结结果果HClO4滴定滴定空白试空白试验校正验校正指示剂碱性溶液碱性溶液pKpKb b1010，冰醋，冰醋酸中滴定突跃不明显，酸中滴定突跃不明显，需加入需加入醋酐醋酐，使碱性增，使碱性增强，突跃更明显强，突跃更明显第3页/共23页 2.2.一般方法一般方法 供试品：以消耗标准液体积计算 溶剂：HAc，一般用量1030ml 滴定剂：0.1mol/L HClO4 无水HAc溶液 指示剂：电位法第4页/共23页3.HClO4在在冰冰醋醋酸酸溶溶液液中中，具具强强氧氧化化性性，可可氧氧化化吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物产产生生红红色色的的氧氧化化物物，干干扰扰指指示示剂剂终终点点的的观观察。排除方法：察。排除方法：（1）改用中性溶剂改用中性溶剂（2）加抗坏血酸加抗坏血酸（3）电位法指示终点电位法指示终点 第5页/共23页 4 4、适用范围、适用范围 主要主要用于用于K Kb b1010-8-8的有机碱盐的含量测定的有机碱盐的含量测定。对碱性较。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使点指示的方法，可使pKpKb b为为8 81313的弱碱性药物采用本的弱碱性药物采用本法滴定。法滴定。K Kb b为为1010-8-81010-10-10时，宜选时，宜选冰醋酸冰醋酸作为溶剂；作为溶剂；K Kb b为为1010-10-101010-12-12时，宜选时，宜选冰醋酸与醋酐冰醋酸与醋酐的混合溶的混合溶液；液；K Kb b1010-12-12时，应用时，应用醋酐醋酐作为溶剂。作为溶剂。冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大。增大。第6页/共23页【示例示例11-3111-31】盐酸氯丙嗪测定盐酸氯丙嗪测定ChPChP（20102010）取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml与醋酐30ml，溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于35.53mg 的C17H19N2ClS.HCl。第7页/共23页提取后HClO4非水滴定法：取本品约0.15g置分液漏斗,加氨水碱化乙醚提取6次，合并水浴加热挥干乙醚残渣丙酮溶解HClO4非水滴定法溴甲酚绿-结晶紫指示液紫红色蓝紫色【示例示例11-3211-32】盐酸氯丙嗪注射液测定盐酸氯丙嗪注射液测定JPJP（1515）每1ml高氯酸滴定液(0.05mol/L)相当于17.77mg 的C17H19N2ClS.HCl。第8页/共23页（二）乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法（二）乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法本类药物的盐酸盐的水溶液显本类药物的盐酸盐的水溶液显酸性酸性，在，在乙醇乙醇-水溶液水溶液中，可用中，可用NaOHNaOH滴定剂滴定剂滴定，电位法指示滴定终点。滴定，电位法指示滴定终点。V1 V2 等当点等当点突跃体积突跃体积滴定体积滴定体积V=V1-V2 第9页/共23页二、分光光度法二、分光光度法（一）直接分光光度法（一）直接分光光度法在在254nm254nm的波长处，的波长处，C C1717H H1919ClNClN2 2S.HClS.HCl的吸收系数的吸收系数（）为）为915915计算。计算。第10页/共23页（二）提取后分光光度法（二）提取后分光光度法-排除辅料干扰排除辅料干扰 【示例示例11-3611-36】盐酸氯丙嗪口服液盐酸氯丙嗪口服液USP32-NF27USP32-NF27对照品：50 同法测定As。第11页/共23页萃取萃取除去抗氧剂的干扰除去抗氧剂的干扰第12页/共23页（三）提取后双波长分光光度法（三）提取后双波长分光光度法 提取后分光光度法能够除去一些干扰物提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却质，但却不能不能除去吩噻嗪类药物的除去吩噻嗪类药物的氧化物氧化物。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，时，因结构相近，氧化物氧化物在吩噻嗪类药物的在吩噻嗪类药物的测定波长处产生吸收测定波长处产生吸收，干扰测定。，干扰测定。第13页/共23页 定量依据定量依据 样品在二波长下吸收度差值（A A）：）：即，吸收度差值（即，吸收度差值（A A）仅与待测组分的浓度有关，）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。第14页/共23页【示例示例11-3711-37】盐酸氯丙嗪注射液的含量测定盐酸氯丙嗪注射液的含量测定 （USP32-NF27USP32-NF27）测定波长：测定波长：254nm（最大吸收波长）277nm（等吸收波长）空白对照液：0.1mol/L盐酸溶液 计算公式：式中：式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度；为对照品溶液的浓度；V(ml)为所取供试品的体积；为所取供试品的体积；括号内的公式分别为供试品溶液括号内的公式分别为供试品溶液(U)和对照和对照品溶液品溶液(S)在下标所示波长处的吸光度差。在下标所示波长处的吸光度差。第15页/共23页第16页/共23页（五）钯离子比色法五）钯离子比色法 吩噻嗪类药物在吩噻嗪类药物在pH 20.1pH 20.1的缓冲溶液中，与的缓冲溶液中，与钯离子钯离子(Pd(Pd2+2+)形成红色配合物，在形成红色配合物，在500nm500nm波长附近波长附近具有最大吸收具有最大吸收 由于由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色，消除了消除了药物中药物中氧化物氧化物对测定对测定的干扰的干扰。比色液的浓度比色液的浓度：50 250 g/mL 显色稳定性：显色稳定性：1010分钟后可稳定约分钟后可稳定约2 2小时小时 第17页/共23页【示例示例11-3811-38】盐酸异丙嗪注射液盐酸异丙嗪注射液USP32-NF27USP32-NF27精密称取适量置分液漏斗依次加氯化钾氢氧化钠碱化甲醇合并正庚烷提取液正庚烷提取3次盐酸酸化合并盐酸提取液并定容至50ml对照品0.124mg/ml称取标准品和对照品溶液各2ml+PdCl2显色，测A470第18页/共23页三、高效液相色谱法三、高效液相色谱法（一）反相高效液相色谱法（一）反相高效液相色谱法(RP-HPLC)固定相：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（十八烷基硅烷键合硅胶（ODSODS）流动相：流动相：水甲醇或水乙腈系统，极性较强水甲醇或水乙腈系统，极性较强极性较强极性较强的组分在分离时的组分在分离时先先流出柱子，流出柱子，极性较弱极性较弱的组分的组分后后流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样品的分析。杂环类药物分析一般品的分析。杂环类药物分析一般在流动相中加入含氮在流动相中加入含氮碱性竞争试剂碱性竞争试剂(扫尾剂扫尾剂:醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈腈等等),以以抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用。第19页/共23页（二）离子对高效液相色谱法（二）离子对高效液相色谱法(Ion-RP-HPLC)常用的离子对试剂：常用的离子对试剂：烷基磺酸盐阴离子对试剂，烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。影响离子对形成的条件影响离子对形成的条件 反离子的性质与浓度反离子的性质与浓度流动相的组成流动相的组成pHpH离子强度等离子强度等影响待测组分的保留影响待测组分的保留 第20页/共23页四、液相色谱四、液相色谱-质谱联用技术质谱联用技术 液相色谱液相色谱-质谱联用技术集质谱联用技术集HPLCHPLC的高分离效能和的高分离效能和MSMS的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是进行药物及有关物质定性分析的常用方法。进行药物及有关物质定性分析的常用方法。第21页/共23页色谱图色谱图：图11-4 血浆中7种抗抑郁类和5种抗精神病类药物的LC-MS/MS检测典型色谱图1.五氟利多；五氟利多；2.匹莫奇特；匹莫奇特；3.氯普噻吨；氯普噻吨；4.硫利达嗪；硫利达嗪；5.三氟拉嗪；三氟拉嗪；6.阿阿米替林；米替林；7.氯米帕明；氯米帕明；8.氟西汀；氟西汀；9.丙米嗪；丙米嗪；10.马普替林；马普替林；11.地昔帕明；地昔帕明；12.舍曲林；舍曲林；IS.还阳酚还阳酚第22页/共23页感谢您的观看！第23页/共23页