血凝抑制实验报告500字范文（10篇）.docx

血凝抑制实验报告500字范文（10篇）血凝抑制实验报告500字范文11、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的112孔每孔加25LPBS液。2、吸取25L标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。3、从第1孔吸取25L混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25L加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔，最后弃去25L。第三排孔至第四排孔同上操作。4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25L1%的鸡红细胞悬液。5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温（20-25）静置30min观察结果（如果环境温度太高，可置4环境下）。6、结果判定：将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集（不流淌）的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位（HAU）血凝抑制实验报告500字范文21、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在第一至第五排的112孔每孔加25LPBS液。2、吸取25L标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。3、从第1孔吸取25L混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25L加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔，最后弃去25L。第三排孔至第四排孔同上操作。4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25L1%的鸡红细胞悬液。5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温（20-25）静置30min观察结果（如果环境温度太高，可置4环境下）。6、结果判定：将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集（不流淌）的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位（HAU）血凝抑制实验报告500字范文31、合理选择抗原和对照阳性血清。针对Re-4和Re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的HI效价较2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌操作将试剂分装成小包装。3、反应温度不能太高。若在37（如温箱）下进行，随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高，人们普遍认识到实验室检测技术在临血凝抑制实验报告500字范文41、合理选择抗原和对照阳性血清。针对Re-4和Re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的HI效价较2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌操作将试剂分装成小包装。3、反应温度不能太高。若在37（如温箱）下进行，随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高，人们普遍认识到实验室检测技术在临血凝抑制实验报告500字范文51、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。（即1HAU抗原除以4）2、取96孔V形酶标板，用移液器在第112孔各加入25LPBS。3、在第1孔加入25L被检血清，充分混匀后移出25L加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25L。4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清（各做两份），作对照孔。5、在第112孔各加入25L4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25下静置30min。6、每孔加入25L1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀，室温（20-25）静置40min后观察结果，若环境温度过高，可于4条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。7、结果判定：只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2，阳性对照孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。将酶标板作45°倾斜，以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。血凝抑制实验报告500字范文61、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。（即1HAU抗原除以4）2、取96孔V形酶标板，用移液器在第112孔各加入25LPBS。3、在第1孔加入25L被检血清，充分混匀后移出25L加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25L。4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清（各做两份），作对照孔。5、在第112孔各加入25L4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25下静置30min。6、每孔加入25L1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀，室温（20-25）静置40min后观察结果，若环境温度过高，可于4条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。7、结果判定：只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2，阳性对照孔误差不超过1个滴度，试验结果才有效。将酶标板作45°倾斜，以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。血凝抑制实验报告500字范文7一、样本要具有代表性：所采样本要能代表整体，通常采用四角加中间的随机取样法，并且确定适当的样品数量，一般1000只以下的鸡群采样率在25%；5000只以下12%；5000只以上0.51%。对产蛋期间的鸡群可采鸡蛋；对雏鸡或青年鸡，可采血。方法是：取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，并注意不要用消毒剂，以免影响结果。每只鸡采血量在1ml左右，最好不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出。二、四单位抗原的准确性：要获得准确的监测效果，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。三、红血球洗脱的充分性：原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡，有时甚至是病鸡。因此，对红血球的洗脱的次数要最后一次为每分钟3000转，持续78分钟。另外，洗红血球过程中，应注意动作要轻，玻璃仪器之间尽量减少碰撞，以免造成红血球破裂而影响结果。四、结果判定的及时性：检测中，每次试验均应设抗原与生理盐水对照，加入红血球后，每隔5影响判定结果的准确性。血凝抑制实验报告500字范文8一、样本要具有代表性：所采样本要能代表整体，通常采用四角加中间的随机取样法，并且确定适当的样品数量，一般1000只以下的鸡群采样率在25%；5000只以下12%；5000只以上0.51%。对产蛋期间的鸡群可采鸡蛋；对雏鸡或青年鸡，可采血。方法是：取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，并注意不要用消毒剂，以免影响结果。每只鸡采血量在1ml左右，最好不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出。二、四单位抗原的准确性：要获得准确的监测效果，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。三、红血球洗脱的充分性：原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非疫苗免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过疫苗的健康公鸡，有时甚至是病鸡。因此，对红血球的洗脱的次数要多、要充分，并注意转速和时间，通常采用五次变速离心法：前四次为每分钟1500转，每次5分钟，最后一次为每分钟3000转，持续78分钟。另外，洗红血球过程中，应注意动作要轻，玻璃仪器之间尽量减少碰撞，以免造成红血球破裂而影响结果。四、结果判定的及时性：检测中，每次试验均应设抗原与生理盐水对照，加入红血球后，每隔5分钟观察一次，一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时，应立即对样本进行结果判定，过早过晚都会影响判定结果的准确性。血凝抑制实验报告500字范文9一、材料与仪器：新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。二、方法：1%鸡红血球的制备：1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为134.2.洗血球：共洗45次，每次58分钟，红血球与生理盐水的比例至少为123.离心机转速为每分钟15003000转，最后倾去上清。3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml，配成1%红血球备用。三、血凝试验：1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于第一孔内，混匀后吸全部孔内加入1%鸡红血球。次，至1015分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。3.结果判定：红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集（+），在血凝板底部集为一小红点为沉淀（），如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集（+）。4.出现完全凝集的抗原的最高稀释度，即为该抗原的凝集价。5.四单位抗原的制备：血凝试验的结果如为28（256），则前移2孔即26（64），作为四单位抗原的稀释度。即：63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。四、血凝抑制试验：1.血凝板上111孔全部加入0.05ml的生理盐水，于第一孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。在振荡器上振荡12分钟，放置室温约20分钟，然后加入等量的1%鸡红血球，振荡后放入恒温培养箱大约1015分钟后进行结果判定。2.结果：能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。注：1、HI价在2324时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到2425免疫。2、2425注：#为完全抑制，+为不完全抑制，为不抑制。血凝抑制实验报告500字范文10一、材料与仪器：新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。二、方法：1%鸡红血球的制备：1.用长针刺入鸡心脏或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为132.洗血球：共洗45次，每次58分钟，红血球与生理盐水的比例至少为123.离心机转速为每分钟15003000转，最后倾去上清。3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml，配成1%红血球备用。三、血凝试验：1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于第一孔内，混匀后吸全部孔内加入1%鸡红血球。次，至1015分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。3.结果判定：红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集（+），在血凝板底部集为一小红点为沉淀（），如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集（+）。4.出现完全凝集的抗原的最高稀释度，即为该抗原的凝集价。5.四单位抗原的制备：血凝试验的结果如为28（256），则前移2孔即26（64），作为四单位抗原的稀释度。即：63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。四、血凝抑制试验：1.血凝板上111孔全部加入0.05ml的生理盐水，于第一孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。在振荡器上振荡12分钟，放置室温约20分钟，然后加入等量的1%鸡红血球，振荡后放入恒温培养箱大约1015分钟后进行结果判定。2.结果：能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的最高稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。注：1、HI价在2324时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到2425免疫。2、2425注：#为完全抑制，+为不完全抑制，为不抑制。禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和国际动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法，而且因其具有经济、快速、可靠、操作简便、能够处理大量的样品，并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点，已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为操作影响较大，经常因操作不规范、不严谨等造成结果偏差大、重复性差等问题，现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。