实验2 分离以尿素为氮源的微生物.pptx

实验二 分离以尿素为氮源的微生物一、实验目的：一、实验目的：1.使用专一的培养基（含尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）使用专一的培养基（含尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）2.使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应。使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应。对照组：对照组：LBLB固体培养基固体培养基实验组：尿素固体培养基实验组：尿素固体培养基涂布分离涂布分离分析与讨论：分析与讨论：1 1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？、为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？2 2、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水解如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水解后的氨使土壤变成碱性，与其他阴离子形成化合物则会使土壤后的氨使土壤变成碱性，与其他阴离子形成化合物则会使土壤板结。板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用所有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用所形成的氨，有利于自然界的氮循环形成的氨，有利于自然界的氮循环琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，如，如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养上产生大量以非尿素为氮源的源，这样会在尿素固体培养上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选3 3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现？4 4、与全营养培养基上的菌落数比较，为什么尿素培、与全营养培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基上只有少数菌落？养基上只有少数菌落？能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量。因为。因为人和其他哺乳动物产生的排泄物毕竟是少量的，而且人和其他哺乳动物产生的排泄物毕竟是少量的，而且尿素还可以在高温下自然分解，因此，以尿素为氮源尿素还可以在高温下自然分解，因此，以尿素为氮源的菌群较少的菌群较少细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中的尿素水解，尿素分解后细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中的尿素水解，尿素分解后产生氨，氨为碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境产生氨，氨为碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境里变为红色里变为红色。培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化，标志着。培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化，标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为氮源。氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强