糖类脂肪蛋白质核酸的鉴定.pptx

（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定1.1.实验原理实验原理 当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O第1页/共19页2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖的基本方法。3 3 实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。第2页/共19页4 4 试剂配制试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）甲、乙试剂千万要分开放，不可混合。在实验过程中，将4-5滴乙液滴入2mL甲液中现混现用！第3页/共19页5 5 实验步骤实验步骤（1 1）制备组织样液（教师制备）制备组织样液（教师制备）（2 2）鉴定样液）鉴定样液先在试管中加入2mL组织样液第4页/共19页再加入2mL刚配制的斐林试剂水浴煮沸2分钟注意观察整注意观察整个实验过程个实验过程中，溶液颜中，溶液颜色的变化！色的变化！第5页/共19页（二）生物组织中脂肪的鉴定（二）生物组织中脂肪的鉴定1 1 实验原理实验原理 苏丹是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法第6页/共19页3 3 实验材料实验材料 做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。4 4 试剂配制试剂配制 苏丹溶液：将0.1g苏丹干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精溶液中，待全部溶解后即成。第7页/共19页5 5 实验步骤实验步骤（1 1）切片制作）切片制作去掉花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。第8页/共19页（2 2）染色）染色 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹溶液2-3滴于花生子叶薄片上2-3min后，吸去染液滴50%的酒精洗去浮色吸去多余酒精再滴1-2滴蒸馏水盖上盖玻片，制成临时装片。（3 3）镜检鉴定）镜检鉴定 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（最好只有最好只有1-21-2层细胞层细胞），移至视野的中心换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。第9页/共19页（三）生物组织中蛋白质的鉴定（三）生物组织中蛋白质的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。第10页/共19页2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。4 4 试剂配制试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）双缩脲试剂 B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）3 3 实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆或鸡蛋白。第11页/共19页5 5 实验步骤：实验步骤：（1 1）制备生物组织样液（教师制备）制备生物组织样液（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液注意观察溶液中颜色的变化？第12页/共19页1、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（）A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B、脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用 B第13页/共19页2、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （）A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料 C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D、鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 A第14页/共19页3、将三个鉴定实验与其使用的试剂和结果之间用直线连接起来。可溶性还原糖 斐 林 试 剂 紫 色 脂 肪 双缩脲试剂 橘黄色 蛋 白 质 苏 丹 砖红色 NH2|4、实验可知，在尿素（O=C）溶液中加入双缩脲试剂，也能产生紫色反应。依据蛋|白质鉴定实验原理说明之。NH2 第15页/共19页2 2 核酸在细胞中的分布核酸在细胞中的分布实验：观察DNA和RNA在细胞中的分布实验原理：甲基绿使DNA呈现绿色 派洛宁使RNA呈现红色 盐酸水解能改变细胞膜的通透性，加速染色剂 进入细胞，使染色体的DNA和蛋白质分离实验材料：口腔上皮细胞第16页/共19页实验步骤：A.取口腔上皮细胞 载玻片上滴0.9 NaCl牙签刮取细胞，涂片B.水解 8 盐酸水解30摄氏度温水C.冲洗 蒸馏水（DW）冲洗D.染色 甲基绿-派洛宁染色E.观察 低倍、高倍显微镜观察第17页/共19页实验结果：实验结论：细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA大部分存在于细胞质中.第18页/共19页感谢您的观看！第19页/共19页