生物技术制药课后习题答案.pdf

第 一 章 绪 论 1 生 物 技 术 是 以 生 命 科 学 为 基 础，利 用 生 物 体（或 生 物 组 织、细 胞 及 其 组 分）的 特 性 和 功 能，设 计 构 建 有 预 期 性 状 的 新 物 种 或 新 品 系，并 与 工 程 相 结 合，进 行 加 工 生 产，为 社 会 提 供 商 品 和 服 务 的 一 个 综 合 性 的 技 术 体 系。2 生 物 技 术 的 主 要 内 容：P1基 因 工 程、细 胞 工 程、酶 工 程、发 酵 工 程 蛋 白 质 工 程:运 用 基 因 工 程 全 套 技 术 改 变 蛋 白 质 结 构 的 技 术。染 色 体 工 程:探 索 基 因 在 染 色 体 上 的 定 位，异 源 基 因 导 入、染 色 体 结 构 改 变。生 化 工 程:生 物 反 应 器 及 产 品 的 分 离、提 纯 技 术。3 生 物 技 术 制 药 采 用 现 代 生 物 技 术 人 为 创 造 条 件，借 助 微 生 物、植 物 或 动 物 来 生 产 所 需 的 医 药 品 过 程 被 称 为 4 生 物 技 术 药 物 采 用 D N A重 组 技 术 或 其 它 生 物 新 技 术 研 制 的 蛋 白 质 或 核 酸 类 药 物 才 能 被 称 为 5 生 物 药 物 生 物 技 术 药 物 与 天 然 生 化 药 物、微 生 物 药 物、海 洋 药 物 和 生 物 制 品 一 起 归 类 为 PPT复 习 题 第 二 章 基 因 工 程 制 药 1、简 述 基 因 工 程 制 药 的 基 本 程 序。P162、说 明 基 因 工 程 技 术 用 于 制 药 的 三 个 重 要 意 义。P 15第 一 段 第 一 行 3、采 用 哪 两 种 方 法 来 确 定 目 的 cDNA克 隆？P18（7 目 的 基 因 cDN A的 分 离 和 鉴 定）核 酸 探 针 杂 交 法 用 层 析 法 或 高 分 辨 率 电 泳 技 术（蛋 白 质 双 向 电 泳 技 术 或 质 谱 技 术）分 离 出 确 定 为 药 物 的 蛋 白 质，氨 基 酸 测 序，按 照 密 码 子 对 应 原 则 合 成 出 单 链 寡 聚 核 苜 酸，用 做 探 针，与 c D N A文 库 中 的 每 一 个 克 隆 杂 交。这 个 方 法 的 关 键 是 分 离 目 的 蛋 白，免 疫 反 应 鉴 定 法（酶 联 免 疫 吸 附 检 测）4、说 明 用 大 肠 杆 菌 做 宿 主 生 产 基 因 工 程 药 物 必 须 克 服 的 6 个 困 难。原 核 基 因 表 达 产 物 多 为 胞 内 产 物，必 须 破 胞 分 离，受 胞 内 其 它 蛋 白 的 干 扰，纯 化 困 难；原 核 基 因 表 达 产 物 在 细 胞 内 多 为 不 溶 性（包 含 体，inclusion body）,必 须 经 过 变 性、复 性 处 理 以 恢 复 药 物 蛋 白 的 生 物 学 活 性，工 艺 复 杂；没 有 翻 译 后 的 加 工 机 制，如 糖 基 化，应 用 上 受 到 限 制；产 物 的 第 一 个 氨 基 酸 必 然 是 甲 酰 甲 硫 氨 酸，因 无 加 工 机 制，常 造 成 N-M et冗 余，做 为 药 物，容 易 引 起 免 疫 反 应；细 菌 的 内 毒 素 不 容 易 清 除；细 菌 的 蛋 白 酶 常 常 把 外 源 基 因 的 表 达 产 物 消 化；5、用 蓝 藻 做 宿 主 生 产 基 因 工 程 药 物 有 什 么 优 越 性？蓝 藻：很 有 前 途 的 药 物 基 因 的 宿 主 细 胞 有 内 源 质 粒，美 国 W olk实 验 室 已 构 建 1200种 人 工 质 粒，可 用 做 基 因 载 体。载 体 转 化 蓝 藻 不 需 要 诱 发 感 受 态 就 可 以 做 到；外 源 基 因 产 物 不 形 成 包 含 体，分 离 与 纯 化 工 艺 可 以 大 大 被 简 化；可 以 直 接 食 用，等 于 直 接 口 服 药 物 6、结 合 pBG-2说 明 选 择 用 于 E.c o/i细 胞 宿 主 中 的 载 体 的 6 项 原 则。P 2 3与 pBV220优 点 类 似,原 则 P227、简 述 基 因 工 程 菌 中 质 粒 不 稳 定 的 两 个 指 标？P 3 2如 何 计 算 质 粒 的 稳 定 性？P 3 3质 粒 稳 定性 分 析 方 法(ST=出 现 的 菌 落 数/100)8、简 述 提 高 质 粒 稳 定 性 的 两 步 培 养 法 P 33分 阶 段 控 制 培 养 普 遍 使 用 的 两 步 培 养 法,是 在 接 种 后 只 让 菌 体 细 胞 快 速 分 裂，这 一 步 培 养 过 程 中，外 源 基 因 不 表 达；然 后 再 诱 导 载 体 上 的 药 物 基 因 以 最 高 效 率 表 达，积 累 药 物 蛋 白。9、简 述 基 因 工 程 药 物 分 离 纯 化 工 艺 设 计 中 必 须 考 虑 的 药 物 的 5 个 特 点。P46(I 摘 自 PPT)在 初 始 物 料 中 的 含 量 低：药 物 分 离 困 难。外 源 基 因 表 达 尽 管 是 在 菌 体 生 长 对 数 期 被 诱 导 的，在 与 菌 体 生 长 过 程 中 的 代 谢 产 物 比 较，在 发 酵 产 物 的 初 始 物 料 中 含 量 也 是 很 低 的。初 始 物 料 的 成 分 复 杂：不 利 于 药 物 蛋 白 的 分 离 与 纯 化。除 了 药 物 基 因 产 物 外，菌 体 细 胞、代 谢 产 物、残 留 的 培 养 基、无 机 盐，尤 其 是 药 物 蛋 白 的 类 似 物。药 物 蛋 白 的 稳 定 性 差：分 离 与 纯 化 条 件 相 对 苛 刻。容 易 失 活 或 变 性，对 各 种 物 理 化 学 因 素 十 分 敏 感。(4)分 离 与 纯 化 的 技 术 差 异 大：基 因 工 程 药 物 种 类 繁 多、结 构 复 杂。不 同 的 药 物 分 离 与 纯 化 必 须 考 虑 其 分 子 特 征。对 不 同 药 物 的 质 量 和 纯 度 有 不 同 的 要 求：药 品 质 量 标 准 是 根 据 药 物 的 应 用 制 定 的，没 有 统 一 的 制 备、分 离、纯 化 的 标 准。第 三 章 动 物 细 胞 工 程 制 药 1、解 释 动 物 细 胞 的 两 种 培 养 方 式。动 物 细 胞 培 养 大 致 可 分 为 两 种：群 体 培 养(mass culture)是 把 一 定 数 量 的 细 胞 悬 浮 液 置 于 培 养 瓶 中，让 细 胞 贴 壁 生 长，汇 合(confluence)后 形 成 单 细 胞 层。克 隆 培 养(clonal culture)是 将 高 度 稀 释 的 游 离 细 胞 悬 浮 液 置 于 培 养 瓶 中，各 个 细 胞 贴 壁 后 彼 此 距 离 较 远，经 过 生 长 增 殖，每 一 个 细 胞 集 落 均 来 源 于 一 个 细 胞 祖 先，称 为 一 个“克 隆”(clone)。2、举 例 说 明 三 种 细 胞 培 养 特 征。P801、贴 壁 细 胞：生 长 须 有 贴 附 的 支 持 物 表 面；贴 附 因 子 来 自 培 养 基 或 细 胞 自 身 分 泌。有 两 种 细 胞 类 型：成 纤 维 细 胞 型、上 皮 细 胞 型。2、悬 浮 细 胞：生 长 不 依 赖 支 持 物 表 面，在 培 养 液 中 悬 浮 生 长，如 淋 巴 细 胞。3、兼 性 贴 壁 细 胞：生 长 对 贴 壁 支 持 物 表 面 要 求 不 严 格。如 中 国 地 鼠 卵 巢 细 胞(C H O),小 鼠 L929细 胞。3、细 胞 系 与 细 胞 株 的 区 别 是 什 么？细 胞 系(cell line)：从 原 代 培 养 经 传 代 培 养 后 得 到 的 一 群 不 均 一 的 细 胞，可 以 连 续 培 养，即 这 些 细 胞 具 备 培 养 条 件 下 的 无 限 增 殖 能 力。细 胞 株(cell strain)：通 过 选 择 或 克 隆 化，从 原 代 培 养 的 细 胞 群 获 得 的、具 有 特 殊 遗 传/生 化 性 质 或 特 异 性 标 记 的 细 胞 群。细 胞 株 强 调 培 养 的 细 胞 的 单 一 性 特 征，即 克 隆 本 质；而 细 胞 系 并 不 强 调 细 胞 的 纯 度，可 以 包 含 多 种 细 胞，但 主 类 细 胞 占 大 多 数。4、说 明 动 物 细 胞 培 养 生 产 药 物 的 优 缺 点。缺 点：培 养 条 件 苛 刻、成 本 高、产 量 低。优 点：分 泌 胞 外、纯 化 方 便、翻 译 后 修 饰 糖 基 化，与 天 然 产 品 一 致。5、如 何 获 得 二 倍 体 细 胞 株？P F 8 6何 为 二 倍 体 细 胞 株 从 动 物 胚 胎 组 织 中 获 得 从 各 国 细 胞 库 或 有 关 机 构 获 取(P87第 二 段)6、举 例 说 明 两 类 基 因 工 程 细 胞。A.病 毒 教 体：牛 痘 病 毒、腺 病 毒、反 转 录 病 毒、杆 状 病 毒B.质 粒 载 体：穿 梭 质 粒 载 体 7、简 单 但 全 面 叙 述 杆 状 病 毒 一 昆 虫 细 胞 表 达 系 统。（需 总 结 概 括）杆 状 病 毒（Baculoviruses）是 昆 虫 病 毒，128 k b双 链 D N A基 因 组。优 点 P88杆 状 病 毒 基 因 组 比 较 大，一 般 用 同 源 重 组 方 法 引 入 外 源 基 因。构 建 过 程：插 入 位 点：多 角 体 蛋 白 基 因 启 动 子 的 后 面；操 作 方 式：重 组 质 粒 与 杆 状 病 毒 共 同 转 染 昆 虫 细 胞，获 得 发 生 同 源 性 重 组 的、含 有 外 源 基 因 的 病 毒 颗 粒；导 入 细 胞：重 组 病 毒 载 体 感 染 昆 虫 细 胞（如 Sf-9细 胞 株）（如 果 用 的 是 B m N P V,可 以 直 接 感 染 家 蚕，获 得 转 基 因 动 物。）8、构 建 基 因 工 程 细 胞 选 择 质 粒 载 体 所 考 虑 的 4个 问 题。P88最 后 一 段 9、说 明 动 物 血 清 在 细 胞 培 养 中 的 作 用。提 供 生 长 因 子 和 激 素 提 供 贴 壁 因 子 和 伸 展 因 子 提 供 结 合 蛋 白 提 供 必 需 脂 肪 酸 和 微 量 元 素 10、细 胞 大 量 培 养 为 什 么 必 须 使 用 无 血 清 培 养 基？提 高 细 胞 培 养 的 可 重 复 性，避 免 血 清 差 异 的 影 响；减 少 血 清 带 来 的 污 染；供 应 及 时、稳 定、充 足；细 胞 产 品 容 易 纯 化；避 免 血 清 某 些 成 分 对 细 胞 的 毒 性；减 少 血 清 蛋 白 对 生 物 测 定 的 干 扰。第 四 章 抗 体 制 药 1、画 图 说 明 抗 体 分 子（IgG）的 结 构，指 出 Fab、Fv、F c和 Fd P1512、说 明 单 克 隆 抗 体 在 医 疗 和 研 究 中 的 三 个 用 途。详 见 P143单 克 隆 抗 体 作 为 抗 体 制 剂，在 临 床 上 主 要 用 与 疾 病 的 诊 断 和 治 疗。如 1.利 用 单 克 隆 抗 体 检 测 与 某 些 疾 病 有 关 的 抗 原，辅 助 临 床 诊 断。2.用 放 射 性 核 素 标 记 单 克 隆 抗 体 进 行 肿 瘤 显 像，做 免 疫 定 位 诊 断。3.单 克 隆 抗 体 制 剂 也 用 于 临 床 治 疗，如 针 对 T淋 巴 细 胞 共 有 的 分 化 抗 原 CD3的 单 克 隆 抗 体，因 其 对 器 官 移 植 排 斥 反 应 有 显 著 的 抑 制 效 果，用 作 免 疫 抑 制 剂 已 在 美 国 标 准 上 市。3、获 得 单 克 隆 抗 体 为 什 么 必 须 使 用 杂 交 瘤 技 术？度 娘 杂 交 瘤 技 术 杂 交 瘤 技 术 的 基 本 原 理 是 通 过 融 合 两 种 细 胞 而 同 时 保 持 两 者 的 主 要 特 征。这 两 种 细 胞 分 别 是 经 抗 原 免 疫 的 小 鼠 脾 细 胞 和 小 鼠 骨 髓 瘤 细 胞。被 特 异 性 抗 原 免 疫 的 小 鼠 脾 细 胞（B 淋 巴 细 胞）的 主 要 特 征 是 它 的 抗 体 分 泌 功 能，但 不 能 在 体 外 连 续 培 养，小 鼠 骨 髓 瘤 细 胞 则 可 在 培 养 条 件 下 无 限 分 裂、增 殖，即 具 有 所 谓 永 生 性。在 选 择 培 养 基 的 作 用 下，只 有 B 细 胞 与 骨 髓 瘤 细 胞 融 合 的 杂 交 细 胞 才 能 具 有 持 续 培 养 的 能 力，形 成 同 时 具 备 抗 体 分 泌 功 能 和 保 持 细 胞 永 生 性 两 种 特 征 的 细 胞 克 隆。4、什 么 是 H A T 选 择？P146最 后 一 段 5、说 明 检 测 杂 交 瘤 的 细 胞 学 方 法 的 原 理。P148动 物 的 染 色 体 制 片 技 术 相 对 简 单，在 普 通 光 学 显 微 镜 下 就 可 以 确 定 染 色 体 核 型（chromosomekaryotype）。小 鼠 的 染 色 体 全 部 都 是 端 部 着 丝 点 染 色 体,2n=40；骨 髓 瘤 细 胞 染 色 体 数 目 大 于 40,2n40,并 且 有 骨 髓 瘤 特 有 的 标 记 染 色 体。所 以，杂 交 瘤 细 胞 的 染 色 体 数 目 应 该 是 两 种 细 胞 染 色 体 数 之 和。由 于 有 HAT选 择 在 前，用 核 型 分 析 确 定 杂 交 瘤 细 胞 只 有 一 个 条 件：2 n 2 8 0。6、说 明 对 鼠 原 性 单 克 隆 抗 体 改 造 的 两 个 原 则。降 低 免 疫 原 性、降 低 分 子 量。7、说 明 CD4-Ig抗 H I V 的 原 理。H IV感 染 就 是 其 g p l2 0专 一 性 结 合 淋 巴 T 细 胞 巨 噬 细 胞 表 面 的 细 胞 受 体 CD4（C D 4是 T 细 胞 重 要 的 活 化 因 子），使 T 细 胞 和 巨 噬 细 胞 失 去 对 H IV和 其 它 病 原 体 的 免 疫 攻 击 能 力。CD4-IgG是 把 分 化 抗 原 C D 4结 合 到 IgG的 F C区，称 免 疫 黏 连 素。H IV表 面 的 g p l2 0只 有 一 个 与 C D 4结 合 的 位 点，只 要 免 疫 黏 连 素 CD4-IgG 分 子 与 gp l2 0结 合，H IV就 失 去 了 感 染 能 力。10、说 明 细 胞 因 子 IL-1和 IL-2的 免 疫 学 功 能。爱 咋 咋 地 H、为 什 么 噬 菌 体 表 面 展 示 和 P C R 技 术 是 抗 体 库 构 建 的 两 项 分 子 生 物 学 技 术 基 础。噬 菌 体 表 面 展 示 技 术（phage display）被 广 泛 应 用 于 抗 体 库 构 建，成 为 目 前 使 用 的 噬 菌 体 抗 体 库 技 术（phage antibody library）0噬 菌 体 表 面 展 示，即 将 外 源 蛋 白 分 子 或 多 肽 的 基 因 克 隆 到 丝 状 噬 菌 体 基 因 组 中，与 噬 菌 体 外 膜 蛋 白 融 合 表 达，展 示 在 噬 菌 体 颗 粒 的 表 面 由 于 外 源 蛋 白 或 多 肽 的 基 因 型 和 表 型 统 一 在 同 一 噬 菌 体 颗 粒 内，因 此，通 过 表 型 筛 选 就 可 以 获 得 它 的 编 码 基 因。噬 菌 体 抗 体 库 技 术，克 服 了 人 体 不 能 随 意 免 疫 的 缺 点，用 人 的 外 周 血 制 备 抗 体 文 库，从 而 获 得 人 源 性 基 因 工 程 抗 体，并 且 将 抗 体 基 因 克 隆 和 表 达 融 为 一 体，同 在 一 种 载 体 上 进 行，将 抗 体 基 因 表 达 在 载 体 的 表 面，用 固 相 化 抗 原 对 表 达 产 物 的 载 体 进 行 淘 筛，在 数 日 内 即 可 筛 出 阳 性 克 隆，从 而 能 构 建 出 大 库 容（108）文 库 囊 括 天 然 全 套 抗 体 基 因，使 抗 体 工 程 的 设 想 成 为 现 实。第 五 章 植 物 细 胞 制 药 1、解 释：初 级 代 谢 产 物、次 生 代 谢 产 物、外 植 体 P1782、说 明 培 养 基 中 的 碳、氮、无 机 盐 和 生 长 因 素。PI863、说 明 植 物 细 胞 培 养 基 中 的 碳 源 来 源 及 其 作 用。PI954、说 明 常 用 的 植 物 生 长 素 与 细 胞 分 裂 素。PI895、培 养 基 中 生 长 素 与 细 胞 分 裂 素 的 配 比 的 效 应。生 长 素/细 胞 分 裂 素：高，有 利 于 根 和 愈 伤 组 织 的 形 成.适 中，有 利 于 根 芽 的 分 化.低，有 利 于 芽 的 形 成 6、举 例 说 明 诱 导 子 在 培 养 中 的 作 用。P2047、举 例 说 明 什 么 是 前 体 饲 养？P206第 七 章 发 酵 工 程 制 药 1、现 代 生 物 技 术 改 造 传 统 制 药 工 业 体 现 在 哪 四 个 方 面？（1）抗 生 素 生 产：分 离 抗 生 素 合 成 酶 基 因，提 高 产 量、得 到 杂 合 抗 生 素；（2）氨 基 酸 生 产：基 因 克 隆 的 工 程 菌、细 胞 融 合 育 种；（3）维 生 素 生 产：构 建 制 造 维 生 素 C 的 基 因 工 程 菌；（4）疫 苗 生 产：把 抗 原 克 隆 到 E c。中 大 量 生 产 疫 苗。2、抗 生 素 生 物 合 成 基 因 群 成 员 的 三 个 结 构 特 点。P2833、简 要 说 明 提 高 抗 生 素 的 产 量 的 四 项 措 施。P2944、为 什 么 增 加 抗 性 基 因 的 拷 贝 数 可 以 提 高 工 程 菌 的 抗 生 素 产 量 P294第 一 部 分 分 类 练 习 一、名 词 解 释 生 物 技 术、细 胞 工 程、基 因 工 程、酶 工 程、蛋 白 质 工 程、发 酵 工 程、人 类 基 因 组 计 划、蛋 白 质 组 学、组 织 培 养、生 长 因 子、人 工 种 子、连 续 培 育、细 胞 分 化、愈 伤 组 织、分 批 发 酵、肝 细 胞、T E 细 胞、酶 分 子 修 饰、酶 反 应 器、生 物 传 感 器、生 物 芯 片、细 胞 融 合、细 胞 培 育、无 菌 操 作、组 织 培 养、单 倍 体、花 药 培 养、花 粉 培 养、胚 珠 培 养、单 克 隆 抗 体、体 细 胞 克 隆、受 体 细 胞、载 体、PCR、限 制 性 内 切 酶、目 的 基 因、转 化 子、花 粉 管 通 道 法、报 告 基 因、重 组 子、转 基 因 技 术、动 物 反 应 器、基 因 治 疗、离 子 交 换、吸 附、超 临 界 流 体 萃 取、固 定 化 细 胞、外 植 体、继 代 培 养、悬 浮 培 养、固 定 化 培 养、转 基 因 植 物、蛋 白 质 功 能 改 性、细 胞 融 合、D N A粘 性 末 端、重 组 质 粒 二、简 答 题 1、细 胞 全 能 性 学 说 的 基 本 内 容 是 什 么？2、植 物 材 料 与 细 胞 全 能 性 表 达 有 何 关 系？对 培 养 中 的 选 材 有 何 指 导 意 义？3、细 胞 脱 分 化 在 细 胞 结 构 上 有 何 变 化？4、细 胞 周 期 的 调 控 在 细 胞 脱 分 化 中 有 何 作 用？5、细 胞 分 化 有 什 么 基 本 特 征？6、蔗 糖 在 组 织 培 养 过 程 中 的 功 能 是 什 么？7、与 器 官 发 生 形 成 个 体 相 比 体 细 胞 胚 形 成 个 体 有 哪 些 特 点？8、如 何 理 解 体 细 胞 胚 的 遗 传 稳 定 性 和 变 异 性？9、离 体 培 养 物 的 遗 传 变 异 机 理 是 什 么？10、哪 些 因 素 会 影 响 培 养 物 的 遗 传 变 异？11、从 体 细 胞 变 异 的 分 子 基 础 分 析 体 细 胞 变 异 的 外 遗 传 变 异，实 践 中 如 何 应 用 这 些 外 遗 传 变 异？12、总 体 上 讲 离 体 培 养 的 条 件 主 要 有 哪 些？13、为 什 么 茎 尖 分 生 组 织 培 养 能 够 除 去 植 物 病 毒？14、花 药 培 养 过 程 中 花 药 为 什 么 要 经 过 低 温 处 理？15、花 药 培 养 中 再 生 植 株 的 形 成 途 径 与 再 生 植 株 倍 性 有 何 关 系？16、用 于 建 立 悬 浮 细 胞 系 的 愈 伤 组 织 有 何 要 求？17、一 个 好 的 悬 浮 细 胞 系 有 哪 些 特 征？18、悬 浮 细 胞 系 在 继 代 培 养 中 其 群 体 生 长 有 何 规 律？19、哪 些 因 素 会 影 响 原 生 质 体 培 养？20、原 生 质 体 融 合 要 经 过 哪 些 过 程？21、对 称 融 合 与 非 对 称 融 合 的 细 胞 杂 种 有 何 异 同？22、胚 乳 培 养 有 何 意 义？23、同 是 薄 壁 细 胞 为 什 么 胚 乳 薄 壁 细 胞 培 养 比 较 困 难？24、细 胞 工 程 对 实 验 室 的 基 本 要 求 有 哪 些？25、为 什 么 胚 乳 培 养 物 及 其 再 生 植 株 的 倍 性 常 发 生 紊 乱？26、何 为 正 选 择?何 为 负 选 择？27、人 工 种 子 利 用 有 何 优 点？28、用 于 制 备 人 工 种 子 的 繁 殖 体 主 要 有 那 些？29、为 什 么 说 微 型 变 态 器 官 是 最 有 可 能 作 为 人 工 种 子 的 繁 殖 体？30、同 游 离 酶 相 比，固 定 化 酶 的 性 质 改 变 主 要 有 哪 些？31、固 定 化 操 作 对 酶 反 应 系 统 的 影 响 主 要 有 哪 些？32、固 定 化 酶 有 何 性 质？33、固 定 化 酶 有 哪 些 指 标？34、酶 反 应 器 有 哪 些 基 本 类 型？描 述 其 特 点？35、酶 反 应 器 有 何 设 计 原 则？36、传 感 器 的 有 哪 些 类 型？各 有 何 特 点？37、蛋 白 质 工 程 为 什 么 又 称 为 第 二 代 基 因 工 程？二 者 有 何 联 系 与 区 别？38、简 述 氨 基 酸 的 基 本 理 化 性 质？39、蛋 白 质 的 基 本 组 件 有 哪 些？40、什 么 是 蛋 白 质 组 学？研 究 细 胞 内 所 有 蛋 白 质 的 组 成 及 其 动 态 变 化 规 律 的 科 学，它 从 更 深 一 个 层 次 一 蛋 白 质 组 层 次 上 揭 示 生 命 活 动 的 本 质 及 其 规 律。41、干 细 胞 的 显 著 特 点？42、干 细 胞 研 究 包 括 那 几 个 阶 段？43、什 么 样 的 细 胞 可 作 为 受 体 细 胞？44、载 体 有 何 左 用？各 种 载 体 有 何 特 点？45、从 cDNA文 库 和 基 因 文 库 中 获 得 目 的 基 因 有 什 么 不 同？CDNA文 库 的 特 点：(1)不 含 内 含 子 序 列。(2)可 以 在 细 菌 中 直 接 表 达。(3)包 含 了 所 有 编 码 蛋 白 质 的 基 因。(4)比 DNA文 库 小 的 多，容 易 构 建。46、基 因 工 程 研 究 的 理 论 依 据？(1)不 同 基 因 具 有 相 同 的 物 质 基 础(2)基 因 是 可 切 割 的(3)基 因 是 可 以 转 移 的(4)多 肽 与 基 因 之 间 存 在 对 应 关 系(5)遗 传 密 码 是 通 用 的(6)基 因 可 以 通 过 复 制 把 遗 传 信 息 传 递 给 下 一 代 47、PCR的 基 本 原 理 及 过 程？48、现 代 发 酵 工 程 的 主 要 特 征 是 什 么？49、发 酵 工 程 经 历 哪 几 个 时 期，每 个 时 期 的 特 征 是 什 么？50、简 述 分 批 培 养 过 程 中 微 生 物 生 长 的 规 律。51、简 述 制 备 固 定 化 酶 的 原 则。三、问 答 题 1、培 养 基、外 植 体、玻 璃 器 皿、金 属 用 具 以 及 外 植 体 各 选 择 什 么 灭 菌 方 法?2、维 持 实 验 室 环 境 相 对 无 菌 应 采 取 哪 些 措 施？3、体 细 胞 胚 诱 导 与 培 养 在 培 养 基 和 生 长 素 应 用 上 有 何 特 点？4、对 于 生 根 困 难 的 植 物 脱 毒 在 培 养 方 式 采 用 哪 些 措 施？5、通 过 离 体 培 养 获 得 单 倍 体 的 途 径 有 哪 些？6、花 药 培 养 中 如 何 选 择 外 植 体？7、花 药 培 养 与 花 粉 培 养 有 什 么 不 同？8、幼 胚 培 养 的 关 键 技 术 是 什 么？9、如 果 要 获 得 有 关 抗 某 种 病 害 的 细 胞 系 应 采 用 何 种 措 施？10、建 立 悬 浮 细 胞 系 的 关 键 技 术 有 哪 些？11、目 前 用 做 原 生 质 体 分 离 的 材 料 有 哪 些？12、原 生 质 体 纯 化 有 哪 些 方 法？13、原 生 质 体 的 培 养 方 法 有 哪 些？各 有 何 优 缺 点？14、体 细 胞 杂 交 和 原 生 质 体 融 合 有 哪 些 类 型？其 产 物 和 再 生 个 体 有 何 特 点？15、哪 些 类 型 的 外 植 体 适 宜 用 做 建 立 悬 浮 细 胞 系 起 始 培 养 物？16、原 生 质 体 培 养 中 如 何 稳 定 培 养 基 的 pH?17、如 何 防 止 培 养 过 程 中 外 植 体 的 褐 化？18、细 胞 固 定 化 培 养 系 统 有 哪 些 类 型？各 有 何 特 点？19、如 何 进 行 悬 浮 细 胞 系 的 继 代 培 养？20、简 述 固 定 化 醐 的 制 备 方 法。21、细 胞 的 固 定 化 方 法 有 哪 些？各 有 何 特 点？包 埋 法(凝 胶 包 埋 法、纤 维 包 埋 法、微 胶 囊 法)、吸 附 法 特 1 点：O O O O O O O O O22、如 何 维 持 美 反 应 器 恒 定 的 生 产 力？23、为 什 么 要 进 行 酶 的 修 饰？酶 的 蛋 白 质 工 程 是 如 何 进 行 的？24、反 向 生 物 学 有 哪 些 基 本 途 径？25、试 述 原 生 质 体 的 制 备 过 程？26、原 生 质 体 的 融 合 方 法 有 哪 些？27、如 何 鉴 别 和 筛 选 杂 合 体？28、如 何 制 备 人 工 种 子？描 述 其 具 体 过 程？(1)胚 状 体 的 制 备 及 其 同 步 生 长(低 温 法、抑 制 剂 法、分 离 法、通 气 法、渗 透 压 法)(2)人 工 胚 乳 的 制 备(3)配 制 包 埋 剂 及 包 埋 29、动 物 细 胞 融 合 的 主 要 途 径 有 哪 些？各 有 何 特 点？30、阐 述 外 源 基 因 导 入 受 体 细 胞 的 各 种 途 径？(1)直 接 转 化 法(2)化 合 物 诱 导 转 化 法：Ca2+诱 导 的 完 整 细 菌 细 胞 的 转 化；聚 乙 二 醇(3)接 合 转 化 法(4)电 穿 孔 转 化 法：微 生 物 细 胞、动 植 物 细 胞、原 生 质 体(5)微 弹 轰 击 转 化 法：植 物 组 织(6)激 光 微 束 穿 孔 转 化 法：植 物 细 胞、组 织、器 官、细 胞 器(线 粒 体、液 绿 体)(7)超 声 波 处 理 转 化 法：微 生 物 细 胞(8)脂 质 体 介 导 转 化 法(9)体 内 注 射 转 会 法：动 植 物 细 胞、细 胞 器(10)花 粉 管 通 道 转 化 法：植 物 31、筛 选 克 隆 子 有 哪 些 方 法？(1)根 据 载 体 标 记 基 因 筛 选 转 化 子 基 因 互 补 显 色 筛 选 转 化 子(2)根 据 报 告 基 因 筛 选 转 化 子 A.b-葡 醛 糖 酸 酶 基 因(gus)B.萤 火 虫 荧 光 素 酶 基 因(lus)C.绿 色 荧 光 蛋 白 基 因(gfp)(3)根 据 形 成 噬 菌 斑 筛 选 转 化 子32、怎 样 才 能 在 发 酵 过 程 中 保 持 工 程 菌 的 遗 传 稳 定 性？33、配 制 培 养 基 的 原 则 和 方 法 是 什 么？34、简 述 菌 种 衰 退 的 原 因 及 防 止 措 施。35、简 述 大 规 模 工 业 生 产 常 用 的 菌 种 扩 大 培 养 方 法。36、简 述 影 响 种 子 质 量 的 主 要 因 素。37、常 用 灭 菌 方 法 有 哪 些？各 有 何 特 点？38、述 发 酵 液 的 下 游 加 工 过 程？（1）发 酵 液 预 处 理 和 固 液 分 离：过 滤、离 心 等；（2）提 取：吸 附 发、离 子 交 换 法、沉 淀 法、萃 取 法、超 滤 法（膜 过 滤 法）；（3）精 制：层 析 分 离；结 晶（4）成 品 加 工：浓 缩、无 菌 过 滤、去 热 原、干 燥、加 稳 定 剂。四、综 合 能 力 部 分 1、为 什 么 说 细 胞 工 程 是 一 门 承 上 启 下 的 技 术（举 例 说 明）？2、如 何 理 解 植 物 细 胞 的 全 能 性？3、绘 制 一 个 示 意 图 将 所 有 培 养 技 术 联 系 起 来。4、任 选 一 培 养 技 术 叙 述 从 外 植 体 到 再 生 植 株 的 完 整 实 验 过 程。5、为 什 么 说 原 生 质 体 培 养 系 统 是 现 代 生 物 技 术 的 载 体？6、要 使 细 胞 杂 交 技 术 成 为 常 规 育 种 途 径 还 有 哪 些 技 术 问 题 需 要 解 决？7、如 何 理 解 细 胞 工 程 的 发 展 既 依 赖 于 相 关 学 科 的 发 展 又 促 进 了 相 关 学 科 的 发 展？8、人 工 种 子 的 应 用 前 景 如 何？需 要 解 决 那 些 问 题？9、植 物 细 胞 规 模 培 养 与 次 数 产 物 生 产 前 景 如 何？为 什 么？10、为 什 么 说 动 物 细 胞 工 程 技 术 的 发 展 在 为 人 类 造 福 的 同 时 也 对 人 类 提 出 了 新 的 挑 战？11、你 对 动 物 克 隆 技 术 怎 样 看 待？如 何 正 确 应 用 动 物 克 隆 技 术？12、举 例 说 明 对 现 有 蛋 白 质 进 行 改 造 的 主 要 方 法 及 其 应 用？13、如 何 从 一 片 嫩 叶 经 组 织 培 养 培 育 出 众 多 的 完 整 植 株？取 一 嫩 叶，然 后 将 经 过 对 其 进 行：A.杀 菌 处 理：经 自 来 水 多 次 漂 洗 一 消 毒 剂 处 理 一 无 菌 水 反 复 清 洗 一 无 菌 滤 纸 吸 干 B.诱 导 去 分 化 阶 段：将 外 植 体 放 入 装 有 一 定 浓 度 生 长 素 溶 液 种 进 行 去 分 化 处 理，使 这 片 嫩 叶 中 的 细 胞 处 于 旺 盛 有 丝 分 裂 的 分 生 状 态。C.继 代 增 值 阶 段 生 根 发 芽 阶 段：愈 伤 组 织 长 出 后 经 过 4,6 周 的 迅 速 分 裂，使 原 培 养 基 中 的 水 分 及 营 养 成 分 迅 速 耗 尽，细 胞 的 有 害 物 质 在 培 养 基 中 累 积，因 此 需 进 行 继 代 培 养。D.移 栽 成 活 阶 段：愈 伤 组 织 经 过 重 新 分 化 形 成 胚 状 体，继 而 长 成 小 幼 苗，将 生 长 在 培 养 基 中 的 小 幼 苗 适 时 移 栽 带 室 外。14、如 何 从 植 物 细 胞 培 养 中 获 得 较 高 的 次 声 代 谢 产 物？15、单 倍 体 植 株 性 单 体 弱？为 什 么 还 有 不 少 的 科 学 家 热 衷 于 诱 发 产 生 单 倍 体 植 株？16、开 展 干 细 胞 研 究 对 人 类 有 何 积 极 的 意 义？17、如 何 在 体 外 获 得 大 量 生 长、分 泌 单 克 隆 抗 体 的 杂 交 瘤 细 胞 克 隆？18、基 因 工 程 的 科 学 意 义 和 应 用 价 值？19、试 述 基 因 工 程 的 基 本 技 术 路 线？20、如 何 采 用 PCR技 术 从 生 物 材 料 中 获 得 目 的 基 因？21、生 物 技 术 的 种 类 及 其 相 互 关 系？22、试 述 生 物 技 术 对 经 济 社 会 发 展 的 影 响？23、基 因 工 程 的 研 究 进 展 24、蛋 白 质 工 程 的 研 究 进 展 25、细 胞 工 程 的 研 究 进 展 26、发 酵 工 程 的 研 究 进 展 27、酶 工 程 的 研 究 进 展 28、查 找 阅 读 有 关 生 物 技 术 的 英 文 文 献 并 翻 译 成 中 文第 二 部 分 综 合 练 习 一、单 项 选 择 题 4.下 面 哪 个 不 是 生 物 技 术 包 括 的 基 本 内 容？C细 胞 工 程 基 因 工 程 日 遗 传 工 程 C酶 工 程 1、现 代 生 物 技 术 是 一 项 高 新 技 术，它 具 有 高 新 技 术 的“六 高”特 征，下 面 哪 个 不 属 于“六 高”?A、高 效 益 B、高 风 险 C、高 势 能 D、效 率 2、生 物 技 术 是 以 下 面 哪 个 为 核 心？A、基 因 工 程 B、细 胞 工 程 C、酶 工 程 D、发 酵 工 程 3、分 子 克 隆 主 要 是 指 A、D N A的 大 量 复 制 B、D N A的 大 量 转 录 C、D N A的 大 量 剪 切 D、R N A的 大 量 反 转 录 4、多 数 限 制 性 核 酸 内 切 酶 切 割 后 的 D N A末 端 为 A、平 头 末 端 B、3 突 出 末 端 C、5 突 出 末 端 D、粘 性 末 端 5、设 计 聚 合 酶 链 反 应 的 引 物 时，应 考 虑 引 物 与 模 板 的 A、5,端 特 定 序 列 互 补 B、5,端 任 章 序 列 互 补 C、3,端 特 定 序 列 互 补 D、3,端 任 意 序 列 互 补 6、用 于 鉴 定 转 化 于 细 胞 是 否 含 重 组 D N A的 最 常 用 方 法 是 A、抗 药 性 选 择 B、分 于 杂 交 选 择 C、R N A反 转 录 D、免 疫 学 方 法 7、下 列 哪 些 是 发 酵 技 术 独 有 的 特 点 A、多 个 反 应 不 能 在 发 酵 设 备 中 一 次 完 成 B、条 件 温 和、能 耗 少、设 备 简 单 C、不 容 易 产 生 高 分 子 化 合 物 D、发 酵 过 程 中 不 需 要 防 止 杂 菌 污 染 A8、不 是 工 业