教学课件：第一章-疫苗概论.ppt

疫苗基础与应用疫苗基础与应用王王 毅毅吉林大学药学院吉林大学药学院20102010第一章第一章 疫苗概论疫苗概论疫苗与药物的不同点一般药物一般药物疫苗疫苗对象年龄目的种类结果病人健康人群不同年龄段的患者婴幼儿和儿童治疗疾病/减轻病人的症状通过免疫机制使健康人预防疾病天然药物、化学合成药物、生物药品等生物制品减轻病痛彻底控制消灭某一种疾病（如：天花、脊髓灰质炎）第一第一节 疫苗概念的疫苗概念的产生及其背景生及其背景一、一、疫苗疫苗的的产生及其背景生及其背景12世纪，中国开始用人痘接种预防天花世纪，中国开始用人痘接种预防天花 -疫苗可预防疾病的流行病学与预防学疫苗可预防疾病的流行病学与预防学 第第6版版（2000年年）美国疾病控制与预防中心出版美国疾病控制与预防中心出版天花（天花（Smallpox）临床表床表现：主要主要为严重毒血症状（寒重毒血症状（寒战、高、高热、乏力、乏力、头痛、痛、四肢及腰背部酸痛，体温急四肢及腰背部酸痛，体温急剧升高升高时可出可出现惊厥、惊厥、昏迷）、皮肤成批依次出昏迷）、皮肤成批依次出现斑疹、丘疹、疱疹、斑疹、丘疹、疱疹、脓疱，最后疱，最后结痂、脱痂，痂、脱痂，遗留痘疤。留痘疤。传播途径播途径：飞沫吸入或直接接触；沫吸入或直接接触；来来势凶猛，凶猛，发展迅速，展迅速，对未免疫人群感染后未免疫人群感染后15-20天内致死率高达天内致死率高达30。天花（天花（Smallpox）由由天花病毒天花病毒引起的一种引起的一种烈性烈性传染病染病，患者在，患者在痊愈后痊愈后脸上会留有麻子，故名上会留有麻子，故名“天花天花”。天花病毒天花病毒：外观外观：呈砖形（：呈砖形（200纳米纳米300纳米）纳米）抵抗力较强：抵抗力较强：能对抗干燥和低温，能对抗干燥和低温，在痂皮、尘土和被服上，可生存数在痂皮、尘土和被服上，可生存数月至一年半之久月至一年半之久天花天花的防治的防治-中国中国宋真宗宋真宗时期期(998-1023年年)：人痘法人痘法-预防天花防天花医者从医者从症状症状轻微的天花病人微的天花病人身上身上进行人工接染到健康行人工接染到健康儿童，使其通儿童，使其通过产生生轻微症状的感染微症状的感染获得免疫力，避得免疫力，避免天花引起的免天花引起的严重疾病甚至死亡重疾病甚至死亡明朝隆明朝隆庆年年间(1567-1572年年)：人痘法人痘法-趋于完善于完善人痘衣法、痘人痘衣法、痘浆法、旱痘法和水苗法法、旱痘法和水苗法等多种接种方法等多种接种方法人痘法的缺点人痘法的缺点：有有时也会引起也会引起严重的天花重的天花天花天花的防治的防治-欧洲欧洲1721年，人症接种法年，人症接种法传入英国入英国英国医生英国医生E.Jenner(1749-1823)1796年年，利用，利用牛痘牛痘防治防治天花天花1798年，医学界年，医学界正式承正式承认疫苗接种确疫苗接种确实是一种行之是一种行之有效的免疫方法有效的免疫方法。1980年，世界年，世界卫生生组织(WHO)宣布宣布:全球消全球消灭了天花了天花疫苗之父疫苗之父-法国免疫学家法国免疫学家 Louis Pasteur细菌的分离培养细菌的分离培养技术技术减毒菌株减毒菌株的获得的获得连续传代培养法连续传代培养法（1870年年）鸡霍乱弧菌鸡霍乱弧菌减毒株减毒株（第一个细菌减第一个细菌减毒活疫毒活疫苗）苗）高温培养法高温培养法（1881年年）炭疸菌苗炭疸菌苗异体传代法异体传代法：将将狂犬病毒狂犬病毒在在兔兔体体内经连续传代内经连续传代，获得了减毒株获得了减毒株 巴氏减毒菌苗的发明巴氏减毒菌苗的发明：为实验免疫学建立了基础为实验免疫学建立了基础疫苗的定疫苗的定义一切一切通通过注射注射或或黏膜黏膜途径途径接种接种，可以，可以诱导机体机体产生生针对特定致病原特定致病原的的特异性抗体特异性抗体或或细胞免疫胞免疫，从而，从而使机体使机体获得得保保护或消或消灭该致病原致病原能力能力的生物制品，的生物制品，统称称为疫苗疫苗包括包括:蛋白蛋白质、多糖、核酸、活、多糖、核酸、活载体或感染体或感染因子等因子等二、二、疫苗的种疫苗的种类1.按按所用材料所用材料分分类：细菌性疫苗菌性疫苗（旧称：旧称：菌苗菌苗）病毒性疫苗病毒性疫苗（旧称：疫苗旧称：疫苗）类毒素毒素二、二、疫苗的种疫苗的种类2.按按疫苗研制技疫苗研制技术分分类：传统疫苗疫苗灭活疫苗活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗位疫苗：用天然微生物的某些成分制成用天然微生物的某些成分制成新型疫苗新型疫苗项目项目减毒活疫苗减毒活疫苗灭活疫苗灭活疫苗亚单位疫苗亚单位疫苗抗原抗原用减毒或无毒的全病原体用减毒或无毒的全病原体作为抗原作为抗原用化学或物理方法将病用化学或物理方法将病原体杀死原体杀死以化学方法获得病原体以化学方法获得病原体的某些具免疫原性的成的某些具免疫原性的成分分免疫机免疫机理理接种后病原体在体内有一接种后病原体在体内有一定生长繁殖能力，类似隐定生长繁殖能力，类似隐性感染，产生细胞、体液性感染，产生细胞、体液和局部免疫和局部免疫病原体失去毒力但保持病原体失去毒力但保持免疫原性，接种后产生免疫原性，接种后产生特异抗体或致敏淋巴细特异抗体或致敏淋巴细胞胞接种后能刺激机体产生接种后能刺激机体产生特异性免疫效果特异性免疫效果优缺点优缺点接种次数少，反应小，免接种次数少，反应小，免疫效果持久。疫效果持久。稳定性较差，并应考虑减稳定性较差，并应考虑减毒株毒力返祖问题毒株毒力返祖问题一般要接种一般要接种2 2-3 3次，反次，反应较大，维持时间较短。应较大，维持时间较短。稳定性好，较安全稳定性好，较安全制品纯度较高，副反应制品纯度较高，副反应小，需多次接种小，需多次接种常用疫常用疫苗苗卡介苗、麻疹、鼠疫、脊卡介苗、麻疹、鼠疫、脊髓灰质炎减毒活疫苗髓灰质炎减毒活疫苗伤寒、霍乱、百日咳、伤寒、霍乱、百日咳、乙脑、脊髓灰质炎灭活乙脑、脊髓灰质炎灭活疫苗疫苗白喉、破伤风类毒素，白喉、破伤风类毒素，A A群脑膜炎球菌多糖疫苗群脑膜炎球菌多糖疫苗新型疫苗新型疫苗基因工程基因工程亚单位疫苗位疫苗基因工程基因工程载体疫苗体疫苗核酸疫苗核酸疫苗基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗重重组疫苗疫苗合成合成肽疫苗疫苗抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体抗独特型抗体：与特定抗原与特定抗原的的抗体抗体结合的抗体结合的抗体，此抗体此抗体具有原始病原具有原始病原微生物微生物抗原的抗原的作用作用应用：应用：可以用来代替可以用来代替免疫免疫源源制造制造疫苗疫苗,适用于目前尚适用于目前尚不能不能培养培养或培养困难、或培养困难、产量产量低低,或危险性大的一些微生或危险性大的一些微生物作疫苗。物作疫苗。二、二、疫苗的种疫苗的种类3.按其按其基本特征基本特征分分类：活疫苗活疫苗灭活疫苗活疫苗新型疫苗新型疫苗基因工程基因工程亚单位疫苗位疫苗-灭活疫苗活疫苗基因工程基因工程载体疫苗体疫苗-活疫苗活疫苗核酸疫苗核酸疫苗-特殊的疫特殊的疫苗苗基因缺失活疫苗基因缺失活疫苗-灭活疫苗活疫苗重重组疫苗疫苗-灭活疫苗活疫苗合成合成肽疫苗疫苗-灭活疫苗活疫苗抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体疫苗-灭活疫苗活疫苗疫苗的疫苗的发展展经典的病毒疫苗和典的病毒疫苗和细菌疫苗菌疫苗 寄生虫疫寄生虫疫苗、苗、肿瘤疫苗、避孕疫苗等瘤疫苗、避孕疫苗等;预防性疫苗防性疫苗 治治疗性疫苗。性疫苗。三、疫苗的基本成分、性三、疫苗的基本成分、性质和特征和特征1.疫苗的基本成分疫苗的基本成分抗原抗原佐佐剂防腐防腐剂稳定定剂灭活活剂缓冲液、冲液、盐类等非活性成分等非活性成分（1）抗原抗原:疫苗最主要的有效活性成分疫苗最主要的有效活性成分基本条件基本条件异物性异物性一一定的理化特性定的理化特性特异性特异性灭活病毒或细菌灭活病毒或细菌活病毒或细菌活病毒或细菌/减毒株减毒株病毒或菌体提纯物病毒或菌体提纯物有效蛋白成分有效蛋白成分类毒素类毒素细菌多糖细菌多糖合成多肽合成多肽DNA。（2）佐佐 剂理想的佐剂理想的佐剂：增强抗原免疫应答增强抗原免疫应答无毒、安全无毒、安全在非冷藏条件下保持稳在非冷藏条件下保持稳定定铝佐剂铝佐剂油制佐剂油制佐剂（弗氏完全佐弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂剂和弗氏不完全佐剂）动物试验动物试验作用作用机制机制改变抗原的物理形状，延改变抗原的物理形状，延长抗原在机体内长抗原在机体内保留时间保留时间；刺激单核吞噬细胞对抗原刺激单核吞噬细胞对抗原的提的提呈呈能力；能力；刺激淋巴细胞分化，增加刺激淋巴细胞分化，增加扩大免疫应答能力扩大免疫应答能力。（3）防腐防腐剂目的：目的：防止外来微生防止外来微生物的污染物的污染大多数的灭活疫苗都大多数的灭活疫苗都使用防腐剂使用防腐剂0.010.02硫柳汞硫柳汞2-苯氧乙醇苯氧乙醇氯仿氯仿硫柳汞硫柳汞副作用：副作用：接触性皮炎接触性皮炎、变应性变应性结膜炎结膜炎、耳毒性耳毒性（4）稳定定剂保保证作作为抗原的病毒或其他微生物存活抗原的病毒或其他微生物存活，并保持免疫原性并保持免疫原性；冻干疫苗中常用的乳糖、明胶、山梨醇等。干疫苗中常用的乳糖、明胶、山梨醇等。（5）灭活活剂灭活病毒或活病毒或细菌抗原的方法菌抗原的方法物理方法物理方法（如加如加热、紫外、紫外线照射等照射等）化学方法化学方法（丙丙酮、酚、甲、酚、甲醛等等）这些物些物质对人体有一定毒害作用，因此在人体有一定毒害作用，因此在灭活抗原后必活抗原后必须及及时从疫苗中除去，并从疫苗中除去，并经严格格检定以保定以保证疫苗的安全性。疫苗的安全性。（6）缓冲液、冲液、盐类 缓冲液的冲液的种种类、盐类的的含量含量都可影响疫都可影响疫苗的效力、苗的效力、纯度和安全性，因此都有度和安全性，因此都有严格格的的质量量标准准2.疫苗的基本性疫苗的基本性质和特征和特征免疫原性免疫原性安全性安全性稳定性定性（1）免疫原性免疫原性抗原的抗原的强弱、大小和弱、大小和稳定性定性抗原抗原分子量分子量过小小，易被体内分解、易被体内分解、过滤，均不，均不易易产生良好的免疫生良好的免疫应答；答；抗原的理化性抗原的理化性质颗粒型抗原粒型抗原、不可溶性抗原不可溶性抗原蛋白蛋白质多糖多糖类脂脂免疫原性免疫原性（2）安全性安全性接种后的全身和局部反接种后的全身和局部反应 接种引起免疫接种引起免疫应答的安全程度答的安全程度 人群接种后引起的疫苗株散播情况等人群接种后引起的疫苗株散播情况等（3）稳定性定性经过一定一定时间的疫苗的疫苗贮存存经过一定一定时间冷冷链运运输过程程疫苗仍能保持其有效的生物活性疫苗仍能保持其有效的生物活性四、四、疫苗制疫苗制备的基本的基本过程、程、质量量检定定及生及生产的的质量管理量管理1.疫苗制疫苗制备的基本的基本过程程经典疫苗典疫苗的的制制备：选择适宜的培养基或适宜的培养基或细胞胞进行菌、毒株大量繁殖行菌、毒株大量繁殖收集培养物，提收集培养物，提纯半成品半成品检定定稀稀释，分装，分装成品成品检定。定。新型新型疫苗疫苗的的制制备：方法更加多方法更加多样化。化。2.疫苗的疫苗的质量量检定定理化理化检定定安全安全检定定效力效力检定定稳定性定性检定定（1）理化理化检定定通过物理或化学分析手通过物理或化学分析手段进行疫苗段进行疫苗有效成分有效成分及及杂质杂质的检测。的检测。中国生物制品化学检中国生物制品化学检定规程定规程(2000年版年版)物理性状检查物理性状检查蛋白含量测定蛋白含量测定纯度测定纯度测定防腐剂含量测定防腐剂含量测定吸附剂含量测定吸附剂含量测定可能有害物的检测可能有害物的检测等等（2）安全安全检定定对象：对象：疫苗成品疫苗成品半成品半成品制备疫苗所用的制备疫苗所用的菌种、毒种等菌种、毒种等一般性安全检查一般性安全检查无菌试验无菌试验热原试验（即细菌内毒素）热原试验（即细菌内毒素）灭菌、灭活和减毒情况检灭菌、灭活和减毒情况检查查外源因子检查外源因子检查过敏性物质检查等过敏性物质检查等用动物进行的急性和亚用动物进行的急性和亚急性毒性试验等。急性毒性试验等。（3）效力效力检定定检测疫苗检测疫苗的的有效性有效性动物试验动物试验活菌数测定活菌数测定病毒滴度测定病毒滴度测定抗毒素和类毒素单位抗毒素和类毒素单位测定测定小鼠半数有效量小鼠半数有效量动物保护力试验动物保护力试验血清学试验等血清学试验等（4）稳定性定性检定定：衡量疫苗衡量疫苗质量量长期稳定性长期稳定性在疫苗的在疫苗的实际保存温度实际保存温度下下存放一定时间之后存放一定时间之后,察其真实稳定性察其真实稳定性,并确并确定保存期。定保存期。加速稳定性试验加速稳定性试验让疫苗在让疫苗在较高温度下较高温度下(一般为一般为37)一定时间，一定时间，考察疫苗在较高温度时考察疫苗在较高温度时的稳定性。的稳定性。3.疫苗生疫苗生产的的质量管理量管理药品生品生产质量管理量管理规范范(good manufacturing practices for drugs，GMP)人人员-实施施GMP的保的保证;厂房厂房设施、施、设备和原材料和原材料-实施施GMP的基本条件的基本条件;管理制度和要求、管理制度和要求、记录等。等。第二节第二节 疫苗的应用、发展及疫苗的应用、发展及其评价其评价一、一、细菌性疫苗菌性疫苗霍乱霍乱：一种烈性一种烈性肠道道传染病，由染病，由革革兰兰氏阴性氏阴性的霍乱弧的霍乱弧菌引起菌引起发病特征病特征：水水样腹泻，迅速造成脱水，腹泻，迅速造成脱水，严重者重者可造成血容量减少性可造成血容量减少性休克休克和和酸中毒酸中毒导致死亡。致死亡。一、一、细菌性疫苗菌性疫苗1.霍乱疫苗霍乱疫苗1885年，用霍乱肉年，用霍乱肉汤培养物培养物经皮下注射入人体皮下注射入人体1896年，用年，用琼脂培养霍乱弧菌，再加脂培养霍乱弧菌，再加热杀死后制成死后制成菌苗菌苗1902年年，日本霍乱病大流行日本霍乱病大流行:大量成功使用大量成功使用至今至今还没有一种理想的霍乱疫苗没有一种理想的霍乱疫苗原因：原因：霍乱弧菌的有效保霍乱弧菌的有效保护性抗原性抗原成分不清、抗原成分不清、抗原漂移、漂移、难以得到足以得到足够的有效抗原量的有效抗原量等因素有关。等因素有关。一、一、细菌性疫苗菌性疫苗 2.伤寒疫苗寒疫苗伤寒寒：由由伤寒杆菌引起的急性寒杆菌引起的急性肠道道传染病染病典型典型临床特征床特征：持持续高高热、相、相对缓缓脉脉、全、全身身中毒中毒症状、症状、玫瑰疹玫瑰疹、肝脾、肝脾肿大与大与白白细细胞胞减少等。减少等。主要并主要并发症症：肠肠出血出血及及肠肠穿孔穿孔分布分布：以以热带热带、亚热带亚热带多多见。一、一、细菌性疫苗菌性疫苗 2.伤寒疫苗寒疫苗1896-1897年年，德国德国和和英国分英国分别研制了研制了伤寒寒全菌体疫苗全菌体疫苗预防效果防效果：总体来体来说有效有效缺点缺点：副反副反应过强，影响推广影响推广。局部局部红肿疼痛、疼痛、发热、头痛、乏力痛、乏力一、一、细菌性疫苗菌性疫苗 3.卡介苗卡介苗预防儿童防儿童结核病核病“出生第一出生第一针”上臂三角肌外上臂三角肌外侧皮内注射皮内注射一、一、细菌性疫苗菌性疫苗 3.卡介苗卡介苗1902年，从患年，从患结核病的牛乳房里分离得到一株核病的牛乳房里分离得到一株牛型牛型结核杆菌核杆菌；Calmette和和Guerin将此菌接种于将此菌接种于5%甘油胆汁甘油胆汁马铃薯培养基，薯培养基，进行行传代培养；代培养；每隔每隔2-3周周传代一次，代一次，经过230余代，余代，历时13年，年，终于制于制备出出减毒活疫苗减毒活疫苗卡介苗卡介苗(bacille Calmette-Guerin，BCG)。对成人肺成人肺结核的作用并不明核的作用并不明显。二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗1.狂犬病疫苗狂犬病疫苗 历史悠久史悠久1882年，法国的年，法国的巴斯德巴斯德应用用连续传代减弱病毒毒力的方法，制造疫苗。代减弱病毒毒力的方法，制造疫苗。五代疫苗五代疫苗：神神经组织来源疫苗来源疫苗禽胚培养疫苗禽胚培养疫苗细胞培养疫苗胞培养疫苗亚单位疫苗和精制疫苗位疫苗和精制疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗1.狂犬病疫苗狂犬病疫苗 因因经济水平的不同水平的不同，不同，不同国国家家狂犬病免疫接种狂犬病免疫接种疫苗的种疫苗的种类及策略也有所不同及策略也有所不同：发达国家达国家：接种接种对象象:人人、宠物物、野生野生动物物主要主要为减毒活疫苗和基因工程疫苗。减毒活疫苗和基因工程疫苗。发展中国家展中国家：使用使用粗制疫苗粗制疫苗进行狂犬病暴露前后行狂犬病暴露前后的免疫接种。的免疫接种。二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗2.脊髓灰脊髓灰质炎疫苗炎疫苗脊髓灰质炎脊髓灰质炎:由由脊髓脊髓灰质炎灰质炎病病毒毒引起的小儿急性传染病，引起的小儿急性传染病，多发生婴幼儿。多发生婴幼儿。病毒侵犯脊髓前角运动神经病毒侵犯脊髓前角运动神经元，造成弛缓性肌肉元，造成弛缓性肌肉麻痹麻痹，病情轻重不一，轻者无病情轻重不一，轻者无瘫痪瘫痪出现，严重者累及出现，严重者累及生命生命中枢中枢而死亡；而死亡；又又称为小儿麻痹症。称为小儿麻痹症。埃及金字塔中的浮雕显埃及金字塔中的浮雕显示法老患有典型的脊髓示法老患有典型的脊髓灰质炎下股后遗麻痹灰质炎下股后遗麻痹二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗2.脊髓灰脊髓灰质炎疫苗炎疫苗1953年，美国研制的三价甲年，美国研制的三价甲醛脊髓灰脊髓灰质炎炎灭活活疫苗疫苗(inacti vated poliomye-litis vaccine，IPV)1954年，年，IPV推广推广应用到加拿大以至全世界用到加拿大以至全世界1957年，美国研制出三价脊髓灰年，美国研制出三价脊髓灰质炎炎减毒减毒活疫活疫苗苗(oral poliomyelitis vaccine，OPV)OPV制制备方法方法简易易价格只是价格只是IPV的几百分之一到几十分之一的几百分之一到几十分之一二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗2.脊髓灰脊髓灰质炎疫苗炎疫苗1994年年8月月，美洲区美洲区实现了无脊髓灰了无脊髓灰质炎目炎目标2000年年10月，西太平洋地区宣布无脊髓灰月，西太平洋地区宣布无脊髓灰质炎炎2001年年10月月，我国宣布我国宣布消消灭脊髓灰脊髓灰质炎炎二、病毒性疫苗二、病毒性疫苗3.其他病毒性疫苗其他病毒性疫苗甲型肝炎疫苗甲型肝炎疫苗麻疹疫苗麻疹疫苗风疹疫苗疹疫苗森林森林脑炎疫苗炎疫苗流行性腮腺炎疫苗流行性腮腺炎疫苗黄黄热病疫苗等病疫苗等，仍是仍是预防疾病的主力。防疾病的主力。三、三、类毒素毒素外外毒素毒素：某些种某些种类的的细菌分泌到菌分泌到细胞外的蛋白胞外的蛋白类毒素。毒素。内毒素：内毒素：某些某些细菌的菌的细胞壁胞壁组分，菌裂解后分，菌裂解后释出（是脂出（是脂多糖）。多糖）。类毒素：毒素：细细菌菌的的外外毒素毒素经0.30.4%甲甲醛醛处理，毒性消失理，毒性消失仍留其仍留其免疫免疫原性，即成原性，即成类毒素。毒素。三、三、类毒素毒素 1.白喉白喉类毒素毒素白喉白喉：由白喉杆菌引起的急性、毒素介由白喉杆菌引起的急性、毒素介导性呼吸道性呼吸道传染染病病1883年，年，Klebs在白喉患者假膜中在白喉患者假膜中发现棒状杆菌棒状杆菌;1884年，年，Loffler获得得纯菌培养菌培养;1891年，年，Beehring用用该菌免疫菌免疫绵羊或山羊，羊或山羊，获得得抗血清抗血清，并，并用于治用于治疗白喉患者首白喉患者首获成功成功;1909年，年，Smith发明了明了灭活白喉毒素活白喉毒素的方法的方法;1923年，年，Ramon等用稀甲等用稀甲醛处理白喉毒素理白喉毒素获得得类毒素，毒素，成成为白喉白喉预防史上划防史上划时代的代的预防制防制剂。广泛使用，广泛使用，发病率极低病率极低。三、三、类毒素毒素 2.破破伤风类毒素毒素 破破伤风：症状症状险恶，较高的高的发病率和病死率病率和病死率，早在早在公元前公元前5世世纪就引起了医就引起了医师们的广泛关注。的广泛关注。直到直到1884年，年，认识破破伤风是由是由细菌引起的菌引起的;1897年年，证实破破伤风抗毒素抗毒素的保的保护作用，并在作用，并在第一第一次世界大次世界大战中使用中使用;1924年，年，甲甲醛脱毒制脱毒制备类毒素毒素方法，并在方法，并在第二次世第二次世界大界大战中广泛使用，取得了很好的效果中广泛使用，取得了很好的效果第三节第三节 疫苗的技术发展疫苗的技术发展一、一、免疫原免疫原的技的技术发展展纯化化组分疫苗和分疫苗和亚单位疫苗位疫苗基因工程乙型肝炎疫苗基因工程乙型肝炎疫苗核酸疫苗核酸疫苗（DNA疫苗及疫苗及RNA疫苗疫苗）DNA疫苗的疫苗的优点点：没有病原体可能在体内复制和复制后致病没有病原体可能在体内复制和复制后致病的危的危险，不存在毒力返祖或突，不存在毒力返祖或突变。免疫免疫应答全面，可同答全面，可同时引起引起细胞免疫和体胞免疫和体液免疫。液免疫。单次接种可次接种可诱导长期或期或终身免疫。身免疫。生生产迅速迅速简便，成本低廉。便，成本低廉。DNA疫苗的疫苗的优点点：无需冷藏，易于保存和运无需冷藏，易于保存和运输。易于易于针对相同或不同病原体的几种抗原分子相同或不同病原体的几种抗原分子进行行联合接种，提供了合接种，提供了设计新的新的联合疫苗的可合疫苗的可能。能。核酸疫苗核酸疫苗还能完善能完善婴儿的抗体儿的抗体应答，促答，促进细胞内抗原的清除，防止母体抗体介胞内抗原的清除，防止母体抗体介导的抑制。的抑制。DNA疫苗的不足之疫苗的不足之处：激激发机体免疫反机体免疫反应的能力比自然感染弱的能力比自然感染弱;目的基因的表达不目的基因的表达不够理想理想;体内蛋白的表达能持体内蛋白的表达能持续多久有待多久有待进一步研究一步研究;导入机体的外源入机体的外源DNA有整合的潜在危有整合的潜在危险，而且，而且DNA免疫接种后可能引起免疫系免疫接种后可能引起免疫系统本身的功能本身的功能紊乱。紊乱。二、二、佐佐剂的技的技术发展展金属金属盐类非甲基化胞非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸呤二核苷酸(CpG)的的DNA片段片段免疫刺激复合物免疫刺激复合物可生物降解微球可生物降解微球脂脂质体体细胞因子胞因子三、三、免疫途径免疫途径的技的技术进展展免疫途径免疫途径：应根据相根据相应病原体病原体传染的染的免疫免疫机理机理来来选择。目前常用的接种途径目前常用的接种途径：划痕法划痕法注射法注射法（皮内、皮下和肌内注射皮内、皮下和肌内注射）口服法口服法吸入法吸入法四、四、联合免疫合免疫的的进展展联合免疫的联合免疫的优点：优点：（1）简化免疫程序简化免疫程序（2）节约人力、物力，减少接种次数和反应）节约人力、物力，减少接种次数和反应四、四、联合免疫合免疫的的进展展存在存在问题问题：免疫干扰：免疫干扰（1）混合抗原比例适当混合抗原比例适当，相互增强相互增强（类似（类似佐剂作用佐剂作用）;抗原配比不恰当时，可能发生免疫干扰，强者抑制抗原配比不恰当时，可能发生免疫干扰，强者抑制弱者。弱者。（2）接受联合免疫的人或动物接受联合免疫的人或动物，如果对制剂中某一如果对制剂中某一抗原已具有相当免疫力，该抗原的免疫应答可能干抗原已具有相当免疫力，该抗原的免疫应答可能干扰其他抗原的免疫应答扰其他抗原的免疫应答。五、五、疫苗生疫苗生产和使用管理和使用管理的的进展展疫苗生疫苗生产厂家必厂家必须向国家管理机构提供符向国家管理机构提供符合合GMP规定的疫苗制造和定的疫苗制造和检定定规程，并且程，并且进行定期的行定期的质量量认证。WHO：起草了起草了“DNA疫苗疫苗质量保量保证指南指南”五、五、疫苗生疫苗生产和使用管理和使用管理的的进展展发达国达国家家将消除疫苗的不良反将消除疫苗的不良反应作作为主要考主要考虑因素因素发展中国家展中国家增加已推荐疫苗的覆盖率增加已推荐疫苗的覆盖率不断将新疫苗不断将新疫苗纳入免疫程序入免疫程序第四节第四节 疫苗运用的现状及其疫苗运用的现状及其效果分析效果分析一、疫苗的人体一、疫苗的人体现场考核及流行病考核及流行病学效果学效果评价价临床床试验选取取小量人群小量人群进行人体的免疫学效果判定，包行人体的免疫学效果判定，包括安全性、免疫原性和效果括安全性、免疫原性和效果评价。价。流行病学效果流行病学效果评价价运用流行病学研究群体疾病的方法，通运用流行病学研究群体疾病的方法，通过疫苗疫苗在人群中在人群中使用后使用后疾病流行病学特征的疾病流行病学特征的变化化来来评价疫苗的效果。价疫苗的效果。流行病学流行病学调查:考核疫苗效果最可靠的方法。考核疫苗效果最可靠的方法。流行病学效果流行病学效果评价价前瞻性前瞻性试验研究：研究：比比较接种接种组和和对照照组在一定在一定时期内特定疾病的罹期内特定疾病的罹患率患率回回顾性性调查研究：研究：进行行长期期预防接种防接种历史史资料料的流行病学的流行病学统计分析，分析，评价疫苗大面价疫苗大面积接种后接种后对该病流行的影响，适用病流行的影响，适用于常于常规使用的疫苗以及使用的疫苗以及对计划免疫划免疫实施施评价。价。二、二、计划免疫与非划免疫与非计划免疫划免疫 1.计划免疫划免疫：根据特指的某些根据特指的某些传染病疫情分析和人群免疫状染病疫情分析和人群免疫状况分析况分析按照按照规定的免疫程序定的免疫程序、有有计划地利用免疫制划地利用免疫制剂进行人群接种行人群接种以提高人群免疫水平，达到控制乃至最以提高人群免疫水平，达到控制乃至最终消消灭相相应传病的目的。病的目的。我国儿童常我国儿童常规免疫所使用的疫苗免疫所使用的疫苗第一第一类：卫生部生部规定的定的儿童儿童计划免疫用菌划免疫用菌，包括卡介苗、口服，包括卡介苗、口服脊髓灰脊髓灰质炎减毒活疫苗、吸附百白破混合制炎减毒活疫苗、吸附百白破混合制剂、破、破伤风二二联类毒素、毒素、冻干麻疹活疫苗干麻疹活疫苗;第二第二类：卫生部生部规定的定的纳入儿童入儿童计划免疫管理划免疫管理的疫苗，如乙型的疫苗，如乙型肝炎疫苗肝炎疫苗;第三第三类：各省各省(自治区、直自治区、直辖市市)纳入或入或拟纳入儿童入儿童计划免疫管划免疫管理的疫苗，如流行性乙理的疫苗，如流行性乙脑炎疫苗、流行性炎疫苗、流行性脑脊髓膜炎多糖疫苗、脊髓膜炎多糖疫苗、风疹疫苗、流行性腮腺炎疫苗。疹疫苗、流行性腮腺炎疫苗。中国推荐的儿童免疫程序中国推荐的儿童免疫程序年年龄龄疫苗疫苗年年龄龄疫苗疫苗新新生儿生儿卡介苗卡介苗，乙型肝炎疫苗，乙型肝炎疫苗6月月龄龄乙型肝炎疫苗乙型肝炎疫苗1月月龄龄乙型肝炎疫苗乙型肝炎疫苗8月月龄龄麻疹活疫苗麻疹活疫苗2月月龄龄脊髓灰脊髓灰质质炎减毒活疫苗炎减毒活疫苗1.5-2岁岁 百白破混合制百白破混合制剂剂43月月龄龄脊髓灰脊髓灰质质炎减毒活疫苗炎减毒活疫苗，百白破混合制，百白破混合制剂剂4岁岁脊髓灰脊髓灰质质炎减毒活疫苗炎减毒活疫苗44 4月龄月龄 脊髓灰脊髓灰质质炎减毒活疫苗炎减毒活疫苗，百白破混合制，百白破混合制剂剂7岁岁卡介苗卡介苗，白喉破，白喉破伤风伤风二二联联苗苗，麻疹活疫苗，麻疹活疫苗5 5月龄月龄 百白破混合制百白破混合制剂剂lO-12岁岁卡介苗卡介苗为第一次接种。为第一次接种。为第二次接种。为第二次接种。为第三次接种。为第三次接种。4为第四次接种。为第四次接种。第五节第五节 疫苗的发展前景疫苗的发展前景一、一、联合疫苗合疫苗 为什么要什么要发展展联合疫苗合疫苗？随着随着EPI中疫苗种中疫苗种类的不断增加，的不断增加，婴幼儿接幼儿接种次数也随之增多，种次数也随之增多，儿童免疫儿童免疫负担加重担加重。WHO和儿童疫苗免疫机构（和儿童疫苗免疫机构（Childrens Vaccine Initiative，CVI)倡倡议研制研制联合疫苗，合疫苗，使目前复使目前复杂的接种程序的接种程序变得得简便易行。便易行。一、一、联合疫苗合疫苗 指能指能够预防多种疾病防多种疾病的的联合制品合制品(其中包括其中包括在注射前混合和在注射前混合和载体疫苗体疫苗);或能防由或能防由同一病原体的不同株同一病原体的不同株，或，或不同血不同血清型清型引起的同一疾病的引起的同一疾病的多价疫苗多价疫苗。联合疫苗合疫苗百白破百白破联合疫苗合疫苗（百百日咳、日咳、白白喉喉、破破伤风）三价口服脊髓灰三价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗炎减毒活疫苗麻麻风腮腮联合疫苗合疫苗（麻麻疹、流行性疹、流行性腮腮腺炎、腺炎、风磨磨）甲乙型肝炎甲乙型肝炎联合疫苗合疫苗二、治二、治疗性疫苗性疫苗麻风病麻风病利什曼病利什曼病布氏杆菌病布氏杆菌病慢性支气管炎慢性支气管炎疱疹病毒感染疱疹病毒感染艾滋病艾滋病慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎肿瘤疫苗肿瘤疫苗三、通三、通过食物食物摄取的疫苗取的疫苗和个性化疫苗和个性化疫苗转基因蔬菜和基因蔬菜和转基因水果制成的口服疫苗基因水果制成的口服疫苗谢谢！谢谢！