高考生物二轮复习方案浙江：专题十五生物技术实践.ppt

专题十五生物技术实践专题十五生物技术实践返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦核核心心考考点点整整合合返回目录返回目录考情纵览考情纵览考点考点考例考例20112011年年20122012年年20132013年年微生物的利用微生物的利用浙江浙江1717酶酶的的应应用用浙江浙江1717生物技生物技术术在食品加在食品加工中的工中的应应用用浙江浙江1717浙江浙江1717浅浅尝现尝现代生物技代生物技术术专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践1 120132013浙江卷浙江卷 利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请回答：回答：(1)(1)为提高紫甘薯的利用率，工厂化生产时，可加入果胶为提高紫甘薯的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自_等微生物。由等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成成_。(2)(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成_。A A半乳糖醛酸和葡萄糖半乳糖醛酸和葡萄糖B B半乳糖和果糖半乳糖和果糖C C半乳糖醛酸甲酯和果糖半乳糖醛酸甲酯和果糖D D半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦(3)(3)紫甘薯匀浆流经紫甘薯匀浆流经 淀粉酶柱后，取适量流出的液体，淀粉酶柱后，取适量流出的液体，经脱色后加入经脱色后加入KIKI I I2 2溶液，结果液体呈红色。表明该液体中溶液，结果液体呈红色。表明该液体中含有含有_。A A淀粉淀粉 B B糊精糊精 C C麦芽糖麦芽糖 D D葡萄糖葡萄糖(4)(4)在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和母，加入温水和_。一段时间后，酵母悬液中会。一段时间后，酵母悬液中会出现气泡，该气泡内的气体主要是出现气泡，该气泡内的气体主要是_。将酵母菌接。将酵母菌接种到待发酵液后，随发酵的进行，酵母菌在种到待发酵液后，随发酵的进行，酵母菌在_条件下条件下产生了酒精和二氧化碳。产生了酒精和二氧化碳。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践(5)(5)图图8 815151 1表示发酵液表示发酵液pHpH对酒精浓度的影响。据图判对酒精浓度的影响。据图判断，最佳断，最佳pHpH是是_。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践图图8151 答案答案(1)(1)黑曲霉黑曲霉(或苹果曲霉或苹果曲霉)固定化酶固定化酶(2)D(2)D(3)B(3)B(4)(4)蔗糖二氧化碳无氧蔗糖二氧化碳无氧(5)4.7(5)4.7 解析解析 果胶酶不是一种酶，而是一类酶的总称，在黑曲果胶酶不是一种酶，而是一类酶的总称，在黑曲霉、苹果曲霉等微生物中都有存在。固定化酶就是将水溶霉、苹果曲霉等微生物中都有存在。固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂，固定化酶技术的优点：不溶于水而又有酶活性的制剂，固定化酶技术的优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；固定在载体固定在载体上的酶可以被反复利用。果胶是植物细胞壁以及胞间层的上的酶可以被反复利用。果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要成分之一，是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯聚合成主要成分之一，是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯聚合成的高分子化合物。果胶酶和果胶甲酯酶可水解果胶，产物的高分子化合物。果胶酶和果胶甲酯酶可水解果胶，产物是半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。淀粉遇是半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。淀粉遇KIKI I I2 2溶液呈蓝溶液呈蓝返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践色，色，淀粉酶能分解淀粉，产物是糊精，糊精遇淀粉酶能分解淀粉，产物是糊精，糊精遇KIKI I I2 2溶溶液呈红色，液呈红色，淀粉酶能分解糊精，产物是麦芽糖，麦芽淀粉酶能分解糊精，产物是麦芽糖，麦芽糖遇糖遇KIKI I I2 2溶液不显色，根据题意，该液体中肯定有糊精的溶液不显色，根据题意，该液体中肯定有糊精的存在。在发酵前，可以先制备酵母悬液：适量干酵母存在。在发酵前，可以先制备酵母悬液：适量干酵母(每每2.5 kg2.5 kg葡萄约用葡萄约用1 g1 g干酵母干酵母)加少量温水加少量温水(低于低于40)40)在烧杯内调成糊状。为使其迅速发生作用，可加极少量在烧杯内调成糊状。为使其迅速发生作用，可加极少量蔗糖，混匀放置片刻，出现气泡即可。原理是酵母在合适蔗糖，混匀放置片刻，出现气泡即可。原理是酵母在合适的温度下，进行需氧呼吸，将蔗糖彻底水解成二氧化碳和的温度下，进行需氧呼吸，将蔗糖彻底水解成二氧化碳和水。发酵过程其实利用了酵母菌的厌氧呼吸，在无氧的条水。发酵过程其实利用了酵母菌的厌氧呼吸，在无氧的条件下，酵母菌分解蔗糖，产物是酒精和二氧化碳。从图中件下，酵母菌分解蔗糖，产物是酒精和二氧化碳。从图中可知，可知，pHpH为为4.74.7时，时，10 d10 d后的酒精浓度最高，说明最佳后的酒精浓度最高，说明最佳pHpH为为4.74.7。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践2 220122012浙江卷浙江卷 幽门螺杆菌幽门螺杆菌(Hp)(Hp)感染是急慢性胃炎和感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请回答：请回答：(1)(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为为HpHp含有含有_，它能以尿素作为氮源；若有，它能以尿素作为氮源；若有HpHp，则菌落，则菌落周围会出现周围会出现_色环带。色环带。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践图图8152(2)(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭菌。灭菌。A A高压蒸汽高压蒸汽 B B紫外灯照射紫外灯照射C C70%70%酒精浸泡酒精浸泡 D D过滤过滤(3)(3)步骤步骤X X表示表示_。在无菌条件下操作时，先将菌液稀。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得是为了获得_菌落。菌落。(4)(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在在培养时，需将培养皿倒置并放在_中。中。若不倒置培养，将导致若不倒置培养，将导致_。(5)(5)临床上用临床上用1414C C呼气试验检测人体是否感染呼气试验检测人体是否感染HpHp，其基本原，其基本原理是理是HpHp能将能将1414C C标记的标记的_分解为分解为NHNH3 3和和1414COCO2 2。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案(1)(1)脲酶红脲酶红(2)D(2)D(3)(3)接种涂布单接种涂布单(4)(4)恒温培养箱无法形成单菌落恒温培养箱无法形成单菌落(5)(5)尿素尿素 解析解析(1)(1)脲酶能特异性地催化尿素水解脲酶能特异性地催化尿素水解释释放出放出NHNH3 3和和COCO2 2。所以加入尿素作所以加入尿素作为为氮源，加入酚氮源，加入酚红红指示指示剂剂(高高pHpH时时呈呈现红现红色色)能指示以尿素能指示以尿素为为氮源的氮源的细细菌的存在。菌的存在。(2)(2)由于尿素在由于尿素在高温下会分解，因此高温下会分解，因此对对尿素溶液的尿素溶液的灭灭菌要采用玻璃漏斗菌要采用玻璃漏斗过过滤滤的方法。的方法。(3)(3)本本题题运用的是涂布分离法，运用的是涂布分离法，该该方法能更容方法能更容易易获获得得单单菌落，但操作菌落，但操作较较复复杂杂。(4)(4)在倒平板和培养在倒平板和培养过过程程中，会中，会产产生水蒸气，如果正置，那么水蒸气在皿盖上凝生水蒸气，如果正置，那么水蒸气在皿盖上凝结结成水珠后会滴在培养基上，会成水珠后会滴在培养基上，会污污染染细细菌，菌，导导致不能分离出致不能分离出返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践单单菌落。菌落。(5)(5)该题该题中中HpHp含有含有脲脲酶酶，能把尿素分解成，能把尿素分解成NHNH3 3和和COCO2 2。患者通。患者通过过服用被服用被1414C C标记标记的尿素并的尿素并检测检测呼气中的被呼气中的被1414C C标记标记的的COCO2 2的含量来判断人体是否感染的含量来判断人体是否感染HpHp。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践3 320132013课标全国卷课标全国卷 回答下列有关泡菜制作的问回答下列有关泡菜制作的问题：题：(1)(1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是_。为。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是泡菜液，加入陈泡菜液的作用是_。(2)(2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行_的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的_中。中。(3)(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_、_和和_等。等。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践(4)(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是是_，原因是，原因是_。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案(1)(1)杀灭杂菌增加乳酸菌数量杀灭杂菌增加乳酸菌数量(2)(2)厌氧呼吸细胞质厌氧呼吸细胞质(3)(3)温度腌制时间食盐用量温度腌制时间食盐用量(4)(4)乳酸菌数量增多，杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为乳酸菌数量增多，杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸耐酸 解析解析 制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是杀灭杂制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是杀灭杂菌。陈泡菜液中含有乳酸菌，相当于加入菌种。乳酸菌进菌。陈泡菜液中含有乳酸菌，相当于加入菌种。乳酸菌进行厌氧呼吸产生乳酸。泡菜制作过程中温度、腌制时间和行厌氧呼吸产生乳酸。泡菜制作过程中温度、腌制时间和食盐用量等都会影响亚硝酸盐的含量。泡菜制作过程中乳食盐用量等都会影响亚硝酸盐的含量。泡菜制作过程中乳酸菌产生乳酸，使酸菌产生乳酸，使pHpH降低，从而抑制其他杂菌生长，而乳降低，从而抑制其他杂菌生长，而乳酸菌可大量繁殖。酸菌可大量繁殖。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 本专题主要考查微生物的培养和分离的相关内容，并本专题主要考查微生物的培养和分离的相关内容，并结合发酵食品制作过程考查传统发酵技术原理及基本操作；结合发酵食品制作过程考查传统发酵技术原理及基本操作；在实际生产生活中，结合酶的特性以实验探究与分析的形在实际生产生活中，结合酶的特性以实验探究与分析的形式考查酶的应用；在植物组织培养方面也会联系人们生活式考查酶的应用；在植物组织培养方面也会联系人们生活与健康方面进行命题。命题都是以非选择题形式出现，非与健康方面进行命题。命题都是以非选择题形式出现，非选择题中又包含选择题。选择题中又包含选择题。返回目录返回目录高高考考真真题题聚聚焦焦专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 考点一微生物的培养和分离考点一微生物的培养和分离 1 1培养基的种类、特点和用途培养基的种类、特点和用途返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践培养基种培养基种类类特点特点用途用途液体培养基液体培养基 不加凝固不加凝固剂剂 工工业业生生产产固体培养基固体培养基 加凝固加凝固剂剂，如，如琼琼脂脂微生物分离、微生物分离、鉴鉴定、定、活菌活菌计计数数选择选择培养基培养基培养基中加入某种化学物培养基中加入某种化学物质质，以抑制或阻止不需要的，以抑制或阻止不需要的微生物的生微生物的生长长，促，促进进所需要所需要的微生物的生的微生物的生长长培养、分离出特定培养、分离出特定微生物微生物鉴别鉴别培养基培养基根据微生物的代根据微生物的代谢谢特点，特点，在培养基中加入某种指示在培养基中加入某种指示剂剂或化学或化学药药品品鉴别鉴别不同种不同种类类的微的微生物生物2.2.方法与原理方法与原理 返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践内容内容方法技方法技术术实验实验原理原理大肠杆菌大肠杆菌的培养和的培养和分离分离无菌技术无菌技术 针对不同对象采用不同的消毒和灭菌的方针对不同对象采用不同的消毒和灭菌的方法，在高温、高压、化学药剂、强酸和强碱法，在高温、高压、化学药剂、强酸和强碱作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从而达作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从而达到杀菌的目的。常采用酒精对实验者双手消到杀菌的目的。常采用酒精对实验者双手消毒，紫外线对操作环境照射消毒，对培养基毒，紫外线对操作环境照射消毒，对培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌，对玻璃器皿进行采用高压蒸汽灭菌法灭菌，对玻璃器皿进行干热灭菌和接种环灼烧灭菌等干热灭菌和接种环灼烧灭菌等返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践大肠杆菌大肠杆菌的培养和的培养和分离分离 平板划线法平板划线法 将微生物样品在固体培养基表面多次将微生物样品在固体培养基表面多次做做“由点到线由点到线”稀释而达到分离目的稀释而达到分离目的稀释涂稀释涂布分离法布分离法 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养，以形成标准培养基的表面，进行培养，以形成标准菌落菌落分离以尿分离以尿素素为为氮源氮源的微生物的微生物选择选择培养法培养法以尿素作以尿素作为为培养基的唯一氮源，能合培养基的唯一氮源，能合成成脲脲酶酶的的细细菌才能分解尿素菌才能分解尿素例例1 1 微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。如图的重要环节。如图8 815153 3所示为大肠杆菌分离和培养过所示为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请据图分析回答下列问题：程中部分操作示意图。请据图分析回答下列问题：返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践图图8153(1)(1)实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌或消毒方法依次是采用的灭菌或消毒方法依次是_、_、_。(2)(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。(3)(3)图示是利用图示是利用_法进行微生物接种，把聚集的菌法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步种逐步_分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后，分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是要等其冷却后再进行划线的原因是_。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践(4)(4)下列关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是下列关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是()A A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B B划线操作须在火焰上进行划线操作须在火焰上进行C C在在5 5区域中才可以找到所需菌落区域中才可以找到所需菌落D D在在1 1、2 2、3 3、4 4、5 5区域中划线前后都要对接种环灭菌区域中划线前后都要对接种环灭菌(5)(5)若要培养具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，制备选择若要培养具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，制备选择培养基时在基本培养基的基础上，注意培养基时在基本培养基的基础上，注意_和和_，其目的是，其目的是_。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案(1)(1)高压蒸汽灭菌干热灭菌化学消毒高压蒸汽灭菌干热灭菌化学消毒 (2)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生观察培养基上是否有菌落产生(3)(3)平板划线稀释以免接种环温度太高，杀死菌种平板划线稀释以免接种环温度太高，杀死菌种(4)D(4)D(5)(5)添加高浓度蔗糖添加高浓度蔗糖(葡萄糖葡萄糖)调低调低pHpH提供高糖和酸性提供高糖和酸性的筛选环境的筛选环境 解析解析(1)(1)实验过程中对培养基进行高压蒸汽灭菌；对培实验过程中对培养基进行高压蒸汽灭菌；对培养皿进行干热灭菌；实验操作者的双手进行化学消毒。养皿进行干热灭菌；实验操作者的双手进行化学消毒。(2)(2)在培养微生物时，接种前需要检测培养基是否被污染。在培养微生物时，接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践菌落产生。菌落产生。(3)(3)题图所示的接种方法为平板划线法，把聚题图所示的接种方法为平板划线法，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；在灼烧接种环之集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；在灼烧接种环之后要等其冷却后才能进行操作，以避免接种环温度太高，后要等其冷却后才能进行操作，以避免接种环温度太高，杀死菌种。杀死菌种。(4)(4)在利用平板划线法接种微生物的实验中，在利用平板划线法接种微生物的实验中，在图示的在图示的1 1、2 2、3 3、4 4、5 5区域中划线前后都要对接种环进区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌。行灼烧灭菌。(5)(5)在基本培养基上添加高浓度蔗糖在基本培养基上添加高浓度蔗糖(葡萄糖葡萄糖)和调低和调低pHpH，可培养出具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌。，可培养出具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌。点评点评 间接计数法中最常用的是稀释涂布平板计数法，间接计数法中最常用的是稀释涂布平板计数法，它应用于统计样品中活菌的数目，采用的原理是当样品的它应用于统计样品中活菌的数目，采用的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。测出样品中大约含有多少活菌。操作方法需要设置操作方法需要设置返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践重复组，以增强实验的说服力和准确性。将待测样品经过重复组，以增强实验的说服力和准确性。将待测样品经过一系列的稀释，然后选择三个稀释度的菌液均匀涂布在平一系列的稀释，然后选择三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上，然后培养。需要注意的是为了使结果接近真实值，板上，然后培养。需要注意的是为了使结果接近真实值，可将同一稀释度的菌液涂布到可将同一稀释度的菌液涂布到3 3个或个或3 3个以上的平板上，经个以上的平板上，经培养，计算出菌落的平均数。培养，计算出菌落的平均数。实验要采用对照原则。判实验要采用对照原则。判断培养基中是否有杂菌污染，可将未接种的培养基同时进断培养基中是否有杂菌污染，可将未接种的培养基同时进行培养。行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用，可将对照判断选择培养基是否具有筛选作用，可将对照培养基接种后培养并观察菌落数目。培养基接种后培养并观察菌落数目。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践变式变式1 1 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，某同学试图从土壤中筛选出能高效降解尿类和数量繁多，某同学试图从土壤中筛选出能高效降解尿素的细菌素的细菌(目的菌目的菌)，下表是该同学配制的培养基成分：，下表是该同学配制的培养基成分：(1)(1)该培养基中的主要营养物质包括氮源、碳源、该培养基中的主要营养物质包括氮源、碳源、_和水。从功能上看，该培养基属于和水。从功能上看，该培养基属于_培养基。培养基。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践KHKH2 2POPO4 4NaNa2 2HPOHPO4 4MgSOMgSO4 47H7H2 2O O葡萄糖葡萄糖(NH(NH4 4)2 2SOSO4 4琼琼脂脂蒸蒸馏馏水水1.4 g1.4 g2.1 g2.1 g0.2 g0.2 g10.0 g10.0 g1.0 g1.0 g15.0 g15.0 g定容到定容到1000 1000 mLmL(2)(2)在微生物的培养中，一般要对配制的培养基采用高压在微生物的培养中，一般要对配制的培养基采用高压灭菌，其中灭菌，其中“高压高压”是为了是为了_。(3)(3)若要培养从土壤中分离出来的目的菌，则该培养基成若要培养从土壤中分离出来的目的菌，则该培养基成分应如何调整？分应如何调整？_，依据是，依据是_。该目的菌的同化作用类型是该目的菌的同化作用类型是_。(4)(4)在纯化土壤中的目的菌时，最常用的接种方法是在纯化土壤中的目的菌时，最常用的接种方法是_。在纯化土壤中的该目的菌时，发现培养基。在纯化土壤中的该目的菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是上的菌落连成一片，最可能的原因是_。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案(1)(1)无机盐选择无机盐选择 (2)(2)杀死培养基中的细菌芽孢杀死培养基中的细菌芽孢 (3)(3)将将(NH(NH4 4)2 2SOSO4 4 换成尿素要筛选出能降解尿素的细菌，换成尿素要筛选出能降解尿素的细菌，只能是以尿素作为唯一的氮源异养型只能是以尿素作为唯一的氮源异养型 (4)(4)涂布分离法和划线分离法菌液浓度过高涂布分离法和划线分离法菌液浓度过高(或培养过程或培养过程被杂菌污染，或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌导被杂菌污染，或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌导致菌液没有稀释开，言之有理即可致菌液没有稀释开，言之有理即可)解析解析(1)(1)微生物培养基的配方中一般包括碳源、氮源、微生物培养基的配方中一般包括碳源、氮源、水、无机盐等。从培养目的看，本培养基要选择能分解尿水、无机盐等。从培养目的看，本培养基要选择能分解尿素的微生物，抑制其他微生物生长，因此属于选择培养基。素的微生物，抑制其他微生物生长，因此属于选择培养基。(2)(2)对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，“高压高压”是为了杀死培养基中所有的微生物，包括细菌的是为了杀死培养基中所有的微生物，包括细菌的返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践芽孢，达到彻底灭菌的目的。芽孢，达到彻底灭菌的目的。(3)(3)此培养基应以尿素为唯此培养基应以尿素为唯一氮源，以达到抑制或阻止不能利用此氮源的微生物生长一氮源，以达到抑制或阻止不能利用此氮源的微生物生长的目的。该目的菌使用的碳源是葡萄糖，其同化作用的类的目的。该目的菌使用的碳源是葡萄糖，其同化作用的类型是异养型。型是异养型。(4)(4)纯化目的菌常用的方法是涂布分离法和纯化目的菌常用的方法是涂布分离法和划线分离法。涂布分离法的稀释倍数一般以平板上菌落数划线分离法。涂布分离法的稀释倍数一般以平板上菌落数在在3030300300个为宜。划线分离时，每次划线前均要灼烧接个为宜。划线分离时，每次划线前均要灼烧接种环，除第一次灼烧是为了灭菌的目的外，以后每次划线种环，除第一次灼烧是为了灭菌的目的外，以后每次划线前的灼烧均是为了达到不断稀释菌液的目的。如果发现培前的灼烧均是为了达到不断稀释菌液的目的。如果发现培养基上的菌落连成一片，那么可能的原因是菌液稀释倍数养基上的菌落连成一片，那么可能的原因是菌液稀释倍数不够或培养过程被杂菌污染。不够或培养过程被杂菌污染。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 考点二酶的应用考点二酶的应用1 1方法与原理方法与原理返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践内容内容方法技方法技术术实验实验原理原理果汁中的果胶和果汁中的果胶和果胶果胶酶酶 对对照照实验实验法法影响影响酶酶活性的因素活性的因素有温度、有温度、pHpH和和酶酶的抑的抑制制剂剂等等 淀粉淀粉酶酶的固的固定化及淀粉水解作定化及淀粉水解作用的用的检测检测吸附法、共价偶吸附法、共价偶联联法、交法、交联联法和包法和包埋法埋法 用物理或化学的用物理或化学的方法将方法将酶酶固定在某种固定在某种介介质质上上2.2.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较 返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践类类型型优优点点不足不足直接使用直接使用酶酶催化效率催化效率高，低耗能，高，低耗能，低低污污染染对环对环境非常敏感，易失活，境非常敏感，易失活，难难回回收，不能再次利用，与收，不能再次利用，与产产物混在一物混在一起，可能影响起，可能影响产产品品质质量量固定化固定化酶酶酶酶与与产产物分物分开，可反复利开，可反复利用用一种一种酶酶只能催化一种化学反只能催化一种化学反应应，生，生产实产实践中，很多践中，很多产产物的形成是通物的形成是通过过一一系列的系列的酶酶促反促反应应得到的得到的固定化细胞固定化细胞 成本低，操作成本低，操作更容易更容易 固定后的细胞不易与反应物接近，固定后的细胞不易与反应物接近，可能导致反应效果下降等可能导致反应效果下降等 3.3.影响酶活性的因素、酶的用量及应用在实验中应注意影响酶活性的因素、酶的用量及应用在实验中应注意的问题的问题(1)(1)实验设计时要遵循单一变量原则和对照原则，严格控实验设计时要遵循单一变量原则和对照原则，严格控制无关变量。制无关变量。(2)(2)探究不同温度探究不同温度(或或pH)pH)对酶活性的影响时，以温度对酶活性的影响时，以温度(或或pH)pH)作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值。作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值。最适值是通过比较相同时间内获得的产物量或反应效果来最适值是通过比较相同时间内获得的产物量或反应效果来确定的。确定的。(3)(3)探究最适温度时，探究最适温度时，pHpH为无关变量；探究最适为无关变量；探究最适pHpH时，温时，温度最好为最适温度。度最好为最适温度。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践(4)(4)探究果胶酶的最适用量时，所测出的最适用量是指在探究果胶酶的最适用量时，所测出的最适用量是指在本实验的温度、本实验的温度、pHpH等条件下测出的最适用量，因而果胶酶等条件下测出的最适用量，因而果胶酶的最适用量应标明温度和的最适用量应标明温度和pHpH。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践例例2 2 用果胶酶处理苹果泥时为了使果胶酶能够充分地催用果胶酶处理苹果泥时为了使果胶酶能够充分地催化反应，应采取的措施是化反应，应采取的措施是()A A加大苹果泥用量加大苹果泥用量 B B大幅度提高反应温度大幅度提高反应温度C C换成大型号容器换成大型号容器D D用玻璃棒进行搅拌用玻璃棒进行搅拌返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案 D D 解析解析 为了使果胶酶能够充分地催化反应，应采取的措为了使果胶酶能够充分地催化反应，应采取的措施是增大酶和反应物的接触面积，搅拌可以达到此目的。施是增大酶和反应物的接触面积，搅拌可以达到此目的。只换大型号容器不一定能加快反应。大幅度提高温度有可只换大型号容器不一定能加快反应。大幅度提高温度有可能会出现温度过高而使酶活性降低的现象。如果反应物已能会出现温度过高而使酶活性降低的现象。如果反应物已足够多，那么增加反应物不改变反应速率。足够多，那么增加反应物不改变反应速率。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 点评点评 果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。酶促反应的催化速率受温度、酶，而是一类酶的总称。酶促反应的催化速率受温度、pHpH、酶的数量、搅拌酶的数量、搅拌(增大接触面积增大接触面积)等众多因素的影响。探究等众多因素的影响。探究某种酶的最适反应条件某种酶的最适反应条件(温度、温度、pH)pH)时需设置一系列梯度，时需设置一系列梯度，且不同的温度梯度之间或不同的且不同的温度梯度之间或不同的pHpH梯度之间构成了相互对梯度之间构成了相互对照，通过相互对照可确认影响酶活性的温度或照，通过相互对照可确认影响酶活性的温度或pHpH的最适值。的最适值。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践变式变式2 2 如图如图8 815154 4所示是固定化酶反应柱，请回答下所示是固定化酶反应柱，请回答下列问题：列问题：(1)(1)将将 淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，不时搅拌，这样不时搅拌，这样 淀粉酶就可以固定在石淀粉酶就可以固定在石英砂上。这种固定化的方法称为英砂上。这种固定化的方法称为_。30 min30 min后，后，装入如图所示的反应器中，构成固定化酶装入如图所示的反应器中，构成固定化酶反应柱，并用反应柱，并用1010倍体积的蒸馏水洗涤此反倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是应柱，洗涤的目的是_。洗涤时，蒸馏水流速。洗涤时，蒸馏水流速_(_(填填“能能”或或“不能不能”)过快。过快。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践图图8154(2)(2)实验时，将此反应柱固定在支架上，用滴管滴加可溶实验时，将此反应柱固定在支架上，用滴管滴加可溶性淀粉溶液，并以性淀粉溶液，并以0.3 mL/min0.3 mL/min的流速过柱，控制流速的目的流速过柱，控制流速的目的是的是_。在流出。在流出5 mL5 mL后接收后接收0.5 mL0.5 mL流出液，加入流出液，加入1 12 2滴滴_，观察颜色。，观察颜色。为了使观察到的颜色变化明显，可为了使观察到的颜色变化明显，可_后再观察。如后再观察。如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为果溶液呈红色，说明淀粉水解成为_。(3)(3)实验后，用实验后，用1010倍柱体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤倍柱体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是的目的是_。洗涤后，放置在。洗涤后，放置在4 4 冰箱中保存。几天后，可重复使用。冰箱中保存。几天后，可重复使用。(4)(4)一段时间后，某同学从冰箱中取出此反应柱，重复上一段时间后，某同学从冰箱中取出此反应柱，重复上述实验，却没有了相同的结果，试分析可能的原因。述实验，却没有了相同的结果，试分析可能的原因。_。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 答案答案(1)(1)吸附法除去未吸附的游离淀粉酶不能吸附法除去未吸附的游离淀粉酶不能(2)(2)使淀粉溶液与淀粉酶充分接触，充分反应使淀粉溶液与淀粉酶充分接触，充分反应KIKI I I2 2溶液溶液稀释糊精稀释糊精 (3)(3)洗去残留的反应物和产物洗去残留的反应物和产物(4)(4)从酶的活性、酶的数量、反应条件等方面分析，答案从酶的活性、酶的数量、反应条件等方面分析，答案合理即可合理即可 解析解析(1)(1)固定化酶的制作方法有吸附法、共价偶联法、固定化酶的制作方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法，本题所示为吸附法。洗涤是除去未吸附交联法和包埋法，本题所示为吸附法。洗涤是除去未吸附的一些游离的酶，在洗涤时流速不能过快，为的一些游离的酶，在洗涤时流速不能过快，为1 mL/min1 mL/min。(2)(2)以相对较慢的流速使淀粉溶液流过反应柱，可以让吸以相对较慢的流速使淀粉溶液流过反应柱，可以让吸附着的酶与底物充分反应。根据附着的酶与底物充分反应。根据KIKI I I2 2溶液与淀粉反应呈蓝溶液与淀粉反应呈蓝色，与糊精反应呈红色的原理来鉴定反应情况。色，与糊精反应呈红色的原理来鉴定反应情况。(3)(3)实验实验返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践完成后还需要对反应柱进行洗涤，以除去参与反应的反应完成后还需要对反应柱进行洗涤，以除去参与反应的反应物及生成的产物，使反应柱能够重复使用。物及生成的产物，使反应柱能够重复使用。(4)(4)一段时间一段时间后重复使用得不到相同的结果，排除反应物本身的影响，后重复使用得不到相同的结果，排除反应物本身的影响，则肯定是酶出了问题，可能这些酶已经失活，或再次操作则肯定是酶出了问题，可能这些酶已经失活，或再次操作时相应的反应条件时相应的反应条件(如温度如温度)不适合等。不适合等。返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践 考点三生物技术在食品加工中的应用考点三生物技术在食品加工中的应用 1 1方法与原理方法与原理返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践内容内容方法方法实验实验原理原理果酒、果果酒、果醋、泡菜醋、泡菜的制作的制作发发酵法酵法微生物微生物发发酵酵(酵母菌、醋化醋杆菌、酵母菌、醋化醋杆菌、假假丝丝酵母、乳酸菌酵母、乳酸菌发发酵等酵等)亚亚硝酸硝酸盐盐的的测测定定光光电电比色法比色法 (目目测测比比较较法法)在在盐盐酸酸化的条件下，用已知酸酸化的条件下，用已知浓浓度度的的亚亚硝酸硝酸钠钠与与对对氨基苯磺酸氨基苯磺酸发发生重氮生重氮化反化反应应后，再与后，再与N N 1 1 萘萘基乙二胺偶基乙二胺偶联联形成紫形成紫红红色色产产物物2.2.果酒、果醋、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较果酒、果醋、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较 返回目录返回目录核核心心考考点点整整合合专题十五专题十五生物技术实践生物技术实践项项目目果酒和果醋制作果酒和果醋制作泡菜的制作泡菜的制作菌种菌种果酒：酵母菌果酒：酵母菌果醋：醋化醋杆菌果醋：醋化醋杆菌 乳酸菌乳酸菌控制控制条件条件果酒：果酒：181825 25，先通，先通氧，后无氧氧，后无氧果醋：果醋：303035 35，有氧，有氧 室温，无氧室温，无氧防止防止杂杂菌菌污污染染排气口胶管排气口胶管长长而弯曲的作而弯曲的作用是防止空气中的用是防止空气中的杂杂菌菌污污染染葡萄先冲洗后去枝梗的目葡萄先冲洗后去枝梗的目的是防止的是防止杂杂菌菌污污染染泡菜泡菜坛坛的的选择标选择标准是火候准是火候好、无裂好、无裂纹纹、无砂眼、无砂眼、坛坛沿沿深、盖子吻合好。否深、盖子吻合好。否则则其他其他微