实验七环境因素对微生物的影响.ppt

实验七、环境因素对微生物的影响实验七、环境因素对微生物的影响-温度、渗透压、生物因素、紫外线及消温度、渗透压、生物因素、紫外线及消毒剂对微生物的影响毒剂对微生物的影响一一 实验目的实验目的1.1.了解温度对微生物生长的影响；了解温度对微生物生长的影响；2.2.了解渗透压对微生物的影响；了解渗透压对微生物的影响；3.3.了解抗生素（青霉素、氨苄青霉素）的了解抗生素（青霉素、氨苄青霉素）的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。4 4、了解消毒剂对微生物分布的影响。、了解消毒剂对微生物分布的影响。5 5、了解紫外线杀菌对微生物的作用特点、了解紫外线杀菌对微生物的作用特点二二 实验原理实验原理1.1.温度温度:温度是影响微生物生长与存活的最重温度是影响微生物生长与存活的最重要因素。要因素。n自然界的微生物可根据对温度的适应性分为低自然界的微生物可根据对温度的适应性分为低温型、中温型和高温型。温型、中温型和高温型。n但不管哪一种温度型的微生物，都有生长温度但不管哪一种温度型的微生物，都有生长温度范围。分为最高、最适和最低生长温度。在最范围。分为最高、最适和最低生长温度。在最适宜温度里生长良好：超过最高温度细胞死亡；适宜温度里生长良好：超过最高温度细胞死亡；低于最低温度细胞被抑制或死亡。低于最低温度细胞被抑制或死亡。n温度对微生物影响的实际应用：应用上温度对微生物影响的实际应用：应用上利用高温进行杀菌；低温抑制微生物；利用高温进行杀菌；低温抑制微生物；最适温度培养微生物的活动。最适温度培养微生物的活动。2.2.渗透压的影响：渗透压的影响：n在等渗溶液中在等渗溶液中，（环境渗透压和细胞内渗透压，（环境渗透压和细胞内渗透压相同或相近，细胞在等渗环境中生长好，如相同或相近，细胞在等渗环境中生长好，如0.850.85氯化钠氯化钠生理盐水），微生物正常生生理盐水），微生物正常生长。长。n在高渗溶液在高渗溶液（如高盐、高糖溶液中），细胞失（如高盐、高糖溶液中），细胞失水收缩，从而抑制了微生物体内的生理生化反水收缩，从而抑制了微生物体内的生理生化反应，抑制其生长繁殖。应，抑制其生长繁殖。n而在低渗溶液中而在低渗溶液中，由于细胞壁的保护作用，微，由于细胞壁的保护作用，微生物受低渗的影响不大。生物受低渗的影响不大。n大多数微生物在大多数微生物在0.50.53 3的盐浓度范围的盐浓度范围内可正常生长；内可正常生长；n10101515的盐浓度能抑制大部分微生物的盐浓度能抑制大部分微生物的生长；的生长；n但对嗜盐细菌而言，在低于但对嗜盐细菌而言，在低于1515的盐浓的盐浓度环境中不能生长；度环境中不能生长；n某些极端嗜盐菌可在盐浓度高达某些极端嗜盐菌可在盐浓度高达3030的的条件下生长良好。条件下生长良好。n本实验选择了金黄色葡萄球菌和大肠杆本实验选择了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为实验菌种，菌作为实验菌种，其中大肠杆菌耐高渗其中大肠杆菌耐高渗透压的能力较差透压的能力较差，在，在3%3%以下的以下的NaClNaCl下能下能正常生长，以正常生长，以5%5%的的NaClNaCl下即受到抑制；下即受到抑制；金黄色葡萄球菌有较强的耐盐能力金黄色葡萄球菌有较强的耐盐能力，它，它在在1015%1015%的的NaClNaCl溶液中仍能正常生长，溶液中仍能正常生长，因此实验选择了因此实验选择了0.85%0.85%、5%5%、10%10%和和20%20%的的NaClNaCl溶液浓度作为实验浓度。溶液浓度作为实验浓度。3.3.生物因素对微生物生长的影响生物因素对微生物生长的影响：抗生素是某：抗生素是某些微生物在生长代谢过程中产生的能抑制或杀些微生物在生长代谢过程中产生的能抑制或杀死其它微生物的次生代谢产物。每种抗生素都死其它微生物的次生代谢产物。每种抗生素都有它固定的抗菌范围和抗菌谱。有它固定的抗菌范围和抗菌谱。p例如青霉素只对革兰氏阳性菌具有抗菌作用；例如青霉素只对革兰氏阳性菌具有抗菌作用；多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为素称为窄谱抗生素窄谱抗生素；p另一些抗生素对多种细菌具有作用，例如四环另一些抗生素对多种细菌具有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有作用称为作用称为广谱抗生素广谱抗生素。n本实验中用到的氨苄青霉素：对青霉素本实验中用到的氨苄青霉素：对青霉素敏感革兰氏阳性球菌、变形杆菌、沙门敏感革兰氏阳性球菌、变形杆菌、沙门氏菌、痢疾杆菌、产气荚膜杆菌；氏菌、痢疾杆菌、产气荚膜杆菌；大肠大肠杆菌及流感杆菌等都有很好的抗菌效果。杆菌及流感杆菌等都有很好的抗菌效果。4 4、化学消毒剂对微生物分布的影响、化学消毒剂对微生物分布的影响 人体皮肤分布着一定种类与数量的微人体皮肤分布着一定种类与数量的微生物。使用化学消毒剂对皮肤进行表面生物。使用化学消毒剂对皮肤进行表面消毒是医院里进行无菌操作常用的方法消毒是医院里进行无菌操作常用的方法之一。之一。5 5、紫外线的杀菌作用、紫外线的杀菌作用 波长为波长为200-300nm200-300nm的紫外线都有杀菌能力，的紫外线都有杀菌能力，其中以其中以260nm260nm的杀菌能力最强。其杀菌机的杀菌能力最强。其杀菌机理是抑制理是抑制DNADNA复制，以及产生臭氧和复制，以及产生臭氧和H H2 2O O2 2 而产生一定的杀菌作用。但紫外线穿透而产生一定的杀菌作用。但紫外线穿透力弱，一般适用于表面消毒和空气消毒。力弱，一般适用于表面消毒和空气消毒。三、实验步骤三、实验步骤1.1.温度对微生物生长的影响：温度对微生物生长的影响：nA.A.菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌；菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌；nB.B.取肉汤培养基取肉汤培养基5 5支；支；nC.C.分别接种大肠杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌各分别接种大肠杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌各2 2支试管，余下一支不接种作阴性对照；支试管，余下一支不接种作阴性对照；nD.D.分别取接种的培养基各分别取接种的培养基各1 1管，于管，于100100作用作用15min15min后取出，后取出，37 37 培养；培养；nE.E.培养培养24h24h后观察现象。后观察现象。2.2.渗透压对微生物生长的影响：渗透压对微生物生长的影响：nA.A.菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌；nB.B.取一块取一块LBLB平板，将其分成两个区，分平板，将其分成两个区，分别接种划线大肠杆菌和金黄色葡萄球菌；别接种划线大肠杆菌和金黄色葡萄球菌；nC.C.取一块含取一块含Nacl Nacl 浓度为浓度为5 5、10%10%和和20%20%的肉膏蛋白胨平板，将其分成两个区，分的肉膏蛋白胨平板，将其分成两个区，分别接种划线大肠杆菌和金黄色葡萄球菌；别接种划线大肠杆菌和金黄色葡萄球菌；nD.D.将三块接种好的平板于将三块接种好的平板于3737培养培养24h24h后后观察现象。观察现象。3.3.生物因素（抗生素）对微生物生长的影响生物因素（抗生素）对微生物生长的影响A.A.菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌B.B.用接种环刮取一环菌体，轻放在平板上；用接种环刮取一环菌体，轻放在平板上；C.C.将无菌的棉签在无菌水中润湿；将无菌的棉签在无菌水中润湿；D.D.用湿润的无菌棉签将平板上的菌体均匀涂用湿润的无菌棉签将平板上的菌体均匀涂布；布；E.E.用无菌镊子取青霉素药敏片，贴在用无菌镊子取青霉素药敏片，贴在LBLB平板上平板上 注意：在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤注意：在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布不均匀。不均匀。F.F.重复上述操作，重复上述操作，2 2次（次（2 2种不同的菌）种不同的菌）G.G.平板于平板于3737培养培养24h24h后观察实验现象后观察实验现象4 4、化学消毒剂对微生物分布的影响、化学消毒剂对微生物分布的影响pA.A.两名同学用两名同学用1 1个营养琼脂平板，将平个营养琼脂平板，将平板分为两个区域；板分为两个区域；pB.B.一名同学直接用手指在平板的一半一名同学直接用手指在平板的一半划之字形，另一半用碘酒划之字形，另一半用碘酒/酒精消毒后，酒精消毒后，稍候片刻稍候片刻，再在另外一半划之字形；，再在另外一半划之字形；pC.C.平板于平板于3737培养培养24h24h后观察实验现象后观察实验现象5 5、紫外线的消毒作用、紫外线的消毒作用pA.A.菌种：大肠杆菌菌种：大肠杆菌pB.B.用接种环刮取一环菌体，轻放在平板上；用接种环刮取一环菌体，轻放在平板上；pC.C.将无菌的棉签在无菌水中润湿；将无菌的棉签在无菌水中润湿；pD.D.用湿润的无菌棉签将平板上的菌体均匀涂用湿润的无菌棉签将平板上的菌体均匀涂布；布；pE.E.将平板半盖上置于紫外灯照射将平板半盖上置于紫外灯照射30min;30min;pF.F.平板于平板于3737培养培养24h24h后观察实验现象后观察实验现象习习 题题n如果抑菌带隔一段时间后又长出少许菌如果抑菌带隔一段时间后又长出少许菌落，你如何解释这种现象？落，你如何解释这种现象？