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液液传质分离过程第1页，共46页，编辑于2022年，星期日第第4章章.液液传质分离过程液液传质分离过程主要内容及要求主要内容及要求1 1、液液萃取的计算、液液萃取的计算2 2、超临界流体萃取、反胶团萃取和、超临界流体萃取、反胶团萃取和 双水相萃取的基本原理及应用双水相萃取的基本原理及应用第2页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1液液萃取液液萃取液液传质分离是利用溶质在两液相中不同的分配液液传质分离是利用溶质在两液相中不同的分配特性，通过相间传质达到分离的目的。特性，通过相间传质达到分离的目的。萃取是液液传质分离过程中常用的操作单元，广泛应萃取是液液传质分离过程中常用的操作单元，广泛应用于石油化工、湿法冶金、精细化工等领域用于石油化工、湿法冶金、精细化工等领域。超临界流体萃取技术、双水相萃取技术、反胶团超临界流体萃取技术、双水相萃取技术、反胶团萃取技术等则是新型萃取分离技术的代表。萃取技术等则是新型萃取分离技术的代表。第3页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1.1萃取剂的选择和萃取体系的分类萃取剂的选择和萃取体系的分类一、萃取剂的选择一、萃取剂的选择 一个合用的萃取剂应与原溶液形成不互溶的两液相，萃取一个合用的萃取剂应与原溶液形成不互溶的两液相，萃取剂还应具备以下性质：剂还应具备以下性质：两液相容易分开，不形成乳化液；两液相容易分开，不形成乳化液；萃取剂与任何进料组分之间不形成共沸物；萃取剂与任何进料组分之间不形成共沸物；萃取剂对关键组分的选择性尽可能地高；萃取剂对关键组分的选择性尽可能地高；萃取剂在萃余相中的溶解度应尽可能地低。萃取剂在萃余相中的溶解度应尽可能地低。萃取剂要易于回收萃取剂要易于回收第4页，共46页，编辑于2022年，星期日萃取剂的搜寻方法：萃取剂的搜寻方法：(1)(1)搜寻数据库。搜寻数据库。(2)(2)主要筛选方法：主要筛选方法：a)a)选择同系物为萃取剂，选择同系物为萃取剂，b b）罗宾斯表，）罗宾斯表，c c）氢键，）氢键，d d）极性作用，）极性作用，e)e)特定萃取剂的认定。特定萃取剂的认定。4.1.1 萃取剂的选择和萃取体系的分类萃取剂的选择和萃取体系的分类第5页，共46页，编辑于2022年，星期日第6页，共46页，编辑于2022年，星期日案例案例 苯苯中中分分离离链链烃烃。苯苯在在罗罗宾宾斯斯表表中中属属于于第第1111组组，而而所所选选的的链链烃烃庚庚烷烷属属于于第第1212组组。由由罗罗宾宾斯斯表表可可见见，第第8 8组组（伯伯胺胺、氨氨、无无取取代代基基的的氨氨基基化化合合物物）与与芳芳烃烃形成的物系对拉乌尔定律产生负偏差，与链烃形成的物系产生正偏差。形成的物系对拉乌尔定律产生负偏差，与链烃形成的物系产生正偏差。尽尽管管胺胺或或氨氨基基化化合合物物在在分分离离该该混混合合物物上上很很可可能能是是有有效效的的，没没有有迹迹象象表表明明是是否否一一定定分分层层。罗罗宾宾斯斯表表也也指指出出，第第4 4组组（具具有有活活性性氢氢原原子子的的多多环环链链烃烃）、第第7 7组组（仲仲胺胺）和和第第9 9组组（醚醚、氧氧化化物物、亚亚砜砜）均均与与链链烃烃形形成成正正偏偏差差物物系系，与与芳芳烃烃形形成成理理想想物系。这类溶剂同样可认为是可行的溶剂。但没有表明形成的液相数目。物系。这类溶剂同样可认为是可行的溶剂。但没有表明形成的液相数目。第7页，共46页，编辑于2022年，星期日(1)(1)简单分子萃取体系简单分子萃取体系(2)(2)中性络合体系中性络合体系(3)(3)酸性络合萃取体系酸性络合萃取体系(4)(4)离子缔合萃取体系离子缔合萃取体系(5)(5)胺类萃取体系胺类萃取体系 二、萃取体系的分类二、萃取体系的分类 第8页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1.2 多级逆流萃取的计算多级逆流萃取的计算 逆流萃取塔 定义定义E为进料中组分为进料中组分i被萃取的分数被萃取的分数 集团法集团法:定义定义U为进料中组分为进料中组分i进入萃余相中的分数进入萃余相中的分数 第9页，共46页，编辑于2022年，星期日各式可用质量单位或摩尔单位。由于在绝热萃取塔中温度变化一般都不大，各式可用质量单位或摩尔单位。由于在绝热萃取塔中温度变化一般都不大，因此一般不需要焓平衡方程，只有当原料与溶剂有较大温差或混和热很大时因此一般不需要焓平衡方程，只有当原料与溶剂有较大温差或混和热很大时才需考虑。才需考虑。第10页，共46页，编辑于2022年，星期日对比：对比：萃取吸收与蒸出第11页，共46页，编辑于2022年，星期日对比：对比：萃取吸收与蒸出第12页，共46页，编辑于2022年，星期日对比：对比：萃取吸收与蒸出方法特点：方法特点：1.热量变化不大，无须热平衡计算热量变化不大，无须热平衡计算2.影响大，有时不可靠影响大，有时不可靠ig g例例4-1第13页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1.3 分馏萃取分馏萃取n通常采用塔中部进料的分馏萃取流程。通常采用塔中部进料的分馏萃取流程。适用于那些分配系数差别较小或虽差别较大但分离效果要求很适用于那些分配系数差别较小或虽差别较大但分离效果要求很高的体系。高的体系。第14页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1.4微分逆流萃取模型微分逆流萃取模型n一一活塞流模型活塞流模型活塞流模型是一个完全理想化的微分逆流萃取模型。它假定活塞流模型是一个完全理想化的微分逆流萃取模型。它假定塔内同一截面上任一点每一相的流速相等，两相在塔内作塔内同一截面上任一点每一相的流速相等，两相在塔内作活塞流动；两相的传质只发生在水平方向上，在垂直方向活塞流动；两相的传质只发生在水平方向上，在垂直方向上，每一相内没有物质传递。上，每一相内没有物质传递。第15页，共46页，编辑于2022年，星期日用苯作萃取剂在喷淋塔内萃取水溶液中的醋酸。已知塔高用苯作萃取剂在喷淋塔内萃取水溶液中的醋酸。已知塔高H=1.4m，塔截面积，塔截面积A=4.510-3(m2)，萃取相进出口的醋酸浓度分别为，萃取相进出口的醋酸浓度分别为y1=0.00397，y0=0.0115，萃余相进出口醋酸浓度分别为，萃余相进出口醋酸浓度分别为x0=0.688，x1=0.683(均为均为kmol/m3)。苯的流率。苯的流率E=5.6710-6m3/s，萃取平衡，萃取平衡关系为关系为：y=0.0247x。试求：试求：(1)萃取相总传质单元数；萃取相总传质单元数；(2)萃取相体积传质系数萃取相体积传质系数Koa。例题：第16页，共46页，编辑于2022年，星期日解解:设萃取塔中传质速率为设萃取塔中传质速率为N。则则N=E(y0y1)=5.6710-6(0.01150.00397)=4.26910-8kmol/s塔顶和塔底的萃取相平衡浓度为：塔顶和塔底的萃取相平衡浓度为：y0*=0.02470.688=0.01699kmol/m3y1*=0.02470.683=0.01687kmol/m3塔顶、塔底的传质推动力为：塔顶、塔底的传质推动力为：y0*y0=0.016990.0115=0.00549kmol/m3y1*y1=.016870.00397=0.01290kmol/m3第17页，共46页，编辑于2022年，星期日对数平均浓度差为：对数平均浓度差为：因此得：因此得：则则此塔萃取相的总传质单元数为此塔萃取相的总传质单元数为0.869，其萃取相的体积传质系数，其萃取相的体积传质系数Koa等于等于7.81610-41/s。第18页，共46页，编辑于2022年，星期日4.1.4 微分逆流萃取模型微分逆流萃取模型n二二轴向扩散模型轴向扩散模型轴向扩散模型做了如下假设：轴向扩散模型做了如下假设：每相的返混可用一恒定的轴向扩散系数每相的返混可用一恒定的轴向扩散系数E来描述；来描述；各相的表观速度在横截面上处处相同，在轴向上是恒定的；各相的表观速度在横截面上处处相同，在轴向上是恒定的；仅仅是溶质在两相间传质，各相体积总传质系数为一常数；仅仅是溶质在两相间传质，各相体积总传质系数为一常数；溶质的分配系数为一常数；溶质的分配系数为一常数；第19页，共46页，编辑于2022年，星期日n在在实实验验室室对对某某稀稀溶溶液液物物系系进进行行萃萃取取实实验验，活活塞塞流流工工况况下下测测得得（HTU）ox=0.9144m。现现放放大大设设计计一一个个工工业业塔塔，已已知知:（NTU）ox=4、Pex=19、Pey=50、E=0.5。求求塔高是多少塔高是多少？解：对于活塞流解：对于活塞流,塔高塔高H活塞流活塞流=（HTU）ox（NTU）ox，将已知数据代入式（，将已知数据代入式（4-39）：）：该方程为非线形方程，用迭代方法求解该方程为非线形方程，用迭代方法求解H=5.26m效率效率=（HTU）ox（NTU）ox/H=40.9144/5.26100%=69.5%例题：第20页，共46页，编辑于2022年，星期日4.2超临界流体萃取超临界流体萃取 超超临临界界流流体体萃萃取取是是一一种种以以超超临临界界流流体体作作为为萃萃取取剂剂，从从固固体体或或液体中提取出待分离的高沸点或热敏性物质的新型萃取技术。液体中提取出待分离的高沸点或热敏性物质的新型萃取技术。超超临临界界流流体体萃萃取取技技术术的的起起源源:1879年年，J.B.Hannay等等发发现现无无机机物物在在高高压压乙乙醇醇或或乙乙醚醚中中溶溶解解度度异异常常增增加加的的现现象象,用用高高压压的的乙乙醇醇可可溶溶解解金金属属卤卤化化物物，压压力力越越高高，溶溶解解能能力力越越强强。而而当当压压力力降降低低到到一一定定程程度度以后，溶解的无机物又从乙醇或乙醚中析出。以后，溶解的无机物又从乙醇或乙醚中析出。第21页，共46页，编辑于2022年，星期日 通常物质有三种状态，如果提高温度和压力，会出现液体与气体通常物质有三种状态，如果提高温度和压力，会出现液体与气体界面消失的现象，该点称为临界点。界面消失的现象，该点称为临界点。超临界流体是指物质的温度和压力分别超过其临界温度（超临界流体是指物质的温度和压力分别超过其临界温度（TC）和临）和临界压力（界压力（PC）的流体，处于临界点状态的物质可实现从液态）的流体，处于临界点状态的物质可实现从液态到气态的连续状态。到气态的连续状态。例如：水的温度和压力升高到临界（例如：水的温度和压力升高到临界（T=374.3，P=22.05MPa）以上时，就会处于一种既不同于水，也不同于液态和固态的新的以上时，就会处于一种既不同于水，也不同于液态和固态的新的流体态流体态-超临界态，该状态水即称之为超临界水。超临界态，该状态水即称之为超临界水。超临界流体超临界流体 第22页，共46页，编辑于2022年，星期日超临界流体与气体和液体的物性比较超临界流体与气体和液体的物性比较 物物 性性流流 体体密度密度,g/cm3粘度粘度，Pa.S扩散系数扩散系数D,cm2/s气体气体1530，常压，常压（0.62）10-3(13)10-50.10.4液体液体1530，常压，常压0.61.6(0.23)10-3(0.22)10-5超临界流体，超临界流体，Tc，4Pc0.40.9(39)10-50.210-2第23页，共46页，编辑于2022年，星期日技术优势：技术优势：超超临临界界流流体体具具有有极极强强的的溶溶解解能能力力，能能实实现现从从固固体体中中提提取取有效成分。有效成分。可可通通过过温温度度、压压力力的的调调节节改改变变超超临临界界流流体体的的溶溶解解能能力力的的大大小小，因因而超临界流体萃取具有较好的选择性。而超临界流体萃取具有较好的选择性。超临界流体传质系数大，可大大缩短分离时间。超临界流体传质系数大，可大大缩短分离时间。萃取剂的分离回收容易。萃取剂的分离回收容易。第24页，共46页，编辑于2022年，星期日4.2.1 超临界流体萃取的热力学基础超临界流体萃取的热力学基础 固体固体超临界流体的相平衡超临界流体的相平衡 第25页，共46页，编辑于2022年，星期日4.2.1 超临界流体萃取的热力学基础超临界流体萃取的热力学基础 由于固体的饱和蒸气压非常低，所以用来校正纯固体的饱和蒸气压的逸度系数值近乎由于固体的饱和蒸气压非常低，所以用来校正纯固体的饱和蒸气压的逸度系数值近乎等于等于1；因固体的摩尔体积通常很小，在压力变化为几十兆帕范围内，；因固体的摩尔体积通常很小，在压力变化为几十兆帕范围内，Poynting因因子积分值通常不超过子积分值通常不超过2；因此，决定增强因子；因此，决定增强因子E的大小的主要因素是高压流体混合物的大小的主要因素是高压流体混合物中溶质中溶质2的逸度系数。经热力学推导可得：的逸度系数。经热力学推导可得：在压力不高的情况下（大约不超过轻组分临界压力的一半），在压力不高的情况下（大约不超过轻组分临界压力的一半），E可由简化的维里方可由简化的维里方程计算：程计算：第26页，共46页，编辑于2022年，星期日 4.2.2 4.2.2 超临界流体萃取过程超临界流体萃取过程 作为萃取溶剂的超临界流体必须具备以下条件：作为萃取溶剂的超临界流体必须具备以下条件：萃取剂应具有化学稳定性，对设备无腐蚀性；萃取剂应具有化学稳定性，对设备无腐蚀性；临界温度不能太高或太低，最好在室温附近；临界温度不能太高或太低，最好在室温附近；操作温度应低于被萃取溶质的变性温度；操作温度应低于被萃取溶质的变性温度；为减小能耗，临界压力不能太高；为减小能耗，临界压力不能太高；选择性好，容易得到高纯产品；选择性好，容易得到高纯产品；溶解度要高，可减少溶剂的循环量；溶解度要高，可减少溶剂的循环量；萃取溶剂易得，价格便宜。萃取溶剂易得，价格便宜。第27页，共46页，编辑于2022年，星期日第28页，共46页，编辑于2022年，星期日典型的萃取流程典型的萃取流程 第29页，共46页，编辑于2022年，星期日4.2.3 超临界流体萃取的应用超临界流体萃取的应用 案例：案例：超临界流体超临界流体CO2提取啤酒花中有效成分提取啤酒花中有效成分 啤酒花中对酿酒有用的部分是挥发油和软树脂中的律草酮，挥发就赋啤酒花中对酿酒有用的部分是挥发油和软树脂中的律草酮，挥发就赋予啤酒特有的香气。起初，使用二氯甲烷或有机溶剂萃取，其利用率达到予啤酒特有的香气。起初，使用二氯甲烷或有机溶剂萃取，其利用率达到60%-80%,但残留的有机溶剂不仅需要进一步精制还具有毒性，且会影响啤酒的风但残留的有机溶剂不仅需要进一步精制还具有毒性，且会影响啤酒的风味和品质。采用超临界味和品质。采用超临界CO2萃取技术后软树脂的提取率可达萃取技术后软树脂的提取率可达96.5%，律草酮的萃，律草酮的萃取率可达取率可达98.7%。酒花经过粉碎成适和粒度后装入萃取器中，选择适当的温度和压力酒花经过粉碎成适和粒度后装入萃取器中，选择适当的温度和压力,CO2通入萃取器中，啤酒花中的有效成分溶解在超临界状态的通入萃取器中，啤酒花中的有效成分溶解在超临界状态的CO2中，中，CO2流体经过分离器，通过降低压力和升高温度等途径将其转变成气态从分离器流体经过分离器，通过降低压力和升高温度等途径将其转变成气态从分离器中分离出去，而啤酒花中的有效成分就留在分离器中，分离出的中分离出去，而啤酒花中的有效成分就留在分离器中，分离出的CO2气体经冷凝气体经冷凝后循环使用。萃取后循环使用。萃取2.5小时后。停止运行。从分离器底部的接样阀接取小时后。停止运行。从分离器底部的接样阀接取样品样品。第30页，共46页，编辑于2022年，星期日4.3 4.3 反胶团萃取反胶团萃取 应用背景应用背景：常规的液液萃取技术不适用于大部分基因工程的主要产品-蛋白质的分离，原因在于:1、蛋白质在发酵液和培养介质中绝大多数呈现离子态，不溶于非极性的有机溶剂。2、若蛋白质与有机溶剂接触，会引起蛋白质的变性。为了使蛋白质能从水相萃取进入另一液相，发挥液液萃取技术的优良分离性能和作用，需要找到一种与水不互溶，溶解于有机溶剂，并且蛋白质溶于其中并保持活性的液相反胶团。反胶团萃取有效解了溶剂萃取过程中蛋白质不溶于有机溶剂和易变性、失活的问题，因此得到了广泛的应用。第31页，共46页，编辑于2022年，星期日 反胶团：表面活性剂是由亲水的极性头和疏水的非极性尾两部分组成的两性分子。表面活性剂在非极性有机相中超过一定浓度时,自发形成的纳米尺度的一种聚焦体。在这种聚焦体中，表面活性剂的憎水非极性尾向外，而极性头则向内排列形成一个极性核心，而此极性核心具有溶解水和大分（蛋白质）的能力。4.3.1 反胶团的特性反胶团的特性 第32页，共46页，编辑于2022年，星期日 反胶团示意图反胶团示意图第33页，共46页，编辑于2022年，星期日4.3.2 反胶团萃取机理反胶团萃取机理萃取过程中，生物大分子进入反胶团相需经历三步传质过程：通过表面液膜扩散，从水相到达相界面；在相界面处溶质进入反胶团；含溶质的反胶团扩散进入有机相。反萃操作中溶质亦经历相似的过程，只是方向相反，在界面处溶质从反胶团释放出来。第34页，共46页，编辑于2022年，星期日4.3.2 反胶团萃取机理反胶团萃取机理 萃取过程传质通量计算式萃取过程传质通量计算式反萃过程传质通量计算式反萃过程传质通量计算式第35页，共46页，编辑于2022年，星期日反胶团萃取蛋白质的主要影响因素 第36页，共46页，编辑于2022年，星期日4.3.3 反胶团萃取的应用反胶团萃取的应用n（1 1）分离蛋白质混合物；分离蛋白质混合物；n（2 2）浓缩浓缩-淀粉酶；淀粉酶；n（3 3）从发酵液中提取胞外酶）从发酵液中提取胞外酶 ；n（4 4）直接提取胞内酶；直接提取胞内酶；n（5 5）用于蛋白质复性用于蛋白质复性;第37页，共46页，编辑于2022年，星期日案例案例通过调节水相通过调节水相pH值和值和KCl浓度来实现三种蛋白质的分离。在浓度来实现三种蛋白质的分离。在pH=9时，核糖核酸酶的溶时，核糖核酸酶的溶解度很小，保留在水相而与其他两种蛋白质分离；相分离后得到的反胶团相（含细胞色素解度很小，保留在水相而与其他两种蛋白质分离；相分离后得到的反胶团相（含细胞色素C和溶和溶菌酶）与菌酶）与0.5 mol/dm3的的KCl水溶液接触后，细胞色素水溶液接触后，细胞色素C被反萃取到水相，而溶菌酶留在被反萃取到水相，而溶菌酶留在反胶团相；含溶菌酶的反胶团与反胶团相；含溶菌酶的反胶团与2.0 mol/dm3KCl，pH值为值为11.5的水相接触后，将溶的水相接触后，将溶菌酶反萃至水相中。菌酶反萃至水相中。第38页，共46页，编辑于2022年，星期日 双水相萃取（双水相萃取（aqueoustwo-phaseextraction）就是利用物质在互不相溶的）就是利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来实现分离的一种新型分离技术，由于它具两水相间分配系数的差异来实现分离的一种新型分离技术，由于它具有收率高、成本低、可连续化操作等技术优势，因而已被广泛应用于有收率高、成本低、可连续化操作等技术优势，因而已被广泛应用于生物化学、细胞生物学和生物化工等领域，进行生物转化，蛋白质、生物化学、细胞生物学和生物化工等领域，进行生物转化，蛋白质、核酸等产品的分离纯化。用此方法提纯的酶已达数十种，其分离也达核酸等产品的分离纯化。用此方法提纯的酶已达数十种，其分离也达到了相当规模。近年来又进行了双水相萃取氨基酸类和病毒小分子物到了相当规模。近年来又进行了双水相萃取氨基酸类和病毒小分子物质的研究，大大扩展了应用范畴并提高了选择性，使双水相萃取技术质的研究，大大扩展了应用范畴并提高了选择性，使双水相萃取技术具有更大的潜力和美好的发展前景。具有更大的潜力和美好的发展前景。双水相萃取双水相萃取第39页，共46页，编辑于2022年，星期日 4.4 双水相萃取双水相萃取 4.4.1 双水相体系双水相体系 物物质类质类型型物物质质P的名称的名称物物质质Q的名称的名称两种非离子型聚合物两种非离子型聚合物聚丙二醇聚丙二醇聚乙二醇聚乙二醇聚乙聚乙烯烯醇醇葡萄糖（葡萄糖（Dex）羟羟丙基葡萄糖丙基葡萄糖聚乙二醇（聚乙二醇（PEG）聚乙聚乙烯烯醇醇葡萄糖葡萄糖(Dex)聚乙聚乙烯烯吡咯吡咯烷酮烷酮P为带电为带电荷聚荷聚电电解解质质硫酸葡聚糖硫酸葡聚糖钠盐钠盐羧羧甲基葡聚糖甲基葡聚糖钠盐钠盐聚丙二醇、聚乙二醇聚丙二醇、聚乙二醇甲基甲基纤维纤维素素PQ都都为为聚聚电电解解质质羧羧甲基葡聚糖甲基葡聚糖钠盐钠盐羧羧甲基甲基纤维纤维素素钠盐钠盐P为为聚合物聚合物Q为盐类为盐类聚乙二醇聚乙二醇磷酸磷酸钾钾、硫酸、硫酸铵铵、硫酸、硫酸钠钠硫酸硫酸镁镁、酒石酸、酒石酸钾钠钾钠第40页，共46页，编辑于2022年，星期日4.4.1 双水相体系双水相体系 图中把均相区与两相区分开的曲线，称为双节点曲线。如果体系总组成位于图中把均相区与两相区分开的曲线，称为双节点曲线。如果体系总组成位于双节点曲线下方的区域，两高聚物均匀溶于水中而不分相。如果体系总组成双节点曲线下方的区域，两高聚物均匀溶于水中而不分相。如果体系总组成位于双节点曲线上方的区域，体系就会形成两相。上相富集了高聚物位于双节点曲线上方的区域，体系就会形成两相。上相富集了高聚物Q Q，下相，下相富集了高聚物富集了高聚物P P。用。用A A点代表体系总组成，点代表体系总组成，B B点和点和C C点分别代表互相平衡的上相和下点分别代表互相平衡的上相和下相组成，称为节点。相组成，称为节点。A A、B B、C C三点在一条直线上，称为系线。三点在一条直线上，称为系线。第41页，共46页，编辑于2022年，星期日4.4.2 双水相中溶质分配理论双水相中溶质分配理论 溶质在双水相中的分配性质可用分配系数溶质在双水相中的分配性质可用分配系数K表示，计算方法如下：表示，计算方法如下：溶质在双水相中的分配受表面自由能、表面电荷、疏水作用及生物亲和作用溶质在双水相中的分配受表面自由能、表面电荷、疏水作用及生物亲和作用等因素的影响，其中表面自由能、表面电荷对分配行为的影响最为重要，因等因素的影响，其中表面自由能、表面电荷对分配行为的影响最为重要，因而对这两方面的理论研究也比较深入。溶质分配的理论研究对双水相萃取起而对这两方面的理论研究也比较深入。溶质分配的理论研究对双水相萃取起到指导作用，使萃取过程可通过控制相关的影响因素而得到优化。到指导作用，使萃取过程可通过控制相关的影响因素而得到优化。第42页，共46页，编辑于2022年，星期日4.4.2 双水相中溶质分配理论双水相中溶质分配理论(1)表面自由能的影响表面自由能的影响因为大分子物质的因为大分子物质的M Mr r很大，很大，的微小改变会引起分配系数的微小改变会引起分配系数K K发生很大的改变，发生很大的改变，因此利用不同的表面性质，可以达到分离大分子的目的。因此利用不同的表面性质，可以达到分离大分子的目的。溶质在双水相中分配的影响因素溶质在双水相中分配的影响因素第43页，共46页，编辑于2022年，星期日4.4.2 双水相中溶质分配理论双水相中溶质分配理论（2）表面电荷的影响）表面电荷的影响（3）疏水作用）疏水作用 两相系统中如有盐存在，会对大分子在两相间的分配系数发生改变两相系统中如有盐存在，会对大分子在两相间的分配系数发生改变 在在pH值为等电点的双水相中，蛋白质主要根据表面疏水性的差异产生值为等电点的双水相中，蛋白质主要根据表面疏水性的差异产生各自的分配平衡。各自的分配平衡。第44页，共46页，编辑于2022年，星期日4.4.3 双水相萃取的应用双水相萃取的应用n (1)产品的浓缩产品的浓缩n（2）蛋白质的提取和纯化）蛋白质的提取和纯化n（3）生物小分子的分离和纯化）生物小分子的分离和纯化n（4）中草药有效成分的提取中草药有效成分的提取n（5）生物活性物质的分析检测）生物活性物质的分析检测第45页，共46页，编辑于2022年，星期日案例案例从细胞浆液中提取蛋白质时，蛋白质均分配于上相，而细胞或细胞碎片分配于下相。在大多数从细胞浆液中提取蛋白质时，蛋白质均分配于上相，而细胞或细胞碎片分配于下相。在大多数情况下分配系数大于情况下分配系数大于3，很多杂蛋白也和细胞同时除去。实际操作中多数采用很多杂蛋白也和细胞同时除去。实际操作中多数采用PEG盐体系，盐体系，主要是因为这种体系物理特性较好易于相分离，而且价格也低。主要是因为这种体系物理特性较好易于相分离，而且价格也低。细胞浆液的加入量是一个重要参数。大量细胞或细胞碎片的存在使体系两相的粘度，细胞浆液的加入量是一个重要参数。大量细胞或细胞碎片的存在使体系两相的粘度，特别是下相的粘度大大增高，上、下相体积比降低从而影响蛋白质的收率。根据经特别是下相的粘度大大增高，上、下相体积比降低从而影响蛋白质的收率。根据经验，一般验，一般1kg1kg萃取体系中加入萃取体系中加入200200400g400g湿细胞为宜。湿细胞为宜。从细胞浆液中提取到的蛋白质还从细胞浆液中提取到的蛋白质还需要进一步纯化。通常可通过多步双水相萃取来达到纯化的目的。第一步萃取后，分布于需要进一步纯化。通常可通过多步双水相萃取来达到纯化的目的。第一步萃取后，分布于上相的蛋白质可通过加入适量的盐上相的蛋白质可通过加入适量的盐(有时也可同时加入少量的有时也可同时加入少量的PEG)PEG)进行第二次萃取。通进行第二次萃取。通常第二次萃取的目的是除去核酸和多糖，它们的亲水性强，因而易分配于盐相中，而常第二次萃取的目的是除去核酸和多糖，它们的亲水性强，因而易分配于盐相中，而蛋白质留在蛋白质留在PEGPEG相中。第三步萃取的目的是使目的蛋白分配于盐相，使其与相中。第三步萃取的目的是使目的蛋白分配于盐相，使其与PEGPEG分离，以便进分离，以便进一步纯化蛋白和回收一步纯化蛋白和回收PEGPEG并循环使用。并循环使用。第46页，共46页，编辑于2022年，星期日