实验四果蝇唾腺染色体的观察幻灯片.ppt

实验四果蝇唾腺染色体的观察实验四果蝇唾腺染色体的观察第1页，共16页，编辑于2022年，星期五实验目的实验目的练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。腺染色体标本的方法。观察果蝇唾腺染色体的结构特点。观察果蝇唾腺染色体的结构特点。第2页，共16页，编辑于2022年，星期五实验原理实验原理n发现发现 18811881年，意大利年，意大利BalbianiBalbiani在双翅目昆在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了巨大的巨大的“永久性染色质纽永久性染色质纽”。19301930年前后，研究表明，年前后，研究表明，“染色质纽染色质纽”实质上是特殊的染色体。实质上是特殊的染色体。后来，其他学者又在果蝇和其它双翅后来，其他学者又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。巨大染色体。第3页，共16页，编辑于2022年，星期五n形成原因形成原因染色体螺旋化程度不高。染色体螺旋化程度不高。核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育过程中，细胞核内的过程中，细胞核内的DNADNA多次复制，但细多次复制，但细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体DNADNA也不分开（核内复制），形成了多线也不分开（核内复制），形成了多线染色体。染色体。体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈现一种联会状态，使其比一般的体细胞现一种联会状态，使其比一般的体细胞染色体粗大。染色体粗大。第4页，共16页，编辑于2022年，星期五n特点特点n n巨大；巨大；n n体联会现象决定了染色体看起来只有半体联会现象决定了染色体看起来只有半数；数；n n各个染色体中异染色质多的着丝粒部分各个染色体中异染色质多的着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；相互靠拢形成染色中心；n n横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自对应排列，具有种的特异性。对应排列，具有种的特异性。n n若有缺失、易位、倒位、重复等现象，若有缺失、易位、倒位、重复等现象，很容易在唾腺染色体上识别出来。很容易在唾腺染色体上识别出来。第5页，共16页，编辑于2022年，星期五实验材料与药品实验材料与药品n n果蝇三龄幼虫果蝇三龄幼虫n n0.8%生理盐水生理盐水n n0.2mol/LHCln n蒸馏水蒸馏水n n苯酚品红苯酚品红第6页，共16页，编辑于2022年，星期五实验方法实验方法n n三龄幼虫的饲养三龄幼虫的饲养三龄幼虫的饲养三龄幼虫的饲养；n n剥取唾液腺剥取唾液腺剥取唾液腺剥取唾液腺 在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端1/31/31/31/3处，右手的处，右手的处，右手的处，右手的解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，唾腺随之而出，丢弃杂质。唾腺随之而出，丢弃杂质。唾腺随之而出，丢弃杂质。唾腺随之而出，丢弃杂质。n n解离和染色解离和染色解离和染色解离和染色：取解剖好的唾腺于载片上，加：取解剖好的唾腺于载片上，加：取解剖好的唾腺于载片上，加：取解剖好的唾腺于载片上，加1-21-21-21-2滴蒸馏滴蒸馏滴蒸馏滴蒸馏水，使之成为低渗溶液，处理水，使之成为低渗溶液，处理水，使之成为低渗溶液，处理水，使之成为低渗溶液，处理8-108-108-108-10分钟，再经分钟，再经分钟，再经分钟，再经1mol/L HCl1mol/L HCl1mol/L HCl1mol/L HCl解离解离解离解离1-2min1-2min1-2min1-2min后，只需要用解剖针轻轻拨动，脂肪等杂质后，只需要用解剖针轻轻拨动，脂肪等杂质后，只需要用解剖针轻轻拨动，脂肪等杂质后，只需要用解剖针轻轻拨动，脂肪等杂质便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去酸液，用碱性品红染便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去酸液，用碱性品红染便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去酸液，用碱性品红染便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去酸液，用碱性品红染色色色色10101010分钟（或醋酸洋红染色分钟（或醋酸洋红染色分钟（或醋酸洋红染色分钟（或醋酸洋红染色15151515分钟或龙胆紫染色分钟或龙胆紫染色分钟或龙胆紫染色分钟或龙胆紫染色1 1 1 1分钟）分钟）分钟）分钟）左右。左右。左右。左右。n n揉片及观察揉片及观察揉片及观察揉片及观察第7页，共16页，编辑于2022年，星期五幼虫培养的注意事项幼虫培养的注意事项n n培养基要较稀且富含营养培养基要较稀且富含营养n n追加酵母追加酵母n n幼虫密度要小幼虫密度要小n n低温培养低温培养第8页，共16页，编辑于2022年，星期五唾液腺唾液腺n n位置：在幼虫体前约位置：在幼虫体前约1/3处。处。n n形状：形如一对香蕉，上小下形状：形如一对香蕉，上小下大。一边常附着带状的不透明大。一边常附着带状的不透明的脂肪。的脂肪。n n颜色：半透明如玻璃，略带白颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围的组织都透明。色，比周围的组织都透明。第9页，共16页，编辑于2022年，星期五第10页，共16页，编辑于2022年，星期五实验作业实验作业1、绘制你所观察到的果蝇唾腺、绘制你所观察到的果蝇唾腺 染色体。染色体。2、剥离果蝇唾液腺时应该、剥离果蝇唾液腺时应该 注意的注意的 问题？问题？第11页，共16页，编辑于2022年，星期五第12页，共16页，编辑于2022年，星期五果蝇唾腺染色体果蝇唾腺染色体第13页，共16页，编辑于2022年，星期五果蝇各染色体臂的形态果蝇各染色体臂的形态第14页，共16页，编辑于2022年，星期五各臂的末端模式图各臂的末端模式图第15页，共16页，编辑于2022年，星期五注意事项注意事项n n一定要加生理盐水，否则唾腺易干；一定要加生理盐水，否则唾腺易干；n n水不可过多，否则幼虫易漂起来并且活水不可过多，否则幼虫易漂起来并且活跃，影响剥离；跃，影响剥离；n n剥离时要去干净脂肪；剥离时要去干净脂肪；n n染色时间不可过长，否则背景着色；染色时间不可过长，否则背景着色；n n压片前先轻敲，使之分散，压片时朝一压片前先轻敲，使之分散，压片时朝一个方向揉片。个方向揉片。第16页，共16页，编辑于2022年，星期五