叶绿体色素提取分离及理化性质.ppt

叶叶绿体色素提取体色素提取别离及理化性离及理化性质一、目的与要求一、目的与要求n n掌握叶绿素的别离、提取方法；n n了解叶绿体色素的种类、性质和功能；2021/11/142021/11/142 2二、实二、实 验验 原原 理理n n叶绿体色素？叶绿体色素？n n叶绿体色素别离原理？叶绿体色素别离原理？n n叶绿体色素性质？叶绿体色素性质？2021/11/142021/11/143 3一叶绿体色素：一叶绿体色素：叶绿素 类胡萝卜素叶绿素叶绿素叶绿素叶绿素a a叶绿素叶绿素叶绿素叶绿素b b胡萝卜素胡萝卜素胡萝卜素胡萝卜素叶黄素叶黄素叶黄素叶黄素 3:1(3:1(3:1(3:1(阳生阳生阳生阳生):1(:1(:1(:1(阴生阴生阴生阴生)2 2：1 13 3：1 12021/11/142021/11/144 4叶绿体在细胞中的分布与构造2021/11/142021/11/145 5类囊体膜的构造及功能2021/11/142021/11/146 62021/11/142021/11/147 7类胡萝卜素的构造式类胡萝卜素的构造式2021/11/142021/11/148 8二叶绿体色素别离原理？二叶绿体色素别离原理？n n色素别离的方法有多种，纸层析是最简便的一种。当溶剂有机推动剂不断从纸上流过时，由于混合物叶绿素提取液中各种成分在固定相滤纸纤维素所吸附的水分和流动相有机推动剂间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开2021/11/142021/11/149 9三叶绿体色素性质？三叶绿体色素性质？物理性质：不溶于水，易溶于有机溶剂化学性质：皂化反响，置换反响 功能：吸收光能、电子传递、光能转化少量叶绿素a2021/11/142021/11/141010叶绿素的吸收光谱叶绿素的吸收光谱叶绿素溶液叶绿素溶液叶绿素溶液叶绿素溶液2021/11/142021/11/141111叶绿素的吸收光谱叶绿素的吸收光谱2021/11/142021/11/141212叶绿素的荧光现象叶绿素的荧光现象2021/11/142021/11/141313置换反响置换反响2021/11/142021/11/141414皂化反响皂化反响:Chla Chla、Chlb Chlb 是双羧酸的酯可发生皂化反响是双羧酸的酯可发生皂化反响 一个羧基被甲基酯化一个羧基被甲基酯化 另一个羧基被叶醇基酯化另一个羧基被叶醇基酯化 COOCH3 COOCH3 COOKCOOK C32H30ON4Mg C32H30ON4Mg +2KOH+2KOH C32H30ON4Mg C32H30ON4Mg COOC20H39 COOC20H39 COOKCOOK 叶叶绿绿酸盐酸盐 +CH3OH CH3OH+C20H39OHC20H39OH 甲甲醇醇 叶叶绿绿醇醇2021/11/142021/11/141515n n新鲜的植物叶片。新鲜的植物叶片。n n80%80%乙醇、乙醇、CaCOCaCO3 3、醋酸铜结晶、无水硫酸钠、醋酸铜结晶、无水硫酸钠、1N1N盐酸。盐酸。n n量筒，新华滤纸，大试管一支，长滴管，剪刀。量筒，新华滤纸，大试管一支，长滴管，剪刀。三、材料与试剂三、材料与试剂2021/11/142021/11/141616四、操作步骤四、操作步骤提取提取提取提取 ：称取称取1g1g左右的鲜叶左右的鲜叶 研磨研磨 过滤过滤 色素提取液色素提取液2021/11/142021/11/141717层析：层析：2021/11/142021/11/141818四、操作步骤四、操作步骤 研磨提取叶绿素研磨提取叶绿素80%80%乙醇乙醇 过滤、洗研钵及残渣过滤、洗研钵及残渣 2mL2mL乙醇提取液乙醇提取液 余下的色素提取液余下的色素提取液 参加参加1N HCl 1N HCl 纸层析纸层析 荧光荧光 皂化反响皂化反响 光破坏光破坏 脱镁叶绿素脱镁叶绿素 别离色素别离色素 Cu Cu取代取代 扫描光谱扫描光谱2021/11/142021/11/141919n n荧光2021/11/142021/11/142020酮取代反响酮取代反响n n 2021/11/142021/11/142121四四.结果与分析结果与分析n n对实验现象作好详细记录，并加以解释n n请对皂化反响现象做出合理解释，而不是单单用反响方程式来表示2021/11/142021/11/142222