免疫球蛋白与抗体 (4)精选PPT.ppt

关于免疫球蛋白与抗体(4)第1页，讲稿共62张，创作于星期一一、抗体的发现和研究历史：一、抗体的发现和研究历史：18891889年：年：绿脓杆菌绿脓杆菌绿脓杆菌绿脓杆菌 感染感染 动物血清动物血清 凝集反应凝集反应（凝集素）（凝集素）18901890年年(Behring):(Behring):白喉类毒素白喉类毒素 免疫免疫 动物血清动物血清绿脓杆菌绿脓杆菌绿脓杆菌绿脓杆菌白喉毒素白喉毒素中和毒素中和毒素(抗毒素抗毒素)第一节第一节 免疫球蛋白与抗体的概念免疫球蛋白与抗体的概念第2页，讲稿共62张，创作于星期一并发现在血清蛋白中主要是并发现在血清蛋白中主要是 -球蛋白（丙种球蛋白）具球蛋白（丙种球蛋白）具有抗体活性。有抗体活性。抗体抗体(antibody(antibody，Ab)Ab)凝集素凝集素抗毒素抗毒素溶菌素溶菌素沉淀素沉淀素19301930年发现：年发现：第3页，讲稿共62张，创作于星期一血清蛋白电泳图谱显示：白蛋白白蛋白球蛋白球蛋白abg gabg gabg g未免疫动物血清未免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清+抗原处理吸收抗原处理吸收后后第4页，讲稿共62张，创作于星期一二、抗体的概念二、抗体的概念(重点重点)抗体（抗体（antibody,Ab)antibody,Ab)：动物机体受到抗原物质刺激动物机体受到抗原物质刺激后，由后，由B B淋巴细胞转化为浆细胞而产生的，能与相应抗淋巴细胞转化为浆细胞而产生的，能与相应抗原发生特异性反应的免疫球蛋白。原发生特异性反应的免疫球蛋白。将抗体介导的免疫称为将抗体介导的免疫称为体液免疫体液免疫,将含有抗体的血清将含有抗体的血清称为称为抗血清抗血清或或免疫血清免疫血清。第5页，讲稿共62张，创作于星期一三、免疫球蛋白的概念三、免疫球蛋白的概念(重点重点)19641964年世界卫生组织召开会议，将年世界卫生组织召开会议，将具有抗体活性具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为统称为免疫球蛋白免疫球蛋白（immunoglobulinimmunoglobulin，简称简称IgIg ）。）。免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可存在于免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可存在于B B细细胞膜上。胞膜上。第6页，讲稿共62张，创作于星期一 免疫球蛋白可分为免疫球蛋白可分为两种两种类型：类型：分泌性分泌性IgIg ：存在于血清、体液以及分泌液中，具有抗体的各：存在于血清、体液以及分泌液中，具有抗体的各种功能。种功能。膜型膜型IgIg ：位于：位于B B淋巴细胞的表面，即膜表面免疫球蛋白淋巴细胞的表面，即膜表面免疫球蛋白（mIgmIg），是），是B B淋巴细胞的抗原识别受体（淋巴细胞的抗原识别受体（BCRBCR）。）。第7页，讲稿共62张，创作于星期一抗体的化学本质是抗体的化学本质是免疫球蛋白免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都具有都具有抗体的活性抗体的活性。IgAbAb=Ig Ig AbIgIg与与AbAb的关系的关系抗体抗体=生物学功能上的概念生物学功能上的概念 IgIg=化学结构上的概念化学结构上的概念第8页，讲稿共62张，创作于星期一四、抗体的分类四、抗体的分类（一）根据所对应的抗原分：（一）根据所对应的抗原分：第9页，讲稿共62张，创作于星期一（二）根据（二）根据有无抗原刺激分有无抗原刺激分：第10页，讲稿共62张，创作于星期一（三）根据与抗原反应的性质分：（三）根据与抗原反应的性质分：第11页，讲稿共62张，创作于星期一（四）根据根据抗原性分：（四）根据根据抗原性分：主要根据重链的不同主要根据重链的不同第12页，讲稿共62张，创作于星期一第二节第二节 免疫球蛋白的分子结构免疫球蛋白的分子结构一、免疫球蛋白的单体分子结构一、免疫球蛋白的单体分子结构 由由两条相同两条相同的较大的的较大的重链重链和和两条相同两条相同的较小的较小的的轻链轻链4 4条肽链通过轻链与重链之间的条肽链通过轻链与重链之间的二硫键二硫键连连接起来构成的接起来构成的“Y Y”字形的分子结构。字形的分子结构。第13页，讲稿共62张，创作于星期一第14页，讲稿共62张，创作于星期一（一）重链和轻链（一）重链和轻链1 1重链（重链（heavy chainheavy chain，H H链）链）由由450-550450-550个氨基酸残基组成，分子量个氨基酸残基组成，分子量55-75KD55-75KD，有，有4-54-5个链内二硫键组成的环肽，两重链之间由个链内二硫键组成的环肽，两重链之间由一对或两对以上的二硫键互相连接。一对或两对以上的二硫键互相连接。根据根据IgIg重链抗原性的差异，重链抗原性的差异，IgIg可分为可分为5 5类：类：IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE和和IgDIgD，相应相应H H链为链为、链，链，不同免疫球蛋白的差别就由重链所决定。不同免疫球蛋白的差别就由重链所决定。第15页，讲稿共62张，创作于星期一2 2轻链（轻链（light chainlight chain，L L链）链）由由214214个氨基酸残基组成，分子量为个氨基酸残基组成，分子量为24KD24KD，有两个，有两个由链内二硫键组成的环肽，在羧基端靠二硫键分别与由链内二硫键组成的环肽，在羧基端靠二硫键分别与两条重链连接。两条重链连接。各类免疫球蛋白的轻链都相同，均可分为：各类免疫球蛋白的轻链都相同，均可分为：KappaKappa（）与）与lambdalambda（）2 2个型。个型。第16页，讲稿共62张，创作于星期一 （二）可变区和恒定区（二）可变区和恒定区 1 1、H H链：链：N N端开始的最初端开始的最初110110个氨基酸为个氨基酸为可变区可变区（VHVH），之后一直到），之后一直到C C端的氨基酸称为端的氨基酸称为恒定区恒定区（CHCH）。在）。在VHVH中有中有3 3个区域的氨基酸变异最大，称个区域的氨基酸变异最大，称为为高（超）变区高（超）变区（HVRHVR），其余的氨基酸变化较小，），其余的氨基酸变化较小，称为称为骨架区骨架区。2 2、L L链：链：N N端开始的端开始的109109个氨基酸为个氨基酸为可变区可变区(VL(VL），），其余的为其余的为恒定区（恒定区（CLCL），在在VLVL中也有中也有3 3个高变区个高变区。第17页，讲稿共62张，创作于星期一第18页，讲稿共62张，创作于星期一（三）功能区（三）功能区1 1、基本含义、基本含义 免疫球蛋白的多肽链分子可折叠形成免疫球蛋白的多肽链分子可折叠形成几个由链内二硫键连接成的环状球形结构，此即其几个由链内二硫键连接成的环状球形结构，此即其IgIg的的功能区（或结构域功能区（或结构域），每一功能区约有），每一功能区约有110110个氨个氨基酸组成，其顺序具有高度的同源性。基酸组成，其顺序具有高度的同源性。2 2、L L链功能区链功能区 有两个，即有两个，即VLVL和和CLCL，分别位于可变区，分别位于可变区和恒定区。和恒定区。3 3、H H链功能区链功能区 IgGIgG、IgAIgA、IgDIgD有有4 4个个（V V区区1 1个，个，VHVH，C C区区3 3个，个，CH1CH1、CH2CH2和和CH3CH3）；）；IgMIgM、IgEIgE有有5 5个个（增加（增加一个一个CH4CH4）。）。第19页，讲稿共62张，创作于星期一第20页，讲稿共62张，创作于星期一4 4、功能区作用、功能区作用 （1 1）VHVH和和VL:VL:特异性识别和结特异性识别和结合抗原，合抗原，由由VHVH和和VLVL内的高变区内的高变区构成抗体分子的抗原结合点。构成抗体分子的抗原结合点。（2 2）CH1CH1和和CL:CL:同种异型的遗同种异型的遗传标记传标记。（3 3）IgGIgG的的CH2CH2和和IgMIgM的的CH3 CH3 是抗体分子的补体结合点，是抗体分子的补体结合点，与补与补体的活化有关。体的活化有关。（4 4）CH3/CH4:CH3/CH4:细胞结合位细胞结合位点，点，是同免疫活性细胞（如巨是同免疫活性细胞（如巨噬细细胞、噬细细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞）的细胞）的FCFC受体的结合部位。受体的结合部位。第21页，讲稿共62张，创作于星期一二、免疫球蛋白的特殊分子结构二、免疫球蛋白的特殊分子结构 （一）绞链区（一）绞链区1 1、含义、含义 在两条重链之间二硫键连接处附近的重链恒在两条重链之间二硫键连接处附近的重链恒定区，即定区，即CH1CH1尾部和尾部和CH2CH2头部的小段肽链；与抗体分子头部的小段肽链；与抗体分子的构型变化有关的构型变化有关,称为称为绞链区绞链区。2 2、功能、功能 含有丰富的含有丰富的脯氨酸脯氨酸，因此易伸展弯曲，当抗因此易伸展弯曲，当抗体与抗原结合时，该区可转动，一方面使可变区的两体与抗原结合时，该区可转动，一方面使可变区的两个抗原结合点尽量与抗原结合，另一方面可使抗体分个抗原结合点尽量与抗原结合，另一方面可使抗体分子变构，使补体结合位点暴露出来子变构，使补体结合位点暴露出来。且易被且易被木瓜蛋白木瓜蛋白酶、胃蛋白酶酶、胃蛋白酶等水解。等水解。第22页，讲稿共62张，创作于星期一第23页，讲稿共62张，创作于星期一（二）（二）J J链和分泌成分链和分泌成分1 1、J J链链 即连接链即连接链是一条多肽链，富含半胱氨酸是一条多肽链，富含半胱氨酸;由浆细胞合成由浆细胞合成;以二硫键的形式共价结合到以二硫键的形式共价结合到IgIg的重链上的重链上;在在IgMIgM和分泌型和分泌型IgAIgA单体之间起连接作用。单体之间起连接作用。第24页，讲稿共62张，创作于星期一2 2、分泌成份（、分泌成份（SC)SC)（1 1）是二聚体）是二聚体IgAIgA上的一个辅助成分；上的一个辅助成分；（2 2）由上皮细胞合成，化学本质为糖蛋白）由上皮细胞合成，化学本质为糖蛋白（3 3）以共价形式结合到）以共价形式结合到IgAIgA分子，并一起被分泌到粘膜分子，并一起被分泌到粘膜表面，又称分泌片（表面，又称分泌片（secretory piece,SPsecretory piece,SP）；）；（4 4）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶对二聚体）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶对二聚体IgAIgA的降解。的降解。第25页，讲稿共62张，创作于星期一第26页，讲稿共62张，创作于星期一（三）单体、双体（三）单体、双体和五聚体和五聚体1 1、单体、单体 由一对由一对L L链链和和H H链组成的基本结链组成的基本结构。构。2 2、双体、双体 分泌型的分泌型的IgAIgA由由J J链连接的两链连接的两个单体。个单体。3 3、五聚体、五聚体 IgMIgM是由是由J J链和二硫键连接的链和二硫键连接的五个单体。五个单体。第27页，讲稿共62张，创作于星期一 （一）木瓜蛋白酶酶切结果（一）木瓜蛋白酶酶切结果 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶可将可将H H链铰链区二硫键的近链铰链区二硫键的近N N端切断，端切断，得到大小相近的得到大小相近的3 3个片段；其中有两个相同的片段，个片段；其中有两个相同的片段，称称抗原结合片段（抗原结合片段（FabFab），另一个为另一个为FCFC片段片段，可形成，可形成蛋白结晶。蛋白结晶。三、免疫球蛋白的水解片段与生物学活性三、免疫球蛋白的水解片段与生物学活性第28页，讲稿共62张，创作于星期一（二）胃蛋白酶酶切结果（二）胃蛋白酶酶切结果 胃蛋白酶胃蛋白酶可将可将H H链从铰链区二硫键的近链从铰链区二硫键的近C C端切端切断，得到一个具有双价活性的断，得到一个具有双价活性的F(ab)F(ab)2 2片片段和若干段和若干个小分子多肽碎片个小分子多肽碎片（pFcpFc）。）。F(ab)2F(ab)2片段与抗片段与抗原结合可发生凝集和沉淀反应，原结合可发生凝集和沉淀反应，pFcpFc片段失去生片段失去生物学活性。物学活性。第29页，讲稿共62张，创作于星期一第30页，讲稿共62张，创作于星期一一、免疫球蛋白的种类一、免疫球蛋白的种类 免疫球蛋白可区分为类、亚类、型、亚型等。免疫球蛋白可区分为类、亚类、型、亚型等。（一）类（一）类 免疫球蛋白免疫球蛋白类类的区分是依据其的区分是依据其重链重链C C区的理化特性及抗原性区的理化特性及抗原性的差异，在同种系所有个体内的免疫球蛋白可分为的差异，在同种系所有个体内的免疫球蛋白可分为IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE、IgDIgD五大类五大类(class),(class),重链分别称为重链分别称为,链链。（二）亚类（二）亚类 同一种类免疫球蛋白，又可根据其同一种类免疫球蛋白，又可根据其重链恒定区的微细结构、重链恒定区的微细结构、二硫键的位置与数目及抗原特性二硫键的位置与数目及抗原特性的不同，进一步分为的不同，进一步分为亚类亚类（subclasssubclass）。如人的）。如人的IgGIgG有有IgG1IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3和和IgG4IgG4四个亚四个亚类。类。第三节第三节 免疫球蛋白的种类与抗原决定簇免疫球蛋白的种类与抗原决定簇第31页，讲稿共62张，创作于星期一（三）型（三）型 根据轻链恒定区的抗原性不同，各类免疫球蛋白的根据轻链恒定区的抗原性不同，各类免疫球蛋白的轻链分轻链分为为和和两个型两个型（typetype），任何种类的免疫），任何种类的免疫球蛋白均有两型轻链分子。球蛋白均有两型轻链分子。（四）亚型（四）亚型 根据根据型轻链型轻链N N端恒定区上氨基酸排列顺序的差异，端恒定区上氨基酸排列顺序的差异，免疫球蛋白又免疫球蛋白又可分为若干亚型可分为若干亚型（subtypesubtype），），型轻链型轻链无亚型。无亚型。（五）亚群（五）亚群 根据免疫球蛋白根据免疫球蛋白V V区的一级结构特点，可将免疫区的一级结构特点，可将免疫球蛋白球蛋白分为分为3 35 5个亚群个亚群（subgroupsubgroup）。）。第32页，讲稿共62张，创作于星期一二、免疫球蛋白的抗原决定簇（血清型）二、免疫球蛋白的抗原决定簇（血清型）（一）同种型决定簇（一）同种型决定簇 指在同一种属动物所有个体的指在同一种属动物所有个体的IgIg分子共同具有的抗原特异性标志，为分子共同具有的抗原特异性标志，为种属型标志种属型标志。即是。即是说在同一种动物不同个体之间同时存在不同类型的说在同一种动物不同个体之间同时存在不同类型的免疫球蛋白，不表现出抗原性，只是在异种动物之免疫球蛋白，不表现出抗原性，只是在异种动物之间才表现出抗原性。同种型抗原决定基存在于间才表现出抗原性。同种型抗原决定基存在于Ig CIg C区，表现在全部区，表现在全部IgIg的类、亚类、型、亚型分子上。的类、亚类、型、亚型分子上。第33页，讲稿共62张，创作于星期一（二）同种异型决定簇二）同种异型决定簇 指免疫球蛋白在同一种动物不同指免疫球蛋白在同一种动物不同个体之间呈现出的抗原性，为个体之间呈现出的抗原性，为个体型标志个体型标志。同种异型抗原同种异型抗原决定基广泛存在于决定基广泛存在于Ig CHIg CH和和CLCL区。区。第34页，讲稿共62张，创作于星期一（三）独特型决定簇（三）独特型决定簇 由抗体分子的可变区呈现出的抗原性就称为免疫由抗体分子的可变区呈现出的抗原性就称为免疫球蛋白（抗体）的球蛋白（抗体）的独特型独特型(重点重点)，或称个体基因型或称个体基因型，可变区内的抗原决定簇称为可变区内的抗原决定簇称为独特型决定簇独特型决定簇，是，是每个免疫每个免疫球蛋白分子所特有的抗原特异性标志。球蛋白分子所特有的抗原特异性标志。其中单个的抗原其中单个的抗原决定簇，又称为决定簇，又称为独特位独特位。独特型在异种、同种异体乃至同一个体内均可刺激产独特型在异种、同种异体乃至同一个体内均可刺激产生相应的抗体，这种抗体称为生相应的抗体，这种抗体称为抗独特型抗体抗独特型抗体。第35页，讲稿共62张，创作于星期一第36页，讲稿共62张，创作于星期一第四节第四节 免疫球蛋白的生物学功能免疫球蛋白的生物学功能一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白V V区的功能：区的功能：主要是识别和结合特异性抗原主要是识别和结合特异性抗原第37页，讲稿共62张，创作于星期一（一）（一）激活补体激活补体 IgG1-3IgG1-3和和IgMIgM与与相相应应抗抗原原结结合合后后，可可因因构构型型改改变变而而使使其其CH2/CH3CH2/CH3功功能能区区内内的的补补体体结结合合点点暴暴露露，从从而而激激活活补补体体经典途径经典途径。IgG4IgG4、IgAIgA和和IgEIgE的的凝凝聚聚物物可激活补体可激活补体旁路途径旁路途径。二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白C C区的功能区的功能第38页，讲稿共62张，创作于星期一 1.1.调调理理作作用用(重重点点)IgGIgG与与细细菌菌等等颗颗粒粒性性抗抗原原结结合合后后，可可通通过过其其FcFc段段与与巨巨噬噬细细胞胞和和中中性性粒粒细细胞胞表表面面相相应应IgG IgG FcFc受受体体结结合合，促促进进吞吞噬噬细细胞胞对对细细菌菌等等颗颗粒粒抗抗原原的吞噬，此即抗体的调理吞噬作用。的吞噬，此即抗体的调理吞噬作用。（二）结合（二）结合FcFc受体受体 第39页，讲稿共62张，创作于星期一2.2.抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCCADCC）(重点重点).IgGIgG与肿瘤或病毒感染的靶细胞结合后，可通过其与肿瘤或病毒感染的靶细胞结合后，可通过其FcFc段与段与NKNK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞表面相应细胞、巨噬细胞和中性粒细胞表面相应IgG FcIgG Fc受体结受体结合，增强合，增强NKNK细胞和触发吞噬细胞对靶细胞的杀伤作用，此即细胞和触发吞噬细胞对靶细胞的杀伤作用，此即ADCCADCC效应。效应。第40页，讲稿共62张，创作于星期一3.3.介导介导I I型超敏反应型超敏反应 IgEIgE引起引起I I型超敏反应型超敏反应第41页，讲稿共62张，创作于星期一（三）穿过胎盘和粘膜（三）穿过胎盘和粘膜 IgGIgG、sIgAsIgA第42页，讲稿共62张，创作于星期一一、一、IgGIgG 人和动物中人和动物中含量最高含量最高的免疫球蛋白，的免疫球蛋白，占血清总占血清总IgIg的的75%75%80%80%，半衰期约，半衰期约20202323天；天；主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产 生，大部分存在于血液中（生，大部分存在于血液中（45%45%50%50%），），其余存在于组织液和淋巴液中；其余存在于组织液和淋巴液中；IgGIgG是是惟一可通过人和兔胎盘的抗体惟一可通过人和兔胎盘的抗体，在新生动物抗感染中，在新生动物抗感染中起重要作用。起重要作用。IgGIgG是动物自然感染和人工主动免疫后，机体所产生的主是动物自然感染和人工主动免疫后，机体所产生的主要抗体，要抗体，是动物机体抗感染免疫的主力是动物机体抗感染免疫的主力，大多数抗菌、抗病毒，大多数抗菌、抗病毒抗体和抗菌素都为抗体和抗菌素都为IgGIgG类，因而也是类，因而也是血清学诊断和疫苗免疫后监测血清学诊断和疫苗免疫后监测的主要抗体的主要抗体；IgGIgG还参与抗肿瘤免疫，同时也是引起还参与抗肿瘤免疫，同时也是引起型、型、型变态反应型变态反应及自身免疫病的抗体及自身免疫病的抗体。IgGIgG通过经典途径活化补体，具有调理吞噬、介导通过经典途径活化补体，具有调理吞噬、介导ADCCADCC、结合结合SPASPA和结合链球菌和结合链球菌G G蛋白的作用。蛋白的作用。第五节第五节第五节第五节 各类免疫球蛋白的主要特性与功能各类免疫球蛋白的主要特性与功能各类免疫球蛋白的主要特性与功能各类免疫球蛋白的主要特性与功能第43页，讲稿共62张，创作于星期一 动物机体初次免疫后动物机体初次免疫后产生最产生最 早早的免疫球蛋白；但含量仅占血清的免疫球蛋白；但含量仅占血清 IgIg的的10%10%左右，左右，主要由脾脏和淋巴结中的浆主要由脾脏和淋巴结中的浆 细胞产生，一般不能通过血管壁，细胞产生，一般不能通过血管壁，主要分布于血液中；主要分布于血液中；IgMIgM是是5 5个单体组成的五聚体个单体组成的五聚体 （pentamerpentamer）,又称为又称为巨球蛋白巨球蛋白（macroglobulinmacroglobulin）。）。IgMIgM在体内产最早，但持续时间短，不是抗感染免疫的主力，在体内产最早，但持续时间短，不是抗感染免疫的主力，但对但对早期抗感染免疫和早期血清学诊断早期抗感染免疫和早期血清学诊断十分重要，并且十分重要，并且IgMIgM有多有多个抗原结合部位，其单个的杀菌、溶菌、溶血、促进吞噬及凝集作个抗原结合部位，其单个的杀菌、溶菌、溶血、促进吞噬及凝集作用，均较用，均较IgGIgG高；高；IgMIgM同样具有抗肿瘤作用，也是同样具有抗肿瘤作用，也是型型型变态反应及自型变态反应及自身免疫病的抗体身免疫病的抗体。膜表面膜表面IgMIgM是是BCRBCR的主要成分。只表达的主要成分。只表达mIgMmIgM是未成熟是未成熟B B细胞细胞的标志，记忆的标志，记忆B B细胞表面的细胞表面的mIgMmIgM逐渐消失。逐渐消失。二、二、IgMIgM第44页，讲稿共62张，创作于星期一第45页，讲稿共62张，创作于星期一 IgAIgA以单体和二以单体和二 聚体两种分子形式存在聚体两种分子形式存在,单体单体存在于血清中，称存在于血清中，称 为血清型为血清型IgA,IgA,占血清占血清IgIg 的的10%10%20%20%，二聚体为分泌型二聚体为分泌型IgA,IgA,是由呼吸道、消化道、泌尿是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等部位粘膜固有层中的浆细胞所产生。主要存在于呼吸生殖道等部位粘膜固有层中的浆细胞所产生。主要存在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、泪液等分泌物道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、泪液等分泌物中。中。分泌型分泌型IgAIgA是是参与粘膜局部免疫参与粘膜局部免疫的主要抗体，在传染病的主要抗体，在传染病预防接种中，经滴鼻、点眼、饮水及喷雾途径免疫，均可产生预防接种中，经滴鼻、点眼、饮水及喷雾途径免疫，均可产生分泌型分泌型IgAIgA，从而建立相应的粘膜免疫力。，从而建立相应的粘膜免疫力。婴幼儿和幼畜禽婴幼儿和幼畜禽从母乳中可获得从母乳中可获得sIgA sIgA 产生产生自然被动免疫自然被动免疫，新生儿和幼畜禽易新生儿和幼畜禽易患呼吸道、胃肠道感染可能与患呼吸道、胃肠道感染可能与IgAIgA合成不足有关。合成不足有关。三、三、IgA第46页，讲稿共62张，创作于星期一 IgEIgE产生部位与分泌型产生部位与分泌型IgAIgA相似，是血清中含量最低的相似，是血清中含量最低的IgIg。IgEIgE的重链多一个功能区的重链多一个功能区CH4CH4，此区是细胞结合的部位，因而，此区是细胞结合的部位，因而它是一种亲细胞性抗体。它是一种亲细胞性抗体。结合在肥大细胞和嗜碱性细胞上的结合在肥大细胞和嗜碱性细胞上的IgEIgE与抗原结合后，能引与抗原结合后，能引起这些细胞脱颗粒，释放组织氨等活性介质，从而引起起这些细胞脱颗粒，释放组织氨等活性介质，从而引起I I型过型过敏反应敏反应。IgEIgE在抗寄生虫感染在抗寄生虫感染中具有重要作用，研究表明，蠕虫、血吸虫和中具有重要作用，研究表明，蠕虫、血吸虫和旋毛虫等寄生虫病以及某些真菌感染后，均可诱导机体产生大量的旋毛虫等寄生虫病以及某些真菌感染后，均可诱导机体产生大量的IgEIgE抗体。抗体。五、五、IgDIgD IgD IgD在个体发育的任何时候产生，在血清中浓度极低，平均约在个体发育的任何时候产生，在血清中浓度极低，平均约0.03mg/ml0.03mg/ml，且极不稳定，容易降解，半衰期仅，且极不稳定，容易降解，半衰期仅3 3天；天；主要作为成熟主要作为成熟B B细胞膜上的抗原特异性受体，是细胞膜上的抗原特异性受体，是B B细胞分化发育细胞分化发育成熟的标志成熟的标志，成熟，成熟B B细胞活化后，或者变成记忆细胞活化后，或者变成记忆B B细胞时，细胞时，mIgDmIgD逐渐逐渐消失。消失。对防止免疫耐受有一定作用对防止免疫耐受有一定作用四、四、IgEIgE第47页，讲稿共62张，创作于星期一各类免疫球蛋白的生物学活性各类免疫球蛋白的生物学活性 免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgGIgAIgAIgMIgMIgDIgDIgEIgE重链名称重链名称重链功能区数目重链功能区数目4 44 45 54 45 5主要存在形式主要存在形式单体单体单体、双体单体、双体五聚体五聚体单体单体单体单体分子量分子量(KD)(KD)146-170146-170160160，400400970970175175188188碳水化合物（碳水化合物（%）4 41010121218181212血清浓度血清浓度(mg/dl)(mg/dl)1150115030030021021050501501500.3-40.3-40.0020.002血清总血清总Ig(%)Ig(%)757510105-105-10110.0010.001外分泌液外分泌液-+-经典途径活化补体经典途径活化补体+-+-代替途径活化补体代替途径活化补体+?+半衰期（天）半衰期（天）20-2320-235.85.85.15.12.82.82.52.5合成部位合成部位脾、淋巴结浆细脾、淋巴结浆细胞胞粘膜相关淋巴样粘膜相关淋巴样组织组织脾、淋巴结浆细脾、淋巴结浆细胞胞扁桃体、脾浆细扁桃体、脾浆细胞胞粘膜固有层浆细粘膜固有层浆细胞胞通过胎盘通过胎盘+-免疫作用免疫作用抗菌、抗病毒、抗菌、抗病毒、抗毒素、自身抗抗毒素、自身抗体体粘膜局部免疫作粘膜局部免疫作用，抗菌、抗病用，抗菌、抗病毒，免疫排除功毒，免疫排除功能能早期防御作用，早期防御作用，溶菌，溶血，溶菌，溶血，SmIgMSmIgM，天然血，天然血型抗体，类风湿型抗体，类风湿因子因子确切功能目前不确切功能目前不清楚清楚抗寄生虫感染，抗寄生虫感染，I I型超敏反应型超敏反应第48页，讲稿共62张，创作于星期一 一、多克隆抗体（第一代抗体）一、多克隆抗体（第一代抗体）（一）概念（一）概念(重点重点).).采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途径采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途径注入动物体内后，经数次免疫后采取动物血液，分注入动物体内后，经数次免疫后采取动物血液，分离出血清，由此获得的抗血清即为离出血清，由此获得的抗血清即为多克隆抗体多克隆抗体（polyclonal antibody,PcAbpolyclonal antibody,PcAb），该抗血清是一种多克），该抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性，即针对同一抗原决隆的混合抗体，具有高度的异质性，即针对同一抗原决定簇的抗体仍是由不同定簇的抗体仍是由不同B B细胞克隆产生的不同质的抗体细胞克隆产生的不同质的抗体所组成。所组成。（二）基本制备过程（二）基本制备过程 抗原制备抗原制备动物免疫动物免疫检测血清抗体效价检测血清抗体效价血清分离与保存。血清分离与保存。第六节第六节 抗体的人工制备抗体的人工制备第49页，讲稿共62张，创作于星期一第50页，讲稿共62张，创作于星期一二、单克隆抗体（第二代抗体）二、单克隆抗体（第二代抗体）(重点重点).).（一）概念（一）概念 由一个由一个B B细胞分化增殖的子代细胞（浆细细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）克隆、产生的针对单一抗原决定簇的抗体，或者说胞）克隆、产生的针对单一抗原决定簇的抗体，或者说是由一个识别一种抗原表位的是由一个识别一种抗原表位的B B细胞克隆产生的同源抗体，细胞克隆产生的同源抗体，称为单克隆抗体称为单克隆抗体（McAbMcAb）。）。第51页，讲稿共62张，创作于星期一（二）优点（二）优点1.1.有高度的有高度的单一性、均一性单一性、均一性；2.2.纯度高纯度高，制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体；，制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体；3.3.效价高效价高；4.4.产量高产量高，且可连续生产特异性强；，且可连续生产特异性强；5.5.特异性强特异性强，少或无血清交叉反应。，少或无血清交叉反应。第52页，讲稿共62张，创作于星期一（三）制备单克隆抗体的基本原理（三）制备单克隆抗体的基本原理（1 1）DNADNA合成的合成的2 2条途径条途径 主要途径：可被主要途径：可被氨基喋呤氨基喋呤(A)(A)所阻断所阻断 旁路途径：利用旁路途径：利用次黄嘌呤次黄嘌呤(H)(H)和和胸腺嘧啶核苷胸腺嘧啶核苷(T)(T)l 次黄嘌呤次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)(HGPRT)l 胸腺嘧啶核苷激酶胸腺嘧啶核苷激酶(TK)(TK)。所需要的酶所需要的酶第53页，讲稿共62张，创作于星期一（2 2）所用的细胞）所用的细胞第54页，讲稿共62张，创作于星期一第55页，讲稿共62张，创作于星期一（3 3）所用培养基）所用培养基第56页，讲稿共62张，创作于星期一（三）基本制备过程（三）基本制备过程制备抗原制备抗原 免疫动物免疫动物 免疫脾细胞和骨髓瘤细胞免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备的制备 细胞融合细胞融合 杂交瘤细胞的选择培养杂交瘤细胞的选择培养 杂交瘤细胞的的筛选杂交瘤细胞的的筛选 杂交瘤细胞的克隆化杂交瘤细胞的克隆化 单单克隆抗体的检定克隆抗体的检定 杂交瘤细胞系的建立杂交瘤细胞系的建立 单克隆单克隆抗体的大量制备（动物体内诱生法和体外培养法）抗体的大量制备（动物体内诱生法和体外培养法）第57页，讲稿共62张，创作于星期一第58页，讲稿共62张，创作于星期一单克隆抗体的大量生产单克隆抗体的大量生产第59页，讲稿共62张，创作于星期一 单克隆和多克隆抗体的比较和用途单克隆和多克隆抗体的比较和用途1 1、用于免疫学检测，辅助临床诊、用于免疫学检测，辅助临床诊断，用于各种病原体以及肿瘤断，用于各种病原体以及肿瘤的诊断的诊断2 2、McAbMcAb用于亲和层析，分离用于亲和层析，分离微量可溶性抗原微量可溶性抗原特异性特异性敏感性敏感性均一性均一性McAbPcAb低低差差无无高高强强有有3 3、标记的、标记的McAbMcAb用于基础研究，用于基础研究，了解细胞分化等了解细胞分化等4 4、制备生物导弹用于肿瘤、移植、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。等的临床治疗。特异性特异性敏感性敏感性均一性均一性McAbPcAb低低差差无无高高强强有有3 3、标记的、标记的McAbMcAb用于基础研究，用于基础研究，了解细胞分化等了解细胞分化等4 4、制备生物导弹用于肿瘤、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。移植等的临床治疗。第60页，讲稿共62张，创作于星期一三、基因工程抗体（第三、基因工程抗体（第3 3代抗体）代抗体）自自19751975年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来，单年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来，单克隆抗体在医学中被广泛地应用于疾病的诊断及治克隆抗体在医学中被广泛地应用于疾病的诊断及治疗。疗。但目前绝大数单克隆抗体是鼠源的，临床重复但目前绝大数单克隆抗体是鼠源的，临床重复给药时体内产生抗鼠抗体，使临床疗效减弱或消失。给药时体内产生抗鼠抗体，使临床疗效减弱或消失。因此，医学临床上最理想的单克隆抗体应是人源因此，医学临床上最理想的单克隆抗体应是人源的的,但人但人-人杂交瘤技术目前尚未突破。人杂交瘤技术目前尚未突破。第61页，讲稿共62张，创作于星期一感感谢谢大大家家观观看看2023/4/8第62页，讲稿共62张，创作于星期一