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会计学1临床医学临床常用免疫学检查年制临床医学临床常用免疫学检查年制22023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2 2临床常用免疫学检查pp免疫功能检查免疫功能检查免疫功能检查免疫功能检查(immunologicalfunction)(immunologicalfunction)血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测 血清补体检测血清补体检测血清补体检测血清补体检测细胞免疫检测细胞免疫检测细胞免疫检测细胞免疫检测(immunoglobulin,(immunoglobulin,complements,cellimmune)complements,cellimmune),细胞因子。细胞因子。细胞因子。细胞因子。qq肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测(tumormarkers)(tumormarkers)蛋白质类肿瘤标志物蛋白质类肿瘤标志物蛋白质类肿瘤标志物蛋白质类肿瘤标志物 糖脂类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物(proteins,(proteins,glycolipid,enzymesmarkers)glycolipid,enzymesmarkers)pp自身免疫检测自身免疫检测自身免疫检测自身免疫检测(auto-antibodies)(auto-antibodies)类风湿因子测定类风湿因子测定类风湿因子测定类风湿因子测定抗核抗体检测抗核抗体检测抗核抗体检测抗核抗体检测组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测组织和细胞抗体检测(RFANAotherantibodies)(RFANAotherantibodies)pp感染免疫检测感染免疫检测感染免疫检测感染免疫检测(infectiousimmunology)(infectiousimmunology)细菌感染免疫检测细菌感染免疫检测细菌感染免疫检测细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测病毒感染免疫检测病毒感染免疫检测病毒感染免疫检测 其它其它其它其它(寄生虫感染、性病等）寄生虫感染、性病等）寄生虫感染、性病等）寄生虫感染、性病等）(bacterial,virusandsoon)(bacterial,virusandsoon)pp其它其它其它其它 循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测第1页/共142页32023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查3 3一、免疫功能检查免疫功能检查(immunological function(immunological function(immunological function(immunological function)l l血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测(ImmunoglobulinImmunoglobulintesttest)l l血清补体检测血清补体检测 (ComplementsComplements)l l细胞免疫检测细胞免疫检测 (Cell immuneCell immune)第2页/共142页42023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查4 4血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测n n概念：概念：概念：概念：具有具有具有具有抗体活性抗体活性抗体活性抗体活性和和和和抗体样结构抗体样结构抗体样结构抗体样结构的球蛋白，由的球蛋白，由的球蛋白，由的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。些细胞膜上。些细胞膜上。些细胞膜上。n n分类分类分类分类:根据其根据其根据其根据其功能功能功能功能和和和和理化性质理化性质理化性质理化性质不同，将免疫球蛋不同，将免疫球蛋不同，将免疫球蛋不同，将免疫球蛋白分为五类：白分为五类：白分为五类：白分为五类：I IgGgG、IgAIgA、IgMIgM、IgD IgD、IgEIgE第3页/共142页52023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查5 5u IgG最多、占70%80%u IgA血清型和分泌型两种u IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子，最早；最先。u IgD功能尚不完全清楚u IgE与变态反应有关(0.002%)血清免疫球蛋白检测第4页/共142页6检测方法n n酶联免疫法（酶联免疫法（酶联免疫法（酶联免疫法（ELISA)ELISA)n n放射免疫（放射免疫（放射免疫（放射免疫（RIA)RIA)n n荧光标记免疫荧光标记免疫荧光标记免疫荧光标记免疫(IFA)(IFA)n n化学发光法（化学发光法（化学发光法（化学发光法（CLIA)CLIA)n n免疫透射比浊、免疫散射比浊免疫透射比浊、免疫散射比浊免疫透射比浊、免疫散射比浊免疫透射比浊、免疫散射比浊第5页/共142页7血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白GG（IgGIgG）检测）检测n nIgG人体内含量最多，占Ig的70-80n n再次免疫应答的主要抗体n n对细菌、病毒和寄生虫都有抗体活性n n唯一可通过胎盘的Ig第6页/共142页8检测方法检测方法：免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法参考值：7.016.6 g/L血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白GG（IgGIgG）检测）检测第7页/共142页9临临 床床 意意 义义IgG IgG 增高增高 （病理性）（病理性）n nIgGIgG增高是再次免疫应答增高是再次免疫应答的标志。见于各种慢性感的标志。见于各种慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染以及肺结核、链球菌感染以及自身免疫性疾病，如自身免疫性疾病，如SLESLE，类风湿关节炎等。，类风湿关节炎等。n n单克隆性增高单克隆性增高 仅见一种仅见一种IgIg增高，主要见于免疫增增高，主要见于免疫增殖性疾病，如殖性疾病，如IgGIgG分泌型分泌型多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤第8页/共142页10IgG 增高（生理性）n n胎儿出生前可从母体获得胎儿出生前可从母体获得IgGIgG，孕期，孕期22-2822-28周与母体血浓度相等，出周与母体血浓度相等，出生后逐渐减少，生后逐渐减少，3 3、4 4月胎儿血月胎儿血IgGIgG降至最低，随后胎儿自身逐渐开降至最低，随后胎儿自身逐渐开始合成始合成IgGIgG，血清，血清IgGIgG逐渐增多，到逐渐增多，到1616岁前达到成人水平。岁前达到成人水平。IgG 减低见于各种先天性和获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、肾病综合症、和免疫抑制剂患者以及重症传染病等。临临 床床 意意 义义第9页/共142页11免疫球蛋白免疫球蛋白A(IgA)检测检测n n两型：血清型IgA，分泌型IgA（SIgA）。血清型IgA以单体形式存在,占10%-15%.分泌型IgA（S IgA）由J链连接的二聚体和分泌片组成。第10页/共142页12n n血清血清IgA 0.7IgA 0.73.5 g/L3.5 g/L。n nSIgA SIgA 唾液唾液0.3 g/L0.3 g/L，泪液，泪液3080 g/L3080 g/L，初乳，初乳5.06 g/L5.06 g/L，粪便，粪便1.3 g/L1.3 g/L参考值：检测方法：免疫比浊法免疫比浊法免疫球蛋白免疫球蛋白A(IgA)检测检测第11页/共142页13临临 床床 意意 义义n nIgA增高：见于IgA型MM，SLE,类风湿性关节炎，肝硬化，湿疹及皮肌炎等。在中毒性肝损伤时，IgA浓度与炎症程度相关。IgA降低：见于反复呼吸道感染，非IgA型MM，原发和继发性免疫缺陷病和自身免疫性疾病等。n n生理性变化：儿童的IgA水平比成人低，到16岁前达到成人水平。第12页/共142页14免疫球蛋白免疫球蛋白M(IgM)检测检测n nIgM是五聚体，分子量最大的Ign n不能通过血管壁，不能通过胎盘n n个体发育过程中最早合成的抗体，脐带血IgM增高提示胎儿宫内感染n n体液免疫应答中IgM是最早产生的抗体第13页/共142页15第14页/共142页16检测方法：免疫比浊法免疫比浊法参考值：0.5 2.6 g/L 占占5%-10%免疫球蛋白免疫球蛋白M(IgM)检测检测第15页/共142页17临临 床床 意意 义义n nIgMIgM增高增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类风湿关节炎、关节炎、SLESLE等，由于等，由于IgMIgM是初次免疫应答中的是初次免疫应答中的Ig,Ig,因此因此单纯单纯IgMIgM增加常提示为病原体引起的原发性增加常提示为病原体引起的原发性感染。感染。n n原发性巨球蛋白血症时，原发性巨球蛋白血症时，IgMIgM呈单克隆性明显增呈单克隆性明显增高高n nIgMIgM降低降低 见于见于IgGIgG型重链病，型重链病，IgAIgA型型MMMM，先天性，先天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统肿瘤和免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统肿瘤和肾病综合症等。肾病综合症等。第16页/共142页18免疫球蛋白E(IgE)检测n nIgE是血清中最少的一种Ig，占血清总Ig的0.002%。n n是一种亲细胞抗体，介导型变态反应，与变态反应、寄生虫感染和皮肤过敏等有关。第17页/共142页19检测方法检测方法：ELISA ELISA 法法法法参考值：0.1 0.9 mg/L免疫球蛋白E(IgE)检测第18页/共142页20临临 床床 意意 义义n nIgE增高 见于IgE型MM、肝脏病、结节病、类风湿性关节炎，以及各种过敏性疾病和寄生虫感染等。n nIgE降低 见于先天性和获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期应用免疫抑制剂和共济失调性毛细血管扩展症等。第19页/共142页212023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2121M蛋白（Monoclonalprotein）概念：概念：单克隆单克隆B淋巴细胞异常增殖产生淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性速度，但不具有抗体活性。第20页/共142页22【参考值】蛋白电泳法、免疫比浊法或免疫电泳法：正常人为阴性。图图1 14 4号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱号为多发性骨髓瘤病人的血清蛋白电泳图谱1 13 3 1 12 23 34 45 56 67 78 89 91010 11111212M蛋白（Monoclonalprotein）第21页/共142页23临床意义临床意义检测到检测到MM蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于：蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖病。见于：多发性骨髓瘤：以多发性骨髓瘤：以IgGIgG型最常见，其次为型最常见，其次为IgAIgA型，型，IgDIgD和和IgEIgE罕罕见，也有见，也有IgMIgM型的报道。型的报道。巨球蛋白血症(macroglobulinemia)：该病血液中存在大量单克隆IgM。重链病：出现Ig重链轻链病：出现单克隆游离轻链。半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆Ig片段。恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。良性M蛋白血症：第22页/共142页242023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2424血清补体（血清补体（complement,C）p组成：补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途径的9种成分c1（c1q、c1r、c1s）c9,旁路途径的3种成分及其衍生物B、D 、P、H、I等因子组成。p作用：参与灭活病原体的免疫反应，也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤第23页/共142页25补体的三条激活途径补体的三条激活途径第24页/共142页26总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测(CH50)(CH50)n n原理:抗体致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合物)可激活血清中的补体C1,从而引起补体经典途径的连锁反应,导致绵羊红细胞膜上形成多分子的聚合物，绵羊红细胞溶解。在分光光度计上542nm读取吸光度。溶解程度与样品中补体量正相关。n n主要反应补体经典途径的综合水平。第25页/共142页282023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2828正常值：正常值：正常值：正常值：试试试试管法管法管法管法5010050100kUkU/L/L临床意义临床意义临床意义临床意义：减低减低减低减低1.1.先天性先天性先天性先天性2.2.合成减少合成减少合成减少合成减少 肝炎肝炎 ,营养不良营养不良3.3.消耗或者丢失过多消耗或者丢失过多消耗或者丢失过多消耗或者丢失过多,自身免疫性疾病，如自身免疫性疾病，如自身免疫性疾病，如自身免疫性疾病，如SLESLE、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎。增高增高增高增高急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测(CH50)第27页/共142页292023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2929pp补体补体补体补体C3C3检测检测检测检测 C3C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。途径被激活的关键物质。正常值：正常值：0.81.0.81.g/L g/L pp补体补体补体补体C4C4检测检测检测检测 C4C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用 。正常值：正常值：0.0.20200.0.6060g/Lg/L其他补体检测其他补体检测第28页/共142页302023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查3030pp参见参见CH50减低和增高的临床意减低和增高的临床意义义ppC3增高在急性炎性反应更敏感增高在急性炎性反应更敏感ppC4对判断免疫复合物形成时补对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义体消耗性减低更有意义临床意义临床意义第29页/共142页312023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查3131细胞免疫检测细胞免疫检测(Cell immune)(Cell immune)T细胞免疫检测B细胞免疫检测自然杀伤细胞检测(NK cell)细胞因子检测(cytokine)（自学了解）第30页/共142页32T T细胞分化抗原细胞分化抗原细胞分化抗原细胞分化抗原n nT T细胞表面特异的表面抗原，细胞表面特异的表面抗原，WHOWHO统称其为白细胞分化抗原统称其为白细胞分化抗原（cluster differentiationcluster differentiation，CD)CD)n nCD3CD3+代表总代表总T T细胞、细胞、CD3CD3+/CD4/CD4+T T辅助细胞、辅助细胞、CD3CD3+/CD8/CD8+T T抑制细胞。抑制细胞。n n应用这些细胞的单克隆抗体与应用这些细胞的单克隆抗体与T T细胞表面抗原结合后，再与细胞表面抗原结合后，再与荧光标记二抗荧光标记二抗(兔或羊抗鼠兔或羊抗鼠IgG)IgG)反应，在流式细胞仪中计数反应，在流式细胞仪中计数CDCD阳性细胞的百分率。阳性细胞的百分率。第31页/共142页33参考值参考值n n流式细胞术：流式细胞术：CD3CD3+61 61-85-85 CD3 CD3+CD4CD4+(Th)28-58(Th)28-58 CD3 CD3+CD8CD8+(Ts)19-48(Ts)19-48 Th/Ts 0.9-2.0 Th/Ts 0.9-2.0第32页/共142页342023/3/292023/3/29临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查3434CDCDCDCD4 4 4 4降低降低降低降低病毒感染（病毒感染（病毒感染（病毒感染（CMV,HIV,HBV)CMV,HIV,HBV)CDCDCDCD4 4 4 4/CD/CD/CD/CD8 8 8 8增高增高增高增高自身免疫性疾病、变态反应、排异反应自身免疫性疾病、变态反应、排异反应自身免疫性疾病、变态反应、排异反应自身免疫性疾病、变态反应、排异反应 CDCDCDCD4 4 4 4/CD/CD/CD/CD8 8 8 8减低减低减低减低见于艾滋病见于艾滋病见于艾滋病见于艾滋病(HIV(HIV(HIV(HIV,常常常常0.5)0.5)0.5)0.5)、恶性肿瘤、恶性肿瘤、恶性肿瘤、恶性肿瘤（进行期或复发期）进行期或复发期）进行期或复发期）进行期或复发期）、传单及乙肝急性期。、传单及乙肝急性期。、传单及乙肝急性期。、传单及乙肝急性期。CDCDCDCD3 3 3 3 CD CD CD CD4 4 4 4 CD CD CD CD8 8 8 8均增高均增高均增高均增高T T T T细胞型淋巴细胞恶性疾病细胞型淋巴细胞恶性疾病细胞型淋巴细胞恶性疾病细胞型淋巴细胞恶性疾病 (T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)临床意义临床意义第33页/共142页35应用应用应用应用CDCDCDCD19191919、CDCDCDCD20202020、CDCDCDCD21 21 21 21、CDCDCDCD22222222 和和和和CDCDCDCD40404040等单克隆抗体等单克隆抗体等单克隆抗体等单克隆抗体标记单个核细胞标记单个核细胞标记单个核细胞标记单个核细胞BBBB细胞，通过免疫荧光或流式细细胞，通过免疫荧光或流式细细胞，通过免疫荧光或流式细细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。胞术进行检测。胞术进行检测。胞术进行检测。CDCDCDCD19191919 为全部为全部为全部为全部B B B B细胞共有的表面标志，细胞共有的表面标志，细胞共有的表面标志，细胞共有的表面标志，B B B B细胞活化后不细胞活化后不细胞活化后不细胞活化后不消失消失消失消失，是最重要的，是最重要的，是最重要的，是最重要的B B B B细胞标记分子。细胞标记分子。细胞标记分子。细胞标记分子。CDCDCDCD22 22 22 22 为成熟为成熟为成熟为成熟B B B B细胞的表面标志。细胞的表面标志。细胞的表面标志。细胞的表面标志。细胞分化抗原细胞分化抗原第34页/共142页36检测方法：检测方法：流式细胞术流式细胞术参考值：参考值：CDCD19 19 11.743.73%3.73%细胞分化抗原细胞分化抗原第35页/共142页37升高升高BB细胞型急性淋巴细胞性细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、白血病、慢性淋巴细胞白血病、BurkittBurkitt淋巴瘤等淋巴瘤等 减低减低无丙种球蛋白血症、长期无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后免疫抑制剂应用后临床意义临床意义第36页/共142页38自然杀伤细胞自然杀伤细胞(NK cell)检测检测NK NK 细胞是一种多功能细胞群，细胞是一种多功能细胞群，介导天然免疫，不依赖抗体和补体，介导天然免疫，不依赖抗体和补体，能直接杀死靶细胞能直接杀死靶细胞，在抗肿瘤免疫监视作用中起第一道防线。其，在抗肿瘤免疫监视作用中起第一道防线。其分化抗原主要是表达分化抗原主要是表达CD3CD3-/CD(16+56)/CD(16+56)+.其作用：其作用：1.1.介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞，抗感染抗感染和免疫调节作用；是在抗肿瘤的免疫监视作用中处于第一道防线。和免疫调节作用；是在抗肿瘤的免疫监视作用中处于第一道防线。2.2.自然杀伤细胞自然杀伤细胞（NKNK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一标之一第37页/共142页39检测方法：检测方法：检测方法：检测方法：流式细胞术流式细胞术参考值：参考值：CDCD-/CD(16+56)/CD(16+56)+：13.8%5.95.9%自然杀伤细胞(NK cell)检测第38页/共142页40临床意义临床意义自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一活性降低活性降低活性降低活性降低：见于血液系统肿瘤、实体肿瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某：见于血液系统肿瘤、实体肿瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染患者；些病毒感染患者；活性升高活性升高活性升高活性升高：宿主抗移植物反应者。：宿主抗移植物反应者。第39页/共142页41n n细胞因子（细胞因子（Cytokine,CKCytokine,CK）是由免疫原、丝裂原或其是由免疫原、丝裂原或其他因子刺激细胞所产生的低分子量可溶性蛋白质，他因子刺激细胞所产生的低分子量可溶性蛋白质，为生物信息分子，具有调节固有免疫应答和适应性为生物信息分子，具有调节固有免疫应答和适应性免疫应答，促进造血以及刺激细胞活化、增殖分化免疫应答，促进造血以及刺激细胞活化、增殖分化等功能。等功能。必须与相应受体结合发挥作用。细胞因子的产生细胞细胞因子的产生细胞抗原等刺激抗原等刺激产生生物学效应产生生物学效应靶细胞靶细胞细胞因子细胞因子细胞因子细胞因子第40页/共142页42n n多为小分子（830kD）多肽。n n在较低浓度下即具有生物学活性。（高效性）n n通过结合细胞表面高亲和力受体发挥生物学效应。n n半衰期很短。n n以自分泌、旁分泌或内分泌形式发挥作用n n具有多效性、重叠性、协同性和拮抗性细胞因子的共同特点细胞因子的共同特点第41页/共142页43n n细胞因子可以旁分泌、自分泌或内分泌的方式发挥作用,以自分泌和旁分泌为主。细胞因子的作用方式细胞因子的作用方式内分泌内分泌endocrine血液循环血液循环远距离作用远距离作用(IL-1、TNF)自分泌自分泌autocrine作用于分泌细胞自身作用于分泌细胞自身(IL-2)T作用于比邻细胞作用于比邻细胞(IL-12)旁分泌旁分泌paracrineDCT第42页/共142页44（1 1）多效性）多效性:一种CK可作用多种靶细胞,产生多种生物学效应（2 2）重叠性）重叠性:2种或2种以上的CKs可介导相似的功能（3 3）拮抗性）拮抗性:一种CK可抑制另一种CK的功能（4 4）协同性）协同性:一种CK可强化 另一种CK的功能IL-6IL-4IL-13B增殖增殖造血干细胞造血干细胞造血干细胞造血干细胞肥大细胞肥大细胞IL-4BIL-3IL-11IL-4(-)(+)IFN-ThTh1Th2IL-4(+)(-)IFN-细胞因子的发挥生物效应特点细胞因子的发挥生物效应特点第43页/共142页45细胞因子的分类细胞因子的分类细胞因子的分类细胞因子的分类n n白细胞介素白细胞介素 interleukininterleukin，ILILn n干扰素干扰素interferoninterferon，IFNIFNn n肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子Tumor necrosis factorTumor necrosis factor，TNFTNFn n集落刺激因子集落刺激因子 colony stimulating factorcolony stimulating factor，CSFCSFn n趋化性细胞因子趋化性细胞因子 chemokinechemokinen n生长因子生长因子growth factor,GF growth factor,GF 根据结构和功能，细胞因子分为六大类根据结构和功能，细胞因子分为六大类第44页/共142页46几种主要的白细胞介素几种主要的白细胞介素n nIL-1:IL-1:发热发热,激活激活T T细胞、巨噬细胞。细胞、巨噬细胞。IL-6:IL-6:发热发热,促进促进T T、B B细胞增殖分化细胞增殖分化 。n nIL-2IL-2:主要由活化主要由活化ThTh细胞产生，细胞产生，促进促进T T细胞分化发育细胞分化发育。n nIL-8:IL-8:主要主要由由单核单核-巨噬细胞生成巨噬细胞生成，激活中性粒细胞激活中性粒细胞。n nIL-4IL-4:主要由活化的主要由活化的T T细胞和肥大细胞产生，细胞和肥大细胞产生，促进促进B B细胞生细胞生长长；抑制；抑制Th1Th1细胞生长，促进体液免疫应答，促进细胞生长，促进体液免疫应答，促进IgEIgE的合成。的合成。n nIL-10:IL-10:由活化的由活化的T T细胞和巨噬细胞产生，细胞和巨噬细胞产生，抑制巨噬细胞抑制巨噬细胞的活性。的活性。n nIL-12:IL-12:由由B B细胞、单核细胞、单核-巨噬细胞生成，巨噬细胞生成，激活激活NKNK细胞细胞，促，促进进Th1Th1细胞的生长。细胞的生长。n nIL-15IL-15:由由单核单核-巨噬细胞生成，巨噬细胞生成，激活激活T T细胞和细胞和NKNK细胞细胞。第45页/共142页47干扰素干扰素干扰素干扰素(interferon IFN)(interferon IFN)(interferon IFN)(interferon IFN)n n最早发现的最早发现的CK,CK,具有干扰病毒感染和复制的能具有干扰病毒感染和复制的能力。力。n n根据其来源和结构，可将其分为两型：根据其来源和结构，可将其分为两型：n n型：型：型：型：IFN-IFN-、-主要由白细主要由白细主要由白细主要由白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组胞、成纤维细胞、病毒感染的组胞、成纤维细胞、病毒感染的组胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等产生织细胞等产生织细胞等产生织细胞等产生n n型：型：型：型：IFN-IFN-主要由主要由主要由主要由T T、NKNK细胞产生细胞产生细胞产生细胞产生第46页/共142页48主要功能主要功能主要功能主要功能IFN IFN IFN CD118CD118CD119淋巴细胞，单核巨噬细胞淋巴细胞，单核巨噬细胞成纤维细胞成纤维细胞活化活化T细胞，细胞，NK细胞细胞抗病毒作用强抗病毒作用强，促进，促进MHCI和和II类子表达类子表达抗病毒作用强抗病毒作用强，抗细胞，抗细胞增殖，同上增殖，同上免疫调节能力强，免疫调节能力强，如激如激活巨噬细胞，抑制活巨噬细胞，抑制Th2细胞，抗病毒作用弱细胞，抗病毒作用弱名称名称受体受体主要产生细胞主要产生细胞主要功能主要功能病毒性疾病病毒性疾病肿瘤肿瘤第47页/共142页49n n可以直接诱导肿瘤细胞凋亡的细胞因可以直接诱导肿瘤细胞凋亡的细胞因子。子。n n分类：分类：n nTNFTNF ：活化的单核巨噬细胞：活化的单核巨噬细胞：活化的单核巨噬细胞：活化的单核巨噬细胞产生产生产生产生 亦称恶液质素亦称恶液质素亦称恶液质素亦称恶液质素n nTNFTNF ：活化的：活化的：活化的：活化的T T细胞产生，亦细胞产生，亦细胞产生，亦细胞产生，亦称淋巴毒素。称淋巴毒素。称淋巴毒素。称淋巴毒素。n n两种两种两种两种TNFTNF的分子量为的分子量为的分子量为的分子量为51kD51kD，结结结结构为同源三聚体，具有相同的结构为同源三聚体，具有相同的结构为同源三聚体，具有相同的结构为同源三聚体，具有相同的结合受体和生物学活性合受体和生物学活性合受体和生物学活性合受体和生物学活性肿瘤坏死因子超家族肿瘤坏死因子超家族肿瘤坏死因子超家族肿瘤坏死因子超家族 （tumor necrosis factor,TNFtumor necrosis factor,TNF）第48页/共142页50集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子 -（colony stimulating factorcolony stimulating factor，CSFCSF）n n指能刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段指能刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血干细胞进行增殖分化，并在半固体培养的造血干细胞进行增殖分化，并在半固体培养基中形成相应集落的细胞因子。基中形成相应集落的细胞因子。n n按其作用范围分为：粒细胞按其作用范围分为：粒细胞CSFCSF（G-CSFG-CSF），），巨噬细胞巨噬细胞CSFCSF（M-CSFM-CSF），粒细胞和巨噬细胞），粒细胞和巨噬细胞CSFCSF（GM-CSFGM-CSF）和多集落刺激因子（）和多集落刺激因子（multi-multi-CSFCSF，IL-3IL-3）等。）等。n n广义上，凡是刺激造血细胞的细胞因子都可以广义上，凡是刺激造血细胞的细胞因子都可以统称为统称为CSFCSF，如，如EPOEPO，SCFSCF、TPOTPO、IL-11IL-11。治疗肾性贫血治疗肾性贫血第49页/共142页51趋化性细胞因子（趋化性细胞因子（趋化性细胞因子（趋化性细胞因子（chemokinechemokine）n n概念：能使细胞发生概念：能使细胞发生趋化运动趋化运动的小分子细胞的小分子细胞因子。趋化运动是指因子。趋化运动是指细胞向高浓度刺激物方细胞向高浓度刺激物方向的定向运动向的定向运动。n n功能：招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、功能：招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入感染发生的部位。淋巴细胞等进入感染发生的部位。n n特点：特点：结构上有较大的同源性结构上有较大的同源性 氨基端多含有氨基端多含有1 1个或个或2 2个半胱氨酸个半胱氨酸第50页/共142页52生长因子生长因子生长因子生长因子（growth factor,GF growth factor,GF）n n对细胞生长起调节作用的细胞因子。对细胞生长起调节作用的细胞因子。n n包括包括TGF-TGF-、EGFEGF、VEGFVEGF、FGFFGF、NGFNGF等。等。n nTGF-TGF-可抑制多种免疫细胞的增殖、分化及效可抑制多种免疫细胞的增殖、分化及效应应,但对肿瘤细胞的生长无抑制作用。但对肿瘤细胞的生长无抑制作用。第51页/共142页53细胞因子检测的特点免疫原性较弱样品含量低样品具有时效性生物效应特异性差第52页/共142页54细胞因子检测的方法免疫学检测方法抗原性检测细胞生物学检测方法生物活性检测分子生物学检测方法基因表达检测第53页/共142页55二、肿瘤标志物检测 肿瘤标志物（肿瘤标志物（tumor marker、TM）：）：在肿瘤发生和发展过程中，在肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤由肿瘤细胞所产生或机体在肿瘤细胞刺激下产生的细胞刺激下产生的，与肿瘤存在，与肿瘤存在相关的物质，存在于血液、细胞、相关的物质，存在于血液、细胞、组织液、体液中组织液、体液中。第54页/共142页56肿瘤的发展与诊断肿瘤的发展与诊断10-100 g榛子大小针头大小免疫学方法生物物理学方法早期亚临床阶段晚期1 mg1 g1kg1 g高灵敏度的肿瘤标志物的测定对肿瘤的早期诊断和治疗方案设计是十分重要的手段 世界卫生组织（WHO）指出：若能早期诊断并若能早期诊断并及时治疗，及时治疗，90%90%95%95%的肿瘤是可以治愈的的肿瘤是可以治愈的。临床可检测的肿瘤临床可检测的肿瘤肿瘤标记物肿瘤标记物(无形的肿瘤无形的肿瘤)第55页/共142页58肿瘤标志物分类肿瘤标志物分类n n蛋白质类，蛋白质类，如如如如AFPAFPAFPAFP、CEACEACEACEA和和和和PSAPSAPSAPSA等等等等。n n糖脂类，糖脂类，如如如如CA125CA125、CA19-9CA19-9、CA153CA153和和和和CA-50CA-50等等等等n n*酶类，酶类，如前列腺酸性磷酸酶如前列腺酸性磷酸酶如前列腺酸性磷酸酶如前列腺酸性磷酸酶(PAP)(PAP)(PAP)(PAP)、神经元特异、神经元特异、神经元特异、神经元特异性烯醇化酶性烯醇化酶性烯醇化酶性烯醇化酶(NSE)(NSE)(NSE)(NSE)和和和和-L-L-L-L-岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶(AFU)(AFU)(AFU)(AFU)等等等等。n n*激素，激素，如如如如HCGHCGHCGHCG、雌激素受体等、雌激素受体等、雌激素受体等、雌激素受体等n n其它其它 肿瘤标志物，肿瘤标志物，如核酸、多胺等如核酸、多胺等如核酸、多胺等如核酸、多胺等。第57页/共142页59甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP）n n在在胎胎儿儿发发育育早早期期,由由肝肝脏脏和和卵卵黄黄囊囊合合成成，出出生生后后一一年年内内降降至至正正常水平。常水平。n n细细胞胞恶恶变变后后又又重重新新具具有有分分泌泌AFP的能力。的能力。n n对对诊诊断断肝肝细细胞胞癌癌及及滋滋养养细细胞胞恶恶性肿瘤性肿瘤有重要的临床价值。有重要的临床价值。第58页/共142页60参考值n n血清血清 300g/L300g/L。n n病毒性肝炎与肝硬化患者血清中病毒性肝炎与肝硬化患者血清中AFPAFP可增高，但常可增高，但常 300g/L300g/L。n n生殖器胚胎性肿瘤、胃癌、胰腺癌生殖器胚胎性肿瘤、胃癌、胰腺癌患者血清中患者血清中AFPAFP可升高。可升高。n n妊妊 娠娠 时时 AFPAFP可可 升升 高高，峰峰 值值 低低 于于400g/L400g/L，若若异异常常升升高高应应考考虑虑胎胎儿儿神经管缺损畸形。神经管缺损畸形。第60页/共142页62癌胚抗原（carcinoembryonic antigencarcinoembryonic antigen、CEACEA）n n早早早早期期期期胎胎胎胎儿儿儿儿的的的的胃胃胃胃肠肠肠肠道道道道及及及及某某某某些些些些组组组组织织织织均均均均有有有有合合合合成成成成CEACEA的的的的能能能能力力力力n n胎儿出生后血清胎儿出生后血清胎儿出生后血清胎儿出生后血清 CEACEA的含量极低的含量极低的含量极低的含量极低n n是是是是一一一一种种种种广广广广谱谱谱谱性性性性肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤标标标标志志志志物物物物，多多多多种种种种肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤表表表表达达达达，脏脏脏脏器器器器特特特特异异异异性性性性低低低低，主主主主要要要要用用用用于于于于辅辅辅辅助助助助肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤的的的的诊诊诊诊断断断断、判判判判断断断断预预预预后后后后、监测疗效和肿瘤复发等。监测疗效和肿瘤复发等。监测疗效和肿瘤复发等。监测疗效和肿瘤复发等。第61页/共142页63参考值n n血清血清血清血清 5g/L2.5ug/L,CEA2.5ug/L,少数人少数人少数人少数人5.0ug/L.5.0ug/L.第63页/共142页65前列腺特异性抗原（前列腺特异性抗原（PSA)n n前列腺分泌的单链糖蛋白n n存在于前列腺管道的上皮细胞，前列腺癌时血清水平明显升高n n总PSA(t-PSA）中，80结合形式，20游离（f-PSA)n n参考值:t-PSA4.0g/L、f-PSA0.25第64页/共142页66临床意义临床意义n n前列腺癌是60-90患者血清t-PSA明显升高n n前列腺炎、增生，轻度升高，t-PSA 4.0-10.0g/L n nt-PSA 4.0-10.0g/L，f-PSA/t-PSA 的比值对诊断更有价值的比值对诊断更有价值，f-PSA/t-PSA0.1时提示前列腺癌第65页/共142页672.2.糖脂类肿瘤标志物检测糖脂类肿瘤标志物检测糖脂类肿瘤标志物检测糖脂类肿瘤标志物检测n n肿瘤细胞内糖基化过程发生变异，从而导致细胞分泌性或细胞膜上的糖蛋白或糖脂中的糖基序列发生改变，形成了一种和正常糖蛋白不同的特殊抗原，可利用单克隆抗体技术检测这些抗原