葡萄糖的旋光性及变旋现象.ppt

实验实验 十二十二 葡萄糖的旋光性及变旋现象葡萄糖的旋光性及变旋现象一、实验目的一、实验目的1 1、了解糖的旋光性及变旋现象；、了解糖的旋光性及变旋现象；2 2、学习旋光度的测定方法。、学习旋光度的测定方法。二、实验原理二、实验原理1.定义：定义：手性化合物使平面偏振光偏振面旋转的性质称为手性化合物使平面偏振光偏振面旋转的性质称为旋光性。具有旋光性的物质称为旋光物质，或称为旋光性。具有旋光性的物质称为旋光物质，或称为光学活性物质。光学活性物质。若手性化合物能使偏振面右旋若手性化合物能使偏振面右旋(顺时针顺时针)称为右旋体，称为右旋体，用用(+)表示；而其对映体必使偏振面左旋表示；而其对映体必使偏振面左旋(逆时针逆时针)相相等角度，称为左旋体，用等角度，称为左旋体，用(-)表示。表示。偏振面被旋转的角度称为偏振面被旋转的角度称为旋光度，用旋光度，用表示表示。手性化合物旋光度与溶液浓度、溶剂、测手性化合物旋光度与溶液浓度、溶剂、测定温度、光源波长、测定管长度有关。因此定温度、光源波长、测定管长度有关。因此旋光仪测定的旋光度旋光仪测定的旋光度并非特征物理常数，并非特征物理常数，同一化合物测得的旋光度就有不同的值。因同一化合物测得的旋光度就有不同的值。因此为了比较不同物质的旋光性能，通常用此为了比较不同物质的旋光性能，通常用比比旋光度旋光度来表示物质的旋光性，比旋光度是物来表示物质的旋光性，比旋光度是物质特有的物理常数质特有的物理常数。用。用 表示。表示。2.测定方法：测定方法：手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。实手性化合物的旋光度可用旋光仪来测定。实验室常用目测或自动旋光仪。验室常用目测或自动旋光仪。自动旋光仪基本构造自动旋光仪基本构造 仪器采用20瓦钠光灯作光源，由小孔光栏和物镜组成一个简单的点光源平行光管，平行光经偏振镜（一）变为平面偏振光，当偏振光经过有法拉弟效应的磁旋线圈时，其振动平面产生50赫兹的角往复摆动，该偏振光通过检偏镜投射到光电倍增管上，产生交变的光电讯号，当检偏镜的透光面与偏振光的振动面正交时，即为仪器的光学零点，此时出现平衡指示。而当偏振光通过一定旋光度的测试样品时，偏振光的振动面转过一个角度，此时光电讯号就能驱动工作频率为50HZ的伺服电机，并通过涡轮杆带动检偏镜转动角而使仪器回到光学零点，此时读数盘上的示值即为所测物质的旋光度。三、仪器和试剂三、仪器和试剂仪器：仪器：WZZ-3WZZ-3自动旋光仪、自动旋光仪、容量瓶（容量瓶（20ml20ml）试剂：葡萄糖试剂：葡萄糖WZZ-3自动旋光仪自动旋光仪四、四、仪器使用仪器使用 1、先、先打开电源开关（打开电源开关（power），至少等），至少等待待5分钟后，分钟后，后后将光源开关向（将光源开关向（light）上拨）上拨至直流位置至直流位置,此时可使钠灯启动。关闭时则此时可使钠灯启动。关闭时则是先关闭（是先关闭（light）再关闭（）再关闭（power）。）。2、按、按enter键，显示出厂默认值：键，显示出厂默认值：mode1;L:2.0;C:0;n:1。Mode1:表示测旋光度表示测旋光度 L:2.0：表示试管的长度：表示试管的长度 C：表示样品的浓度表示样品的浓度 n:表示自动复测的次数表示自动复测的次数3、如不需修改，按、如不需修改，按 enter 键，显示键，显示“0.000”作一般旋光仪使用。作一般旋光仪使用。4、如需修改，注意、如需修改，注意光标光标的位置，可做修改，的位置，可做修改，输入数字后，按输入数字后，按enter键。键。5、在测量的过程中，要改变模式，可按、在测量的过程中，要改变模式，可按键。键。6 6、每次在放入样品前，按、每次在放入样品前，按“校零校零”键。键。五、实验步骤五、实验步骤1、将放样管洗好，左手拿住管子把它竖立，装上蒸馏水，使液面凸出管口。2、将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好，不能带入气泡，旋上螺丝帽盖，不要过紧。3、将蒸馏水管擦干，放入旋光仪内盖上盖子，开启钠光灯，按清零键，读数盘显示0.000即可。（一）旋光仪零点的校正：（一）旋光仪零点的校正：（二）旋光度的测定：（二）旋光度的测定：1、准确称取2.0g葡萄糖样品，放在20ml容量瓶中配成溶液，倒入样品管，放入已调零的旋光仪内，待读数稳定读出读数。2、每隔20min测定1次葡萄糖溶液的旋光值，至少测定4次，根据公式计算葡萄糖溶液的比旋光值。六、注意事项六、注意事项1、试样溶液必须澄清，不应浑浊或含有混悬的小颗粒，否则，应预先过滤。试样溶液不能含有其它的光学活性杂质，如有机酸、蛋白质、核酸、生物碱。2、每次测定之前应以溶剂做空白实验，校正零位。