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    实验报心得体会及收获实验心得与收获(7篇).docx

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    实验报心得体会及收获实验心得与收获(7篇).docx

    实验报心得体会及收获实验心得与收获(7篇)关于试验报心得体会及收获一 现有制造电池、蓄电池的原理是电化学反响。电极是不同种元素、不同种化合物构成,产生电流不需要磁场的参加。 目前有磁性材料作电极的铁镍蓄电池(注1),但铁镍蓄电池放电时没有外加磁场的参加。 通过数次试验证明,在磁场中是可以发生电化学反响的。本试验报告是讨论电化学反响发生在磁场中,电极是用同种元素、同种化合物。 磁场中的电化学反响不同于燃料电池、磁流体发电。 1、所用器材及材料 (1):长方形塑料容器一个。约长100毫米、宽40毫米、高50毫米。 (2):磁体一块,上面有一根棉线,棉线是作为挂在墙上的钉子上用。还有铁氧体磁体phi;30*23毫米二块、稀土磁体phi;12*5毫米二块、稀土磁体phi;18*5毫米一块。 (3):塑料瓶一个,内装硫酸亚铁,分析纯。 (4):铁片两片。(对铁片要进展除锈处理,用砂纸除锈、或用刀片除锈、或用酸清洗。)用的罐头铁皮,长110毫米、宽20毫米。外表用砂纸处理。 2、 电流表,0至200微安。 用微安表,由于要让指针能向左右移动,用表头上的调0螺丝将指针向右的方向调整肯定位置。即通电前指针在50微安的位置作为0,或者不调整。 3、 “ 磁场中的电化学反响“装置是直流电源,本试验由于要使用电流表,一般的电流表指针的偏转方向是根据电流流淌方一直设计的,(也有随电流流淌方向转变,电流表指针可以左右偏转的电流表。本试验报告示意图就是画的随电流流淌方向转变,电流表指针可以向左或向右偏转的电流表)。因此本演示所讲的是电流流淌方向,电流由“磁场中的电化学反响“装置的正极流向“磁场中的电化学反响“装置的负极,通过电流表指针的偏转方向,可以推断出“磁场中的电化学反响“装置的正极、负极。 4、 手拿磁体,靠近塑料瓶,明显感到有吸引力,这是由于塑料瓶中装了硫酸亚铁,说明硫酸亚铁是铁磁性物质。 5、 将塑料瓶中的硫酸亚铁倒一些在纸上,压碎硫酸亚铁晶体,用磁体靠近硫酸亚铁,这时有一局部硫酸亚铁被吸引在磁体上,进一步说明硫酸亚铁是铁磁性物质。 6、 将磁体用棉线挂在墙上一个钉子上让磁体悬空垂直不动,用装有硫酸亚铁的塑料瓶靠近磁体,当还未接触到悬空磁体时,可以看到悬空磁体已开头运动,此事更进一步说明硫酸亚铁是铁磁性物质。(注:用另一个塑料瓶装入硫酸亚铁饱和溶液产生的现象同样) 7、 通过步骤4、5、6我们得到这样的共识,硫酸亚铁是铁磁性物质。 8、 将塑料瓶中的硫酸亚铁适量倒在烧杯中,参加蒸溜水溶解硫酸亚铁。可以用饱和的硫酸亚铁溶液,然后倒入一个长方形的塑料容器中。试验是用的饱和硫酸亚铁溶液。装入长方形容器中的液面高度为40毫米。 9、 将铁片分别放在塑料容器中的硫酸亚铁溶液两端中,但要留大局部在溶液之上,以便用电流表测量电流。由于两个电极是用的同种金属铁,没有电流的产生。 10、 然后,在塑料容器的外面,将铁氧体磁体放在某一片铁片的四周,让此铁片处在磁埸中。用电流表测量两片铁片之间的电流,可以看到有电流的产生。(假如用单方向移动的电流表,留意电流表的正极应接在放磁体的那一端),测量出电流强度为70微安。为什么同种金属作电极在酸、碱、盐溶液中有电流的产生?电位差是怎样形成的?我是这样看这个问题的:由于某一片铁片处在磁埸中,此铁片也就成为磁体,因此,在此铁片的外表吸引了大量的带正电荷的铁离子,而在另一片铁片的外表的带正电荷的铁离子的数量少于处在磁埸中的铁片的带正电荷的铁离子数量,这两片铁片之间有电位差的存在,当用导线接通时,电流由铁离子多的这一端流向铁离子少的那一端,(电子由铁离子少的那一端铁片即电源的负极流向铁离子多的那一端铁片即电源的正极)这样就有电流产生。可以用化学上氧化-复原反响定律来看这个问题。处在磁埸这一端的铁片的外表由于有大量带正电荷的铁离子聚拢在外表, 而没有处在磁埸的那一端的铁片的外表的带正电荷的铁离子数量没有处在磁埸中的一端多,当接通电路后,处在磁埸这一端的铁片外表上的铁离子得到电子(复原)变为铁原子沉淀在铁片外表,而没有处在磁埸那一端的铁片失去电子(氧化)变为铁离子进入硫酸亚铁溶液中。由于在外接的电流表显示,有电流的流淌,可以证明有电子的转移,而电子流淌方向是由电源的负极流向电源的正极,负极铁片上铁原子失去电子后,就变成了铁离子,进入了硫酸亚铁溶液中。下列图所示。 11、 确定“磁场中的电化学反响“的正、负极,确认正极是处在磁体的位置这一端。这是通过电流表指针移动方一直确定的。 12、 转变电流表指针移动方向的试验,移动铁氧体磁体试验,将第10步骤中的磁体从某一片上移开(某一片铁片可以退磁处理,如放在交变磁埸中退磁,产生的电流要大一些)然后放到另一片铁片四周,同样有电流的产生,留意这时正极的位置发生了变化,电流表的指针移动方向产生了变化。 假如用稀土磁体,由于产生的电流强度较大,电流表就没有必要调整0为50毫安处。而用转变接线的方式来让电流表移动。 转变磁体位置:假如用磁体直接吸引铁片电极没有浸在液体中的部份的方式来转变磁体位置,铁片电极不退磁处理也行。 下列图所示磁体位置转变,电流表指针偏转方向转变。证明电流流淌方向转变,磁场中电化学反响成立。电流流淌方向说明白磁体在电极的正极位置。 此演示试验产生的电流是微缺乏道的,我认为此演示的重点不在于产生电流的强度的大小,而重点是演示出产生电流流淌的方向随磁体的位置变动而发生方向性的转变,这就是说此电源的正极是随磁体在电源的那一极而正极就在磁体的那一极。因此,可以证明,“磁场中的电化学反响“是成立的,此电化学反响是随磁体位置发生变化而产生的可逆的电化学反响。请特殊留意“可逆“二字,这是本物理现象的重点所在。 通过磁场中的电化学反响证明:物理学上原电池的定律在恒定磁场中是不适用的(原电池两极是用不同种金属,而本试验两极是用一样的金属)。 通过磁场中的电化学反响证明:物理学上的洛仑兹力(洛伦兹力)定律应修正,洛仑兹力对磁性运动电荷是吸引力,而不是偏转力。并且洛仑兹力要做功。 通过试验证明,产生电流与磁场有关,电流流流淌的方向与磁体的位置有关。电极的两极是用的同种金属,当负极消耗后又补充到正极,由于两极是同种金属,所以总体来说,电极没有发生消耗。这是与以往的电池的区分所在。而且,正极与负极可以随磁体位置的转变而转变,这也是与以往的电池区分所在。 磁场中电化学反响电源的正极与负极可以循环使用。 产生的电能大小所用的计算公式应是法拉弟电解定律,法拉第电解第肯定律指出,在电解过程中,电极上析出产物的质量,和电解中通入电流的量成正比,法拉第电解其次定律指出:各电极上析出产物的量,与各该物质的当量成正比。法拉第常数是1克当量的任何物质产生(或所需) 的电量为96493库仑。而移动磁体或移动电极所消耗的功应等于移动磁体或移动电极所用的力乘以移动磁体或移动电极的距离。 1、 在多大的铁片面积下,产生多大的电流?详细数字还要进一步试验,从目前试验来看,铁片面积及磁场强度大的条件下,产生的电流强度大。如铁片浸入硫酸亚铁溶液20毫米时要比浸入10毫米时的电流强度大。 2、 产生电流与磁场有关,还要作进一步的定量试验及进一步的理论分析。如用稀土磁体比铁氧体磁体的电流强度大,在试验中,最大电流强度为200微安。可以超过200微安,由于电流表有限,没有让试验电流超过200微安。 3、 产生的电流值随时间变化的曲线图a-t(电流-时间),还要通过进一步试验画出。 4、 电解液的浓度及用什么样电解液较好?还需进一步试验。 由于磁场中的电化学反响在书本及因特网上查不到现成的资料,可以说是一门新学科,因此,还需要进一步的试验验证。此文起抛砖引玉之用。我盼望与有识之士共同进展进一步的试验。 我的观点是,一项新试验,需要不同的时间、不同的人、不同的地点重复试验胜利才行。 关于试验报心得体会及收获二 试验内容 4蚯蚓的选择 试验地点 试验室 试验目的 蚯蚓相宜的生活环境是什么样的? 试验器材 蚯蚓、泥土、水、盒子 试验步骤 1、 (1)把长方形盒子一端剪去一局部,盖上玻璃片,再在另一端用黑布包住。 (2)在盒底放入塑料薄膜,以爱护蚯蚓,便利它爬行。 (3)把5条蚯蚓放在盒子的中间,盖好盖子。 (4)5分钟以后翻开盒盖,做好观看和记录。 (5)再做2次。 2、 (1)在另外的盒子两端分别铺上同样土质的泥土,不同的是一边枯燥,一边潮湿。 (2)把10条蚯蚓放在盒子的中间,盖好盖子。 (3)5分钟以后翻开盒盖观看,记录。 (4)再做2次 试验现象 1、蚯蚓向黑暗的一方爬行。 2、蚯蚓向潮湿的一方爬行 试验结论 1、蚯蚓喜爱黑暗的环境。 2、蚯蚓喜爱潮湿的环境。 备注 试验人 试验时间 仪器治理员签字 关于试验报心得体会及收获三 1试验前应仔细预习试验指导,明的确验目的和要求,写出预试验报告。 2进入试验室必需穿白外套。严格遵守试验课纪律,不得无故迟到或早退。不得高声说话。严禁拿试验器具开玩笑。试验室内制止吸烟、用餐。 3严格按操作规程进展试验。试验过程中自己不能解决或打算的问题,切勿盲目处理,应准时请教指导教师。 4严格按操作规程使用仪器,凡不熟识操作方法的仪器不得随便动用,对珍贵的周密仪器必需先熟知使用方法,才能开头使用;仪器发生故障,应马上关闭电源并报告教师,不得擅自拆修。 5取用试剂时必需“随开随盖”,“盖随瓶走”,即用毕马上盖好放回原处,切忌“张冠李戴”,避开污染。 6爱惜公物,节省水、电、试剂,遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。 7留意水、电、试剂的使用安全。使用易燃易爆物品时应远离火源。用试管加热时,管口不准对人。严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在试验台上。 8废纸及其它固体废物严禁倒入水槽,应倒到垃圾桶内。废弃液体如为强酸强碱,必需事先用水稀释,方可倒入水槽内,并放水冲走。 9以实事求是的科学态度照实记录试验结果,认真分析,做出客观结论。 试验失败,须仔细查找缘由,而不能任意涂改试验结果。试验完毕,仔细书写试验报告,按时上交。 10试验完毕,个人应将试剂、仪器器材摆放整齐,用过的玻璃器皿应刷洗洁净归置好,方可离开试验室。值日生则要仔细负责整个试验室的清洁和整理,保持试验干净卫生。离开试验室前检查电源、水源和门窗的安全等,并严格执行值日生登记制度。 试验报告通过分析总牢固验的结果和问题,加深对有关理论和技术的理解与把握,提高分析、综合、概括问题的力量,同时也是学习撰写讨论论文的过程。 1试验报告应当在专用的生化试验报告本上、按上述格式要求书写。 2试验报告的前三局部试验原理、试验材料(包括试验样品、主要试剂、主要仪器与器材)、试验步骤(包括试验流程与操作步骤)要求在试验课前预习后撰写,作为试验预习报告的内容。预习时也要考虑并设计好相应试验记录的表格。 3每项内容的根本要求 (1)试验原理:简明扼要地写出试验的原理,涉及化学反响时用化学反响方程式表示。 (2)试验材料:应包括各种来源的生物样品及试剂和主要仪器。说明化学试剂时要避开使用未被普遍承受的商品名和俗名。试剂要标清所用的浓度。 (3)试验步骤:描述要简洁,不能照抄试验讲义,可以采纳工艺流程图的方式或自行设计的表格来表示,但对试验条件和操作的关键环节应写清晰,以便他人重复。 (4)试验记录:包括主要试验条件、试验中观看到的现象及试验中的原始数据。 (5)结果(定量试验包括计算):应把所得的试验结果(如观看现象)和数据进展整理、归纳、分析、比照,尽量用图表的形式概括试验的结果,照实验组与对比组试验结果的比拟表等(有时对试验结果还可附以必要的说明)。 (6)争论:不应是试验结果的重述,而是以结果为根底的规律推论。如对定性试验,在分析试验结果的根底上应有中肯的结论。还可以包括关于试验方法、操作技术和有关试验的一些问题,对试验特别结果的分析和评论,对于试验设计的熟悉、体会和建议,对试验课的改良意见等。 (7)结论:一般试验要有结论,结论要简洁扼要,说明本次试验所获得的结果。 1试验预习报告内容(30分) 学生进入试验室前应预习试验,并书写预习报告。试验预习报告应包括以下三局部: 试验原理(10分):要求以自己的语言归纳要点;试验材料(5分):包括样品、试剂及仪器。只列出主要仪器、试剂(常规材料不列);试验方法(15分):包括流程或路线、操作步骤,要以流程图、表格式给出要点,简明扼要。依据各局部内容是否完整、清晰、简明等,分以下三个等级给分。 优秀:工程完整,能反映试验者的加工、整理、提炼。 合格:较完整,有肯定整理,但不够精炼。 不合格:不完整、缺项,大段文字,完全照抄教材,记流水账。 试验预习报告不合格者,不允许进展试验。该试验应重新预约,待试验室安排时间前方可进展试验。 2试验记录内容(20分) 试验记录是试验教学、科学讨论的重要环节之一,必需培育严谨的科学作风。 试验记录的主要内容包括以下三方面:主要试验条件(如材料的来源、质量;试剂的规格、用量、浓度;试验时间、操作要点中的技巧、失误等,以便总牢固验时进展核对和作为查找成败缘由的参考依据);试验中观看到的现象(如参加试剂后溶液颜色的变化);原始试验数据:设计试验数据表格(留意三线表格式),精确记录试验中测得的原始数据。记录测量值时,要依据仪器的准确度精确记录有效数字(如吸光值为0.050,不应写成0.05),留意有效数字的位数。 试验记录应在试验过程中书写;应当用钢笔或者圆珠笔记录,不能用铅笔。记录不行擦抹和涂改,写错时可以精确划去重记。记录数据时请教师审核并签名。 试验记录分以下三个等级给分。 优秀:照实具体地记录了试验条件、试验中观看到的现象、结果及试验中的原始数据(如三次测定的吸光度值)等;试验记录用钢笔或者圆珠笔记录,没有抹擦和涂改迹象。书写精确,表格标准(三线表)。有教师的签字审核。 合格:记录了主要试验条件,但不具体、凌乱;试验中观看到的现象不细致;原始数据无涂改迹象,但不标准。有教师的签字审核。 不合格:记录不完整,有遗漏;原始数据有抹擦和涂改迹象、捏造数据(以0分计);图、表格形式错误;用铅笔记录原始数据;无教师的签字审核。 若记录的结果有疑心、遗漏、丧失,必需重做试验,培育严谨的科学作风。 3结果与争论(45分) (1)数据处理(5分) 对试验中所测得的一系列数值,要选择适宜的处理方法进展整理和分析。数据处理时,要依据计算公式正确书写中间计算过程或推导过程及结果,得出最终试验结果。要留意有效数字的位数、单位(国际单位制)。经过统计处理的数据要以xsd表示。可分成以下三个等级给分。 优秀:处理方法合理,中间过程清晰,数据格式单位标准。 合格:处理方法较合理,有中间计算过程;数据格式单位较标准。 不合格:处理方法不当;无中间过程;有效数字的位数、单位不标准。 (2)结果(20分) 试验结果局部应把所观看到的现象和处理的最终数据进展归纳、分析、比对,以列表法或作图法来表示。同时对结果还可附以必要的说明。 要留意图表的标准:表格要有编号、标题;表格中数据要有单位(通常列在每一列顶端的第一行或每一行左端的第一列)。图也要有编号、标题,标注在图的下方;直角坐标图的纵轴和横轴要标出方向、名称、单位和长度单位;电泳图谱和层析图谱等要标明正、负极方向及分别出的区带、色带或色斑的组分或成分。电泳结果还要标记泳道,并在图题下给出泳道的解释;要标出分子量标准的各条带的大小。并且留意需要结合图表对结果进展较具体的解释说明。 可分成以下三个等级给分。 优秀:试验结果有归纳、 解释说明,结果精确,格式标准。 合格:堆砌试验现象、数据,解释说明少。 不合格:最终试验结果错误且无解释说明,图表、数字不标准。 (3)争论(20分) 争论应围绕试验结果进展,不是试验结果的重述,而是以试验结果为根底的规律推论,根本内容包括:用已有的专业学问理论对试验结果进展争论,从理论上对试验结果的各种资料、数据、现象等进展综合分析、解释,说明试验结果,重点阐述试验中消失的一般规律与特别性规律之间的关系。 关于试验报心得体会及收获四 试验内容 8光是怎样传播的 试验地点 试验室 试验目的 验证光的传播路线 试验器材 卡纸4张,其中3张在同一位置打一个洞(一枚硬币大小,夹子,手电筒、水管3段,弯头2个 试验步骤 1、用夹子夹住卡纸,横立在桌面上排成整齐的一行,间隔距离为15cm(没有孔的放在最末端) 2、用手电筒照耀有孔卡指和管口 试验现象 光在物质中是直线传播。 试验结论 光在同一物质中沿直线传播。 备注 试验人 试验时间 关于试验报心得体会及收获五 生物学是一门试验科学。生物新课程提倡面对全体学生、提高生物科学素养和探究性学习的课程理念。其中探究学习是让学生在主动参加的过程中进展学习,让学生在探究问题的活动中猎取学问,了解科学家的工作方法和思维方法,学会科学讨论所需要的各种技能,领悟科学观念,培育科学精神。这种学习的方式的中心是针对问题的探究活动,当学生面临各种让他们困惑的问题时,他就要想法查找答案。 在解决问题时,要对问题进展推理、分析,找出问题解决的方向,然后通过观看、试验来收集事实,通过对获得的资料进展归纳、比拟、统计分析,形成对问题的解释。最终通过争论和沟通进一步澄清事实,发觉新的问题,对问题进展更深入的讨论。 在此背景理念依据下,在教学中教学模式也将发生根本的转变,生物课将更多地开展学生的试验、争论、沟通等活动。引导学习教学模式就是在这种背景下构建的。详细的模式构造:问题阅读、试验分析、推理、归纳、争论结论。 在运用这种模式的过程中我有下面几点感受: 1、在教师的引导下学生可带者问题去阅读、分析、争论资料,到达解决问题的目的。比方:在学习空中飞行的动物时,教师可这样引导学生;想一想,我们人要想在天空自由拘束的飞行必需先解决什么问题? 学生思索后说;一是,解决了动力问题。二是,解决了地心引力问题。教师随后提出问题:鸟是如何解决这些问题的?引导学生思索,让学生带着问题去看书、阅读、争论、沟通、的出结论。这样既可提高学生的学习兴趣,转变学习方式,又符合新课程的要求。 2、合理开发的有效地利用一切可以利用的课程资源是实现课程目标,转变学生学习方式的关键条件。学问、技能、阅历、活动方式方法等都是课程资源。在学习水中生活的动物时,对于生活在我这些地方的学生来说,对水中的动物了解不多,而且上课时还不能做试验,学生缺少感性的熟悉,这时教师就要引导学生开发自己已有的课程资源。如:学习鱼鳍的作用时引导学生想想:独桨船和双桨船他们的桨各起什么作用?在学习鱼儿离开水为什么会死?教师可引导学生回忆:头发在水中水什么样的?从水中出来时又是什么样的?这样就很简单理解学问,解决了问题。 3、信息化是当今世界经济和社会进展的大趋势。新课程注意现代信息技术与生物新课程的整合。这样可有效地应用数字化的优势到达学习目标。教师用编制成的演示文稿、多媒体课件来引导学生学习或作为学生自主学习的资源。 在课程学习中,利用诸多的文字处理、图形图像处理、信息集成等工具,让学生对课程学习内容进展重组、创作,不仅使学生获得学问,而且能够帮忙学生建构学问。但是,教师在制作多媒体课件时,把每个学问点、每个环节设计的过于完善,在教师的引导下学生很简洁的就可把握学问,完成教学任务。但也存在着弊端,这就是学生的自主学习不到位,在获得学问的过程中缺少自主探究的过程。这个问题就是我发觉的问题和努力改良的方面。 关于试验报心得体会及收获六 一、定义与作用 试验报告,就是在某项科研活动或专业学习中,试验者把试验的目的、方法。步骤、结果等,用简洁的语言写成书面报告。 试验报告必需在科学试验的根底上进展。胜利的或失败的试验结果的记载,有利于不断积存讨论资料,总结讨论成果,提高试验者的观看力量。分析问题和解决问题的力量,培育理论联系实际的学风和实事求是的科学态度。 二、写作要求 试验报告的种类繁多,其格式大同小异,比拟固定。试验报告,一般依据试验的先后挨次来写,主要内容有: 1.试验名称名称,要用最简练的语言反映试验的内容。如验证某定律,可写成“验证”;如测量的试验报告,可写成“测定。” 2.试验目的试验目的要明确,要抓住重点,可以从理论和实践两个方面考虑。在理论上,验证定理定律,并使试验者获得深刻和系统的理解,在实践上,把握使用仪器或器材的技能技巧。 3.试验用的仪器和材料如玻璃器皿。金属用具、溶液、颜料、粉剂、燃料等。 4.试验的步骤和方法这是试验报告极其重要的内容。这局部要写明依据何种原理。定律或操作方法进展试验,要写明经过哪儿个步骤。还应当画出试验装置的构造示意图,再配以相应的文字说明,这样既可以节约很多文字说明,又能使试验报告简明扼要。清晰明白。 5.数据记录和计算指从试验中测到的数据以及计算结果。 6.结果即依据试验过程中所见到的现象和测得的数据,作出结论。 7.备注或说明可写上试验胜利或失败的缘由,试验后的心得体会、建议等。 有的试验报告采纳事先设计好的表格,使用时只要逐项填写即可。 三、撰写时应留意事项 写试验报告是一件特别严厉。仔细的工作,要讲究科学性、精确性。求实性。在撰写过程中,常见错误有以下几种状况: 1.观看不细致,没有准时、精确、照实记录。 在试验时,由于观看不细致,不仔细,没有准时记录,结果不能精确地写出所发生的各种现象,不能恰如其分。实事求是地分析各种现象发生的缘由。故在记录中,肯定要看到什么,就记录什么,不能弄虚作假。为了印证一些试验现象而修改数据,假造试验现象等做法,都是不允许的。 2.说明不精确,或层次不清楚。 比方,在化学试验中,消失了沉淀物,但没有精确他说明是“晶体沉淀”,还是“无定形沉淀”。说明步骤,有的说明没有根据操作挨次分条列出,结果消失层次不清楚。凌乱等问题。 3.没有尽量采纳专用术语来说明事物。 例如,“用棍子在混合物里转动”一语,应用专用术语“搅拌”较好,既可使文字简洁明白,又符合试验的状况。 4.外文、符号、公式不精确,没有使用统一规定的名词和符号。 验证欧姆定律 【试验目的】通过试验加深对欧姆定律的理解,熟识电流表、电压表、变阻器的使用方法。 【学问预备】学习有关理论(略) 【试验器材和装置】器材:电流表、电压表、电池组、定值电阻滑动变阻器、导线、开关、装置(略) 【试验步骤】 1.按图示连接电路。 2.保持定值电阻r不变,移动滑动变阻器的铜片,转变加在r两端的电压,将电流表、电压表所测得的电流强度。电压的数值依次填人表一。 3.转变定值电阻凡同时调整变阻器,使加在r两端的电压保持不变,将电阻r的数值与电流表测得的电流强度的数值依次填人表二。 关于试验报心得体会及收获七 禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于推断未使用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物安康组织进展全球流感监测所普遍采纳的方法,而且因其具有经济、快速、牢靠、操作简便、能够处理大量的样品,并能在短时间内报告禽流感抗体水公平优点,已经成为当前基层兽医试验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为操作影响较大,常常因操作不标准、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题,现依据几年来的工作阅历对该试验过程中应留意的事项做一探讨。 1、取96孔90°v形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的112孔每孔加25 l pbs液。 2、吸取25 l标准禽流感抗原参加到第一排第1孔中充分混匀。 3、从第1孔吸取25 l混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25l参加到第3孔中,依次进展倍比稀释至其次排最终一孔即第24孔,最终弃去25 l。第三排孔至第四排孔同上操作。 4、依次向第一至第五排孔的每孔中参加25 l 1%的鸡红细胞悬液。 5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25)静置30 min观看结果(假如环境温度太高,可置4环境下)。 6、结果判定:将板作45°倾斜,观看红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(hau) 1、依据血凝试验结果配制4hau抗原。(即1hau抗原除以4) 2、取96孔v形酶标板,用移液器在第112孔各参加25 l pbs。 3、在第1孔参加25 l被检血清,充分混匀后移出25 l加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25 l。 4、按以上步骤参加阳性血清和阴性血清(各做两份),作对比孔。 5、在第112孔各参加25 l 4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25下静置30 min。 6、每孔参加25 l 1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25)静置40 min后观看结果,若环境温度过高,可于4条件下进展,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。 7、结果判定:只有阴性对比孔血清滴度不大于2 log2,阳性对比孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。 将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。 1样品的保存及试验前处理 1.1 采集的血液样品应准时分别血清,最好分装至离心管中,标记清晰,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并制止运输过程中猛烈震惊。 1.2 一般状况下,在5天内检测的样品可放置在4的冰箱中冷藏,否则低温冷冻保存。 1.3 在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采纳上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌猛烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。 1.4 对消失胶冻状的血清样品,可采纳反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其中少量的清亮血清。 1.5 水禽等样品为排解非特异性反响,还应相应进展灭能反响。详细操作方法:56水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。 2器材的选择 2.1 酶标板的选择: 建议使用96孔90°v型板进展试验,通过反复试验证明:90°v型板相对于110°板及130°板来讲,具有红细胞沉降速度快,产生的凝集图像清楚、结果简单判定等优点。 2.2 移液枪的选择及使用: 单道、多道可调微量移液枪应选择适宜的量程,以便准确度的提高。 使用时应采纳一档吸液二档排液的方法。吸取液体时,枪头要深入液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时 应加在板孔底部。倍比稀释血清时,应每孔至少反复吹吸6次,以便混合匀称,还应留意尽量避开产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样,以免穿插污染,影响试验结果。 加样、倍比稀释时应高度集中留意力,以免漏加、重复加样等。 3试剂的保存及配置 3.1 禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格根据说明书的要求进展保存和配置,试验前应提前将其恢复至室内温。抗原的保存温度为-20,反复冻融会降低抗原的滴度,应避开反复冻融。 3.2 ph7.2、0.01mol/l的pbs液的制备 应尽量现用现配 每次使用前应测ph值,以免时间过长而导致ph值发生转变。 由于ph试纸跨度范围偏大,ph值不易精确介定,因此最好采纳酸度计精确测量ph值,以提高试验的准确度。 全部试验均采纳同一种稀释液。 3.3 1%红细胞的制备 为避开有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应最好选择实行2-3只spf鸡或未进展过任何免疫过的成年公鸡血液。固然采血的前提条件是要按非常之一采血量比例在一次性注射器中参加抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。 采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中,由于通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比拟,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与参加的pbs液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱洁净的目的。 经20xx3000r/min,510min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再参加十倍以上血量的pbs液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞裂开),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透亮为止。 在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞匀称,使其每孔参加一样数量的红细胞。 制备好的红细胞液假如放置后上清液变红,说明有溶血,不行再使用。 3.4抗原液的配制 先做血凝试验测定效价,以抗原与红细胞完全凝集的孔为1hua抗原,配制4hua抗原应往前推算两孔,即除以4后的值。 每次做试验前,必需重新检测禽流感抗原的血凝效价,以免效价发生转变而导致抗原稀释倍数不精确,从而导致试验结果不精确。 为保证配制的抗原精确,还要进展抗原回滴试验。详细方法:做二排抗原回滴,在两排的第18孔各加25微升pbs,取4hau抗原25微升加在两排的第1、第2孔,混匀,从第2孔倍比稀释至第4孔,弃去25微升,另一排同样。从第2至第8孔补25微升pbs,以保持75微升总量不变,另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞,震荡10秒钟。静置30分钟观看结果。这样在第1孔为4hau抗原,第2孔为2hau抗原,第3孔为1hau抗原,第4孔为1/2hau抗原,均为75微升总量,第5至第8孔为空白对比。假如抗原回滴试验不成立,应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。由于假如抗原浓度过高,则所测定的抗体效价水平偏低,假如抗原浓度过低,则所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至试验成立的话会对结果有很大影响。 4结果的判定 每次试验必需设阳性及阴性(空白)对比血清,判别试验是否成立。判读结果时,将酶标板倾斜45°,以孔底沉淀的红细胞流淌性好,呈泪珠样流淌,边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。 5试验器具的清洗 每次试验完毕后,应将酶标板中液体甩净,然后用自来水反复冲净每个孔,再放入3%naoh中4小时,清水反复冲净,再放入3%hcl中4小时,清水反复冲净,再用蒸馏水反复冲洗几次,甩干水份,入枯燥箱中枯燥备用。试验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、枯燥。以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。 在进展禽流感血凝抑制试验时,应充分考虑到各方面的影响因素,供应的检测结果才会真实牢靠,精确把握禽类的免疫抗体水平,进而为科学防控禽流感供应理论依据。

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