(2.3)--第七章弧菌属与螺杆菌属.ppt
第八章弧菌属与螺杆菌属重点难点重点难点重点重点霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制难点难点霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制第一节第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌概述概述我国将霍乱定为甲类法定传染病我国将霍乱定为甲类法定传染病。霍乱弧菌霍乱弧菌（Vibrio cholerae）引起烈性传染病霍乱，全引起烈性传染病霍乱，全球曾多次发生过大流行球曾多次发生过大流行：津巴布韦霍乱津巴布韦霍乱（2008）海地霍乱海地霍乱（2010）:感染者超过感染者超过50万，近万，近7000人死人死亡亡目录目录一、生物学性状一、生物学性状二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性三、微生物学检查原则三、微生物学检查原则四、防治原则四、防治原则五、特殊护理措施五、特殊护理措施形态形态弧形或逗点状，革兰染色弧形或逗点状，革兰染色阴性阴性，有菌毛，有菌毛单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状单鞭毛，运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状一、生物学性状一、生物学性状培养培养耐碱不耐酸，在耐碱不耐酸，在pH 8.09.0的碱性环境中生长迅速，的碱性环境中生长迅速，常用常用pH8.4的碱性蛋白胨的碱性蛋白胨作为选择培养基。作为选择培养基。在碱性琼脂平板上培养在碱性琼脂平板上培养24小时后，形成圆形、无色、小时后，形成圆形、无色、透明或半透明透明或半透明S型菌落。型菌落。生化反应生化反应霍乱弧菌能发酵葡萄糖、甘露醇及蔗糖，产酸不产气霍乱弧菌能发酵葡萄糖、甘露醇及蔗糖，产酸不产气不发酵阿拉伯胶糖不发酵阿拉伯胶糖能还原硝酸盐为亚硝酸盐能还原硝酸盐为亚硝酸盐吲哚试验阳性吲哚试验阳性氧化酶试验氧化酶试验阳性阳性 硝酸盐还原反应硝酸盐还原反应（1）原理：霍乱弧菌能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加）原理：霍乱弧菌能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加入硫酸后生成亚硝酸吲哚，呈红色反应。入硫酸后生成亚硝酸吲哚，呈红色反应。（2）方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置）方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置35孵育孵育24h，加入浓硫酸数滴，观察。，加入浓硫酸数滴，观察。（3）结果：呈红色者为阳性。）结果：呈红色者为阳性。根据根据O抗原不同抗原不同抗原构造与分型：抗原构造与分型：H抗原，抗原，O抗原抗原现已有现已有155个血清群个血清群其中其中O1群、群、O139群引起霍乱群引起霍乱 根据表型差异根据表型差异O1群霍乱弧菌可分为两个生物型群霍乱弧菌可分为两个生物型古典生物型古典生物型El Tor生物型生物型抵抗力抵抗力El Tor生物型和其他非生物型和其他非O1群霍乱弧菌在外环境中的生群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型为强存力较古典型为强本菌不耐酸，不耐热本菌不耐酸，不耐热鞭毛运动：有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近鞭毛运动：有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞。肠壁上皮细胞。普通菌毛：是细菌定居于小肠所必须的因子。普通菌毛：是细菌定居于小肠所必须的因子。1.鞭毛、菌毛及其他毒力因子鞭毛、菌毛及其他毒力因子致病物质致病物质二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性2.霍乱肠毒素（霍乱肠毒素（choleratoxin）:活性亚单位活性亚单位5个个B亚单位（亚单位（ctxB）A亚单位（亚单位（ctxA）与受体介导与受体介导A亚亚单位进入细胞单位进入细胞1A+5BB亚单位与小肠黏膜上皮细胞亚单位与小肠黏膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结神经节苷脂受体结合，介导合，介导A亚单位进入细胞。亚单位进入细胞。霍乱肠毒素作用机制霍乱肠毒素作用机制A亚单位裂解为亚单位裂解为A1和和A2两条多肽，两条多肽，A1亚单位发挥毒性亚单位发挥毒性作用。作用。G蛋白蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶活化腺苷酸环化酶ATP cAMPA1胞内胞内cAMP，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌Na+、K+、HCO3-和水，大量水和电解质在肠腔堆积，和水，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻与呕吐。引起剧烈腹泻与呕吐。所致疾病所致疾病霍乱霍乱传染源：病人及无症状感染者传染源：病人及无症状感染者传播途径传播途径：主要是通过污染的水源或食物经口摄入：主要是通过污染的水源或食物经口摄入二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性临床表现临床表现上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）大量水分和电解质丧失大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）O139型更严重型更严重感染霍乱弧菌后，机体体液免疫，可获得牢固免疫力感染霍乱弧菌后，机体体液免疫，可获得牢固免疫力免疫性免疫性标本标本直接镜检直接镜检分离培养分离培养涂片见涂片见G-性弧菌，鱼群状排列性弧菌，鱼群状排列悬滴法观察细菌呈穿梭样运动悬滴法观察细菌呈穿梭样运动碱性蛋白胨水增菌碱性蛋白胨水增菌选择培养基为选择培养基为TCBS玻片凝集反应玻片凝集反应分子诊断：分子诊断：LAMP病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）病人粪便，肛拭（流行病学调查包括水样）三、微生物学检查三、微生物学检查严密隔离、观察病情、及时发现并纠正休克。严密隔离、观察病情、及时发现并纠正休克。最可靠、有效的预防措施是改善卫生条件，特别是供最可靠、有效的预防措施是改善卫生条件，特别是供水卫生。水卫生。应用应用O1群霍乱弧菌死疫苗皮下注射为主要特异性预防群霍乱弧菌死疫苗皮下注射为主要特异性预防措施，但保护力不强措施，但保护力不强（50%左右左右），且持续时间短，且持续时间短。治疗应选择使用四环素或环丙沙星抗菌药物治疗应选择使用四环素或环丙沙星抗菌药物。补液，预防失水导致的休克和酸中毒是关键。补液，预防失水导致的休克和酸中毒是关键。四、防治原则四、防治原则患者需按消化道传染病严密隔离，严格遵守消毒隔离患者需按消化道传染病严密隔离，严格遵守消毒隔离制度，消毒患者用物及排泄物，以防交叉感染。制度，消毒患者用物及排泄物，以防交叉感染。重症患者要绝对卧床，针对剧烈泻吐应暂停饮食，呕重症患者要绝对卧床，针对剧烈泻吐应暂停饮食，呕吐停止及腹泻缓解可行流质饮食。吐停止及腹泻缓解可行流质饮食。补液为霍乱的基础治疗，补液原则：早期、迅速、适补液为霍乱的基础治疗，补液原则：早期、迅速、适量，先盐后糖，先快后慢。量，先盐后糖，先快后慢。注意纠正酸中毒、补钙，必要时补钾。注意纠正酸中毒、补钙，必要时补钾。五、霍乱特殊护理措施五、霍乱特殊护理措施第二节第二节副溶血弧菌副溶血弧菌概述概述副溶血性弧菌副溶血性弧菌（Vparahemolyticus）沿海地区流行沿海地区流行根据菌体根据菌体O抗原不同，现已有抗原不同，现已有13个血清群个血清群主要引起食物中毒主要引起食物中毒 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌某家庭周末某家庭周末食海鲜后食海鲜后，餐后约，餐后约6小时一家三口相继出现恶小时一家三口相继出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻。腹泻次数不等，大便多为心、呕吐、腹痛、腹泻。腹泻次数不等，大便多为水便水便，白细胞数均为正常，经常规治疗白细胞数均为正常，经常规治疗3d后均恢复正常。后均恢复正常。思考题：思考题：1根据上述情况，你认为属哪种细菌性食物中毒？根据上述情况，你认为属哪种细菌性食物中毒？2引起食物中毒的细菌有哪些？主要鉴别要点是什么？引起食物中毒的细菌有哪些？主要鉴别要点是什么？案例案例 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌雷同于其他引起人类感染的弧菌雷同于其他引起人类感染的弧菌特征：嗜盐（特征：嗜盐（halophilic），培养以含），培养以含3.5%8%NaCl为宜为宜抵抗力：不耐热，抵抗力：不耐热，90 C1分钟即被杀死分钟即被杀死 不耐酸，不耐酸，50%食醋中食醋中1分钟死亡分钟死亡生物学特性生物学特性 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌副溶血性弧菌引起的食物中毒副溶血性弧菌引起的食物中毒烹饪不当的海产品：常见的为海蜇、海鱼、海虾及各烹饪不当的海产品：常见的为海蜇、海鱼、海虾及各种贝类。种贝类。盐腌制品盐腌制品p因食物容器或砧板生熟不分污染后，发生食物中毒。因食物容器或砧板生熟不分污染后，发生食物中毒。潜伏期潜伏期572小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症。病症。免疫力不强。免疫力不强。第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物标本采集：患者粪便、肛拭或剩余食物分离培养：分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板琼脂平板或嗜盐菌选择平板嗜盐性试验与生化反应嗜盐性试验与生化反应诊断血清进行鉴定诊断血清进行鉴定诊断诊断第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌治疗可用抗菌药物治疗可用抗菌药物严重病例需输液和补充电解质严重病例需输液和补充电解质 防治防治第三节第三节幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌（Helicobacter Helicobacter pyloripylori）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌一、生物学性状一、生物学性状 G-细长弯曲、细长弯曲、S型或海鸥展翅状，有多根鞭毛型或海鸥展翅状，有多根鞭毛营养要求高营养要求高、一定湿度、一定湿度细小、针尖状、半透明菌落细小、针尖状、半透明菌落 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌不分解糖，氧化酶（不分解糖，氧化酶（+）过氧化氢酶（过氧化氢酶（+）快速尿素酶（快速尿素酶（+）水解尿素释放氨）水解尿素释放氨 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌 1.鞭毛与鞭毛与尿素酶尿素酶 2.黏附素黏附素 3.脂多糖脂多糖 4.毒素（空泡毒素毒素（空泡毒素VacA、细胞毒素相关、细胞毒素相关CagA）二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病物质（一）致病物质 第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌（二）（二）所致疾病所致疾病（人是唯一肯定传染源）（人是唯一肯定传染源）功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病。淋巴瘤、胃肠道外疾病。（三）免疫性（三）免疫性（IgA和和IgG感染或疾病的标志）感染或疾病的标志）第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌1.标本：胃镜采集组织活检标本标本：胃镜采集组织活检标本2.分离培养与鉴定：分离培养与鉴定：37，3天，微需氧，湿润天，微需氧，湿润3.快速诊断快速诊断组织学染色、快速尿素酶试验组织学染色、快速尿素酶试验血清学、分子生物学血清学、分子生物学尿素呼吸试验、粪便抗原测定尿素呼吸试验、粪便抗原测定三、微生物学检查法三、微生物学检查法 亚甲蓝染色：海鸥状菌体亚甲蓝染色：海鸥状菌体无有效预防无有效预防 胶体铋剂、质子泵抑制剂、两种抗菌药物三联疗法胶体铋剂、质子泵抑制剂、两种抗菌药物三联疗法第二节第二节 副溶血弧菌副溶血弧菌四、防治原则四、防治原则练习题v一.填空题v1.霍乱弧菌的两个生物型是指（）和（）.v2.致人类食物中毒的弧菌是（）.v3.霍乱弧菌耐（）不耐酸,常用的人工培养基是（）或（）.v4.霍乱弧菌肠毒素的（）亚单位可与小肠粘膜上皮细胞结合,使毒素分子变构.v5.霍乱弧菌有耐热的（）抗原和不耐热的（）抗原.v二.判断题v1.霍乱肠毒素是一种内毒素.v2.霍乱弧菌的两个生物型都是属于非 O1 血清型.v3.霍乱弧菌能还原硝酸银盐,靛基质试验呈阴性.v4.在自然情况下,人类是霍乱弧菌的唯一易感者.v三.选择题v1.霍乱弧菌生长繁殖的最适宜 pH 值范围是A.4.0-6.0 B.8.8-9.0 C.7.2-7.6 D.6.0-7.0 E.2.0-5.0v2.能致人类食物中毒的病原菌是A.霍乱弧菌 B.副溶血性弧菌 C.溶血性链球菌 D.志贺痢疾菌 E.肺炎双球菌v3.机体感染下列哪种病原菌后能获得牢固持久免疫力A.流感杆菌 B.大肠杆菌 C.痢疾杆菌 D.肺炎链球菌 E.霍乱弧菌v4.霍乱弧菌的主要致病物质是vA.肠毒素 B.内毒素 C.鞭毛 D.菌毛 E.荚膜v四.问答题v1.简述霍乱弧菌的致病过程.v2.简述霍乱弧菌的微生物学检查方法.作业题v简述霍乱肠毒素的组成以及其毒性作用.
