(33)--第3.4章基因工程抗体的制备二.ppt

基因工程抗体的制备二基因工程抗体的制备二主要内容主要内容l双特异抗体双特异抗体l抗体融合蛋白抗体融合蛋白l噬菌体抗体噬菌体抗体l定义：定义：指指同时能与两种不同特异性的抗原发生结合的抗体同时能与两种不同特异性的抗原发生结合的抗体。l特点：特点：双双特异抗体的两特异抗体的两抗原结合部位可以抗原结合部位可以同时与两种不同的同时与两种不同的抗原发生结合。抗原发生结合。三三、双特异抗体、双特异抗体l应用应用价值：价值：u免疫检测免疫检测u肿瘤肿瘤放射免疫显放射免疫显像像u介导药物或细胞的杀伤介导药物或细胞的杀伤效应效应三三、双特异抗体、双特异抗体l定义：是定义：是指利用基因工程技术，指利用基因工程技术，将抗体的不同片段与将抗体的不同片段与其他生物活性蛋白融合后得到的重组蛋白其他生物活性蛋白融合后得到的重组蛋白。l特点：特点：u具有具有抗原结合抗原结合能力能力u保留与保留与之融合的蛋白的生物学之融合的蛋白的生物学特性特性四、抗体融合蛋白四、抗体融合蛋白l定义：定义：PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变区和轻链可变区基因，克隆到噬菌体载体上，并以融合蛋区和轻链可变区基因，克隆到噬菌体载体上，并以融合蛋白的形式表达在噬菌体外壳表面白的形式表达在噬菌体外壳表面。五、噬菌体抗体库技术五、噬菌体抗体库技术五、噬菌体抗体库技术五、噬菌体抗体库技术lscFv抗体抗体库库lFab抗体抗体库库噬菌体噬菌体抗体抗体库构建流程库构建流程分离分离B B淋巴细胞淋巴细胞提取提取mRNAmRNA并逆并逆转录为转录为cDNAcDNAPCRPCR扩增扩增IgIg基因基因构建噬菌体表构建噬菌体表达载体达载体转化大肠杆菌，转化大肠杆菌，构建全套抗体库构建全套抗体库筛选噬菌体抗体筛选噬菌体抗体l方法方法简便快速，无需杂交瘤技术，也不用免疫简便快速，无需杂交瘤技术，也不用免疫动物动物l选择选择范围广泛，抗体库的抗原特异性一般在范围广泛，抗体库的抗原特异性一般在10106 6以上l可可获得高亲和力的人源化获得高亲和力的人源化抗体抗体l无需无需人体免疫接种过程即可获得特异性人人体免疫接种过程即可获得特异性人抗体抗体l可以可以获得一些用传统方法难于制备的抗体，如针对弱获得一些用传统方法难于制备的抗体，如针对弱免疫原或毒性抗原的抗体免疫原或毒性抗原的抗体噬菌体噬菌体抗体抗体库技术特点库技术特点抗体药物抗体药物“Zmapp”埃博拉病毒埃博拉病毒HIV单链抗体单链抗体scAb2219基因工程抗体的应用基因工程抗体的应用思考题 请请通通过过查查阅阅文文献献，找找出出当当前前应应用用于于临临床床的的基基因因工工程程抗抗体体有有哪哪些？请举出些？请举出3 3个例子。个例子。