spe检测酚类.ppt
SPESPE技术在环境监测中的应用技术在环境监测中的应用 固相萃取-高效液相色谱法检测水中的酚类物质酚类化合物广泛存在于环境中，是造成环境污染的重要工业化学品，我国饮用水卫生标准规定挥发酚的质量浓度0.002mgL传统的气相色谱法和高效液相色谱法测定时需要溶剂富集，操作繁琐且误差大，而固相萃取技术可实现水中痕量酚类物质的高倍富集与分离。今采用固相萃取-高效液相色谱法同时测定饮用水中14种酚类化合物，结果令人满意。前言（一）主要仪器与试剂（一）主要仪器与试剂Agilent 1200型高效液相色谱仪，配DAD检测器(美国Agilent仪器有限公司)；ENVI一18型固相萃取柱(500 mg)(美国SUPELCO公司);2 000 mgL酚类化合物标准储备液;乙腈、异丙醇、甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷，磷酸、盐酸，超纯水.一、材料与方法一、材料与方法（二）样品前处理取1 000 mL水样，用6 molL盐酸溶液调节pH值为2035，再用乙酸乙酯二氯甲烷混合溶剂(体积比为1：1)以10 mLmin的流量过萃取柱。1.活化：反相固相萃取柱(萃取柱使用前分别用甲醇和超纯水活化)。2.上样：将水样以5 mLmin10 mLmin的流量过固相 萃取柱富集浓缩。3.淋洗：装样完毕，用10 mL乙酸乙酯淋洗，以净化样品。4.洗脱：待固相萃取柱吹干后，用10 mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液5.浓缩：用旋转蒸发仪浓缩至10 mL进行色谱分析。（三）色谱条件色谱柱色谱柱:SB-C18(46 mm 150 mm 50 lxm)；柱温柱温:30；波长波长:287 nm；流动相组成：流动相组成：A为乙腈，B为001 molL磷酸溶液，按(20 A+80 B)75 min，(45 A+55 B)95 min，(80 A+20 B)15 min梯度设置；流动相流量流动相流量:10 mLmin；进样体积进样体积:20 uL。（四）标准曲线的绘制在室温下，用异丙醇将酚类化合物标准储备液逐级稀释成0mgL、100mgL、160mgL、200mgL、300mgL、400mgL标准溶液系列，在上述色谱条件下分析，以峰面积为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制工作曲线。（一）色谱条件的选择用乙腈和水作流动相，14种酚类化合物不能很好分离，而且峰拖尾严重，这是由于酚羟基易产生电离，在固定相表面有双重保留机制。改用乙腈和0.01molL磷酸溶液作流动相，可抑制酚的电离，成为中性分子在反相条件下的疏水缔合物，使分离效果和峰形得到改善。只有在梯度条件下，才能使14种酚类化合物达到基线分离。按试验中的梯度条件设置，分离效果最佳。波长为287nm时，峰的分离效果最好。该试验选择287nm为检测波长。二、结果与讨论水样的组成十分复杂，除了酚类化合物外，还含有大量在紫外光区有吸收的其他物质，如芳胺、芳烃、多环芳烃等，这些物质可能会与酚类化合物出峰时间相同，干扰测定。水样中的酚类化合物需分离和富集后才能测定，但酚类化合物与其他有机物难以预分离。根据酚类物质在弱酸性条件下以中性分子形态存在、疏水性强、在反相柱上有保留的特点，在富集时将水样pH值调节至2035。尝试用不同的洗脱剂(乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷)洗脱小柱上的酚类化合物，发现用10mL乙酸乙酯和二氯甲烷能完全洗脱。（二）固相萃取条件优化（三）方法的精密度和回收率（三）方法的精密度和回收率在选定的色谱条件下对水样进行测定,同时进行添加回收实验.取7份水样各1000mL，用6 molL盐酸溶液调节pH值为2035，6份用该方法平行测定，1份加标10.0m/ug，计算回收率。加标回收率=(加标试样测定值试样测定值)加标量100%.小结：酚类化合物是造成环境污染的重要工业化学品,不但有毒,而且它可使水带有讨厌的气味和颜色,因而水中酚类物质测定具有重要意义。本实验采用固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水中14种酚类化合物，通过对样品预处理、仪器最佳色谱检出条件等实验，发现该方法操作简便，灵敏度高，精密度与准确度好，可以适用于饮用水中的酚类物质的检测，从而为建立快速灵敏的测定水中的酚类物质奠定了实验和理论基础。个人体会：通过对SPE检测水中的酚类物质实验的学习，对固相萃取技术有了更加深刻的认识，对其萃取的原理也有了直观的感受，也进一步了解了固相萃取活化、上样、淋洗、洗脱的四个步骤。个人觉得固相萃取技术操作简单，对被测物质的萃取彻底，样品收集方便，实验的精密度和灵敏度高，适合环境中微量物质的提取分析。发展前景：固相萃取技术与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。固相萃取预处理方法在医药、食品、环境、商检、化工等领域将会有良好的应用与发展。参考文献：l史坚固相萃取高效液相色谱法测定废水中苯酚和间甲酚J环境监测管理与技术，2000，12(6)：3536l张丽，李楠，万延延固相萃取一高效液相色谱法测定饮用水中酚类化合物，连云港市环境监测中心站，江苏 连云港222001 l胡秋芬，杨光宇，黄章杰，等固相萃取一高效液相色谱法测定水中酚类物质J分析化学，2002，30(5)：560563l张呖，管春梅，陈文华，等高效液相色谱法测定水中酚类化合物J中国卫生检验杂志，2003，15(4)：196197l王浩，刘艳琴，曹红，杨红梅，刘小力，闫龙宝 固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺国家食品安全监督检验中心,北京100083l薛风丽，李岩，杨瑞强，等SPMEHPLC法测定水中的酚类化合物J中国给水排水，2006，22(16)：8183The End!Thanks!
