2022年医学专题—肝功能检验.docx
第十三章 肝功能检验 掌握:黄疸的发生机理、类型及实验室鉴别诊断要点;肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。(一)胆红素代谢障碍(黄疸)黄疸分类: 溶血性黄疸、肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸 (二)胆汁酸代谢障碍1、胆汁酸合成障碍、2、胆汁酸向肠道排出障碍、3胆汁酸肠肝循环紊乱、4胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱 (三)血浆酶异常1肝脏合成酶类:胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白;2. 肝细胞内酶: ALT、AST 3肝脏阻塞性疾病酶活性改变:ALP、GGT;4肝硬化疾病酶活性改变:单胺氧化酶(MAO) (四)血浆蛋白异常 第二节 肝功能试验n 血清(浆)蛋白n 血清酶测定n 血清胆红素测定n 血清胆汁酸测定n 血氨测定一、血清(浆)蛋白测定(一)总蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白(A/G)比值测定1总蛋白测定:化学法(双缩脲法 )、物理法、染料结合法、电泳法 2.白蛋白测定 :染料结合法(BCG、BCP)、沉淀法 3A/G比值 【参考范围】总蛋白 6080g/L 白蛋白 3555g/L球蛋白:1532g/L A/G比值:1.52.0/1临床意义:血中白蛋白(总蛋白浓度)减少: 见于严重肝病、肾病; A/G比值减少与A/G比值倒置:表示肝功能损害严重。(二)纤维蛋白原测定 (凝血因子) 测定方法:分为三大类 根据纤维蛋白原的生物学特性测定方根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。 根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。 【参考范围】2.224.22g/L(热沉淀比浊法)【临床意义】 (1) 纤维蛋白原增加:感染;无菌炎症;其它。(2) 纤维蛋白原减少: 严重的肝脏疾病;其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。(三)甲胎蛋白(1-fetoprotein,AFP)测定 测定方法:酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等 【参考范围】成人1030g/L 、>400g/L作为肝癌诊断标准 【临床意义】 (1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标:400g/L(400ng/ml) ; (2)活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断(四)其它1.铜蓝蛋白测定 【原理】铜蓝蛋白具有氧化酶活性 【参考范围】 52.9167.7 IU/L【临床意义】肝豆状核变性(Wilson病)和遗传性色素沉积症2转铁蛋白【原理】双联吡啶法 【参考范围】 TIBC 男 5077mol/L 女5477mol/L , 转铁蛋白饱和度为33.0%35.0% 【临床意义】 遗传性血色素沉积症铁沉积二、血清酶测定§ (2)方法评价§ 赖氏法的实验结果需与卡门分光法的结果对比后求出;§ NaOH的浓度对显色有影响;§ 该法的重复性差。【参考范围】 525卡门氏单位 【临床意义】(1) 肝细胞损伤的灵敏指标;(2) 慢性活动性肝炎或脂肪肝:ALT轻度增高(100200IU),或属正常范围.ALT测定连续监测法(速率法)() 方法评价:存在着两个副反应,会使测定结果偏高;A、血清中存在的-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。B、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时,在有氨存在条件下,亦能消耗NADH。 双试剂法,因温育期长,能有效地消除干扰反应,测定准确性高,是ALT测定的首选方法;血清不宜反复冰冻保存,以免影响酶活性;避免使用溶血标本。 3.赖氏法测定AST ()原理与方法评价(类似ALT测定)【参考范围】 828卡门氏单位 【临床意义】增高见于:心肌梗死、肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎和各种肝病病人4连续监测法测定AST ()方法评价 误差来源内源性干扰:主要来自血清中高浓度丙酮酸和L-谷氨酸脱氢酶(GLDH)。外源性:干扰来自试剂中污染的GLDH和AST。 【参考范围】 540 IU/L(连续监测法测定)【临床意义】 见赖氏法ALP测定:化学法:金氏法、皮氏法、连续监测法:、金氏法测定ALP(2) 方法评价:磷酸苯二钠比色法与更早的-甘油磷酸钠法相比具有较大的优点,如水解速度快,保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。但与磷酸对硝基酚连续监测法相比,准确度、精密度较低;操作比较繁琐,,灵敏度低。【参考范围成人:313 单位,儿童:528单位 【临床意义】 :ALP主要用于诊断肝胆和骨骼疾病 2.连续监测法测定ALP()方法评价: 线性范围可达500U/L,批内CV为2.06%2.36%,批间CV为2.74%。 【参考范围】男性:112岁 <500U/L, 女性:112岁 <500U/L 1215岁 <750U/L, >15岁 40 150U/L,>25岁 40150U/L。【临床意义】 见金氏法(三)GGT测定法 化学法(重氮反应比色法)和连续监测法。 1. 重氮反应比色法测定GGT【参考范围】 男性 3 17 U/L; 女性 2 13 U/L§ 连续监测法测定GGT【参考范围】男性:1150 U/L;(以-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物)女性:732 U/L 男性: 40U/L;女性:30U/L(以-谷氨酰-4-硝基苯胺为底物)(四)MAO测定 (2) 方法评价【参考范围】 1240 U/ml【临床意义】:肝硬化时,肝纤维化现象十分活跃,MAO活性明显升高。 三、血清胆红素测定测定方法:重氮盐法、胆红素氧化酶(BOD)法、高效液相色谱法(HPLC)、导数分光光度法直接分光光度计法 四、血清胆汁酸测定测定方法:比色分析测定法 、酶免疫分析法、放射免疫分析法、高效液相色谱法;酶比色法(2) 酶比色测定法评价: 优点: 快速、简便、准确、可靠和适用 缺点:试剂价贵、不易保存。对酶量的要求严格,易产生误差。此外,标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品。 【参考范围】 1 7 µmol/L(成人空腹)【临床意义】 1、 任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高. 2、各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝,及急慢性胆道阻塞。 3、空腹胆汁酸测定:敏感、特异性强; 最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病,但其它生化试验正常或轻度异常的病人的诊断。生物化学检验质量控制复习题 A 型题B 1、由二级参考测量程序定值,用于校正校准试剂盒厂家选定测量程序的物质: A一级标准品 B一级校准物 C二级标准品 D控制物 E优级标准品B 2、应用于评价鉴定常规方法,可作为评价商品试剂盒或为质控血清定值的实验方法是: A决定性方法 B参考方法 C推荐方法 D己知偏差法 E未知偏差法D 3、由于分析人员的操作习惯而造成的误差属于以下哪种误差( )A、系统误差 B、粗大误差 C、方法误差 D、随机误差A 4、偏差和偏差系数一般用来表示( )A、准确度 B、特异度 C、精密度 D、灵敏度B 5、EA表示( )的允许误差限度A、90% B、95% C、5% D、85%D 6、医学决定水平:为对临床病人的诊疗具有医学 作用的临界分析物浓度。 A分析 B观察 C比对 D判断 E研究A 7、建立一个实验方法时,常做回收率试验。其主要目的是验证实验方法的( ) A、准确度 B、灵敏度 C、精密度 D、特异性 B 8、哪种评价试验可用来检测侯选方法的恒定系统误差( )A、回收试验 B、干扰试验 C、对比试验 D、重复性试验B 9、回收率好,说明该定量方法: A 精密度高 B 准确度高 C 灵敏度好 D 实用 E 属于参考方法D 10、Levy-Jennings质控图中用来控制界限的是( )A、标准差 B、误差 C、变异系数 D、平均值和标准差B 11、在室内1,3X质控规则中,若质控血清的检测结果超出X±3s,则判为( )A、在控 B、失控 C、警告 D、难以确定A 12、系统误差在平均值质控图中常表现为 A测定值在上下波动 B。测定值有两天连续在均值以上或以下 C测定值有一次越限,次日又回到限内 D。测定值有三天连续在均值以上或以下 E测定值有五天连续在均值以上或以下B 型题AOCV BRCVK CRCVU DCCV EVID 1、选定变异系数 B 2、常规条件下已知值的变异 E 3、变异指数X 型题:ABCD 1、下列哪些可能是室内质控图发生向上或向下倾向性变化的原因?A、试剂过期 B、分光光度计光源衰老 C、更换了校准品或操作者 D、光电管老化ABCDE 2、常规方法的选择在可靠性方面应具有: A较高的检测精密度 B较大的检测能力 C较低的检测费用 D较快的检测速度 E较好的检测准确度ABD 3、准确度与精密度的关系为: A 测量的精密度并不能说明测量值与真值的关系B 精密的测量值不一定是准确的 C 准确度高,一般说来精密度也较好 D 系统误差会使准确度降低,但其对精密度的影响要根据它在一系列测定中是否保持不变BC 4、质控物的作用是:A 监测测定结果的准确度 B 改进测定方法的准确度C 观察测定结果的精密度 E 提高测定结果的精密度内容总结(1)第十三章 肝功能检验 掌握:黄疸的发生机理、类型及实验室鉴别诊断要点(2)(三)甲胎蛋白(1-fetoprotein,AFP)测定 测定方法:酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等 【参考范围】成人1030g/L 、>400g/L作为肝癌诊断标准 【临床意义】 (1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标:400g/L(400ng/ml)