实验八-ABO血型鉴定、心音听诊、血压测量及蛙心灌流PPT课件.ppt

ABO血型血型鉴鉴定定1.实验实验原理原理n n人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，据其凝集情况便可判定出受试者的血型。2.【实验实验材料】材料】1 1标标准血清准血清 n nA A型型标标准血清准血清含抗含抗B B凝集素凝集素n n使使B B型、型、ABAB型型红细红细胞的凝集原凝集胞的凝集原凝集n nB B型型标标准血清准血清含抗含抗A A凝集素凝集素n n使使A A型、型、ABAB型型红细红细胞的凝集原凝集胞的凝集原凝集2 2一次性采血一次性采血针针1 1枚、枚、洁净洁净玻片玻片1 1块块、长长滴管滴管1 1支、支、7575酒精、酒精、灭灭菌棉菌棉签签。3.3.用标准的血清鉴定ABO血型时，根据凝集4.反应的结果可推测血型。（“+”表示有凝集反应，“”表示无凝集反应）被被测测者者标标准血清准血清 甲甲 乙乙 丙丙 丁丁 A A型型 +B B型型 +推推测测的血清的血清 B型 AB型O型A型4.二、实验过程1.配制红细胞悬液.消毒 受检者的指尖.捏紧指尖，用消毒过的 采血针 迅速 刺破皮肤.待血流出后将1滴血，滴入盛有 1毫升浓度为 0.9 的 生理盐水 的 小瓶 中，摇匀，即成为红细胞悬液5.2.玻片法鉴定血型 取1载玻片 用小滴管吸A型标准血清，滴1滴在 左侧，用 另一小滴管吸 B型 标准血清，滴1滴在右侧。用小滴管取 红细胞悬液，各滴1滴在左侧 和右侧的血清上 用一根 消毒牙签的两端 分别用来混合A型和B型标准血清和红细胞悬液 静置数分钟后，观察凝集现象。3.根据观察到的 凝集 现象推测受检者的血型AB抗A抗B6.抗抗A A分型分型试剂侧试剂侧抗抗B B分型分型试剂侧试剂侧血型血型+A A+B B+ABABO O“”表示表示红细红细胞凝集，胞凝集，“”表示表示红细红细胞未凝集胞未凝集【实验结果】记录受检者红细胞凝集情况，根据ABO血型鉴定表(下表)，判断受检者的血型。ABO血型鉴定表7.注意事注意事项项n n 1红细胞悬液和标准血清均应新鲜、合格且无污染，防止出现假凝集现象。n n 2注意是否有溶血，切勿把溶血当作不凝集。n n 3在操作中，应严格分离各种检测用品，注意吸取标准血清的滴管和搅拌用的竹签等用品绝不能混淆，即防止在进行操作时相互污染。n n 4判断红细胞凝集，要有足够的时间。8.人的心音听诊9.目的要求目的要求n n学学习习心音听心音听诊诊的方法，的方法，识别识别第一心音第一心音与第二心音。与第二心音。10.基本原理基本原理n n心音是由心心音是由心脏脏瓣膜关瓣膜关闭闭和心肌收和心肌收缩缩引引起的振起的振动动所所产产生的声音。用听生的声音。用听诊诊器在胸壁器在胸壁前听前听诊诊，在每一心，在每一心动动周期内可以听到两个周期内可以听到两个心音。心音。11.12.实验实验器材器材n n听听诊诊器器 13.方法与步方法与步骤骤n n1受受试试者安静端坐，胸部裸露。者安静端坐，胸部裸露。n n2检查检查者者带带好听好听诊诊器，注意听器，注意听诊诊器的耳具器的耳具应应与外耳道开口方向一致（向前）。以右与外耳道开口方向一致（向前）。以右手的食指、拇指和中指手的食指、拇指和中指轻轻持听持听诊诊器胸端器胸端紧紧贴贴于受于受试试者胸部皮肤上，依次由左房室瓣者胸部皮肤上，依次由左房室瓣听听诊诊区区主主动动脉瓣听脉瓣听诊诊区区肺肺动动脉瓣听脉瓣听诊诊区区右房室瓣听右房室瓣听诊诊区，仔区，仔细细听取心音，注听取心音，注意区分两心音。意区分两心音。14.心心脏脏瓣膜听瓣膜听诊诊区区n为为心心脏脏各瓣膜各瓣膜开开闭时产闭时产生的生的声音声音n与各瓣膜的解与各瓣膜的解剖位置并不完剖位置并不完全一致全一致Area of auscultationauscultation 15.16.听听诊诊内容内容n心率heart raten心律heart rhythmn心音heart sound17.注意事注意事项项n n1实验实验室内必室内必须须保持安静，以利听保持安静，以利听诊诊。n n2听听诊诊器耳具器耳具应应与外耳道方向一致。与外耳道方向一致。橡皮管不得交叉、扭橡皮管不得交叉、扭结结，管切勿与它，管切勿与它物摩擦，以免物摩擦，以免发发生摩擦音影响听生摩擦音影响听诊诊。n n3如呼吸音影响听如呼吸音影响听诊诊，可令受，可令受试试者者暂暂停呼吸片刻。停呼吸片刻。18.人体动脉血压的测定及其影响因素19.目的要求目的要求n n1学学习习并掌握人体并掌握人体间间接接测压测压法的原法的原理和方法。理和方法。n n2观观察在正常情况下，某些因素察在正常情况下，某些因素对对动动脉血脉血压压的影响。的影响。20.基本原理基本原理n n测测定人体定人体动动脉血脉血压压最常用的方法是最常用的方法是间间接接测压测压法，是使用血法，是使用血压计压计在在动动脉外加脉外加压压，根据血管音的根据血管音的变变化来化来测测量量动动脉血脉血压压的。的。21.实验原理-间接测定法间接的方法：以外加的压强间接反映 在某种情况下：外压分别等于收缩压、舒张压 （？何种情况）我我们们必必须寻须寻求求建立某种关系建立某种关系22.实验原理-间接测定法人们发现：在某些情况下会出现“血管音”当外当外压压大于收大于收缩压时缩压时：血管被：血管被压闭压闭，无血流，无血管音，无血流，无血管音当外当外压压小于舒小于舒张压时张压时：学流通：学流通畅畅，无血管音，无血管音当外当外压压小于收小于收缩压缩压而大于舒而大于舒张压时张压时：血管：血管时时断断时续时续，出，出现现血管音血管音23.实验实验器材器材n n血血压计压计、听、听诊诊器。器。24.方法与步方法与步骤骤 1受受试试者脱左臂衣袖，静坐者脱左臂衣袖，静坐5min。2松开打气球上的螺松开打气球上的螺丝丝，将，将压压脉脉带带内的内的空气完全放出，再将螺空气完全放出，再将螺丝丝扭扭紧紧。3将将压压脉脉带带裹于左上臂，其下裹于左上臂，其下缘应缘应在肘在肘关关节节上上约约2cm处处，松，松紧应紧应适宜。受适宜。受试试者手掌者手掌向上平放于台上，向上平放于台上，压压脉脉带应带应与心与心脏脏同一水同一水平平 25.26.27.n n4 4在肘在肘在肘在肘窝窝窝窝部找到部找到部找到部找到动动动动脉搏脉搏脉搏脉搏动处动处动处动处，左手持听，左手持听，左手持听，左手持听诊诊诊诊器的胸器的胸器的胸器的胸具置于其上。注意：不可用力下具置于其上。注意：不可用力下具置于其上。注意：不可用力下具置于其上。注意：不可用力下压压压压。n n5 5听取血管音听取血管音听取血管音听取血管音变变变变化右手持打气球，向化右手持打气球，向化右手持打气球，向化右手持打气球，向压压压压脉脉脉脉带带带带打气打气打气打气加加加加压压压压，此，此，此，此时时时时注意注意注意注意倾倾倾倾听声音听声音听声音听声音变变变变化，在声音消失后再化，在声音消失后再化，在声音消失后再化，在声音消失后再加加加加压压压压20mmHg20mmHg，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺，然后扭开打气球之螺丝丝丝丝，缓缓缓缓慢放慢放慢放慢放气（切勿气（切勿气（切勿气（切勿过过过过快），此快），此快），此快），此时时时时可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列可听到血管音的一系列变变变变化，声音从无到有，由低而高，而后突然化，声音从无到有，由低而高，而后突然化，声音从无到有，由低而高，而后突然化，声音从无到有，由低而高，而后突然变变变变低，低，低，低，最后完全消失。然后扭最后完全消失。然后扭最后完全消失。然后扭最后完全消失。然后扭紧紧紧紧打气球螺打气球螺打气球螺打气球螺丝继续丝继续丝继续丝继续打气加打气加打气加打气加压压压压，反复听取声音，反复听取声音，反复听取声音，反复听取声音变变变变化化化化2323次。次。次。次。28.n n6测测量量动动脉血脉血压压重复上一操作，同重复上一操作，同时时注意注意检压计检压计之水之水银银柱和声音柱和声音变变化。在徐徐放气化。在徐徐放气减减压时压时，第一次听到血管音的水，第一次听到血管音的水银银柱高度柱高度即代表即代表收收缩压缩压。在血管音突然由。在血管音突然由强强变变弱弱时时的水的水银银柱高度即代表柱高度即代表舒舒张压张压，记记下下测测定数定数值值后，将后，将压压脉脉带带内的空气放尽，使内的空气放尽，使压压力降力降至零。至零。29.注意事注意事项项n n1 1测压时测压时测压时测压时室内室内室内室内须须须须保持安静，以利听保持安静，以利听保持安静，以利听保持安静，以利听诊诊诊诊。n n2 2戴听戴听戴听戴听诊诊诊诊器器器器时时时时，务务务务使耳具的弯曲方向与使耳具的弯曲方向与使耳具的弯曲方向与使耳具的弯曲方向与 外耳道一致，即接耳的弯曲端向前外耳道一致，即接耳的弯曲端向前外耳道一致，即接耳的弯曲端向前外耳道一致，即接耳的弯曲端向前n n3 3压压压压脉脉脉脉带带带带裹裹裹裹绕绕绕绕要松要松要松要松紧紧紧紧适宜，并与心适宜，并与心适宜，并与心适宜，并与心脏脏脏脏同同同同 一水平。一水平。一水平。一水平。n n4 4重复重复重复重复测压时测压时测压时测压时，须须须须将将将将压压压压脉脉脉脉带带带带内空气放内空气放内空气放内空气放 尽，使尽，使尽，使尽，使压压压压力降至零位，而后再加力降至零位，而后再加力降至零位，而后再加力降至零位，而后再加压测压测压测压测量。量。量。量。5.5.切勿将听切勿将听切勿将听切勿将听诊诊诊诊器放入袖器放入袖器放入袖器放入袖带带带带内。内。内。内。6.6.测测测测2323次，以次，以次，以次，以较较较较低的低的低的低的值为值为值为值为准准准准 7.7.血血血血压计压计压计压计的开关的开关的开关的开关30.1.学学习习离体蛙心灌流方法离体蛙心灌流方法;2.了解离体器官的研究方法；了解离体器官的研究方法；3.观观察察K+、Na+、Ca2+等离子、等离子、肾肾上腺素、上腺素、乙乙酰酰胆碱、酸胆碱、酸硷硷度度诸诸因素因素对对心心脏脏活活动动的影响，的影响，理解心理解心脏脏正常活正常活动动需要一适当的理化需要一适当的理化环环境境;蛙心灌流蛙心灌流【目的】【目的】31.心心脏脏的的正正常常节节律律性性活活动动必必须须在在适适宜宜的的理理化化环环境境里里才才能能维维持持，一一旦旦适适宜宜的的理理化化环环境境(内内环环境境)被被干干扰扰或或破破坏坏，心心脏脏活活动动就会受到影响。就会受到影响。心心脏脏受受自自主主性性神神经经的的双双重重支支配配，交交感感神神经经兴兴奋奋时时，其其末末梢梢释释放放去去甲甲肾肾上上腺腺素素，作作用用于于心心脏脏1受受体体使使心心肌肌收收缩缩力力加加强强，传传导导增增快快，心心率率加加快快；而而迷迷走走神神经经兴兴奋奋时时，其其末末梢梢释释放放乙乙酰酰胆胆碱碱，作作用用于于心心脏脏M受受体体使使心心肌肌收收缩缩力力减弱，心率减慢。减弱，心率减慢。蛙蛙心心离离体体后后，用用理理化化性性质质近近似似于于血血浆浆的的任任氏氏液液灌灌流流，在在一一定定时时间间内内，可可保保持持节节律律性性收收缩缩和和舒舒张张。改改变变任任氏氏液液的的组组成成成成分分，心心脏脏跳跳动动的的节节律律、频频率率和和幅幅度度都都可随之可随之发发生改生改变变。【原理】【原理】32.【实验步骤及观察项目】1 1离体心离体心脏脏制制备备（1）取取一一青青蛙蛙，破破坏坏脑脑和脊髓，暴露心和脊髓，暴露心脏脏。（2）用用小小镊镊子子夹夹起起心心包包膜膜，沿沿心心轴轴剪剪开开心心包包膜膜，仔仔细细辨辨认认心心房房、心心室室、动动脉脉圆圆锥锥、主主动动脉脉、静静脉脉窦窦、前后腔静脉等解剖前后腔静脉等解剖结结构。构。录录象象33.（3）在左主）在左主动动脉下穿一根脉下穿一根线线，靠近，靠近动动脉脉分叉分叉处结处结扎左主扎左主动动脉，另一脉，另一线线置主置主动动脉脉圆锥圆锥下下备备用。提起左主用。提起左主动动脉脉结结扎扎线线，用，用眼科剪在左主眼科剪在左主动动脉靠近脉靠近动动脉脉圆锥处圆锥处剪一剪一小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管小斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主由此口插入主动动脉，插至脉，插至动动脉脉圆锥时圆锥时略略向后退，在心室收向后退，在心室收缩时缩时，向心室后壁方，向心室后壁方向下插，向下插，经经主主动动脉瓣插入心室腔内，一脉瓣插入心室腔内，一次不成可反复多次稍退后插，但不可次不成可反复多次稍退后插，但不可过过深深顶顶室壁以免堵住管口。插管若成功室壁以免堵住管口。插管若成功进进入心室，管内液面会随着心室跳入心室，管内液面会随着心室跳动动而上而上下移下移动动或看到血如或看到血如喷喷泉涌入插管。用泉涌入插管。用动动脉脉圆锥圆锥下的下的备备用用线结线结扎插管，并将扎插管，并将结结扎扎线线固定于插管固定于插管侧侧面的小突起上防止滑脱。面的小突起上防止滑脱。34.（4）提起插管，在）提起插管，在结结扎扎线远线远端分端分别别剪断左、右主剪断左、右主动动脉，脉，轻轻轻轻提提起起插插管管及及心心脏脏，用用线线将将左左、右右肺肺前前后后腔腔静静脉脉结结扎扎，注注意意：在在结结扎扎前前用用小小弯弯镊镊沿沿静静脉脉窦窦往往下下压压，结结扎扎线线在在镊镊子子下下方方结结扎扎，以以保保护护静静脉脉窦窦防防止止误误扎扎，否否则则出出现现窦窦房房阻阻滞滞；最最后后在在结结扎扎线线下下方方剪剪断断上上述述静静脉脉而而将将心心脏脏离离体体。用用滴滴管管吸吸净净插插管管内内血血液液，加加入入新新鲜鲜任任氏氏液液，反反复复冲冲洗洗数数次次，直直至至液液体体澄澄清清。保保持持灌灌流流液液面面高高度度恒定（恒定（12厘米），即可厘米），即可进进行行实验实验。（5）用）用试试管管夹夹将蛙心插管固定于将蛙心插管固定于铁铁支架上，将支架上，将连连于蛙心于蛙心夹夹的的线线经经滑滑轮轮转转挂挂于于张张力力换换能能器器，注注意意避避免免液液体体滴滴到到换换能能器器上上漏漏电电锈蚀锈蚀，适当，适当调调整前整前负负荷即可荷即可记录记录。35.2仪仪器器线线路路连连接接 将将张张力力换换能能器器插插头头连连接接至至BL系系统统第第1通通道道（或或MS系系统统第第2道道的的插座）插座）3.软软件操作件操作开机并启开机并启动动相关相关实验实验系系统统。（1）BL系系统统“实验项实验项目目”“循循环实验环实验”“蛙心灌流蛙心灌流”。G、T、F可适当可适当调节调节，让让波形幅度大小适宜。波形幅度大小适宜。扫扫描速度可根据波形描速度可根据波形进进行行调节调节，让让波形分开易波形分开易辩辩。36.4观观察察项项目目（1）描）描记记正常心跳曲正常心跳曲线线（曲（曲线线疏密表示心跳疏密表示心跳频频率；曲率；曲线线幅度表幅度表示心示心脏脏收收缩缩力的力的强强弱；曲弱；曲线线的的规规律性表示心跳的律性表示心跳的节节律性）。律性）。（2）吸出插管内全部灌流液，）吸出插管内全部灌流液，换换入等量的入等量的0.65%NaC1，观观察心察心跳曲跳曲线线。当效。当效应应明明显时应显时应及及时时吸出灌流液，并用新吸出灌流液，并用新鲜鲜任氏液反复任氏液反复换换洗，直至恢复适宜的心跳曲洗，直至恢复适宜的心跳曲线为线为止。止。调节调节最后一次液面高度同最后一次液面高度同前（前（12厘米）。厘米）。（3）滴入）滴入2CaC12 12滴，滴，观观察及察及换换液方法同上。液方法同上。（4）滴入）滴入lKCl 12滴，滴，观观察及察及换换液方法同上。液方法同上。（5）滴入）滴入3乳酸乳酸12滴，效滴，效应应出出现现后立即滴入后立即滴入2.5NaHCO3 数滴，效数滴，效应应明明显时显时及及时时吸出灌流液，吸出灌流液，换换液方法同上。液方法同上。37.（6）滴入）滴入1 10 000肾肾上腺素上腺素12滴，滴，观观察及察及换换液方法同上。液方法同上。（7）滴滴入入1 100 000乙乙酰酰胆胆碱碱滴滴，效效应应明明显显时时应应立立即即吸吸出出灌灌流液，并用新流液，并用新鲜鲜任氏液任氏液换换洗，方法同上。洗，方法同上。（8）滴滴入入0.1%阿阿托托品品1滴滴，效效应应出出现现后后立立即即滴滴入入1 100 000乙乙酰酰胆胆碱碱1滴滴，观观察察结结果果并并与与（8）比比较较，然然后后用用任任氏氏液液换换洗洗，方方法同上。法同上。38.【注意事注意事项项】1换换洗洗时时可可暂暂停停记录记录，且最后一次加液的，且最后一次加液的液面液面应应保持保持同同一一高高度度.2滴入滴入试剂时试剂时，先先加加12滴滴，观观察效察效应应。如。如不明不明显显可可再再补补加。加。3每每项实验项实验均均应应有有前后前后对对照照。4每次加每次加药时药时，应应作作标记标记。5随随时时滴加任氏液于滴加任氏液于心心脏脏表面使之保持表面使之保持湿湿润润。6吸任氏液的吸管和吸蛙心插管内液的吸管要分开（吸任氏液的吸管和吸蛙心插管内液的吸管要分开（专专管管专专用用），以免影响，以免影响实验结实验结果。果。7.有些步有些步骤骤，如滴加，如滴加KCl和和Ach时时，在，在刚刚出出现现抑制抑制效效应应时时立即冲立即冲洗洗，否，否则则作用作用过过久抑制久抑制过过深可能深可能难难以以抢抢救。救。39.