第九章消化感染菌.ppt

第九章第九章 消化道感染消化道感染细菌细菌n粪粪口途径口途径传播的细菌传播的细菌包括：包括：n在胃肠道增殖在胃肠道增殖n引起胃肠道症状的致病菌引起胃肠道症状的致病菌n在肠道内共生在肠道内共生n引起肠外感染的正常菌群引起肠外感染的正常菌群消化道感染细菌的消化道感染细菌的种类种类n1.1.肠杆菌科的细菌肠杆菌科的细菌n2.2.幽门螺杆菌幽门螺杆菌n3.3.弧菌属霍乱弧菌、副溶血性弧菌弧菌属霍乱弧菌、副溶血性弧菌n4.4.弯曲菌属空肠弯曲菌弯曲菌属空肠弯曲菌n肠杆菌科肠杆菌科共共1414个属，个属，对人有致病的主要是：对人有致病的主要是：n埃希氏菌属埃希氏菌属n志贺氏菌属志贺氏菌属n沙门氏菌属沙门氏菌属 肠杆菌科细菌共同的生物学特征肠杆菌科细菌共同的生物学特征1.1.形态：中等大小（形态：中等大小（1 16 6m m）,G,G杆菌杆菌 （形态学（形态学-均一性均一性）2.2.生化反应：非致病菌发酵乳糖，致病菌不发酵乳糖生化反应：非致病菌发酵乳糖，致病菌不发酵乳糖 （生化反应（生化反应特殊性特殊性）3.3.抗原结构：有抗原结构：有O O、H H、vivi、K K 抗原、菌毛抗原抗原、菌毛抗原 （抗原结构抗原结构-复杂性复杂性与可变异性）与可变异性）4.4.抵抗力：抵抗力：弱弱，6030 min6030 min死亡，对死亡，对氯氯等消毒剂敏感等消毒剂敏感 有些菌对胆盐、煌绿抵抗力有些菌对胆盐、煌绿抵抗力强强,-,-制备制备 选择选择/鉴别鉴别培养基培养基-分离鉴定细菌分离鉴定细菌 （抵抗力（抵抗力可鉴别性可鉴别性）5.5.变异：肠道微环境变异：肠道微环境密切接触密切接触-容易发生基因转移，容易发生基因转移，（变异株变异株-多样性多样性)第一节第一节埃希菌属埃希菌属 Escherichia-共5个种，其中最常见是：大肠大肠埃希菌埃希菌 (E.coli,大肠杆菌大肠杆菌)n是正常菌群是正常菌群,出生后数小时就进入肠道，并终生伴随n可引起肠外感染可引起肠外感染n某些菌株某些菌株可致腹泻可致腹泻n可作为粪便污染的检测指标可作为粪便污染的检测指标n基因工程的基因工程的工具菌工具菌1.1.形态形态培养与生化反应：培养与生化反应：在普通琼脂平板培养基上，形成在普通琼脂平板培养基上，形成S S型菌落型菌落在伊红美蓝（在伊红美蓝（EMBEMB）鉴别培养基上呈鉴别培养基上呈紫黑色菌落紫黑色菌落 分解葡萄糖、分解葡萄糖、乳糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖麦芽糖、甘露糖 IMViC 实验实验：+-+-一、生物学性状：一、生物学性状：电镜下大肠杆菌电镜下大肠杆菌2.抗原构造：抗原构造：n有三种抗原：有三种抗原：O、H、K是血清学分型的基础是血清学分型的基础n菌体抗原（菌体抗原（O抗原）抗原）170种种n鞭毛抗原（鞭毛抗原（H抗原）抗原）56种种n荚膜抗原（荚膜抗原（K抗原）抗原）100种种n血清型血清型(Serumtype)表示法：表示法：O：K：Hn如如E.coliO157:H7;O111:K58:H23.抵抗力抵抗力-同杆菌科共性同杆菌科共性二、二、致病性致病性（一）致病因素（一）致病因素1菌毛有黏附作用菌毛有黏附作用-小肠、尿道黏膜小肠、尿道黏膜2肠毒素肠毒素:外毒素外毒素活化腺苷环化酶活化腺苷环化酶,使使ATP环腺苷酸环腺苷酸 （cAMP）H2O、Na+、Cl-分泌增加分泌增加活化鸟活化鸟苷环化苷环化酶酶环鸟苷酸环鸟苷酸（cGMP）腹泻腹泻(1)不耐热肠毒不耐热肠毒素素 (heat labile enterotoxin，LT)(2)耐热肠毒素耐热肠毒素(heat stable enterotoxin，ST)肠粘膜对肠粘膜对水分吸收水分吸收减少减少一般不引起组织炎性反应及病变一般不引起组织炎性反应及病变肠肠毒毒素素为外毒素，为外毒素，能溶解红细胞和其它组织细胞，能溶解红细胞和其它组织细胞，引起细胞因子释放和诱发炎症反应引起细胞因子释放和诱发炎症反应5.其它其它：内毒素：内毒素-K抗原抗原-抗吞噬抗吞噬 为外毒素，与为外毒素，与28SrRNA作用，使核糖体灭活，终止作用，使核糖体灭活，终止蛋白质合成，使肠上皮细胞死亡脱落蛋白质合成，使肠上皮细胞死亡脱落 4.溶血素溶血素3.Vero3.Vero毒素（毒素（VTVT）可被志贺抗毒素中和掉可被志贺抗毒素中和掉,故也称志贺氏样毒素故也称志贺氏样毒素（二）所致疾病（二）所致疾病1.1.肠道外感染肠道外感染:化脓性炎症为主，化脓性炎症为主，泌尿道感染为多见泌尿道感染为多见 机会性感染可引起：胆囊炎、腹膜炎、肺炎、机会性感染可引起：胆囊炎、腹膜炎、肺炎、脑膜炎、败血症等脑膜炎、败血症等 2.2.肠道内感染肠道内感染引起引起腹泻的腹泻的 E.coliE.coli (分为分为5 5组组 p70)p70)ETECETECEHEC 0157EHEC 0157侵袭力侵袭力黏附定居黏附定居菌侵入细胞菌侵入细胞聚集黏附聚集黏附黏附破坏黏附破坏脓血便脓血便EIECEIEC 水样便水样便大量血便大量血便EAECEAEC黏液便黏液便EPECEPEC内毒素内毒素STST，LTLTVeroVero毒素毒素溶血素等溶血素等水样便水样便产生肠毒素产生肠毒素5种种致病性大肠杆菌致病性大肠杆菌三、微生物学检查三、微生物学检查n1 1肠道外感染肠道外感染:n涂片镜检：涂片镜检：中段尿、中段尿、脓汁、痰、分泌物脓汁、痰、分泌物n涂片涂片G G染色镜捡染色镜捡-初步鉴定初步鉴定n分离培养分离培养与鉴定：与鉴定：菌落形态菌落形态nIMViCIMViC实等系列生化反应实等系列生化反应最后鉴定最后鉴定n泌尿道感染泌尿道感染做细菌计数，做细菌计数，1010万万/ml/ml才有诊断才有诊断意义意义 荧光染色荧光染色标本标本 接种接种鉴别培养基鉴别培养基 鉴定为大肠埃希菌鉴定为大肠埃希菌做血清型做血清型鉴定鉴定-EPEC、EHEC 侵袭力实验侵袭力实验 如用如用senery试试验检测验检测EIEC的的侵袭力侵袭力（接种（接种豚鼠眼结膜豚鼠眼结膜测定肠毒素测定肠毒素（ETEC）ELISA、PCR方法2 2肠道内感染肠道内感染3 3卫生细菌学检查：卫生细菌学检查：n大肠菌群大肠菌群指指37OC24h内内发酵乳糖产酸发酵乳糖产酸产气产气的肠道杆菌，是粪便污染的指标的肠道杆菌，是粪便污染的指标n大肠菌群指数（大肠菌群指数（coli-index）是指是指1000ml被检样品中大肠菌群数被检样品中大肠菌群数n我国的饮水标准：每我国的饮水标准：每100ml中不得检出中不得检出四、防治原则四、防治原则n防止尿路感染防止尿路感染n防止腹泻防止腹泻n注意牛肉、牛奶中的注意牛肉、牛奶中的EHEC-n如，美国的流行如，美国的流行-汉堡包中牛肉馅污染汉堡包中牛肉馅污染n治疗治疗-注意耐药现象注意耐药现象一、生物学形状一、生物学形状第二节第二节 志贺氏菌属志贺氏菌属(Shiglla)俗称俗称 痢疾杆菌痢疾杆菌（dysentery bacterium）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌能分解葡萄糖，产酸不产气能分解葡萄糖，产酸不产气 不分解乳糖，除宋内志贺菌不分解乳糖，除宋内志贺菌无鞭毛，有菌毛无鞭毛，有菌毛生化反应生化反应形态形态抗原与分类根据O抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A110福氏志贺菌福氏志贺菌B16，X，Y变种鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌C115宋内志贺菌宋内志贺菌D12.抗原结构及分类抗原结构及分类3.抵抗力抵抗力 弱弱致病性传染源传染源 患者和带菌者患者和带菌者粪粪口传播口传播感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血病后免疫期短，也不巩固病后免疫期短，也不巩固二、致病性二、致病性1.1.侵袭力侵袭力 菌毛黏附菌毛黏附介导细菌侵入肠上皮细胞介导细菌侵入肠上皮细胞140MD140MD质粒质粒-编码蛋白介导侵入编码蛋白介导侵入2.2.内毒素：内毒素：肠粘膜肠粘膜 通透性增强通透性增强 促进毒素吸收促进毒素吸收破坏肠粘膜细胞破坏肠粘膜细胞形成溃疡形成溃疡脓血黏液便脓血黏液便内毒素血症和休克内毒素血症和休克肠壁植物神经肠壁植物神经扩约肌痉挛，里急后重扩约肌痉挛，里急后重（1）致病物质：）致病物质：3.志贺毒素（志贺毒素（shiga toxin,STX）n是是外毒素，外毒素，由由、型痢疾志贺菌型痢疾志贺菌产生产生n也称也称Vero毒素毒素n有有3种生物学活性种生物学活性：n具有具有肠毒素肠毒素作用作用致致水样腹泻水样腹泻n具有具有细胞毒素细胞毒素作用致作用致细胞坏死、细胞坏死、阻止吸收阻止吸收n具有具有神经毒素神经毒素作用引起作用引起神经麻痹、昏迷等神经麻痹、昏迷等型痢疾志贺菌感染临床重，病死率高型痢疾志贺菌感染临床重，病死率高 急性细菌性痢疾急性细菌性痢疾(菌痢）菌痢）-我国以福氏和宋内志贺氏菌多见我国以福氏和宋内志贺氏菌多见急性典型：急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重急性非典型：急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性易误诊，导致带菌和慢性中毒性痢疾：中毒性痢疾：小儿小儿 高热昏迷高热昏迷、DIC，病死率高病死率高慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上带菌者带菌者（二）所致疾病（二）所致疾病（三）免疫性（三）免疫性细菌不入血，免疫力不稳固细菌不入血，免疫力不稳固微生物学检查微生物学检查法法及时送检及时送检/暂用暂用30%甘油缓冲盐水保存甘油缓冲盐水保存分离培养分离培养新鲜脓血便新鲜脓血便/肛拭肛拭快速诊断快速诊断*不做血培养不做血培养!荧光抗体荧光抗体检查检查SPASPA协同凝集试协同凝集试验验PCRPCR检测检测140MD140MD的的大质粒大质粒 鉴别鉴别/选择培养基上无色菌选择培养基上无色菌落落生化鉴定生化鉴定血清学鉴定：定群、定型血清学鉴定：定群、定型侵袭力鉴定：侵袭力鉴定：Senery实验实验四、防治原则四、防治原则n预防：控制传染源，切断传播途径预防：控制传染源，切断传播途径n 加强粪管等加强粪管等n疫苗：链霉素依赖株活疫苗（疫苗：链霉素依赖株活疫苗（Sd）n治疗：治疗：隔离治疗隔离治疗n 药敏试验选用敏感药物药敏试验选用敏感药物n联合用药联合用药 人沙门菌：人沙门菌：伤寒沙门菌伤寒沙门菌(S.typhiS.typhi)-)-伤寒伤寒甲型副伤寒甲型副伤寒(S.paratyphiS.paratyphi A)-A)-副伤寒甲副伤寒甲乙型副伤寒乙型副伤寒(S.paratyphiS.paratyphi B)-B)-副伤寒乙副伤寒乙丙型副伤寒丙型副伤寒(S.paratyphiS.paratyphi C)-C)-副伤寒丙副伤寒丙其它动物沙门菌其它动物沙门菌-胃肠炎（食物中毒）、败血症胃肠炎（食物中毒）、败血症第三节第三节 沙门氏菌属沙门氏菌属 Samonella种类多，血清型种类多，血清型20002000个，个，对人致病的种类主要有：对人致病的种类主要有：肠肠热热症症一、生物学性状：一、生物学性状：（一）（一）形态形态、染色、培养与生化反应、染色、培养与生化反应 G G-杆菌，有周鞭毛有活力杆菌，有周鞭毛有活力-与志贺菌区别与志贺菌区别分解葡萄糖产酸产气分解葡萄糖产酸产气除除伤寒沙门菌产酸伤寒沙门菌产酸不不产气产气外外不分解乳糖不分解乳糖EMB培养基呈培养基呈无色半透明菌落无色半透明菌落1.1.O抗原抗原：LPS（脂多糖）脂多糖），耐耐100数小时数小时 是是分组的依据，分组的依据，A E组对人致病组对人致病 刺激机体产生刺激机体产生IgM抗体抗体 2.H抗原：抗原：为蛋白质，为蛋白质，6510min破坏破坏 是是分型依据分型依据 刺激机体产生刺激机体产生IgG抗体抗体 3.Vi抗原抗原：见于少数新分离的菌株见于少数新分离的菌株是表面抗原，可阻止是表面抗原，可阻止O抗原与抗体凝集抗原与抗体凝集有有抗吞噬作用抗吞噬作用抗原性弱抗原性弱，低效价的，低效价的Vi抗体是检测带菌者的指标抗体是检测带菌者的指标-？（二）抗原结构与分类（二）抗原结构与分类分类分类nspecies:依据生化反应和依据生化反应和DNA同源性同源性,分为分为2种：种：肠道沙门菌肠道沙门菌-6个亚种个亚种邦戈沙门菌邦戈沙门菌nSubspecies:A.依据所致人依据所致人/动物疾病命名动物疾病命名如如伤寒沙门菌伤寒沙门菌/鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌B.依据分离地命名：依据分离地命名：上海沙门菌上海沙门菌-（三）抵抗力：（三）抵抗力：n耐冷不耐热耐冷不耐热n水中存活水中存活23W,冰冻土壤中可越冬冰冻土壤中可越冬n粪便种可以存活粪便种可以存活12月月n胆盐、煌绿抗力较其他肠道杆菌强胆盐、煌绿抗力较其他肠道杆菌强n可用可用选择培养基（选择培养基（SS）进行分离鉴别进行分离鉴别二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病因子：（一）致病因子：1.1.侵袭力：侵袭力：侵袭基因侵袭基因(inv)/黏附因子黏附因子-介导菌体黏附介导菌体黏附M 细胞细胞 侵入固有层侵入固有层 Vi抗原抗原-有抗吞噬抗杀伤作用有抗吞噬抗杀伤作用2.2.内毒素内毒素 体温升高、体温升高、脉搏迟缓脉搏迟缓、WBCWBC下降下降、血管通透性增强血管通透性增强，中毒性休克等，中毒性休克等3.3.肠毒素肠毒素 与与ETECETEC的肠毒素作用相似的肠毒素作用相似 水样泻水样泻（二）所致疾病（二）所致疾病:沙门菌病沙门菌病(salmonellosissalmonellosis)肠热症肠热症 -两次菌血症两次菌血症包括包括 胃肠炎胃肠炎（食物中毒）败血症败血症 带菌者带菌者 占患者的占患者的15%-胆囊内胆囊内可可持续带菌持续带菌1 1年年 传染源传染源TYPHOID MARY伤寒沙门菌、甲、乙型副伤寒沙门菌等经消化道伤寒沙门菌、甲、乙型副伤寒沙门菌等经消化道在肠系膜淋巴结繁殖在肠系膜淋巴结繁殖经胸导管初次入血，第一次菌血症经胸导管初次入血，第一次菌血症细菌随血流进入骨髓、肝、脾、细菌随血流进入骨髓、肝、脾、肾、胆囊在吞噬细胞内增殖肾、胆囊在吞噬细胞内增殖再次入血再次入血第二次菌血症第二次菌血症胆囊中细菌进入肠道胆囊中细菌进入肠道肠壁淋巴组织肠壁淋巴组织 引起迟发性变态反应引起迟发性变态反应淋巴组织坏死、溃疡淋巴组织坏死、溃疡初期（发病第初期（发病第1 1周）周）恢复期（发病第恢复期（发病第3 3周后）：特异性免疫渐强，血清抗周后）：特异性免疫渐强，血清抗体效价增高，少数成为带菌者。体效价增高，少数成为带菌者。极期（发病第极期（发病第2 23 3周）周）随粪便排出随粪便排出血液、骨髓血液、骨髓细菌培养细菌培养潜伏期（潜伏期（1 12 2周）周）肠出血、穿孔肠出血、穿孔粪便细菌培养粪便细菌培养肥达反应协助诊断肥达反应协助诊断伤寒菌在体内扩散过程伤寒菌在体内扩散过程（三）免疫性（三）免疫性n细胞内寄生菌，主要是细胞免疫细胞内寄生菌，主要是细胞免疫 n肠热症后可获牢固免疫力肠热症后可获牢固免疫力 （细菌入血）（细菌入血）n胃肠炎主要依靠胃肠炎主要依靠sIgA作用作用n 1.1.病原学检查病原学检查 标本标本 ：肠热症肠热症 第第1 1、2 2周取血周取血/骨髓骨髓 第第2 2周以后取粪便做分离周以后取粪便做分离培养培养 *分离培养鉴定程序：分离培养鉴定程序：血血/骨髓骨髓 肉汤增菌肉汤增菌 血平板培养血平板培养粪便标本粪便标本 SSSS培养基培养培养基培养 微生物学检查法微生物学检查法选择无色半选择无色半透明菌落透明菌落 生化反应或血清学鉴定生化反应或血清学鉴定 测血清中相应抗体测血清中相应抗体-常用常用肥达氏反应肥达氏反应抗原抗原伤寒沙门菌伤寒沙门菌O抗原抗原伤寒沙门菌伤寒沙门菌H抗原抗原甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌H抗原抗原乙型沙门菌乙型沙门菌H抗原抗原+抗体（病人血清）抗体（病人血清）凝集现象凝集现象2.血清学诊断血清学诊断诊断标准：诊断标准：伤伤寒寒O抗体抗体1:80；H抗体抗体1:160副伤寒副伤寒O抗体抗体1:80；H抗体抗体1:80动态观察：动态观察：有时单次不能定论，应逐周复查，若依次递增或恢复期有时单次不能定论，应逐周复查，若依次递增或恢复期/初期初期效价增加效价增加4倍者始有意义倍者始有意义肥达氏反应肥达氏反应结果分析结果分析n1.控制消灭传染源，切断传播途径控制消灭传染源，切断传播途径 灭灭蝇蝇！n2.特异性预防：特异性预防：n死疫苗：死疫苗：注射伤寒、甲乙副伤寒三联菌苗注射伤寒、甲乙副伤寒三联菌苗-副作用副作用大大n减毒活疫苗减毒活疫苗：口服：口服Ty21a疫苗效果评价不一疫苗效果评价不一 n伤寒伤寒Vi多糖疫苗多糖疫苗：尚未用于人体尚未用于人体-目前的研究方向目前的研究方向n3.治疗治疗n用抗生素用抗生素-氟哌酸为首选氟哌酸为首选 n注意：抗生素不能杀死胞内细菌注意：抗生素不能杀死胞内细菌 n故故停药过早容易复发停药过早容易复发 四、四、防治原则防治原则第四节第四节 幽门螺杆菌幽门螺杆菌 Helicobacter pylori,HP历史沿革：历史沿革：n20世纪世纪80年代初，澳大年代初，澳大利亚病理学家利亚病理学家Wanen发发现慢性胃炎和消化性溃疡现慢性胃炎和消化性溃疡病人的胃粘膜活检标本中病人的胃粘膜活检标本中有大量弯曲菌样的细菌有大量弯曲菌样的细菌n1982年年，Marshal成功成功地分离培养出该菌并命名地分离培养出该菌并命名n之后，之后，Marshal进行了吞进行了吞服服Hp的自身感染试验，的自身感染试验，证实了该菌的证实了该菌的致病性致病性幽门螺杆菌幽门螺杆菌n形态：形态：G G-弧形或弧形或S S形，有鞭毛形，有鞭毛 2 26 6根根n培养和生化反应：培养和生化反应：微需氧菌，营养要求高微需氧菌，营养要求高n含丰富尿素酶，是鉴定该菌的主要依据含丰富尿素酶，是鉴定该菌的主要依据n致病物质致病物质：鞭毛和尿素酶；黏附素：鞭毛和尿素酶；黏附素n 脂多糖脂多糖-细胞凋亡；细胞凋亡；n 空泡素细胞损伤和溃疡空泡素细胞损伤和溃疡n感染途径感染途径：经：经 口口、粪口、医疗器械感染，口口、粪口、医疗器械感染，在胃窦黏膜表面的黏液层中（在胃窦黏膜表面的黏液层中（PH7.0PH7.0）定植）定植n所致疾病所致疾病-功能性消化不良；引起慢性胃炎；消化功能性消化不良；引起慢性胃炎；消化道溃疡；并与胃癌、胃淋巴瘤等的发生有关道溃疡；并与胃癌、胃淋巴瘤等的发生有关微生物学检查微生物学检查n组织活检；快速尿素酶试验组织活检；快速尿素酶试验n分子生物学分子生物学n尿素呼吸试验尿素呼吸试验n抗体检测等抗体检测等 n尿素呼吸试验尿素呼吸试验n含有含有13C13C或或(1414C)C)的的尿素尿素病人服用病人服用尿素被分尿素被分解释放解释放C02从病人呼吸中测从病人呼吸中测C02同位素含量同位素含量n敏感特异敏感特异第五节第五节 霍乱弧菌霍乱弧菌（V.cholerae）细菌是一大群菌体短小细菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的，弯曲成弧形的G-菌菌一、生物学特性一、生物学特性1.1.形态与染色形态与染色：GG-单鞭毛单鞭毛 弧型或逗点状弧型或逗点状液体中液体中运动非常活泼运动非常活泼呈穿梭样呈穿梭样涂片中涂片中排列整齐排列整齐呈鱼群状呈鱼群状2.培养及生化反应培养及生化反应 耐碱不耐酸耐碱不耐酸在在pH8.89.0的碱性蛋白胨水的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好碱性琼脂平板上生长良好3.3.抗原构造与分型抗原构造与分型：4.4.抵抗力抵抗力对热、干燥、日光都很敏感，煮沸对热、干燥、日光都很敏感，煮沸对热、干燥、日光都很敏感，煮沸对热、干燥、日光都很敏感，煮沸1-2min1-2min1-2min1-2min即可杀死即可杀死即可杀死即可杀死对酸、氯、氟化剂、碘制剂等均敏感对酸、氯、氟化剂、碘制剂等均敏感对酸、氯、氟化剂、碘制剂等均敏感对酸、氯、氟化剂、碘制剂等均敏感对低温和碱耐受力较强对低温和碱耐受力较强对低温和碱耐受力较强对低温和碱耐受力较强 根据表型差异根据表型差异O1群霍乱弧菌可分为两个生物型群霍乱弧菌可分为两个生物型El Tor生物型生物型根据根据O抗原不同抗原不同分为分为155个血清群个血清群其中其中O1群、群、O139群引起霍乱群引起霍乱 古典生物型古典生物型二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病物质（一）致病物质：鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素 霍乱肠毒素的作用机理霍乱肠毒素的作用机理（二）所致疾病（二）所致疾病:霍乱霍乱-烈性肠道传染病烈性肠道传染病为我国的甲类法定传染病为我国的甲类法定传染病n传播途径：传播途径：污染的水源污染的水源或未煮熟的食物经口摄入或未煮熟的食物经口摄入n临床表现：临床表现：进食后进食后1h突然发病，多无腹痛突然发病，多无腹痛剧烈的上吐下泻，米泔水样腹泻物为特征剧烈的上吐下泻，米泔水样腹泻物为特征 最终可因脱水、酸中毒，死于肾衰最终可因脱水、酸中毒，死于肾衰/休克休克O139比比O1严重严重思考题：思考题：n霍乱弧菌与志贺菌的致病性霍乱弧菌与志贺菌的致病性有何不同？有何不同？n霍乱肠毒素致病机制与霍乱肠毒素致病机制与ETECETEC的肠毒素及的肠毒素及金黄色葡萄球菌的肠毒素致病机制金黄色葡萄球菌的肠毒素致病机制有何有何异同？异同？n沙门菌与沙门菌与金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、霍乱弧菌、ETECETEC的致腹泻的机制的致腹泻的机制有何异同？有何异同？（三）免疫性（三）免疫性*sIgAsIgA及抗肠毒素抗体起保护作用及抗肠毒素抗体起保护作用 *0101群免疫对群免疫对O139O139群无交叉免疫群无交叉免疫 感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力标本标本直接镜检直接镜检分离培养分离培养涂片见涂片见G-性弧菌性弧菌 悬滴法悬滴法观察细菌呈鱼群穿梭样运动观察细菌呈鱼群穿梭样运动选择培养基选择培养基(TCBS)-黄色菌落黄色菌落病人粪便，肛拭病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）（流行病学调查包括水样）增菌增菌(碱性蛋白胨碱性蛋白胨)血清学鉴定血清学鉴定霍乱是烈性传染病，对首例病人的病原学诊断应快速、准霍乱是烈性传染病，对首例病人的病原学诊断应快速、准确，并及时作出疫情报告确，并及时作出疫情报告三、微生物学检查法三、微生物学检查法四、防治原则四、防治原则改善社区环境，加强水源管理，改善社区环境，加强水源管理，及时补充液体和电解质及时补充液体和电解质抗生素治疗抗生素治疗治疗霍乱的关键治疗霍乱的关键控制传染源控制传染源切断传播途径切断传播途径防治：防治：O1O1群死群死疫苗接种已被淘汰疫苗接种已被淘汰 B B亚单位疫苗；基因工程减毒活疫苗是研制方向亚单位疫苗；基因工程减毒活疫苗是研制方向 第六节第六节 副溶血性弧菌副溶血性弧菌 特点特点-嗜盐嗜盐(故俗称嗜盐杆菌）故俗称嗜盐杆菌）在含在含3 3NaclNacl培养基中最适宜生长培养基中最适宜生长 分布分布-海产品中海产品中 所致疾病所致疾病-食物中毒食物中毒腹泻为主腹泻为主 （V.parahemolyticus）第七节第七节 弯曲菌属弯曲菌属 (Campylobacter)n生物学特性生物学特性G G-n形态细长，呈弧形、形态细长，呈弧形、螺旋形、螺旋形、S形或海鸥状形或海鸥状n单鞭毛，运动活泼单鞭毛，运动活泼n微需氧微需氧n42能生长能生长n营养要求高营养要求高n抵抗力较弱抵抗力较弱对人致病的主要是对人致病的主要是 空肠空肠弯曲菌弯曲菌(C.jejuni）*禽类肠道正常菌群禽类肠道正常菌群 *人类感染主要通过饮食或直接接触人类感染主要通过饮食或直接接触 *儿童感染率高儿童感染率高 *细菌在小肠内增殖，产生细胞毒素和不耐热肠毒素细菌在小肠内增殖，产生细胞毒素和不耐热肠毒素 n引起散发性细菌性肠炎引起散发性细菌性肠炎n表现腹痛，腹泻，血便或果酱样便等表现腹痛，腹泻，血便或果酱样便等n病程病程5 58d8d，自愈自愈致病性致病性诊断与防治诊断与防治n粪便标本涂片、镜检粪便标本涂片、镜检nPCRPCRn主要是注意饮水和食品卫生主要是注意饮水和食品卫生n治疗可用红霉素类抗生素治疗可用红霉素类抗生素第八节第八节 其它其它 G G-杆菌，有鞭毛、菌毛；杆菌，有鞭毛、菌毛；固体培养基上固体培养基上迁徙生长迁徙生长；迅速分解尿素是本菌的特征迅速分解尿素是本菌的特征为肠道正常菌群，是机会性病原菌，可为肠道正常菌群，是机会性病原菌，可引起食物中毒、尿路引起食物中毒、尿路感染、新生儿败血症等感染、新生儿败血症等本菌水解尿素产氨，引起钙镁盐的沉积，故易引起结石本菌水解尿素产氨，引起钙镁盐的沉积，故易引起结石 外斐反应外斐反应 变形杆菌的某些菌株与立克次体有共同抗原，因变形杆菌的某些菌株与立克次体有共同抗原，因此可用其代替立克次体抗原与患者血清做凝集反应，称此可用其代替立克次体抗原与患者血清做凝集反应，称外斐外斐反应反应，可，可辅助诊断斑疹伤寒辅助诊断斑疹伤寒类疾病类疾病 二、二、变形杆菌变形杆菌n变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长，形成变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长，形成以菌接种部位为中心的厚薄交替，同心圆型的以菌接种部位为中心的厚薄交替，同心圆型的层层波状菌苔，这种现象称为迁徙生长现象层层波状菌苔，这种现象称为迁徙生长现象变形杆菌的迁徙生长现象：变形杆菌的迁徙生长现象：第第9章复习重点章复习重点 1.1.肠杆菌科的共性肠杆菌科的共性2.2.大大肠肠埃埃希希氏氏菌菌的的致致病病性性、分分类类及及在在卫卫生生细细菌菌学学的的检测中的应用检测中的应用3.3.志贺菌志贺菌属分型、属分型、致病性致病性4.4.沙沙门门氏氏菌菌属属的的抗抗原原构构造造、所所致致疾疾病病、免免疫疫性性、微微生物学检测生物学检测5.5.幽门螺杆菌致病性幽门螺杆菌致病性6.6.霍乱弧菌的霍乱弧菌的抗原构造与分型、抗原构造与分型、致病性致病性7.7.副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、变形杆菌所致疾病副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、变形杆菌所致疾病8.8.肥达氏反应肥达氏反应、外斐反应、外斐反应大肠杆菌光镜大肠杆菌光镜大肠埃希菌大肠埃希菌(E.coli )G-杆菌杆菌13m 无芽孢无芽孢有周鞭毛有周鞭毛引起腹泻的引起腹泻的E.coli 菌菌 株株致病机制致病机制 疾病疾病 血清型血清型 ETECETEC肠产毒性大肠杆菌肠产毒性大肠杆菌肠毒素肠毒素（LTLT和和STST）旅游者和婴旅游者和婴幼儿腹泻幼儿腹泻O6O6：K15K15：H6H6 EIEC EIEC 肠侵袭性大肠杆菌肠侵袭性大肠杆菌侵袭破坏侵袭破坏痢疾样腹泻痢疾样腹泻O28acO28ac EPEC EPEC 肠致病性大肠杆菌肠致病性大肠杆菌黏附、破坏黏附、破坏婴幼儿腹泻婴幼儿腹泻O2,O55O2,O55 EHEC EHEC 肠出血性大肠杆菌肠出血性大肠杆菌VeroVero毒素毒素儿童出血性儿童出血性结肠炎结肠炎O157O157：H7H7 EAEC EAEC 肠黏附性大肠杆菌肠黏附性大肠杆菌黏附、阻止黏附、阻止吸收吸收婴幼儿腹泻婴幼儿腹泻O42O42E.coli 菌菌落落n在普通琼脂平板培养基上，在普通琼脂平板培养基上，3737O OC C培养培养24h24h形成直径形成直径2 23mm3mm凸起灰白色凸起灰白色S S型菌落型菌落痢疾杆菌痢疾杆菌沙门菌沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌胆囊-肠道-粪排菌皮肤-血栓出血-玫瑰疹肾-尿肝脾-肿大骨髓伤寒沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结 固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第一次菌血症第二次菌血症第二次菌血症伤寒和副伤寒的致病过程伤寒和副伤寒的致病过程伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在测定Vi抗体有助于检出带菌者因因为为所所以以本本质质 Vi抗原抗原 1.1.肠热症肠热症-即即伤寒、副伤寒伤寒、副伤寒（enteric fever or typhoid fever）病原菌病原菌 伤寒沙门菌伤寒沙门菌/副伤寒沙门菌副伤寒沙门菌传染源传染源 病人、带菌者病人、带菌者感染途径感染途径 消化道感染消化道感染 进入小肠黏膜进入小肠黏膜 扩散扩散入血入血临床表现临床表现 第一次菌血症第一次菌血症 发热、不适、周身痛发热、不适、周身痛等等 第二次菌血症第二次菌血症 高热、肝脾大、皮疹高热、肝脾大、皮疹等等 并发症并发症 肠穿孔、胆囊炎、肺炎肠穿孔、胆囊炎、肺炎等等 2 2急性胃肠炎食物中毒急性胃肠炎食物中毒 (acute gastroenteritis or food poisoning)n病原体病原体 鼠伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌 肠炎沙门氏菌肠炎沙门氏菌 猪霍乱沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌n疾病特点疾病特点 以水样泻为主的食物中毒以水样泻为主的食物中毒n致病物质致病物质 细菌为主细菌为主常常称为称为细菌性食物中毒细菌性食物中毒 内毒素可能有关内毒素可能有关3沙门菌败血症沙门菌败血症n病原菌：猪霍乱沙门菌病原菌：猪霍乱沙门菌 丙型副伤寒沙门菌丙型副伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌肠炎沙门菌n易感者易感者儿童、免疫力低下者儿童、免疫力低下者n症状重，细菌入血可导致脑膜炎等症状重，细菌入血可导致脑膜炎等肥达氏反应辅助诊断伤寒病n单份血清考虑单份血清考虑O/H的上述特点：的上述特点：OH-伤寒伤寒 OH-不是伤寒不是伤寒 OH-感染早期；交叉反应感染早期；交叉反应 OH-恢复期；疫苗接种；回忆反应恢复期；疫苗接种；回忆反应 OPA-甲型副伤寒甲型副伤寒 OPB-乙型副伤寒乙型副伤寒n双份血清，双份血清，恢复期效价增加恢复期效价增加4倍倍有诊断意义有诊断意义OIgM,出现早，维持时间短，特异性差出现早，维持时间短，特异性差HIgG,出现迟，维持时间长，特异性强出现迟，维持时间长，特异性强幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌霍乱弧菌霍乱弧菌纯培养，纯培养，G染色，染色，油镜下观察油镜下观察霍乱弧菌霍乱弧菌涂片染色涂片染色霍乱弧菌粘附于人回肠粘膜的霍乱弧菌粘附于人回肠粘膜的M细胞上细胞上 霍乱肠毒素（霍乱肠毒素（CT）作用机制）作用机制 霍乱肠毒素霍乱弧菌与志贺菌的致病性有何不同？霍乱弧菌与志贺菌的致病性有何不同？n霍乱弧菌霍乱弧菌鞭毛穿入粘液层，菌毛鞭毛穿入粘液层，菌毛-黏附小肠上皮刷状缘绒毛黏附小肠上皮刷状缘绒毛膜上，膜上，细菌不侵入肠细胞细菌不侵入肠细胞肠毒素进入细胞致病肠毒素进入细胞致病n志贺菌志贺菌菌毛黏附回肠、结肠粘膜上皮细胞菌毛黏附回肠、结肠粘膜上皮细胞侵入粘膜固有层侵入粘膜固有层致炎症反应致炎症反应VeroToxin致肠上皮细胞坏死、溃疡、出血等致肠上皮细胞坏死、溃疡、出血等霍乱肠毒素致病机制与霍乱肠毒素致病机制与ETECETEC的肠毒素的肠毒素及金黄色葡萄球菌的肠毒素致病机制有何异同？及金黄色葡萄球菌的肠毒素致病机制有何异同？n霍乱肠毒素与霍乱肠毒素与ETECETEC的肠毒素都作用于肠上皮细胞的肠毒素都作用于肠上皮细胞n导致以腹泻为主的食物中毒导致以腹泻为主的食物中毒n霍乱肠毒素的致病机制：霍乱肠毒素的致病机制：n与与ETECETEC的不耐热肠毒素（的不耐热肠毒素（LTLT）相同）相同n使肠上皮胞质内使肠上皮胞质内cAMPcAMP活性增强通透性增强活性增强通透性增强-分泌增加分泌增加-n与与ETECETEC的耐热肠毒素（的耐热肠毒素（STST）不同）不同ncGMPcGMP活性增强活性增强-吸收障碍吸收障碍n金黄色葡萄球菌的肠毒素金黄色葡萄球菌的肠毒素-刺激呕吐中枢刺激呕吐中枢n导致以呕吐为主的食物中毒导致以呕吐为主的食物中毒沙门菌与沙门菌与金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、霍乱弧菌、ETECETEC的致腹泻的机制有何异同？的致腹泻的机制有何异同？n沙门菌沙门菌细菌性食物中毒细菌性食物中毒n霍乱弧菌、霍乱弧菌、ETECETEC、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌-毒素性毒素性鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原肠杆菌科细菌抗原构造肠杆菌科细菌抗原构造-复杂性复杂性溶源性转换生化反应性变异生化反应性变异通过引起耐药性变异耐药性变异毒力性变异毒力性变异转导接合变异变异HO变异变异SR变异等变异等幽螺功过幽螺功过 自有评说自有评说n幽门螺杆菌是一个人类古老的微生物伙伴幽门螺杆菌是一个人类古老的微生物伙伴n早早在在1875年年德德国国的的解解剖剖学学家家就就发发现现了了在在人人体体胃黏膜表面上定植着一个螺旋菌胃黏膜表面上定植着一个螺旋菌n直直到到1982年年Marshal和和Warren成成功功地地得得到到Hp的的纯纯培培养养，研研究究得得出出了了Hp是是胃胃溃溃疡疡和和胃胃癌癌的病原菌结论，这个结论震惊世界的病原菌结论，这个结论震惊世界n国国内内外外的的临临床床学学家家赞赞同同用用抗抗生生素素消消灭灭这这个个“病病原菌原菌”，治疗和预防这两种疾病，治疗和预防这两种疾病10月月3日，瑞典卡罗林斯卡医学院宣布日，瑞典卡罗林斯卡医学院宣布2005年诺贝尔奖年诺贝尔奖沃伦和马歇尔沃伦和马歇尔 20052005年年1010月月3 3日，瑞典卡罗林斯卡医学院宣布，把日，瑞典卡罗林斯卡医学院宣布，把20052005年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖授予澳大利亚科学家巴里授予澳大利亚科学家巴里马歇尔和罗宾马歇尔和罗宾沃伦，以表彰他们发现了导致胃炎和胃沃伦，以表彰他们发现了导致胃炎和胃溃疡的细菌溃疡的细菌幽门螺杆菌。幽门螺杆菌。诺贝尔奖委员会在授奖词中说，由于巴里诺贝尔奖委员会在授奖词中说，由于巴里马歇尔和罗宾马歇尔和罗宾沃伦沃伦19821982年的发现，年的发现，使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成了只需抗生素和一些使得原本慢性的、经常无药可救的胃溃疡变成了只需抗生素和一些酸分泌抑制剂酸分泌抑制剂短短期就可治愈的疾病。期就可治愈的疾病。沃伦在一份胃黏膜活体标本中，意外地发现一条奇怪的蓝线，他用高倍显微镜沃伦在一份胃黏膜活体标本中，意外地发现一条奇怪的蓝线，他用高倍显微镜观察，发现是无数细菌紧粘着胃上皮。接下来，沃伦又在其他活体标本中找到这种观察，发现是无数细菌紧粘着胃上皮。接下来，沃伦又在其他活体标本中找到这种细菌。细菌。“根据活组织切片检查结果，沃伦发现根据活组织切片检查结果，沃伦发现50%50%左右的病人的胃腔下半部分附生着左右的病人的胃腔下半部分附生着许多微小的、弯曲状的细菌。许多微小的、弯曲状的细菌。”“”“他发现发炎部位总是位于接近十二指肠的地方。他发现发炎部位总是位于接近十二指肠的地方。这个发现至关重要。这个发现至关重要。”沃伦的发现引起了马歇尔的极大兴趣，他们决定联合对取自沃伦的发现引起了马歇尔的极大兴趣，他们决定联合对取自100100个病人的活组织个病人的活组织切片进行研究。切片进行研究。“经过反复试验，马歇尔成功地培育出一种尚不为人知晓的细菌经过反复试验，马歇尔成功地培育出一种尚不为人知晓的细菌并命名为幽门弯曲菌，后更名为幽门螺杆菌并命名为幽门弯曲菌，后更名为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)(Helicobacter pylori,HP)。”为了为了获得这种细菌致病的证据，马歇尔和一位名叫莫里斯的医生，自愿进行人体试验。获得这种细菌致病的证据，马歇尔和一位名叫莫里斯的医生，自愿进行人体试验。他们在服食培养的细菌后，都发生了胃炎。虽然马歇尔很快就痊愈了，但莫里斯则他们在服食培养的细菌后，都发生了胃炎。虽然马歇尔很快就痊愈了，但莫里斯则费了好几年时间才治好。费了好几年时间才治好。接下来，沃伦和马歇尔又用内窥镜对接下来，沃伦和马歇尔又用内窥镜对100100例肠胃病病人进行研究。他们发现，所例肠胃病病人进行研究。他们发现，所有十二指肠溃疡病人胃内都有这种细菌。有十二指肠溃疡病人胃内都有这种细菌。基于上述试验结果，马歇尔和沃伦认为，幽门螺杆菌是导致这些病症的关键因素基于上述试验结果，马歇尔和沃伦认为，幽门螺杆菌是导致这些病症的关键因素证明幽门螺杆菌是致病因子证明幽门螺杆菌是致病因子但是，但是，n流行病学家发现一个令人惊奇的事实，在美国和西方流行病学家发现一个令人惊奇的事实，在美国和西方发达国家，抗生素的治疗使胃溃疡和胃癌的发病率下发达国家，抗生素的治疗使胃溃疡和胃癌的发病率下降了，并且