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高中生物选修 专题第1页，此课件共43页哦考纲要求三年考情微生物的分离和培养广东高考无单独考查某种微生物数量的测定培养基对微生物的选择作用2011广东非选择题T28第2页，此课件共43页哦一、微生物的一、微生物的实验实验室培养室培养1.1.培养基培养基(1)(1)概念概念:人人们们按照微生物按照微生物对对_的不同需求的不同需求,配制出供配制出供其其_的的营营养基养基质质。(2)(2)营营养构成养构成:一般都含有水、碳源、氮源和无机一般都含有水、碳源、氮源和无机盐盐。此外。此外还还要要满满足微生物生足微生物生长对长对pHpH、_以及以及_的要求。的要求。(3)(3)种种类类:按照物理性按照物理性质质可分可分为为_培养基和培养基和_培养基。培养基。营营养物养物质质生生长长繁殖繁殖特殊特殊营营养物养物质质氧气氧气液体液体固体固体第3页，此课件共43页哦2.2.将无菌技将无菌技术术的方法、的方法、类类型和型和对对象象连线连线第4页，此课件共43页哦3.3.大大肠肠杆菌的杆菌的纯纯化培养化培养(1)(1)制制备备牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨胨固体培养基固体培养基:最常用的最常用的细细菌培养基菌培养基:_:_培养基。培养基。配制步配制步骤骤:计计算算_溶化溶化_倒平板。倒平板。牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨胨称量称量灭灭菌菌第5页，此课件共43页哦(2)(2)纯纯化大化大肠肠杆菌杆菌:平板划平板划线线法和法和_ 方法方法纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌 接种接种 原理原理在培养基上得到由在培养基上得到由_的肉眼可的肉眼可见见的菌落的菌落,即可即可获获得得纯纯种。种。关键关键稀稀释释涂布平板法涂布平板法一个一个细细胞繁殖而来胞繁殖而来第6页，此课件共43页哦(3)(3)菌种的保存菌种的保存:对对于于频频繁使用的菌种繁使用的菌种,可以采用可以采用_的方法。的方法。对对于需要于需要长长期保存的菌种期保存的菌种,可以采用可以采用_的方法。的方法。临时临时保藏保藏甘油管藏甘油管藏第7页，此课件共43页哦考点考点 一一 培养基培养基营营养及种养及种类类1.1.培养基的成分培养基的成分 作用主要来源碳源构成生物体的物质,异养生物的能源物质CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸等氮源合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物N2、NH3、铵盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子酶和核酸的成分维生素、氨基酸、碱基等第8页，此课件共43页哦作用主要来源无机盐细胞内的组成成分,生理调节物质;某些化能自养菌的能源、酶的激活剂培养基及大气水优良的溶剂,维持生物大分子结构的稳定性培养基、大气、代谢产物第9页，此课件共43页哦2.2.培养基的种培养基的种类类(1)(1)按物理状按物理状态态分分类类:培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏第10页，此课件共43页哦(2)(2)按功能分按功能分类类:选择选择培养基培养基:培养基中加入某些化学物培养基中加入某些化学物质质,用来抑制不需要的微生物用来抑制不需要的微生物的生的生长长,促促进进需要的微生物的生需要的微生物的生长长。鉴别鉴别培养基培养基:培养基中加入某种指示培养基中加入某种指示剂剂或化学或化学药药品品,鉴别鉴别不同种不同种类类的的微生物。微生物。第11页，此课件共43页哦【高考警示高考警示】(1)(1)自养微生物营养自养微生物营养异养微生物营养异养微生物营养:自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物;异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物。异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物。(2)(2)选择培养基中所加的物质选择培养基中所加的物质鉴别培养基中所加的物质鉴别培养基中所加的物质:选择培养基中所加的化学物质对其他微生物起抑制作用选择培养基中所加的化学物质对其他微生物起抑制作用;鉴别培养基所加的化学物质对其他微生物不起作用鉴别培养基所加的化学物质对其他微生物不起作用,只是对所要鉴只是对所要鉴别的微生物起指示作用。别的微生物起指示作用。第12页，此课件共43页哦【典例典例1 1】(2013(2013广广东东六校六校联联考考)甲、乙、丙是三种微生物甲、乙、丙是三种微生物,下表下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中中正常生正常生长长繁殖繁殖;甲能在甲能在中正常生中正常生长长繁殖繁殖,而乙和丙都不能而乙和丙都不能;乙能在乙能在中中正常生正常生长长繁殖繁殖,甲、丙都不能。下列甲、丙都不能。下列说说法正确的是法正确的是()第13页，此课件共43页哦A.A.甲、乙、丙都是异养微生物甲、乙、丙都是异养微生物B.B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C.C.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D.D.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物【解析解析】选选C C。甲能在。甲能在和和培养基中生长繁殖培养基中生长繁殖,不能在不能在培养基中生长培养基中生长繁殖繁殖,说明甲是固氮微生物说明甲是固氮微生物;乙能在乙能在和和培养基中生长繁殖培养基中生长繁殖,不能在不能在培养基中生长繁殖培养基中生长繁殖,说明乙是自养微生物说明乙是自养微生物;丙能在丙能在培养基中生长繁殖培养基中生长繁殖,不能在不能在和和培养基中生长繁殖培养基中生长繁殖,说明丙是异养微生物。说明丙是异养微生物。第14页，此课件共43页哦【变变式式训练训练】下表是几种微生物能利用的碳源和氮源物下表是几种微生物能利用的碳源和氮源物质质的描述的描述,其中描其中描述述错误错误的微生物有几种的微生物有几种()A.1A.1种种B.2B.2种种C.3C.3种种D.4D.4种种硝化细菌圆褐固氮菌甲烷氧化菌乳酸菌碳源物质CO2CO2葡萄糖葡萄糖氮源物质NH3N2尿素N2第15页，此课件共43页哦【解析】【解析】选选C C。硝化细菌属于化能自养型生物。硝化细菌属于化能自养型生物,以以COCO2 2为碳源为碳源,以以NHNH3 3为氮源。为氮源。圆褐固氮菌属于异养固氮菌圆褐固氮菌属于异养固氮菌,碳源为含碳有机物碳源为含碳有机物,氮源为分子态氮。甲氮源为分子态氮。甲烷氧化菌对碳源要求严格烷氧化菌对碳源要求严格,只能是甲烷或甲醇。乳酸菌属于异养厌氧型只能是甲烷或甲醇。乳酸菌属于异养厌氧型菌菌,其碳源和氮源均为有机物。其碳源和氮源均为有机物。第16页，此课件共43页哦(1)(1)在配制培养基在配制培养基时时,一般微生物除一般微生物除满满足足营营养需求外养需求外,还应该还应该考考虑虑pHpH、氧气及特、氧气及特殊殊营营养物养物质质的要求。的要求。()【分析分析】一般微生物需要一定的营养、氧气、一般微生物需要一定的营养、氧气、pHpH及特殊物质及特殊物质(如添加维生如添加维生素素),),但培养厌氧微生物时但培养厌氧微生物时,培养基不能与氧气接触。培养基不能与氧气接触。(2)(2)(2012(2012全国卷全国卷T5B)T5B)常用液体培养基分离常用液体培养基分离获获得得细细菌菌单单菌落。菌落。()【分析分析】菌落只能在固体培养基上形成菌落只能在固体培养基上形成,常用液体培养基进行常用液体培养基进行细菌培养而获得代谢产物。细菌培养而获得代谢产物。第17页，此课件共43页哦考点考点 二二 微生物的微生物的纯纯化培养技化培养技术术与与计计数数1.1.原理原理在培养基上将在培养基上将细细菌稀菌稀释释或分散成或分散成单单个个细细胞胞,使其使其长长成成单单个的菌落个的菌落,这这个个菌落就是菌落就是纯纯化的化的细细菌菌落。菌菌落。2.2.微生物接种方法微生物接种方法(1)(1)平板划平板划线线法法:平板划平板划线线法中法中细细胞的分离和稀胞的分离和稀释过释过程程发发生在接种生在接种环环在在固体平板表面上的划固体平板表面上的划线线和移和移动过动过程中。在程中。在线线的开始部分的开始部分,微生物往往微生物往往连连在一起生在一起生长长,随着随着线线的延伸的延伸,菌数逐菌数逐渐渐减少减少,最后可形成最后可形成纯纯种的种的单单个个菌落。菌落。(如下如下图图)第18页，此课件共43页哦(2)(2)稀稀释释涂布平板法涂布平板法:1010倍系列稀倍系列稀释释操作操作将分将分别别盛有盛有9 mL9 mL水的水的6 6支支试试管管灭灭菌菌,并按并按10101 110106 6的的顺顺序序编编号。号。用移液管吸取用移液管吸取1 mL1 mL培养的菌液培养的菌液,注入注入10101 1倍稀倍稀释释的的试试管中。用手指管中。用手指轻压轻压移液管上的橡皮移液管上的橡皮头头,吹吸吹吸3 3次次,使菌液与水充分混匀。使菌液与水充分混匀。第19页，此课件共43页哦从从10101 1倍稀倍稀释释的的试试管中吸取管中吸取1 mL1 mL稀稀释释液液,注入注入10102 2倍稀倍稀释释的的试试管中管中,重重复复步的混匀操作。依次步的混匀操作。依次类类推推,直到完成最后直到完成最后1 1支支试试管的稀管的稀释释。第20页，此课件共43页哦3.3.微生物的微生物的计计数方法数方法(1)(1)显显微微镜镜直接直接计计数法数法:原理原理:利用特定利用特定细细菌菌计计数板或血数板或血细细胞胞计计数板数板,在在显显微微镜镜下下计计算一定容算一定容积积的的样样品中微生物的数量。品中微生物的数量。方法方法:用用计计数板数板计计数。数。缺点缺点:不能区分死菌与活菌。不能区分死菌与活菌。第21页，此课件共43页哦(2)(2)稀稀释释涂布平板法涂布平板法(活菌活菌计计数法数法):):原理原理:当当样样品的稀品的稀释释度足度足够够高高时时,培养基表面生培养基表面生长长的一个菌落的一个菌落,来源来源于于样样品稀品稀释释液中的一个活菌液中的一个活菌,通通过统计过统计平板上的菌落数平板上的菌落数,就能推就能推测测出出样样品中大品中大约约含有多少活菌。含有多少活菌。计计算公式算公式:每克每克样样品中的菌株数品中的菌株数=(CV)M,=(CV)M,其中其中,C,C代表某一稀代表某一稀释释度下度下平板上生平板上生长长的平均菌落数的平均菌落数,V,V代表涂布平板代表涂布平板时时所用的稀所用的稀释释液的体液的体积积(mL),M(mL),M代表稀代表稀释释倍数。倍数。第22页，此课件共43页哦注意事注意事项项:a.a.一般一般选择选择菌落数在菌落数在3030300300的平板的平板进进行行计计数。数。b.b.统计统计菌落数往往比活菌的菌落数往往比活菌的实际实际数目低。数目低。c.c.统计结统计结果一般用菌落数而不用活菌数表示。果一般用菌落数而不用活菌数表示。d.d.设设置置对对照照,目的是排除目的是排除实验组实验组中非中非测试测试因素因素对实验结对实验结果的影响。果的影响。第23页，此课件共43页哦【高考警示高考警示】平板划线时三次灼烧接种环的目的不同平板划线时三次灼烧接种环的目的不同(1)(1)第一次灼烧第一次灼烧:杀死接种环上所有的微生物。杀死接种环上所有的微生物。(2)(2)第二次灼烧第二次灼烧:杀死上次划线后残留在接种环上的菌种杀死上次划线后残留在接种环上的菌种,使下次划线使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。的菌种直接来源于上次划线的末端。(3)(3)第三次灼烧第三次灼烧:划线结束后划线结束后,杀死接种环上残存的菌种杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环避免细菌污染环境和感染操作者。境和感染操作者。第24页，此课件共43页哦【典例典例2 2】纤维纤维素分解菌能素分解菌能够产够产生生纤维纤维素素酶酶分解分解纤维纤维素。素。回答下列回答下列问题问题:(1)(1)在在筛选纤维筛选纤维素分解菌的素分解菌的过过程中程中,通常用通常用染色法染色法,这这种方法种方法能能够够通通过颜过颜色反色反应应直接直接对纤维对纤维素分解菌素分解菌进进行行筛选筛选。甲同学在甲同学在实验时实验时得到了如下得到了如下图图所示的所示的结结果果,则纤维则纤维素分解菌素分解菌位于位于()A.A.B.B.C.C.D.D.A A刚果红刚果红第25页，此课件共43页哦(2)(2)乙同学打算从牛胃中分离乙同学打算从牛胃中分离纤维纤维素分解菌并素分解菌并计计数数,与分离醋酸菌与分离醋酸菌相比相比,进进行培养行培养时时除了除了营营养不同外养不同外,最主要最主要实验实验条件差条件差别别是是,该该同学采用活菌同学采用活菌计计数法数法统计统计的菌落数目往往比活菌的的菌落数目往往比活菌的实际实际数目数目。(3)(3)丙同学在提取和分离丙同学在提取和分离纤维纤维素素酶酶的的过过程中程中,为为了抵制外界酸和碱了抵制外界酸和碱对对酶酶活性的影响活性的影响,采取的措施是向提取液和分离液中添加采取的措施是向提取液和分离液中添加。若探究。若探究纤维纤维素素酶酶活性的最适温度活性的最适温度,应应如何如何设设置置对对照照?。保证无氧环境保证无氧环境少少缓冲溶液缓冲溶液不同的温度梯度之间相互对照不同的温度梯度之间相互对照第26页，此课件共43页哦【解析解析】(1)(1)刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成不再形成,则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(2)(2)牛胃是一个厌氧的环境牛胃是一个厌氧的环境,所以其中的纤维素分解菌与需氧的醋酸所以其中的纤维素分解菌与需氧的醋酸菌培养条件有所不同。因为是活菌计数法菌培养条件有所不同。因为是活菌计数法,所以部分死亡菌无法计数。所以部分死亡菌无法计数。另外当两个或多个细菌连在一起时平板上只能观察到一个菌落另外当两个或多个细菌连在一起时平板上只能观察到一个菌落,所以所以统计菌落数目偏少。统计菌落数目偏少。(3)(3)探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照,其他无关变其他无关变量要适宜。量要适宜。第27页，此课件共43页哦【互互动动探究探究】(1)(1)若在若在该该培养基中加入青霉素培养基中加入青霉素,该该培养基培养基还还能起到能起到鉴别鉴别作用作用吗吗?提示提示:不能。在该培养基中加入青霉素后不能。在该培养基中加入青霉素后,细菌不能生长繁殖细菌不能生长繁殖(包括纤维包括纤维素分解菌素分解菌),),所以该培养基失去鉴别作用。所以该培养基失去鉴别作用。(2)(2)统计该统计该培养基中的微生物数量除了用培养基中的微生物数量除了用该该同学采用的活菌同学采用的活菌计计数法数法外外,还还有什么方法有什么方法?提示提示:显微镜直接计数法。显微镜直接计数法。第28页，此课件共43页哦【变变式式训练训练】用平板划用平板划线线法或稀法或稀释释涂布平板法涂布平板法纯纯化大化大肠肠杆菌杆菌时时()可以用相同的培养基可以用相同的培养基 都需要使用接种都需要使用接种针进针进行接种行接种都需要在火焰旁都需要在火焰旁进进行接种行接种 都可以用来都可以用来计计数活菌数活菌A.A.B.C.B.C.D.D.【解析解析】选选C C。平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基。平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故故正正确确;平板划线法采用接种针进行操作平板划线法采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作作,故故错误错误;纯化时纯化时,要进行无菌操作要进行无菌操作,需要在火焰旁接种需要在火焰旁接种,避免空气中避免空气中的微生物混入培养基的微生物混入培养基,故故正确正确;平板划线法一般用于分离而不是计数平板划线法一般用于分离而不是计数,故故错误。错误。第29页，此课件共43页哦二、土壤中分解尿素的二、土壤中分解尿素的细细菌的分离与菌的分离与计计数数1.1.分离原理分离原理2.2.计计数方法数方法_。3.3.实验实验流程流程土壤取土壤取样样_微生物的培养与微生物的培养与观观察察细细菌的菌的_。稀稀释释涂布平板法涂布平板法样样品的稀品的稀释释计计数数尿素尿素 无机物无机物 土壤中的微生物土壤中的微生物 合成酶催化合成酶催化第30页，此课件共43页哦三、分解三、分解纤维纤维素的微生物的分离素的微生物的分离1.1.纤维纤维素与素与纤维纤维素素酶酶(1)(1)纤维纤维素素:纤维纤维素是一种素是一种_,_,在棉花、木材、作物秸在棉花、木材、作物秸秆秆中含量中含量较较高。高。(2)(2)纤维纤维素素酶酶:组组成成:纤维纤维素素酶酶是一种复合是一种复合酶酶,一般一般认为认为它至少包括三种它至少包括三种组组分分,即即_。作用作用:纤维素纤维素 _ _ 葡萄糖。葡萄糖。多糖多糖C C1 1酶酶、C Cx x酶酶和葡萄糖苷和葡萄糖苷酶酶纤维二糖纤维二糖第31页，此课件共43页哦2.2.纤维纤维素分解菌的素分解菌的筛选筛选(1)(1)原理原理:(2)(2)培养基培养基:以以_为为惟一碳源的惟一碳源的选择选择培养基。培养基。3.3.实验实验流程流程土壤取土壤取样样_梯度稀梯度稀释释将将样样品涂布到品涂布到鉴别纤鉴别纤维维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上挑挑选产选产生生_的菌落。的菌落。纤维纤维素素选择选择培养培养透明圈透明圈第32页，此课件共43页哦1.1.在以尿素在以尿素为为惟一氮源的培养基中加入酚惟一氮源的培养基中加入酚红红指示指示剂剂,若指示若指示剂剂变蓝变蓝,则说则说明明筛选筛选到分解尿素的到分解尿素的细细菌。菌。()【分析分析】细菌产生的脲酶将尿素分解生成氨细菌产生的脲酶将尿素分解生成氨,氨会使培养基的氨会使培养基的碱性增强碱性增强,pH,pH升高升高,酚红指示剂变红。酚红指示剂变红。2.2.纤维纤维素素酶酶是一是一类类酶酶,它是由它是由C C1 1酶酶、C CX X酶酶和葡萄糖苷和葡萄糖苷酶酶组组成成的。的。()【分析分析】纤维素酶是一种复合酶纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组一般认为它至少包括三种组分分:C:C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶。纤维素在这三种酶共同作用下酶和葡萄糖苷酶。纤维素在这三种酶共同作用下才能被分解成葡萄糖。才能被分解成葡萄糖。第33页，此课件共43页哦3.3.在在选择选择培养培养纤维纤维素分解菌的素分解菌的实验实验中中,选择选择培养的目的是增加培养的目的是增加纤维纤维素分解菌的数量。素分解菌的数量。()【分析分析】选择培养的过程中选择培养的过程中,其他微生物不能在培养基上生长其他微生物不能在培养基上生长,纤维素分解菌的数量会增加。纤维素分解菌的数量会增加。4.(20124.(2012北京北京T5D)T5D)将土壤浸出液涂布在无菌的将土壤浸出液涂布在无菌的选择选择培养基上分培养基上分离分解尿素的离分解尿素的细细菌菌,是否无菌操作影响是否无菌操作影响较较小。小。()【分析分析】土壤浸出液中含有多种杂菌土壤浸出液中含有多种杂菌,所以利用选择培养基筛所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时选土壤浸出液中特定微生物时,不需要进行严格的无菌操作。不需要进行严格的无菌操作。第34页，此课件共43页哦1.1.细细菌培养菌培养过过程中程中,分分别别采用了高采用了高压压蒸汽、酒精、火焰灼蒸汽、酒精、火焰灼烧烧等几种不同等几种不同的的处处理方法理方法,这这些方法可依次用于消些方法可依次用于消灭灭或或杀灭杀灭哪些部位的哪些部位的杂杂菌菌()A.A.接种接种针针、手、培养基、手、培养基 B.B.培养基、手、接种培养基、手、接种针针C.C.手、接种手、接种针针、培养基、培养基 D.D.培养基、接种培养基、接种针针、手、手【解析解析】选选B B。高压蒸汽可以对培养基进行灭菌。高压蒸汽可以对培养基进行灭菌,杀死所有微生物杀死所有微生物;75%;75%酒精用于消灭手表面的微生物酒精用于消灭手表面的微生物;火焰灼烧能消灭接种针上的所有微火焰灼烧能消灭接种针上的所有微生物。生物。第35页，此课件共43页哦2.2.分离土壤中分解尿素的分离土壤中分解尿素的细细菌菌,对对培养基的要求是培养基的要求是()加尿素加尿素不加尿素不加尿素加加琼琼脂糖脂糖不加不加琼琼脂糖脂糖加葡萄糖加葡萄糖不加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸加硝酸盐盐不加硝酸不加硝酸盐盐A.A.B.B.C.C.D.D.【解析解析】选选C C。分离土壤中分解尿素的细菌。分离土壤中分解尿素的细菌,培养基中要有尿素、培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖。尿素可以为分解尿素的细菌提供氮源琼脂糖、葡萄糖。尿素可以为分解尿素的细菌提供氮源,不需要加不需要加入硝酸盐。入硝酸盐。第36页，此课件共43页哦3.(20133.(2013汕汕头头模模拟拟)在在“果醋制作果醋制作过过程程”中中,获获得得较较多的醋酸杆菌菌种的多的醋酸杆菌菌种的最最简简便方法是便方法是()A.A.从从变变酸的葡萄酒表面酸的葡萄酒表面获获得菌膜得菌膜,再培养、分离再培养、分离B.B.不必人不必人为为加入菌种加入菌种,在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸菌在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸菌C.C.从泡菜从泡菜坛坛盖盖边边沿的水槽中水的表面沿的水槽中水的表面获获得菌膜得菌膜,再培养、分离再培养、分离D.D.从土壤中分离提取从土壤中分离提取【解析解析】选选A A。在变酸的葡萄酒表面菌膜中含有醋酸菌。在变酸的葡萄酒表面菌膜中含有醋酸菌,获得菌膜后获得菌膜后,再培再培养、分离养、分离,就可以获得较多的醋酸菌就可以获得较多的醋酸菌,而且这种方法最简便。而且这种方法最简便。第37页，此课件共43页哦4.(20134.(2013无无锡锡模模拟拟)下下图图是微生物平板划是微生物平板划线线示意示意图图。划。划线线的的顺顺序序为为1 1、2 2、3 3、4 4、5 5。下列操作方法正确的是。下列操作方法正确的是()A.A.操作前要将接种操作前要将接种环环放在火焰放在火焰边边灼灼烧灭烧灭菌菌B.B.划划线线操作操作须须在火焰上在火焰上进进行行C.C.在在5 5区域中才可以得到所需菌落区域中才可以得到所需菌落D.D.在在1 1、2 2、3 3、4 4、5 5区域中划区域中划线线前后都要前后都要对对接种接种环灭环灭菌菌【解析解析】选选D D。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作须在火焰边进行。在接种时划线操作须在火焰边进行。在5 5个个区域中区域中,只要有单个活细菌只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。通过培养即可获得所需菌落。第38页，此课件共43页哦5.(5.(双双选选)下表表示某培养基的配方下表表示某培养基的配方,下列有关叙述正确的下列有关叙述正确的是是()A.A.从物理性从物理性质质看看该该培养基属于液体培养基培养基属于液体培养基,从用途看从用途看该该培养基属于培养基属于鉴别鉴别培养基培养基B.B.培养基中属于碳源的物培养基中属于碳源的物质质主要是葡萄糖主要是葡萄糖,属于氮源的物属于氮源的物质质是蛋白是蛋白胨胨C.C.该该培养基缺少提供生培养基缺少提供生长长因子的物因子的物质质D.D.该该培养基培养基调节调节到合适的到合适的pHpH后就可以接种菌种后就可以接种菌种成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g0.4 g 0.065 g1 000 mL第39页，此课件共43页哦【解析解析】选选A A、B B。培养基中没有凝固剂琼脂。培养基中没有凝固剂琼脂,为液体培养基为液体培养基,伊红、美伊红、美蓝能使某些细菌着色蓝能使某些细菌着色,起鉴别作用起鉴别作用,A,A项正确项正确;糖类糖类(尤其是葡萄糖尤其是葡萄糖)是最常是最常用的碳源用的碳源;蛋白胨主要用作氮源蛋白胨主要用作氮源,但也提供生长因子但也提供生长因子,并作为异养型微生并作为异养型微生物的碳源、能源物的碳源、能源,B,B项正确、项正确、C C项错误项错误;培养基制备过程中调完培养基制备过程中调完pHpH后要后要进行灭菌处理进行灭菌处理,D,D项错误。项错误。第40页，此课件共43页哦6.(20126.(2012北京高考北京高考)高中生物学高中生物学实验实验中中,在接种在接种时时不不进进行行严严格无菌操格无菌操作作对实验结对实验结果影响最大的一果影响最大的一项项是是()A.A.将少将少许许干酵母加入到新干酵母加入到新鲜鲜的葡萄汁中的葡萄汁中B.B.将毛霉菌液接种在切成小将毛霉菌液接种在切成小块块的的鲜鲜豆腐上豆腐上C.C.将将转转基因植物叶片接种到无菌培养基上基因植物叶片接种到无菌培养基上D.D.将土壤浸出液涂布在无菌的将土壤浸出液涂布在无菌的选择选择培养基上培养基上第41页，此课件共43页哦【解析解析】选选C C。A A项错误项错误,在酿酒过程中在酿酒过程中,需将少许干酵母加入到新鲜的葡需将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中萄汁中,绝大多数微生物都无法适应酿酒环境而受到抑制绝大多数微生物都无法适应酿酒环境而受到抑制,但为了提但为了提高果酒品质高果酒品质,最好还是抑制其他微生物的生长最好还是抑制其他微生物的生长;B;B项错误项错误,在腐乳制作过程在腐乳制作过程中中,盐、酒和香辛料都具有防腐、杀菌的作用盐、酒和香辛料都具有防腐、杀菌的作用;C;C项正确项正确,在植物组织在植物组织培养实验中培养实验中,无菌技术是获得成功的关键无菌技术是获得成功的关键,培养物一旦受到微生物的污染培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃就会导致实验前功尽弃;D;D项错误项错误,在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中实验中,选择培养基本身会抑制或阻止其他种类微生物的生长。选择培养基本身会抑制或阻止其他种类微生物的生长。第42页，此课件共43页哦7.(20117.(2011重重庆庆高考高考)下列有关下列有关细细菌培养的叙述菌培养的叙述,正确的是正确的是()A.A.在在琼琼脂固体培养基上脂固体培养基上长长出的出的单单个菌落含有多种个菌落含有多种细细菌菌B.B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细进细菌生菌生长长C.C.向液体培养基中通入氧气能促向液体培养基中通入氧气能促进进破破伤风伤风杆菌的生杆菌的生长长D.D.在半固体培养基中接种在半固体培养基中接种细细菌培养后可以菌培养后可以观观察其运察其运动动【解析解析】选选D D。单个菌落中只含有一种细菌。单个菌落中只含有一种细菌;青霉素能抑制细菌生长青霉素能抑制细菌生长,而对真菌没有影响而对真菌没有影响;破伤风杆菌是厌氧型细菌破伤风杆菌是厌氧型细菌,通入氧气会抑制其生长。通入氧气会抑制其生长。半固体培养基是在培养液中加入少量凝固剂的培养基半固体培养基是在培养液中加入少量凝固剂的培养基,常用于观察细菌常用于观察细菌运动、菌种鉴定等。运动、菌种鉴定等。第43页，此课件共43页哦