显微摄影与暗室技术.pptx

会计学1显微摄影与暗室技术显微摄影与暗室技术显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术 1 1工作前的准备工作前的准备(1)(1)光路系统的清洁光路系统的清洁 显显微微摄摄影影必必须须保保证证光光路路系系统统的的清清洁洁，任任何何光光学学部部件件有有了了污污垢垢及及灰灰尘尘，均均会会影影响响照照片片的的质质量量。各各部部件件在在擦拭时，只能清理表面，而不应任意拆卸。擦拭时，只能清理表面，而不应任意拆卸。(2)(2)光轴中心的调整光轴中心的调整 显显微微摄摄影影时时光光轴轴中中心心的的调调整整是是绝绝对对不不可可忽忽视视的的，否否则拍出的图象，各部分的感光不匀。则拍出的图象，各部分的感光不匀。(3)(3)其它准备工作其它准备工作 用用观观察察目目镜镜观观察察，先先调调好好两两眼眼的的瞳瞳距距，使使两两个个视视场场的的象象合合二二为为一一，再再调调节节好好两两眼眼的的屈屈光光度度以以适适应应观观察者的视力。察者的视力。第1页/共10页显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术 2 2 视视场光阑与孔径光阑的应用场光阑与孔径光阑的应用 在在观观察察时时根根据据物物镜镜的的倍倍率率不不同同视视场场光光阑阑开开大大或或缩缩小小而而给给予予相相应应的的光光束束面面积积，以以达达到到镜镜检检的的优优良良效效果果。在在显显微微摄摄影影时时它它起起着着增增加加和和减减弱弱影影象象反反差差的的作作用用。当当视视场场光光阑阑开开大大到到一一定定程程度度时时，照照射射到到被被摄摄物物体体上上的的光光，即即会会产产生生反反射射与与不不规规则则的的散散射射，造造成成影影象象反反差差的的损损失失；当当视视场场光光阑阑收收缩缩到到取取景景框框边边缘缘的的外外方方时时，图图象象的的反反差差就就得得到到改改善善；视视场场光光阑阑过过度度的的收收缩缩接接近近取取景景框框，则则图图象象的的四四角角部部分分将将被被切切去去。因因此此，在在显显微微摄摄影影时时，视视场场光光阑阑的的应应用用是是重重要要的的一一个个因因素素，应应开开启启到到比比取取景景框框稍稍大的位置。大的位置。第2页/共10页显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术 3 3 屈光度调节与调焦屈光度调节与调焦 利利用用取取景景侧侧目目镜镜（聚聚焦焦望望远远镜镜）或或取取景景目目镜镜，首首先先进进行行屈屈光光度度的的校校正正，旋旋转转取取景景侧侧目目镜镜或或取取景景目目镜镜上上的的视视度度圈圈，使使取取景景框框中中的的双双十十字字线线达达到到最最清清晰晰的的程程度度。调调节节此此圈圈可可改改变变透透镜镜间间距距，从从而而改改变变其其焦焦距距，可可以以补补偿偿不不同同人人眼眼视视力力的的差差别别。每每个个人人在在使使用用前前都都需需调调节节，应应用用同同一一只只眼眼睛睛调调节节，不不然然两两眼眼之之间间也也会会存存在在屈屈光光度度的差异。的差异。屈屈光光度度调调节节完完成成后后即即可可进进行行调调焦焦，调调焦焦时时用用取取景景目目镜镜观观察察，将将所所要要拍拍摄摄的的部部分分移移到到取取景景框框中中，然然后后按按显显微微镜镜的的使使用用方方法法将将显显微微镜镜调调到到最最佳佳工工作作状状态态，使使视视野图像清晰，便可进行曝光。野图像清晰，便可进行曝光。第3页/共10页显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术显微摄影技术 4 4光的补偿光的补偿 拍拍摄摄显显微微照照片片时时，根根据据被被摄摄物物体体组组织织结结构构所所占占帧帧幅幅面面积积的的百百分分比比需需要要调调节节曝曝光光补补偿偿。在在明明场场情情况况下下，如如果果组组织织结结构构的的各各部部分分在在帧帧幅幅内内均均匀匀分分布布，这这样样不不论论是是平平均均测测光光还还是是点点测测光光，都都不不需需要要曝曝光光补补偿偿；若若被被摄摄物物体体所所占占的的面面积积小小或或分分散散，则则需需要要进进行行曝曝光光补补偿偿，加加长长一一些些曝曝光光时时间间，否否则则被被摄摄物物体体的的曝曝光光不不够够。反反之之，在在暗暗场场情情况况下下，物物象象是是明明亮亮的的，在在曝曝光光的的补补偿偿上上就就需需要要减减少少一一些些曝曝光时间。光时间。第4页/共10页显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤 1.1.拍摄前准备拍摄前准备（1 1）光路合轴）光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。使光轴与光束处于同一轴线上。（2 2）柯勒氏照明）柯勒氏照明 使观察的视野获得均匀而又充分的使观察的视野获得均匀而又充分的照明；防止杂散光对照相系统产生影响；使被摄物照明；防止杂散光对照相系统产生影响；使被摄物体不受热，影象清晰。体不受热，影象清晰。（3 3）物镜与目镜合理组合）物镜与目镜合理组合 依标本的不同和显微摄影依标本的不同和显微摄影要求，物镜与目镜的组合有一定规范。要求，物镜与目镜的组合有一定规范。（4 4）调整视场光阑和孔径光阑）调整视场光阑和孔径光阑 使两者与所用物镜的使两者与所用物镜的数值孔径相等，所得的分辨力最高；视场光阑一旦数值孔径相等，所得的分辨力最高；视场光阑一旦调好，不要再动，而孔径光阑可随物镜数值孔径的调好，不要再动，而孔径光阑可随物镜数值孔径的更换，做相应的调整。更换，做相应的调整。第5页/共10页显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤显微摄影操作步骤 2.2.拍摄程序拍摄程序 （1 1）开启相机后盖，安装胶卷于照相机内。）开启相机后盖，安装胶卷于照相机内。（2 2）打开显微镜照明装置的电源开关，将亮度调至适）打开显微镜照明装置的电源开关，将亮度调至适当。当。（3 3）依个人的视力，调整摄影目镜视度圈至双）依个人的视力，调整摄影目镜视度圈至双“十十”字线清晰。字线清晰。（4 4）放一片需要拍摄的标本载玻片于载物台上。在低）放一片需要拍摄的标本载玻片于载物台上。在低倍镜下选好要拍摄的核型或细胞结构，再转换到高倍倍镜下选好要拍摄的核型或细胞结构，再转换到高倍镜下，聚焦标本细节，准备拍照。镜下，聚焦标本细节，准备拍照。（5 5）按下曝光按钮，曝光按钮亮表示曝光开始进行，）按下曝光按钮，曝光按钮亮表示曝光开始进行，熄灭表示曝光完毕。熄灭表示曝光完毕。（6 6）拍摄记录。）拍摄记录。第6页/共10页暗室技术暗室技术暗室技术暗室技术 感光胶片在拍摄完毕后，需尽快在暗室中感光胶片在拍摄完毕后，需尽快在暗室中冲洗和晒印，其基本原理是显影液使胶片已感冲洗和晒印，其基本原理是显影液使胶片已感光的银盐潜影还原为可见的金属银影像；定影光的银盐潜影还原为可见的金属银影像；定影液把未被还原的卤化银溶去，晾干是便于胶片液把未被还原的卤化银溶去，晾干是便于胶片和相纸保存。和相纸保存。第7页/共10页暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤 1.1.胶片的冲洗胶片的冲洗 (1)(1)在全暗室中把胶片缠入显影罐，先用清水冲洗在全暗室中把胶片缠入显影罐，先用清水冲洗1 12 2分钟，排除气泡，然后再把水倒掉。分钟，排除气泡，然后再把水倒掉。(2)(2)从顶部罐口注入预先配好的约从顶部罐口注入预先配好的约250ml D-72250ml D-72显影液。显影液。2020显影显影4 46 6分钟。显影中轻轻摇动显影罐，使胶分钟。显影中轻轻摇动显影罐，使胶片表面充分受显影液作用，显影完毕，迅速倒出显片表面充分受显影液作用，显影完毕，迅速倒出显影液。影液。(3)(3)水洗水洗1 1分钟左右，加入分钟左右，加入250ml250ml的的F-5F-5定影液，定影液，2020定定影影1515分钟。取出胶片流水冲洗分钟。取出胶片流水冲洗1515分钟以上。分钟以上。(4)(4)将胶片挂起，用脱脂棉轻轻吸掉胶片表面过多的将胶片挂起，用脱脂棉轻轻吸掉胶片表面过多的积水，晾干。积水，晾干。第8页/共10页暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤暗室技术操作步骤 2.2.底片的扩印底片的扩印 (1)(1)胶片晾干后，用放大机的胶片夹子夹住胶片，药膜胶片晾干后，用放大机的胶片夹子夹住胶片，药膜面朝下，聚焦取景，然后在红灯条件下，用压纸板面朝下，聚焦取景，然后在红灯条件下，用压纸板压住所需号放大像纸，药膜面向上，进行曝光。压住所需号放大像纸，药膜面向上，进行曝光。(2)(2)曝光后的像纸，浸入曝光后的像纸，浸入D-72D-72显影液中，然后不时用竹显影液中，然后不时用竹镊子夹住像纸翻动，直到显影适度为止。镊子夹住像纸翻动，直到显影适度为止。(3)(3)用水漂洗用水漂洗10102020秒，再浸入秒，再浸入F-5F-5定影液中处理定影液中处理1515分钟，分钟，取出在流水中冲洗取出在流水中冲洗6060分钟左右。分钟左右。(4)(4)放在电热上光机上烘干；裁边，装入有说明的纸袋放在电热上光机上烘干；裁边，装入有说明的纸袋内保存。内保存。第9页/共10页