尿LH半定量检测试纸技术课件.ppt

LH半定量检测技术及应用使用产品的机构n n 北京北大医院生殖中心 北京北大医院生殖中心n n 上海红房子医院：林金芳 上海红房子医院：林金芳n n 江苏省人民医院：刘嘉茵 江苏省人民医院：刘嘉茵n n 北大附一院妇产科：左文莉 北大附一院妇产科：左文莉n n 重庆妇幼生殖医院：黄国宁 重庆妇幼生殖医院：黄国宁n n 重医附院：卞厦梁 重医附院：卞厦梁n n 成都计生所：黄萍 成都计生所：黄萍n n 天津总医院：隋笑琳 天津总医院：隋笑琳n n 河南省人民医院：高航云 河南省人民医院：高航云n n 安徽医科大学一附院：曹云霞 安徽医科大学一附院：曹云霞n n 合肥省立医院：骆丽华 合肥省立医院：骆丽华n n 武汉同济医院：朱桂金 武汉同济医院：朱桂金n n 长沙湘雅医院：卢光秀 长沙湘雅医院：卢光秀n n 山东省立医院：陈紫江 山东省立医院：陈紫江n n 昆明昆华医院：章晓梅 昆明昆华医院：章晓梅n n 南昌妇幼医院：王长华 南昌妇幼医院：王长华n n 江西一附院：黄晓琼 江西一附院：黄晓琼n n 北京妇产医院 北京妇产医院n n 南京鼓楼医院 南京鼓楼医院.爱因斯坦，伽利略，爱迪生，弗洛依德，马克思-尽管犹太人占世界总人口少于0.3%，但在世界超一流名人中，犹太人名列榜首。美国哈佛大学奈根博士和麦克马洪教授对母亲的宗教信仰与畸形儿出生率的关系进行研究，发现犹太教徒妇女出生畸形儿的几率最低。?在犹太教的圣经旧约中有这样一段话：“从女人身上有东西流出，如果流出的是血，这个女人在7天之内是不干净的，所有和这个女人接触的人都要倒霉。-如果男人和这个女人同床，和她的身体接触，他就要倒霉7天。而且他睡过的床也沾上晦气了。”犹太教徒在月经内和月经后的7天时间内禁欲。而且在最后一天夜里，要进行称为“密克贝”的礼仪性沐浴 之后，才能开始夫妻生活。n结论：上述禁欲后的解禁日正好是一部分妇女排卵的时间，所以在戒欲后使最新鲜、最有活力的精卵结合，从而达到优生的目的！人体最大的细胞卵子 人体最小的细胞精子卵子体积是精子的85000 倍！为什么新鲜的卵子会减少畸形呢？n nGAMETE AND EMBRYO QUALITYGAMETE AND EMBRYO QUALITY（配子和胚胎质量）配子和胚胎质量）n nRole in fertilization failures and reproductive Role in fertilization failures and reproductive pathology:pathology:（在受精失败和生殖病理学中的角色）在受精失败和生殖病理学中的角色）n n the contribution of Fluorescent the contribution of Fluorescent In Situ In Situ Hybridization(FISH)Hybridization(FISH)n nM.M.BenkhalifaBenkhalifa and Y.and Y.MenezoMenezon nCentre de Centre de BiologieBiologie mdicalemdicale-FondationFondation Marcel Marcel MerieuxMerieuxn n94 rue 94 rue ChevreulChevreul-B.P.7322-69357 Lyon-B.P.7322-69357 Lyon CedexCedex,FranceFrance（法国里昂生物医学中心）法国里昂生物医学中心）n n Oocytes（卵母细胞）n n General aspect（主要论点）n n Oocyte ageing before fertilization is the main factor responsible for chromosomal anomalies.（在受精前卵细胞的老化是对染色体畸变负有主要责任的因素）It generally arises in zootechnical procedures by delaying insemination in relation to ovulation(11).In IVF practice,hazardous manipulation may lead to such anomalies.卵子的存活时间一般在24 48 小时以内，也会经历一个衰老的过程到死亡。但在其完全死亡前，都有可能受孕！新排放卵子 过熟卵子 新鲜的 衰老快死亡的营养充足的 营养物质流失的染色体完整的 染色体畸变的 充满活力 奄奄一息？生殖健康概念提出者：美国法塔拉教授发现妊娠损失的比率可高达50！在2000 年9 月份发表在牛津核心期刊-Human Reproduction Update 2000（国际生殖科学领域排名第一）上的一篇长篇综述Consequences on offspring of abnormal function in ageing gametes（老化的生殖细胞功能异常对后代的影响）作者通过综合分析了翔实的资料后得出结论,老化的卵子与以下结果相关:n n 胎儿发育能力的降低；n n 出生缺陷n n 婴儿期感觉运动统合发展的迟缓n n 后期生活中的行为改变或学习困难n n 许多体质性疾病，如糖尿病、精神分裂症和非家族性的阿尔茨海默氏症等n n 女性后代生育能力的降低n n 后代平均寿命的降低 还有多项研究不断证实了以上的结论：n n 2002年国际著名刊物生殖生物学发表研究论文，采用实验证明了排卵后卵母细胞的老化降低了后代生殖能力及寿命；n n 2004年10月，美国约翰霍普金斯大学发表在分子人类生殖学的研究成果表明，排卵后如果没有适时受孕的卵子其内部会发生细胞骨架的变化从而造成卵子与精子结合能力的下降，以及后期受精卵发育的障碍；n n 2005年，发表在国际生殖生物学和内分泌学上的氧化应激在女性生殖中的角色一文揭示了卵子老化造成损害的一种机制：卵细胞老化后，细胞内氧化剂和抗氧化剂的平衡被破坏，细胞内的活性氧基团（ROS）对DNA等遗传物质产生损害。遗传物质的损害是造成先天畸形的主要原因之一。n n 尤其值得重视的，比如唐氏综合征(21三体)、18三体等染色体异常导致的出生缺陷也越来越多的与生殖细胞的老化联系起来。n n 定时妊娠法是通过掌握自身身体的节律，选择恰当的房事时机，使新鲜的卵子和充满活力的精子结合而怀孕的方法。首先提此说法的市川茂孝认为，生育先天性异常婴儿或发生自然流产的主要原因不是遗传，而是与同房时间不合适有关。n n 不合适的同房时间导致不新鲜的精卵结合，产生不健康的受精卵！解决方法-定时妊娠法从LH峰的最值到排卵的平均时间在16.5小时左右，所以监测排卵的关键是因人而异的找到LH越过最高峰时间。nn LH峰不同于LH起始峰！测定血LHn n由于由于LHLH呈脉冲式分泌，呈脉冲式分泌，脉冲周期脉冲周期1122小时，小时，LHLH峰性分泌的脉冲幅峰性分泌的脉冲幅度则更大，因此在一度则更大，因此在一定程度干扰了对定程度干扰了对LHLH起起始峰或达峰时间的确始峰或达峰时间的确定，造成预测排卵时定，造成预测排卵时间的误差。间的误差。反复抽血，病人痛苦。反复抽血，病人痛苦。Hillier,SG et al.Hillier,SG et al.Scientific Essentials of Scientific Essentials of Reproductive Medicine Reproductive Medicine.London:WB Saunders,.London:WB Saunders,尿LH测定n n 尿LH是由垂体脉冲的LH入血循环后，经肾排入尿中，经尿液的平均，其值受垂体脉冲分泌的影响较小，与血清LH浓度的均值平行。n n 尿LH峰与血LH峰有很好的相关性，重叠率很高1。Corson发现尿LH峰比血LH峰晚46h,尿LH峰后1224h排卵 2。国外学者通过各种监测排卵方法的比较，结果发现尿LH峰值预测排卵的准确性最高 3。n n 1-1-中华妇产科杂志 中华妇产科杂志 Sept 1999,Vol.34 No.9 Sept 1999,Vol.34 No.9n n 2 2Corson Corson SL.Self SL.Self-prediction of ovulation using urinary LH-prediction of ovulation using urinary LH hormone test.J hormone test.J Reprod Reprod Med.31:760 Med.31:760n n 3 3-实用妇产科杂志 实用妇产科杂志2000 Sept Vol.16 No.5 2000 Sept Vol.16 No.5定性的排卵试纸采用检测线与参照线比色的方式，当检测线的颜色与参照线颜色基本相同或明显深于参照线颜色的颜色时即表明LH峰的出现。但这种设计在原理上就有不可避免的缺陷。传统的LH试纸（排卵试纸）为定性试纸。前提是：它设定了参照线固定的LH值。A)比如目前一部分市场上的尿LH试纸为国外的OEM产品，其参照线的LH值根据欧美人的水平设定在40mIU/ml,而一部分中国妇女的LH峰值在也达不到40，这样即使有正常排卵，检测线的颜色一直不会深于参照线，从而无法判断。这样即使有正常排卵，下线的颜色一直不会深于上线，从而无法判断。峰值不到40mIU定性试纸指示值真实峰值排卵时间时间误差如果将参照线的值定在25 IU/L，当检测线颜色深于参照线时，无法表明此时是LH的峰值，因为峰值有可能在40、80或者90IU/L，从而对预测排卵带来一定的时间误差。定性试纸指示时间真实峰值时间排卵时间对LH变化全过程的动态监测因人而异地确定LH值由低到高，再开始转折下降的时间距离排卵时间最近LH激素的分泌每个人都有自己的特点，峰值的高低，上升的速度各不相同。采用固定的参考线不能反映出每个人的特点，也就不易做到更准确的预测与监测排卵。半定量的检测试纸不设固定的参考线，而是全程动态的监测，可以在此基础上掌握每个人的LH变化特点，确定LH的峰值及时间，从而更准确的预测与监测排卵情况。国家863计划新型金增强标记材料显著提高了试纸检测的精确度！目测值：约26-28mIU/ml 半定量的检测试纸不设固定的参考线，而是全程动态监测，可准确找到过峰时间。比65浅的多比25略深跳水时间 跳水时间n n 找到LH“跳水”的时间；预测排卵在24小时内。尿尿LHLH值值 10mIU/ml 10mIU/ml时，每天测定两到三次，在尿时，每天测定两到三次，在尿LHLH值又值又出现明显下降时，即可确定出此时尿出现明显下降时，即可确定出此时尿LHLH刚刚越过峰值，刚刚越过峰值，即可更精确的预测排卵一般在即可更精确的预测排卵一般在2424小时内发生。小时内发生。例如：上午例如：上午99点测定的数值为点测定的数值为40MIU/ml40MIU/ml；中午；中午11点测定的点测定的数值为数值为60MIU/ml,60MIU/ml,下午下午55点测定数值点测定数值30MIU/ml,30MIU/ml,则表明被测则表明被测者刚刚越过者刚刚越过LHLH的峰值，排卵一般将在的峰值，排卵一般将在12-2412-24小时内发生。小时内发生。LH LH起始 起始LH LH 峰 峰排卵 排卵 功血排卵鉴定：通过对尿 功血排卵鉴定：通过对尿LH LH值一个周期的测定，如果患者有这 值一个周期的测定，如果患者有这样一条陡峭的 样一条陡峭的LH LH峰曲线产生，说明患者有排卵。如果患者其尿 峰曲线产生，说明患者有排卵。如果患者其尿 LH LH水平一直徘徊于 水平一直徘徊于10mIU/ml 10mIU/ml以下，无陡峭的 以下，无陡峭的LH LH峰值出现，则说 峰值出现，则说明患者无排卵。明患者无排卵。n n 区分是否有排卵半定量测定的临床应用帮助确定注射HCG 的恰当时机：当尿LH10mIU/ml 时，在4 小时后再测定一次尿LH 值，如果尿LH 值比上次测定数值升高，卵泡直径16mm 时即可注射HCG。n n 帮助确定注射HCG的恰当时机与剂量半定量测定的临床应用如果患者通过半定量尿LH一个周期的提前监测未发现明确的LH峰，提示患者内源性LH分泌不足在促排卵注射HCG时可选择使用较高的剂量。半定量测定的临床应用n n 确定自然周期IUI的时机。n n自然周期者，当尿自然周期者，当尿LHLH值上升（值上升（10mIU/ml10mIU/ml）后又）后又下降时，安排人工授精，第二天再安排一次。下降时，安排人工授精，第二天再安排一次。即排即排卵前及当天各一次。卵前及当天各一次。半定量测定的临床应用 在IVF自然周期中配合B超确定取卵的准确时间：可在LH峰下降的当天，卵泡直径平均为18mm至20mm时，安排取卵的工作。n n 确定取卵的准确时间 方案：口服CC时，在家中采用尿LH半定量试纸进行尿LH水平监测。可安排在尿LH值出现明显上升后又下降时同房一次，第二天再同房一次。提高受孕的成功率。半定量测定的临床应用n 口服CC，指导最佳受孕时机大部分Pcos患者（如下丘脑-垂体-卵巢轴功能异常者等）的LH水平较高，也不出现LH峰值。n n PCOS、LUFS等内分泌相关疾病辅助诊断半定量测定的临床应用随着卵泡的增大，尿LH缓慢的增加，LH值一直在25-50mIU/ml之间波动，无陡峭峰值出现，中低水平的LH可维持5天左右，同时黄素化的卵泡不断地长大。该曲线与正常排卵时尿LH值上升的陡峭高峰状曲线完全不同。定性试纸显色结果与一般相同!n n 在控制下超排卵（COH）GnRH-a长方案中，可简便准确地确定注射GnRH-a的时间：通过半定量动态测定，在尿LH下降后的第7天注射。半定量测定的临床应用 在促排卵的治疗过程中，注射HCG前，当卵泡直径为14mm 至15mm 时，如尿LH10mIU/ml，提示临床患者有隐匿的LH峰的倾向。n n 发现隐匿的LH峰半定量测定的临床应用LH单克隆抗体与HCG无交叉反应尿LH半定量检测试纸n n开始测定时间的确定开始测定时间的确定n n根根据据上上次次月月经经周周期期的的天天数数AA，按按下下表表在在本本次次月月经经来来潮潮后后的的第第BB天天开开始始测测试试。（以以本本次次月月经经来来潮潮当当天天作作为日期计算第一天）为日期计算第一天）n n A 21 22 23 24 25 A 21 22 23 24 25 26 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 n n B 5 5 6 7 8 B 5 5 6 7 8 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 n n例例：如如果果上上次次的的月月经经周周期期为为2626天天（左左右右1-21-2天天不不会会影影响响测测定定结结果果），则则本本次次起起始始测测定定日日为为本本次次月月经经来潮后的第来潮后的第99天。天。尿LH 半定量检测试纸使用 n n LH测定在0-10MIU/ML，可每天测一次，如LH测定10MIU/ML，则平均每4-6小时测定一次，跟踪LH峰值。在LH出现明显上升或下降时，可确定出此时LH刚刚越峰值，即可更精确的预测排卵，一般24小时内发生。n n 在宫颈粘液性状改变：量增加，透明 清亮 拉丝度增加；B超监测卵泡：优势卵泡直径达到16mm及以上时开始使用半定量尿LH试纸，动态测定尿LH值。胎儿所有的细胞均来自唯一的一个细胞：受精卵生男孩几率高，在排卵日同房。生女孩几率高，在排卵日的前2天同房。在一般情况下阴道是酸性的。精子讨厌酸性，所以进入阴道时活动变迟钝但；如果待在酸性液中同样的时间，则Y精子比X精子更早丧失活力。在这种情况下，当然剩下较多的X精子，如此一来生女孩的概率就大了；在接近排卵日时，子宫颈管会分泌强碱性粘液，中和阴道内部的酸性。这时，在普通状态下原本在阴道内缺乏元气的Y精子可以活泼地活动。也就是说，接近排卵日时，阴道内形成碱性环境，精子进入时有很多的Y精子，所以容易生男孩。所以也可以通过人为的控制生殖道内的酸碱环境来改变生男生女的几率；还有卵子的生存时间比精子的存活时间长 云大生物 云大生物国家级唯一的单克隆抗体基地!我们公司试纸的生产标准成为了试纸行业国家标准！谢 谢！B超监测:由于成熟卵泡的直径变化较大，预测排卵有一定困难，而且病人经常到医院做B超，精神负担重，不利于排卵。n n 需来医院进行连续的监测。n n B超用来判断是否排卵是比较准确的。n n 应用试纸，可以在病人LH出现上升，大于10mIU时再来医院同时进行B超检测。n n单克隆抗体是一种免疫球蛋白，可以专一的识别单克隆抗体是一种免疫球蛋白，可以专一的识别它相应的抗原并可以与抗原结合，就像一把钥匙它相应的抗原并可以与抗原结合，就像一把钥匙开一把锁一样，是可用于检测的最特异的物质。开一把锁一样，是可用于检测的最特异的物质。