鱼类急性毒性试验-水环境保护课件.ppt
鱼类急性毒性试验 鱼类急性毒性试验(一)试验方法：静止试验：不换水;半静止试验：至少换水一次/d;鱼类急性毒性试验定为96h(4d).（二）试验鱼的选择收集及驯养1、鱼的选择：一至二龄的鱼种为主，使用学名.2、对鱼的要求：（1）血统纯正，不要杂交鱼）;（2）外观无病，来自同一亲鱼的后代;（3）驯养：715d，脱氯的自来水，硬度50250mg，PH6.08.5。（5）环境 驯养期间：每d换水，保持1216h光照，清除粪便及全部残渣；驯养期间：死亡率不得超过10%；如有受伤、病鱼，应及时除去,以死亡数作记录。（三）了解试验样品的资料在进行毒性试验前：了解样品的物理化学性质；掌握水溶性、蒸气压、结构、纯度，化学稳定性，电离常数等重要常数及化学分析方法。（四）试验液的制备及浓度设计1 母液：溶于水的由蒸馏水配制；难溶于水的用超声波粉碎法制备；也可加低毒的有机溶剂（如丙铜），浓度不得超过0.1mg/L；对照组也需加与最高浓度，组相符量的有机溶剂及乳化剂。3 浓度设计 不同浓度的间隔以等对数差距来设计:如:1、1.8、3.2、5.6、10 等;更窄一些的间距:1、0、1.35、1.8、2.45、3.2等;也可几何级数作间距:如 4 3 210.5 等。（五）试验条件1、水:试验用水同驯养用水一样;容器的体积应以鱼的负荷为1gL水计算;2、水温:水温在2125土10之间;3、氧气、光照：溶解氧不少于空气饱和度的60,每d光照保持1216h。4、停食:试验前24h停食.（七）正式试验 1、用软网将鱼捕出后，随机放入每个浓度组,每试验鱼10尾。2、随时观察、记录：如丧失平衡、游泳不正常、呼吸变化、体色变化等。3、每24h记录一次死鱼的数字。4、保持安静，尽可能避免对鱼的干扰。预 试 验 结 果T是试验结果时，每种浓度中活动的大型溞总数。P是试验结果时，每种浓度中不大活动大型溞的百分数。浓度%1 2 3 4 T P0 5 5 5 5 20 00.35 5 5 3 4 17 150.48 2 2 4 3 12 400.62 3 1 1 2 7 650.80 1 6 2 1 4 801.0 0 0 0 0 1 90 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 90 8070605040 30 20 10.24h(EC500.55%)对数浓度死亡率 大型溞的半数有效浓度24hEC50的测定 7、对试验报告的要求在试验结果的报告中，要列出下列的资料及数据：试验条件：静止式、半静止法，控温及曝气中情况，每缸鱼的负荷。鱼类毒性试验观察记录试验时间 试验样品 其它资料 纯度 分子式 母液制备方法 母液浓度 助剂使用量 本试验采取的分析方法 观时|对照|浓度2|浓度3|浓度4|浓度5|浓度6|水温PH|溶氧|中毒24h死亡数48h死亡数72h死亡数96h死亡数 记录人：受试生物的状况：科学名称，来源，有否用药物作处理。驯养及试验用水的特微：PH，硬度，温度、溶解氧等。试验母液的制备方法或污水的采集情况。每个浓度组中试验鱼的数量。仅有引起鱼类死亡的最高浓度。二、大型溞的急性毒性试验二、大型溞的急性毒性试验测定毒物或废水的24h或48h中毒浓度,（24h-Ec50或48h-Ec50）来反映毒物或废水的毒性大小。（一）试验准备：1、试验材料：溞状溞是624h繁殖的幼溞，用规定的筛网收集获得。2、试验溶液(1)、稀释水 PH 7.80，硬度25025mgL(以CaCO2表示)比例接近于4：1，溶解氧、氨气或多氯联苯等有毒的物质，配制方法如下：并不含对大型溞有毒的物质，如氯气，重金属，农药，氨气或多氯联苯等有毒的物质，将上述四种溶液各25ml混合，并加蒸馏水或脱离子水使水总体积至1L。可加NaOH或HCl溶液，调节pH值。（2）储备液的配制：将已知数据,欲测毒物溶解在一定量的稀释水，脱离子水或蒸馏水中，制备成储备液。现用现配，放置最多不应超过2d，配制溶液时，难溶于水的物质可用适当方法（如低毒溶剂）增溶或分散。（4）水样采集采集水样时，采集瓶充满水样，不留空气；毒性试验应在采样后6h内进行；否则，应将样品立即放入低温保存（4.0 c以下），并应在试验报告中加以说明。3、试验仪器 溶解氧测定仪，试管、烧杯，吸管，量筒及其它常用的实验室设备。在使用前按化学实验室要求洗干净。（三）试验步骤1、向一组烧杯内加入不同体积的储备液或废水，并加入稀释水配制成试验所要求的各种浓度;2、每个容器内放20个大型溞,密度不超过每10ml 5个，每组设一个空白对照，每个容器内放相等体积的稀释水及同样数量的大型溞。（三）试验步骤 3、试验容器放在200C 暗处24h（或48 h）计算每容器中能活动的大型溞。4、如轻微搅动试验液，15秒内不能活动的个体，即使触角仍能活动的个体也应算作是不活动的个体。5、由试验结果确定大型溞0100%不活动的浓度范围.预 试 验 浓度 活动的大型溞 90 0 35 0 10 0 3.5 0 1 0 0.35 5 0.035 5 0.01 5 因此进行正式试验的浓度范围应为0.35-1%.正式 试 验 结 果浓度%1 2 3 4 T P0 5 5 5 5 20 00.35 5 5 3 4 17 150.48 2 2 4 3 12 400.62 3 1 1 2 7 650.80 1 6 2 1 4 801.0 0 0 0 0 1 90T是试验结果时，每种浓度中活动的大型溞总数。P是试验结果时，每种浓度中不大活动大型溞的百分数。0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 90 8070605040 30 20 10.24h(EC500.55%)对数浓度死亡率 大型溞的半数有效浓度24hEC50的测定
