大孔吸附树脂吸附纯化甘草酸的工艺研究.ppt

制药1205 鞠鸣甘草主要成分甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)可以消炎解毒、防治病毒性肝炎和高血脂症,此外对癌症、艾滋病也有显著疗效.本试验探讨了几种大孔吸附树脂对甘草酸粗品的纯化效果，确定了甘草酸纯化的工艺参数。1.1 材料与设备 甘草；大孔吸附树脂（CAD-40、DM-130、860021）；紫外可见分光光度计，电脑紫外检测仪；真空冷冻干燥机；高速冷冻离心机；酸度计 甘草粉碎浸提减压蒸馏酸沉离心、水洗甘草酸粗品萃取、脱色树脂吸附洗脱真空干燥产品1.3.1 原料预处理 将甘草切片烘干粉碎过 40 目筛，称取一定量甘草粉末，加提取溶剂进行超声或微波处理，再连续回流、离心、抽滤得甘草酸提取液，将提取液减压浓缩至一定体积，加浓盐酸调 pH23，静置 12 h 后离心，沉淀水洗 3 次，真空冷冻干燥得甘草酸粗品。再将甘草酸粗品用 70%乙醇溶解、脱色、过滤，配成一定浓度的甘草酸溶液，作为上柱液。准确称取预处理后 5 g(湿基)的 CAD-40、DM-130、860021 吸附剂于 100 mL 锥形瓶中，分别加入准确量取的 50 mL 甘草酸粗提物。在 20、105 r/min 的恒温水浴振荡器中振荡，每隔 1 h 测定滤液中残余甘草酸浓度，计算各种吸附剂对甘草酸的饱和吸附量 1.3.3.1 径高比试验 配制一定浓度的甘草酸粗提物，在加样量相同的情况下，改变层析柱（230 cm）不同高度进行动态吸附，每流出 3 mL 流出液测定甘草酸 1 次，以流出液体积（mL）为横坐标，吸光度（OD）为纵坐标，确定最佳径高比配制浓度为 7.0 mg/mL 的甘草酸粗提物，以1.0 mL/min 的吸附流速通过树脂柱，测定流出液中甘草酸的吸光度，根据泄漏点来确定加样量 准确量取 2.5 BV 体积的液体上柱，使液面高于树脂界面 3 cm 左右，以一定流速洗脱。测量流出液的吸光度值，当吸光度达到甘草酸粗提物的 1/10 时，停止上柱，此时作为吸附泄漏点。可以认为 CAD-40 对甘草酸的吸附达到饱和，再用 2 BV3 BV 的中性或弱碱性水洗，洗脱速度控制在 0.8 mL/min，用不同浓度的乙醇作为洗脱液，收集洗脱液并测定洗脱液的吸光度，确定最佳的解吸剂浓度 配制一定浓度的甘草酸粗提物，在加样量相同的情况下，选用不同的解吸流速进行洗脱，考察解吸流速对甘草酸洗脱率的影响。可见，CAD-40 树脂的洗脱率最高，其吸附量也最大；因此，选用 CAD-40 树脂为纯化甘草酸的树脂。分析原因，主要是因为：甘草酸为大分子，孔径较大的树脂有利于其吸附；洗脱率的大小主要取决于吸附剂与吸附质的作用力，甘草酸具有多酚结构和糖甙链，具有一定极性和亲水性，DM-130 和 860021 树脂是弱极性树脂，吸附力强，所以洗脱率偏低，CAD-40 树脂是非极性树脂，洗脱率较高。所以选择 CAD-40 树脂来纯化甘草酸2.2.1 径高比对 CAD-40 树脂吸附效果的影响 可见，树脂装柱太高、太低都对洗脱不利，考虑到工作效率，选用径高比为 110 来纯化甘草酸。可见，当上样量达到 5.0 mL 时，即吸附达到饱和。可见，随着乙醇浓度的减小，洗脱峰的峰值也随之下降，拖尾现象也比较明显。因此，选用 95%乙醇洗脱，可达到纯化甘草酸的目的 可见，根据洗脱曲线的对称性可以看出，流速为1.0 mL/min 时，洗脱效果较好，拖尾现象也不太明显。考虑到工作效率和吸附效果，选用 1.0 mL/min 为洗脱流速 1）根据静态试验结果，选出分离纯化甘草酸的最佳树脂分别是 CAD-40，其吸附率是 90.91%，此时用95%乙醇解吸，解吸率可达 88.53%2）CAD-40 大孔吸附树脂对甘草酸吸附最佳工作条件为：层析柱 230 cm，上柱液浓度 7.0 mg/mL、加样量 5.0 mL、装柱径高比 110、然后用水洗去糖等杂质，再用 95乙醇作为解吸剂、解吸流速为 1.0mL/min、乙醇体积 150 mL。得到的产品为浅黄色粉末，纯度为53.3%