工作汇报10.ppt

2011年7月工作汇报汇报人：徐亮汇报内容1、本月的工作2、工作进展3、下一步计划观察白及的生物学特性观察白及的生物学特性1、观察、测量项目：茎粗、株高、叶长叶宽、叶片 数目、有无花蕾或果实、叶片干枯缺损等；2、测量工具：直尺、游标卡尺、记录纸；3、操作：随机抽取40株，按1所列项目进行观察、测量，并对数据及叶片干枯缺损等现象记录在 案；4、以上操作，每隔十天进行一次，最后对其数据进 行统计分析。转接白及1、将灭菌后培养基置单人净化工作台内紫外照射15min，然后将橱窗打开部分，关掉紫外，打开照明和风扇；2、将有白及幼苗的培养基放入单人净化工作台，然后对手进行消毒（用75%的酒精喷洒，搓匀）后进入工作台，然后用75%酒精浸泡过的棉花对装酒精的试剂瓶、培养皿、酒精灯及工作台擦拭消毒，点燃酒精灯，接种用镊子用95%酒精浸泡（或擦拭）并于酒精灯火焰上灼烧约23次。3、转接白及，去掉（清理）老根老茎，分接密集的幼苗；4、将转接完毕的白及用封口膜封口，放入培养室培养。注意：（1）手每次进入工作台都必须用75%酒精进行消毒；（2）每次转接时均需对镊子进行消毒，镊子从一个培养基到另一 个培养基亦须消毒等。培养基的配制 B5（5L取量：大量元素200mL、微量元素50mL、铁盐50mL、有机物50mL）+NAA 25mL+琼脂50g+蔗糖200g+活性炭0.25g 加蒸馏水定容至5000mL 加热至沸腾灌装于干洁的培养瓶中（每瓶约50mL）封口，扎紧灭菌锅内灭菌（121、25min）冷却后取出，备用。白及的播种1、果实的消毒、清洗：将其放入锥形瓶中，加75%乙醇（以刚好没过果实为宜）振摇润洗1min，倾出乙醇，加蒸馏水清洗78次，倾去蒸馏水；加升汞适量，间歇振摇润洗8min，倾去升汞，再用蒸馏水洗78次倾去蒸馏水，沥干水分；将上述处理后的果实移入垫有滤纸的培养皿中，加盖，使其吸干表面水分。2、待果实表面水分吸干后，用镊子夹住，用解剖刀将果实一端切一小口。3、将种子播入新培养基中，封口，编号，标注日期后，于培养室内培养，观察。注意：（1）以上操作均在单人净化工作台中无菌操作；（2）试剂瓶、培养皿、酒精灯、镊子、解剖刀、手等的消毒要求同接种；（3）使用升汞时应该戴上橡胶手套，废液应倒入厕所，防止中毒；（4）使用升汞消毒时，应将锥形瓶用封口后再进行振摇，播种后此封口膜应弃去。半夏的薄层鉴别（预试验）1、按中国药典2010版半夏项下鉴别（2）进行试验 取本品粉末1g加甲醇10ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥至0.5ml,作为供试品溶液，另取精氨酸对照品、丙氨酸对照品、亮氨酸对照品、缬氨酸对照品、亮氨酸对照品，加70%甲醇制成每1ml各含1 mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录VIB）试验。吸取供试品溶液5l、对照品溶液1l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（8：3：1）为展开剂，展开，吸取，晾干，喷以茚三酮试液，在105加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2、药典规定的供试品制备方法（纯甲醇回流提取，浓缩）超声提取（不浓缩）超声提取（浓缩）3、展开剂（正丁醇-冰醋酸-水）比例 8:3:1 8:3:2 8:4:24、纯甲醇（99.5%）回流提取，浓缩；70%甲醇回流提取，浓缩；50%甲醇回流提取，浓缩；5、室温下展开 冰箱中展开（-20）6、展开剂（正丁醇-冰醋酸-水 4:1:5 上层）7、不同点样量，第4的供试品 点4次 点3次 点2次 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4点样量4次点样量3次点样量2次1对照品溶液 2纯甲醇回流提取供试品溶液370%甲醇回流提取供试品溶液 450%甲醇回流提取供试品溶液下一步工作计划 由前期试验可知，供试品溶液的制备仍用药典规定的方法（99.5%甲醇回流提取），点样量以点两次为宜，展开剂：正丁醇-冰醋酸-水的比例暂定4:1:5 上层（待进一步确定）。预用市售机制板展开，同自制板进行比较，并用不同比例展开剂 8:3:1(药典)和4:1:5(上层)展开比较，进而确定半夏薄层鉴别用硅胶G板和展开剂的比例对照品溶液点样1次，供试品溶液点样2次 谢谢 谢！谢！