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    维生素分析与检验幻灯片.ppt

    • 资源ID:87524862       资源大小:1.38MB        全文页数:15页
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    维生素分析与检验幻灯片.ppt

    维生素分析与检验第1页,共15页,编辑于2022年,星期二维生素维生素又名维他命,是维持人体生命活动必需的一类有机物质,也是保持人体健康的重要活性物质第2页,共15页,编辑于2022年,星期二特点:特点:维生素均以维生素原的形式存在于食物中参与机体代谢的调节大多数的维生素必须经常通过食物中获得人体对维生素的需要量很小 重要性:重要性:当体内维生素供给不足时,能引起身体新陈代谢的障碍,造成皮肤功能的障碍。第3页,共15页,编辑于2022年,星期二分类:分类:水溶性维生素:维生素B族、维生素C、维生素PP、叶酸等 脂溶性维生素:如维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等 第4页,共15页,编辑于2022年,星期二水溶性维生素的测试分析方法水溶性维生素的测试分析方法分光光度法分子荧光法毛细管电泳法高效液相色谱法微生物法第5页,共15页,编辑于2022年,星期二高效液相色谱法高效液相色谱法色谱柱:symmetry C18(319 mm 150 mm,5m)流动相:甲醇水(含己烷磺酸钠5 mmol/L、冰醋酸1%、三乙胺013%)=2575流速:1 mL/min检测波长:275 nm进样量:10L.优点:制备样品简单 不受样品挥发度和热稳定性的限制 高效性、高选择性、分析速度快缺点:仪器复杂 价格昂贵第6页,共15页,编辑于2022年,星期二脂溶性维生素的分析和检测脂溶性维生素的分析和检测维生素维生素维生素维生素C C的检测方法的检测方法的检测方法的检测方法 2,6-二氯靛酚滴定法 2,4-二硝基苯肼法 高效液相色谱法高效液相色谱法 钼蓝比色法维生素维生素B2的检测方法的检测方法分光光度法催化动力学法荧光法色谱法第7页,共15页,编辑于2022年,星期二滴定法测滴定法测VC含量含量-2,6-二氯靛酚滴定法试剂:1%草酸,2%草酸,0.001mol/L 2,6二氯酚靛酚步骤:1.称4.0g新鲜样品加5ml 2%草酸研磨过滤到50ml容量瓶中残渣用2%草酸提取用1%草酸定容。2.吸取10ml滤液于三角瓶中用2,6二氯酚靛酚滴定,记录所用滴定液体积。3.对照:于另一容量瓶内加35ml 2%草酸用1%草酸定容,取10ml进行滴定,记录体积。第8页,共15页,编辑于2022年,星期二VC含量(含量(ug/100gFW)=100*(V1-V2)K V/W V3 式中,W:样品重 V1:滴定样品用滴定液ml数 V2:滴定对照用滴定液ml数 V3:滤液ml数 V:提取液总体积 K:1ml滴定液氧化VC毫克数第9页,共15页,编辑于2022年,星期二荧光法测荧光法测VB2VB2含量含量双水相的高效萃取作用双水相的高效萃取作用简便快速,检出限和选择性得到优化。简便快速,检出限和选择性得到优化。丙酮形成的双水相萃取荧光测定丙酮形成的双水相萃取荧光测定VB2的方法要的方法要优于由乙醇形成的双水相优于由乙醇形成的双水相第10页,共15页,编辑于2022年,星期二实验方法实验方法l l方法方法方法方法1 1:准确移取一定量的准确移取一定量的VBVB标准溶液于标准溶液于10 ml10 ml比色比色 管中,加入适量硫酸铵管中,加入适量硫酸铵 ,3 3O mlO ml丙酮或乙醇。用水稀释丙酮或乙醇。用水稀释 至刻度后振荡至刻度后振荡1.0min1.0min静置分层,移取上层清液于静置分层,移取上层清液于exexemem =444 =44452lnm52lnm处测量荧光强度,同时做空白实验。处测量荧光强度,同时做空白实验。l l方法方法方法方法2 2:准确移取适量准确移取适量VB2VB2标准溶液标准溶液(含含VB2VB2为为m4)m4)于带刻度的比色于带刻度的比色管中,加入一定量的盐及丙酮或乙醇,用水稀释至管中,加入一定量的盐及丙酮或乙醇,用水稀释至10 ml10 ml后振荡后振荡1.0min1.0min。静置分层读取上层有机相体积,在。静置分层读取上层有机相体积,在exexem=444em=44452lnm52lnm处侧量其荧光强度,确定处侧量其荧光强度,确定VBVB含量含量m2m2,用式,用式,用式,用式E=m1E=m1m2m2计算有机相对计算有机相对计算有机相对计算有机相对VBVB的萃取率的萃取率的萃取率的萃取率E E。第11页,共15页,编辑于2022年,星期二植物维生素提取以蒲菜为例维生素维生素C的提取的提取称取蒲菜1520 g加4%偏磷酸25mL进行匀浆,匀浆后用2%偏磷酸定容至100mL,过滤,滤液进行维生素C含量的测定.盐酸硫胺、核黄素(维生素盐酸硫胺、核黄素(维生素B2)、盐酸吡哆辛、烟酸、烟、盐酸吡哆辛、烟酸、烟酰胺的提取酰胺的提取称取蒲菜1520 g,加入75mL 011mol/LHCl于121加压水解提取30min,冷却后定容至100mL,过滤,滤液进行除维生素C以外的其它水溶性维生素含量的测定.第12页,共15页,编辑于2022年,星期二 可见近红外漫反射光谱无损检测南方蜜橘维生素可见近红外漫反射光谱无损检测南方蜜橘维生素C的研究的研究的研究的研究原理原理原理原理:利用光在生物组织内部具有反射、折射、衍射和吸收等特性来确定固体样品内部品质的一种快速分析法,在水果内外部品质无损检测中已得到广泛应用。对粉末及水果VC的检测也有相关报道。的检测也有相关报道。缺点缺点缺点缺点:需要化学处理,分析速度慢。第13页,共15页,编辑于2022年,星期二实验仪器及参数设置实验仪器及参数设置实验仪器及参数设置实验仪器及参数设置选用美国选用美国选用美国选用美国ASDASD公司的公司的公司的公司的QualitySpecQualitySpec光谱仪,其波长范围为光谱仪,其波长范围为光谱仪,其波长范围为光谱仪,其波长范围为350-1800nm350-1800nm,光谱采样间隔,光谱采样间隔,光谱采样间隔,光谱采样间隔1nm1nm,扫描时间每次,扫描时间每次,扫描时间每次,扫描时间每次100ms100ms,扫描,扫描,扫描,扫描1010次,光源为次,光源为次,光源为次,光源为12V/45 W12V/45 W钨卤灯。钨卤灯。钨卤灯。钨卤灯。5050个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择,确定个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择,确定个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择,确定个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择,确定4040个建模样品进个建模样品进个建模样品进个建模样品进行定标与验证,行定标与验证,行定标与验证,行定标与验证,1010个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参照食品卫生检验方法理化部分总则照食品卫生检验方法理化部分总则照食品卫生检验方法理化部分总则照食品卫生检验方法理化部分总则(GB/T5009.1-2003),(GB/T5009.1-2003),常规化学常规化学常规化学常规化学分析采用国家标准发中的分析采用国家标准发中的分析采用国家标准发中的分析采用国家标准发中的2.6-2.6-二氯靛酚滴定法(二氯靛酚滴定法(二氯靛酚滴定法(二氯靛酚滴定法(GB/T6195-86)GB/T6195-86)。实验采用漫反射方式,每个样品在赤道部位灯间隔采集实验采用漫反射方式,每个样品在赤道部位灯间隔采集实验采用漫反射方式,每个样品在赤道部位灯间隔采集实验采用漫反射方式,每个样品在赤道部位灯间隔采集3 3次光次光次光次光谱,取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位谱,取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位谱,取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位谱,取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位光谱数据由美国光谱数据由美国光谱数据由美国光谱数据由美国ASDASD公司的公司的公司的公司的indico V4.0indico V4.0软件进行采集和转软件进行采集和转软件进行采集和转软件进行采集和转换,采用平滑,多元散射校正和标准换,采用平滑,多元散射校正和标准换,采用平滑,多元散射校正和标准换,采用平滑,多元散射校正和标准3 3化对光谱数据进行预化对光谱数据进行预化对光谱数据进行预化对光谱数据进行预处理,以减少噪声,样品粒度和光程变化对光谱产生影响。处理,以减少噪声,样品粒度和光程变化对光谱产生影响。处理,以减少噪声,样品粒度和光程变化对光谱产生影响。处理,以减少噪声,样品粒度和光程变化对光谱产生影响。数据分析由挪威数据分析由挪威数据分析由挪威数据分析由挪威CAMOCAMO公司的公司的公司的公司的UnscramblerV9.5UnscramblerV9.5软件中的软件中的软件中的软件中的PLSPLS完成完成完成完成第14页,共15页,编辑于2022年,星期二 谢谢第15页,共15页,编辑于2022年,星期二

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