菊花组织培养经典.pptx

指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。一、植物组织培养的概念第2页/共14页第1页/共14页概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质植物组织培养原理：植物细胞的全能性全能性比较：受精卵生殖细胞体细胞第3页/共14页第2页/共14页1.什么叫分化？其实质是什么?2.什么叫脱（去）分化、再分化？3.愈伤组织的细胞有什么特点？4.如何控制细胞的脱分化与去分化？阅读阅读32页解决下列问题：页解决下列问题：二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程基因的选择性表达 第4页/共14页第3页/共14页二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程第5页/共14页第4页/共14页愈伤组织第6页/共14页第5页/共14页第7页/共14页第6页/共14页三、影响植物组织培养的因素：三、影响植物组织培养的因素：1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg 微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Mo、Cu、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素未开花植物的茎上部新萌生的侧枝第8页/共14页第7页/共14页3、不同植物激素使用顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素，先生长素，后细胞分裂素后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素，先细胞分裂素，后生长素后生长素 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用 分化频率提高分化频率提高 第9页/共14页第8页/共14页4、不同植物激素使用量生长素生长素/细胞分裂素比值细胞分裂素比值结果结果 比值高时比值高时 促根分化促根分化，抑芽形成抑芽形成 比值低时比值低时 促芽分化促芽分化，抑根形成抑根形成 比值适中比值适中 促进促进愈伤组织愈伤组织生长生长 第10页/共14页第9页/共14页5、pH、温度、光照（菊花组培）pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h6、灭菌消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境（原因：微生物消耗营养物质，产生毒素）第11页/共14页第10页/共14页制备MS固体培养基外植体消毒 接种 培 养栽 培四、实验操作 移 栽冲洗（洗衣粉）70%酒精无菌水冲洗0.1%氯化汞无菌水冲洗至少三次之上琼脂先调PH再灭菌菊花茎段组织培养，不加植物激素酒精灯火焰附近第12页/共14页第11页/共14页1、培养基、器械的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？第13页/共14页第12页/共14页菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、调节物质、环境条件外植体的消毒接种基本原理:细胞的全能性基本过程:脱分化愈伤组织影响因素：操作流程：配制MS固体培养基培养移栽栽培第14页/共14页第13页/共14页感谢您的观看。第14页/共14页