微生物学教程第3版内容重点.pdf
微 生 物 学一、什么是微生物1.微生物(Microorganism,microbe)-是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称(一般 0.1mm)2.微生物学(Microbiolog力是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造,生理代谢,生态分布和分类进货等生命活动及其应用的一门学科。四、微生物的三个特征r 微米)级:光学显微镜下可见(细 胞)/小(个体微小)|立纳米)级:电子显微镜下可见(细 胞 器,病 毒)单细胞微生 简(构造简单)简单多细胞物 非 细 胞(分子生物)(原 核 类:细 菌(真 细 菌,古 生 菌x放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体等。低(进化地位低)真 核 类:真 菌(酵 母 菌,霉菌、蕈 菌),原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚 病 毒(类病毒、拟病毒、肮 病 毒)五、微生物的五大共性1.体 积 小,面积大比面值=表面积体积2 .吸 收 多,转化快3 .生 长 旺,繁殖快4 .适 应 强,易变异5 .分 布 广,种类多2)微生物的种类繁多物种多样性生理代谢类型的多样性代谢产物的多样性遗传基因的多样性生态类型的多样性第 一 章 原 核 生 物 形 态、构造和功能 原核微生物(prokaryotes)微生物可分类三大类|真 核 微 生 物(eukaryotic microorganism)非细胞微生物(acellular microoganism)r 真细菌(eubacteria)原核生物 1古生菌(archaea)原核生物-指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称作核区(nuclear region)的裸露DNA的原始单细胞生物。我们分成六种类型来介绍:细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体第 一 节 细 菌细菌(bacteria)一类细胞细短(直径约0.5m,长度约0.55”),结构简 单,胞壁坚韧,多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。(-)形态和染色球菌(coccus):单球、双球、四联球、链球、葡萄球1)细菌形态J杆菌(bacillus):短杆、棒杆、梭状、梭杆、分枝状、r弧菌(vibrio):半环螺旋菌(spirilla)|螺菌(spirillum):26 环螺旋体(spirpcjete):6环以上2)细菌的大小是“级 的(微 米),典型细菌、大肠杆菌(E.coli):长x0.5m 宽3)细菌染色法活 菌:美蓝或TTC(氯化三苯基四氮理)r简单染色法r正染色 r革兰氏染色死菌J 鉴 别 染 色 法 抗酸性染色I 芽泡染色负染色 姮 姆 萨(Giemsa)染色其中革兰染色法(Grang stain)最为重要,是由丹麦医生C.Gram于1884年 发 明,菌经革兰氏染色后可区分为两大类:革兰氏阳性(Gram positive,G+),成 紫 色;革兰氏阴性(Gram negative,G-),成红色。(-)构造一般构造:一般细菌都具有的构造,胞壁、胞膜、胞质和核区。特殊构造:特殊环境下才形成的构造,鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被、芽泡见:细菌细胞模式构造图1.一般构造1 )细胞壁(cell wall)细胞最外的一层厚实,坚韧的外被,主要成分为肽聚糖。固定细胞外形和提高机械强度,抵抗渗透压细胞壁的功能 J为细胞生长、分裂和运动必需、阻拦大分子有害物进入细胞赋予细菌抗原性和对抗生素和噬菌体的敏感性细胞壁成份分为以下三种类型来讲:见G+与G-胞壁构造比较图a)G+菌 胞 壁:胞壁厚度大(20-80nm)和化学组分简单,一般含90%肽 聚 糖10%磷壁酸。肽聚糖(peptidoglyean)是真细菌细胞壁中的特有成分,由肽和聚糖两部分 组 成,肽包括四肽尾和肽桥,而聚糖由N乙酰葡糖胺和N乙酰胞壁酸两种单糖相互间隔连接成的长链(金黄色葡萄球菌)双 糖:N乙酰葡糖胺和N乙酰胞壁酸由底一1,4糖昔键相 连接3个组成部分 四 肽 尾:由4个氨基酸分子按L型 与D型交替连接而成肽 桥:为甘氨酸五肽,连接前后2个四肽尾分子,起桥梁作用即1.4糖昔键易被溶菌酶(lysogyme)水 解,导致细胞壁“散架”而死t o四肽尾中的D 型氨基酸,一般仅在细菌胞壁上见到。肽桥的变化甚多,由此形成了肽聚糖多样性。肽聚糖功能:主要是框架和枝架结构磷 壁 酸(teichoic acid)-是 G+菌胞壁上的一种酸性多糖。壁磷壁酸:与肽聚糖分子共价结合磷壁酸分为两类j膜磷壁酸:跨越肽聚糖层与细胞膜相交联磷壁酸的成份甘油磷酸或核糖醇磷酸见甘油磷酸结构模式图磷壁酸的生理现象:大量负电荷吸附Mg2+,提高膜上合成酶活力。贮藏元素调节细胞内自溶素的活力,防止细胞自溶。噬菌体特异吸附受体G+菌的特异表面抗原,可用于鉴定菌种。增强对宿主细胞的粘连,免受白细胞吞噬,并有抗补体的作用。b)G-菌的细胞壁胞壁较G+菌 薄,层次较多,成份较复杂,肽聚糖层很薄(2-3nm)肽聚糖单体结构与G+菌 相 似,有 2 点 差 别:四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而被内消旋二氨基庚(更)二 酸(m-DAP)代 替,是一种原核生物胞壁上特殊氨基酸。没有特异的肽桥,由前肽尾的第四个氨基酸(DAla)的竣基与后肽尾的第三个氨基酸(m-DAP)的氨基直接相连,薄、强 度 低 于G+菌。外膜(out membrane)-是G-菌胞壁的特有结构,位于壁最外层,成份有脂多糖、磷脂和多种外膜蛋白。,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS):位 于G-菌胞壁最外层的类脂多 Y、糖类物质,主要由类脂A;核心多糖;。一特异侧外膜成份 链3部分组成。外膜蛋白(outer membrane protein):指嵌合在LPS和磷脂层外膜上的20多种蛋白,其中脂蛋白和孔蛋白是比较清楚的。外膜功能:脂多糖功能:控制细胞的透性,提 高Mg2+浓 度,决定细胞壁抗原多样性等。外膜蛋白:脂蛋白有使外膜层与内壁肽聚糖层紧密连接的功能孔蛋白是一类中间有孔道,可控制某些物质(如抗生素)进入外膜的跨膜蛋白。c)古生菌(Archaea)细胞壁古生菌是在进化上很早就与真细菌和真核生物互相独立的生物群,主要包括一些独特生态型,如嗜极菌、产甲烷菌等。古生菌大都具有与真细菌功能相似的细胞壁,但化学成份差别很大,它们不含肽聚糖,而含假肽聚糖、糖蛋白或蛋白质。假伏聚糖的结构与成份多糖骨架由N乙酰葡萄糖胺和N乙酰塔罗糖胺糖醛酸以足一1,3糖昔键交替连接而成,连在后一氨基糖上的肽尾由3个L型氨基酸组成肽桥由LGlu1个氨基酸组成。d)缺壁细菌(cell wall deficient bacteria)自发型缺壁突变:L型 实验室中形成 人工法去壁:原生质体缺 壁 细 菌、自然界长期进化形成:支原体2)细 胞 膜(cell membrane)细胞膜是一层紧贴在细胞壁内侧,包围着细胞质的柔软,脆 弱,富有弹性的半透性薄膜(78nm),由硬脂(20%30%)和蛋白质(50%70)组成。(两层硬脂分子对称排列,极 性 头(硬 酸 端)朝向内外表面非极性头(烧 端)埋入膜内层,形成硬脂双分子层细胞膜的成份 整合蛋白(内嵌蛋白):有时分子内有通道,具运输功能,横I 向移动周边蛋白(膜外蛋白):有酶促作用,能作侧向移动。见细胞膜模式构造图细胞膜生理功能:能控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送维持细胞内正常渗透压合成细胞壁和糖被的场所细胞的产能基地(氧化硬酸化,光合硅酸化的酶系)鞭毛基体的着生部,提供鞭毛旋转运动的能量。3)细胞质和内含物细胞质(cytoplasm)指被细胞膜包围的除核区以外的一切半透明,胶体状、颗粒状物质的总称。细胞质的成份:核糖体、贮 藏 物,酸 类,中间代谢产物,质 粒,各种营养物质和大分子的单体等。细胞内含物(miclusion body)指细胞质内一些形状较大的颗粒构造贮藏物(reserve materials):一类由不同化学成分累积而成的不溶性颗粒,主要功能是贮存营养物。糖 原:大肠杆菌r碳源及能源类j聚一 羟(抗)丁 酸(PHB):固氮菌硫 粒:紫硫细菌贮藏物 氮 源 类 藻 青 素:蓝细菌【藻青蛋白:蓝细菌磷 源(异 染 粒):结核分枝杆菌磁小体(magnetosome):一种20100nm,数目不等(220颗),形状为八 面,六 面,或六棱柱体,成分为Fe3O4,外有一层膜色裹,具有导向功能,即借鞭毛引导细菌游向最有利的泥水界面,微氧环境处生活,存在于水生螺菌和嗜胆球菌等趋磁细菌中。竣酶体(carboxysome):又称竣化体,成多角形(10nm)内 含1.5硬酸核酮糖竣化酶,在CO2固定中起作用,一般在自养细菌中,如硫杆菌属(化能 自 养x蓝 细 菌(光能自养)气泡(gas vacuoles):细菌中的泡囊状内含物,内有数排柱状小空泡,大小 为0.21.0mx75nm,由2nm膜 包 裹,具有调节细胞比重,漂浮在最适水层中的作用。4)核 区(nuclear region oraren):又称核质体(nuclear body),是原核生物所特有的无核包裹,无固定形态的原始细胞核,是原核生物负载遗传信息的场所。成 份:一个大型的环状双链DNA分 子,不含蛋白,在染色体复制时呈双倍体 外,一般为单倍体。2.细菌细胞的特殊构造特殊构造不是所有细菌都具有的构造,一般为糖被、鞭毛、菌毛和芽泡。1 )糖 被(glycocalyx)包被在某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。层 次 厚:(大)荚膜 在壁上有固定层次j包裹在单个细胞上j 层 次 薄:微荚膜糖被的种类|松 散,未固定在壁上:粘液层(不同类菌)包裹在细胞群上:菌胶团不同类菌糖被的成份也不一样葡 聚 糖(肠膜状明串珠菌)纯 多 糖|果 聚 糖(变异链链球菌)纤 维 素(木醋杆菌)(多糖 海 藻 酸(棕色固氮菌)Y杂多糖 I 透明质酸(若干链球菌)(r聚 D谷 氨 酸(炭疽杆菌)糖被成分 多肽聚谷氨酰胺(若干黄单胞菌)多肽和多糖(巨大芽泡杆菌)蛋白质(鼠疫耶尔森氏菌)糖被的功能:保护作用:其上极性基团可保护菌体免受干旱可防止噬菌体的吸附和裂解荚膜可保护致病菌免受宿主白细胞的吞噬贮藏养料:从备营养缺乏时重新利用作为透性屏障和离子交换系统:保护细菌不受金属离子毒害表面附着作用:如粘液、果 聚 糖,可将细菌粘附于呼吸道或牙表面细菌间的信息识别作用堆积代谢废物2)鞭 毛(flagellum,flagella)鞭毛生长在某些细菌表面的长丝状,波曲的蛋白质物质,数 目 1 一多十条,具有运动功能,长 约15,直 径 0.01-0.02/77,一般只能在电镜下看到。r基体鞭毛构造1钩形鞘鞭毛丝原核生物(包括古生菌)的鞭毛都有共同的结构G-细菌 E.colia)基 体(basal body):由4个盘状物(ring)组成L环最 外 层,连接在细胞壁的外膜上P环连在细胞壁内壁层肽聚糖上S环-细胞质膜上,靠近周质空间.称SM环(或 内 环)M环与S环连在一起,在细胞质膜上SM环共同嵌在细胞质膜上,被 一 对Mot蛋白包围,基部还存在一个F li蛋白。Mot蛋白可驱动SM环快速旋转。Fli蛋白起键钮作用,可根据信号令鞭毛正转或逆转。b)鞭毛钩(hook):一个钩形似鞘,它将基体和鞭毛丝连在一起,直 径17mm。c)鞭 毛 丝(filament):一 条15-20”,直 径20nm的中空丝管,是由鞭毛蛋 白(flagellin)亚基沿中央孔作螺旋状缠绕而成,每 周810个 亚 基,鞭毛蛋白在胞质中合成后,由基部通过中央孔道输送到鞭毛游离端进行自装配。见鞭毛构造图G+细 菌,BacillusG+细菌鞭毛结构较简单基体仅有S和M两 环,其它结构均与G-细菌相同。鞭毛的功能:运动、实现趋性趋 性 一 生 物 体 对 环 境 中 的 不 同 物 理,化学或生物因子作用方向性的应答,有正趋和负趋性两种。趋 化 性(chemo taxis)趋 光 性(photo taxis)趋性还可分为、趋 氧 性(oxygen taxis)超 磁 性(mageneto taxis)鞭毛的运动机制r栓菌”试验证明鞭毛以旋转方式产生运动,一般2080m/秒,最 高 时 极 生 鞭 毛 菌 速 度 超 过 周 生 鞭 毛 菌。r 一 根(霍乱弧菌)X U 1 u _ V一麻生一 束(荧光假单胞菌)一 根(鼠咬热螺旋体)鞭 毛 着 生 方 式 两 端 生 .一 束(红色螺菌)(肠杆菌科(沙门氏菌)周 生 芽泡杆菌科(枯草芽泡杆菌)侧 生:反刍月形单胞菌鞭毛的有无和着生方式在细菌的分类和鉴定上是一重要指标。3)菌 毛(fimbria,fimbriae)菌毛长在细菌体表面的纤细、中空、短 直,而且数量多的一种蛋白质类物质。结 构:较 简 单,直接着生于细胞质膜上,直 径 3-1 Onm,每 菌 一 般 250300条功 能:使菌体粘附在宿主的呼吸道、消化道或泌尿生殖道等粘膜上,引起疾病。菌毛多存在于G-致病菌中。4)性 毛(pilus,复数 pili)构造和成分与菌毛相同,比菌毛长,每个细胞仅一至几根,一般见于G-细菌的雄性菌株中。功 能:用于向雌性菌株传递遗传物质的作用,是 R N A 噬菌体的特异性吸附受体。5)芽泡和其他休眠构造芽泡(endospore,spore)细胞内形成的一个圆型或椭圆形,厚 壁,含水量低,抗逆性强的休眠构造,胞内只有一个,无繁殖功能,存在于很少菌类,主要G+菌的两个属,好氧性芽泡杆菌(Bacillus)和厌氧性梭菌(Clostridium卜芽泡的特性及功能:抗热抗逆性最强 抗化学药物抗辐射例:肉毒梭菌的芽泡在沸水中经5.09.5h才被杀死巨大芽泡杆菌的芽泡的抗辐射能力比E.coli高 36倍。美国的一块25004000万年的琥珀,有人从其中蜜蜂肠道内分离到有生命芽泡(泡 外 壁:含脂蛋白,透性差芽 泡 衣:含疏水性角蛋白抗酶解、抗药物、多价阳离子难通过皮 层:含芽泡肽聚糖及DPACa含 水,渗透压高芽泡的成分(芽 泡 壁:含肽聚糖可发展成新胞壁,芽泡质膜:含硬脂、蛋白可发展成新胞膜核 心 芽 泡 质:含DPADPACa,核 糖 体,RNA和酶类核 区:含DNA芽泡的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标 泡 囊(cyst)在干旱条件下,细胞外壁加厚,细 胞 失 水,而形成的一种坑干旱不抗热的圆形休眠体特 性:与芽泡相似,一个菌只形成一个,不 繁 殖,条件适宜可发芽并重新营养 生 长,一般存在于一些固氮菌中。6)体泡晶体(parasporal crystal)某些芽泡杆菌在形成芽泡时,在芽泡旁形成一颗菱形、方形或不规则的碱溶性蛋白质晶体(内毒素),对一些昆虫,动、植物线虫有毒杀作用。(三)细菌的繁殖细菌的繁殖方式主要是裂殖,少数是芽殖。1 .裂 殖(fission)指细菌细胞通过分裂形成两个子细胞的过程,杆状菌有横分裂和纵分裂,一般分为横分裂。(1)二分裂(binary fission)对称二分裂:一个细胞在其对称中心形成一隔膜,进而分裂成两个形态,大小和构造完全相同的子细胞,绝大多是这样。不等二分裂(unegual binary fission):不等二分裂产生两个形态,构造不同的子 细 胞,如柄细菌属,分裂产生一个有柄,不 动,另一个无柄,有 鞭 毛,能 动,少数以这种方式。(2)三分裂(trinary fission):细胞分裂时形成一对“Y”形 细 胞,随后仍进行二分 裂,结果形成网状菌丝体,如绿色硫细菌。(3)复分裂(multiple用ssion):细胞在生长时会形成不规则的盘曲的长细胞,然后细胞多处同时发生均等长度的分裂,形成多个细胞,如蛭弧菌寄生于细菌内的分裂方式。2.芽殖(budding)在母细胞表面形成小突起,长成与母细胞相等时,相 互 分 离,并独立生活的一种繁殖方式。如:芽 生 杆 菌(Blastobacter),生丝微菌(Hyphomiorobium)等等。二、细菌的群体形态(-)在固体培养基上菌落(colony)在固体培养基上以母细胞为核心的一堆肉眼可见的,有一定 形 态,构造的子细胞集团。克隆(clone)菌落由一个单细胞繁殖而成的,一个纯种细胞群菌苔(bacterial lawn)-大量菌落已连成一片菌落的形态结构可用于分离,纯 化,鉴 定,计 数,选 种,育种等工作。(-)在半固体培养基上细菌在半固体的培养性状可用于菌种鉴定,如运动能力,产蛋白酶能力等,根据基形态和是否扩散来判断。(三)在液体培养基内菌体在液体培养时,因细胞特征,比 重,运动能力和对氧气等关系的不同,形成不同群体形态,如混浊、沉 淀,在 液 面 形 成 菌 膜(pellicle),菌膜(scum),成 环 状,小片状等。第 二 节 放 线 菌放线菌(actinomycetes)一类呈菌丝状生长和以泡子繁殖的陆生性较强的 原 核 生 物(G+菌)放线菌与人类关系密切:产生抗生素:近万种抗生素中70%由放线菌产生 产生生化药物:多数是放线菌的次生代谢产物 产生维生素和多种酶 对植物的共同固氮作用对提高土壤肥力,环境保护的作用:分解纤维素、石蜡、角蛋白、琼脂和橡胶等放线菌大多有益菌,少数对人和动、植病有病害。一、放线菌的形态构造(-)典型放线菌的形态构造链 霉 菌(streptomyces)-细胞呈丝状分枝,菌丝直径很细(),在营养生长阶段,菌丝内无隔,一般呈多核的单细胞状。链霉菌的形态结构根据其生长阶段的不同而有所不同。1 .基内菌丝(substrote mycelium):泡子落在基质表面,发 芽,不断伸长分枝并以放射状向基质表面和内层扩展,色 浅,较 细,具有吸收营养和排泄代谢物功能。2.气生菌丝(aerial mycelium):菌丝向上不断向空间分化成为色深直径较粗的分枝菌丝。3.泡子丝(spore-bearing mycelium):气生菌丝成熟,分化成泡子丝。4.分生泡子(conidin,spore):泡子丝通过横割分裂方式,产生成串的泡子。链霉菌泡子丝的形态多样:有直、波曲、弯钩、螺旋、轮生等。见链霉菌的各种泡子丝形态图。(-)其他放线菌的形态构造简单提及:无气生菌丝、产生泡囊泡子,有些带鞭毛。二、放线菌的繁殖放线菌繁殖方式分为两种:分生泡子:最常见 无鞭毛、1.借泡子 泡囊泡子有鞭毛!基内菌丝断裂2.借菌丝 任何菌丝片段(液体培养时,不产生泡子)三、放线菌的群体特征(-)在固体培养基上菌落干燥,不 透 明,表面呈致密的丝绒状,上有一薄层彩色的“干粉”,菌落和培养基的连接紧密、正反面颜色常不一致。一些缺乏气生菌的放线菌落与细菌菌落接近。(-)在液体培养基上在液面与瓶壁交界处粘贴一圈菌苔,培养液清面不浊,菌丝团悬浮液中或沉在瓶底。第 三 节 蓝 细 菌蓝细菌(cyanobacteria)旧名蓝藻(blue algae)-一类无鞭毛含叶绿素a,能进行产氮性光合作用的G-大型原核生物,一般直径3-10m,最 大60”。一、蓝细菌的形态(分 为5类)1 .由二分裂形成的单细胞(粘杆属Gloeothece)2.由复分裂形成的单细胞(皮果属Dermocarpa)3.有异形胞的菌丝(鱼腥属Anabaena)4.无异形胞的菌丝(颤蓝属Oscillaloria)5.分枝状菌丝(飞氏属Fischerella)见蓝细菌的典型形态图二、蓝细菌的构造蓝菌的构造与G-细菌相似。构 造:双层细胞壁肽聚糖粘质糖被或鞘类囊体(thylakoid):含叶绿素a,用以光合作用。藻胆素(phycopilin):一类辅助光合色素。竣酶体:有固定C02作用。蓝细菌肽(cyanophycine):用作氮源营养。聚硬酸盐:贮存硬蓝细菌分布很广,在水体、土壤和部分生物体内外,岩石表面和一些其它恶劣 环 境,如高温、低温、盐湖、荒漠、冰原都有“先锋生物”,蓝细菌在人类生活中很有价值,约120多种蓝细菌有固氮能力。第 四 节 支 原 体、立克次氏体和衣原体支原体、立克次氏体和衣原体都属G-,寄生在营养细胞内的小型原核生物,它们介于细菌与病毒间的一类原核生物。一、支原体支原体(Mycoplasmn)一类无细胞壁,介于独立生活和细胞内寄生之间的最小型原核生物。支原体大都是人和动物的致病菌,也可感染植物,有些腐生种类生活在污水、土壤或肥堆中,感染植物的也可称植原体(Phytoplasma卜支原体的型态,构造及特点:细胞很小:150-300nm 细 胞 膜 含 留(灾)醇:膜比较坚韧无细胞壁:对渗透压敏感菌落小(0.110mm):呈“油煎蛋”状以二分裂和出芽等方式繁殖能在营养丰富培养基上生长(血清、酵母膏和苗醇)多以糖类作能源,能在有氧或无氧条件下进行氧化型或发酵型产能代谢基因组很小,0.6-1.1Mb左右。对抑制蛋白合成抗生素(四环素、红 霉 素)和破坏笛体的抗生素(两性霉素、制霉菌素)都很敏感。二、立克次氏体立克次氏体(Rickettsia)一类专性寄生于真核细胞内的G-原核生物,有细胞壁,细胞较大,有产能代谢系统,不能独立生活。1909年,美国医生H.T.Ricketts首次发现落基山斑疹伤寒的病原体,被弃去 生 命,因此而命名。立克次氏体可寄生动、植 物 细 胞,寄生植物细胞的称类立克次氏体细菌(Rickeltsia-like bacteria)立克次氏体形态,构造及特点:细胞大:0.3-0.6x0.8-2.0m细胞型态多:球状、双球状、杆状、丝状等有细胞壁G-真核细胞内寄生,虱、蚤等节肢动物和人、鼠等脊椎动物以二分裂方式繁殖存在不完整的产能代谢,不能利用葡萄糖对四环素、青霉素等抗生素敏感对热敏感:56、30min杀死可在鸡胚,Hela细胞株或敏感动物等组织培养物上培养基因组小:1.1Mb,834个基因立 克 次 氏 体 是 人 类 斑 疹 伤 寒(R.prowageki引 起),恙(样)虫热(R.tsutsugamushi引 起)和Q热等传染病的病原体,能产生内毒素,置人于死地。三、衣原体衣 原 体(chlamydia)一类在真核细胞内能量寄生的小型G-原核生物。1956年由我国著名微生物学家汤飞凡首次从沙眼中分离到病原体,证实衣原体是一种特殊的原核生物,不是大型病毒。形 态,构造及特点:有细胞结构有细胞壁(但没有肽聚糖)G-胞内含RNA和DNA有核糖体缺产能酸系统,严格胞内寄生以二分裂方式繁殖对抗生素和药物敏感只能在动物胚胎和细胞组织培养物上培养衣原体生活周期:原 体:小球状、壁厚、不 运 动,有感染力一般分为三个阶段:始 体:大球状、壁薄、脆弱、无感染力包 涵 体:二分裂繁殖在细胞内形成微菌落见衣原体生活周期图。衣原体现已确认的有三种:鹦鹉热衣原体:人曾共患(c.psittaci)沙眼衣原体:人曾人患(c.trachomatis)肺炎衣原体:人曾人患(c.pneumonine)第 二 章 真 核 微 生 物第一节真核微生物概述真核生物(Eukaryotes)大类细胞核具有核膜,细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞民器的生物。真核微生物(eukaryotic micro-organisms)-真 菌,显微藻类和原生动物等。一、真核细胞与原核细胞的不同真核细胞与原核细胞之间有很多不同之处,但从细胞结构来说,主要的不同有两方面:1 .有膜包围的细胞器(organelles)2 .有核膜包裹着的完整细胞核见真核细胞构造图二、真核微生物的主要类群(植 物 界:显微藻类动 物 界:原生动物真核微生物(粘菌【假菌菌物界 f单细胞真菌酵母菌真 菌 丝 状 真 菌 霉菌大型子实体真菌蕈(训)菌三、真核微生物的细胞构造(-)细胞壁1 .真菌的细胞壁微纤维成为骨架(单糖紧合物)多 糖:构成微纤维和无定形基质X.成 份 I 少量蛋白质 基质为填充物(甘露聚糖、脂类 葡聚糖、蛋 白)功 能:固定细胞外形和保护细胞免受外界影响和损坏2 .藻类细胞壁 纤 维 素:骨架结构成份间质多糖:杂 多 糖,填充物(-)鞭毛与纤毛鞭 毛 和 纤 毛 结 构 很 相 似,具 有 运 动 功 能,主 要 区 别 是 鞭 毛 数 量 少,较长(150-200/7/77),而纤毛数量多较短(5-10/77)构造由三部分组成:鞭杆、基 体,连接两者的过渡区1 .鞭 杆(shaft)鞭杆由9 个微管二联体,2 个中央微管,动力蛋白臂,微管连丝蛋白和放射辐 条 5 个部分组成。(1)微管二联体:由 A、B 两条中空的亚纤维组成,A 由 13个球型微管蛋白(tubulin)亚基环绕而成,B由10个 亚 基,同时与A共 用3个组成。(2)中央微管:在中央鞘中,有 一 对(2)相互平行的中央微管。(3)动力蛋白壁(dynein arms):在A亚纤维上伸出内外2条动力蛋白臂,是能被ca+,均+激活的ATP酶,水解ATP释放能量。(4)微管连丝蛋白(nexin):微管连丝蛋白连接着相邻的两个微管的联体。(5)放射辐条(radial spoke):放射辐条是二联体伸向中央鞘的辐条,成放射状。鞭杆横切面呈“9+2”型。见“9+2”型鞭毛图2.基体基体结构与鞭杆相似,只是横切面呈“9+0”型,即9个 三 联 体,没有中央鞘和中央微管。一些原生动物,藻类和水生真菌的游动泡子或配子等有鞭毛,一些原生动物有纤毛。(三)细胞质膜构造和功能与原核细胞相似。(四)细胞核细 胞 核(nucleus)遗传信息(DNA)的 贮 存,复制和转录的地方,一切真核细胞有核膜包裹,一般一个核。成 份:核 被 膜 染 色 质 核 仁 核 基 质不同种属染色体数差别很大(五)细胞质和细胞器细 胞 质(cytoplasm)位于质膜和核之间的透明,粘 稠,不断流动的溶胶,内含细胞基质、细胞骨架和各种细胞器。1 .细胞基质和细胞骨架细胞基质(cytomatrix)真核细胞中,除细胞器以外的胶状溶液,内含细胞骨架,酶,中间代谢物等,是细胞代谢之场所。细胞骨架(cytoskeleton)由微管肌动蛋白比(微 丝)和 中 间 丝3种蛋白质纤维构成的细胞骨架,有支持、运输和运动等功能。2 .内质网和核糖体内质网(endoplasmie reticulum ER)-细胞质中一个与细胞基质相隔离,但彼此相通的囊腔和细管系统,由脂质双分子层组成,其内侧与核外膜相通。(1)内质网分为两类:a)糙面内质网:在网膜上附有核糖体颗粒,有合成和运送胞外分泌蛋白的功能。b)光滑内质网:在网膜上不含核糖体,与脂类和钙代谢有关。(2)核糖体(ribosome)也称核蛋白体,存在于一切细胞中的直径为25nm的颗粒状细胞器,其 中 含40%蛋 白 质,60%RNA共价结合而成,具有蛋白质合成功能。真核细胞核糖体80S(60S+40S,2个亚基组成),存在于内质网和细胞质中。原核细胞核糖体70S(50S+30S,2个亚基组成),也存在于线粒体和叶绿体中。3.高尔基体(Golgi apparatus)高尔基体(Golgi complex)-由4-8个平行堆叠的扁平膜囊和大小不等的囊泡所组成的膜聚合体。功 能:将糙面内质网合成的蛋白质浓缩,与自身合成的糖类,脂类结合,形成糖蛋白,脂蛋白分泌泡,通过外排作用分泌到细胞外,是协调细胞生化功能和沟通胞内外环境的重要胞器,“加工厂“。4.溶酶体溶酶体(lysosome)由单层膜包裹,内含多种酸性水解酶的球形,囊泡状 胞 器(0.2-0.5m),含40种以上酸性水解酶,PH值 在5左右。功 能:细胞内的消化作用5.微体微 体(microbody)-也称过氧化物酶体(peroxisome),一种由单层膜包裹小球形胞器,内含酶与溶酶体不同,主要是氧化酶和过氧化氢酶。功 能:使细胞免受出。2毒 害,并氧化分解脂肪酸。6.线粒体线粒体(mitochondria)-由内外两层膜包裹的囊状物(0.5-1 5-3.0”),外膜平整,内膜向内伸展,形成大量双层内膜的崎,内部充满基质。功 能:进行氧化磷酸化反应的场所,把蕴藏在有机物中的化学潜能转化成为生命活动能量(ATP),是一切真核细胞的“动力车间见线粒体构造图线粒体内所含功能性物质(1)基 粒(elementary particle)-也 称Fi颗 粒,是一种带柄的小球体(8.5nm)为ATP合成酶复合体,线粒体内含1。41。5个。(2)电子传递链(呼吸链)为内膜上的4种脂蛋白复合物(3)三竣酸循环酶系位于内膜和崎包围的基质内(4)闭环状DNA链为线粒体所特有,约 19-26/77(5)70s核糖体合成一小部分(10%)线粒体专用蛋白质。7.叶绿体叶绿体(chloroplast)-由双层膜包裹,外形为扁平的圆形或椭圆形,呈凸透镜状的绿色颗粒细胞器,主要有3 部分组成,叶绿体膜,类囊体和基质,只存在绿色植物(包括藻类)细胞中。功 能:能转化光能为化学能,具有光合作用,把 C02和 H20 合成葡萄糖并释 放。2 ,是自养型真核生物的“炊 事 房 与 线 粒 体 一 样,叶绿体是半自主性复制的细胞器。见叶绿体构造图叶绿体内所含的主要功能性组成:(1)类 囊 体,基粒由单位膜封闭而成的扁平小囊为类囊体,数 量 很 多,彼此连通,当许多类囊体层层相叠就形成基粒,类囊体上了带着大量的色素。(2)DNA叶绿体内含有自身独有的双链环状DNA(3)70S核糖体叶绿体内含有70S核 糖 体,负责合成叶绿体自身独特的蛋白质。(4)基它蛋白质成份淀 粉 粒,核酮糖二磷酸竣化酶等。8.液 泡(vacuole)液泡(vacuole)由单层膜包裹,大小不定,主要存在真菌和藻类等真核微生物细胞中,泡中含有:糖原、脂肪、多硬酸盐和精氨酸、乌氨酸、谷氨酰胺等碱性氨基酸,以及蛋白酶、酸性和碱性硬酸酯酶,纤维素酶和核酸酶等。功 能:贮存营养物,并有溶酶体的功能,也可维持细胞的渗透压。9.膜边体膜 边 体(lomasome)也称须边体或质膜外泡,为许多真菌所特有,由单层膜色裹,位于菌丝细胞的质膜与胞壁之间,形态不定,内含泡状物或颗粒状物,膜边体可由高尔基体或内质网的特定部位形成,可互相结合,也可与别的细胞器结合。功 能:分泌水解酶或合成细胞壁。10.几丁质酶体几丁质酶体(chitosome)又 称 壳 体,存在于各种真菌菌丝顶端细胞中的微小泡囊(0)40-70nm),内含几丁质合成酶。功 能:运送酶到菌丝尖端细胞表面,不继合成几丁质微纤维,菌丝可不断向前延伸。11.氢化酶体氢化酶体(hydrogenosome)由单层膜包裹球形囊状体,内含氢化酶,氧化还原酶,铁氧还蛋白和丙酮酸,存在于鞭毛基体附近,一般只存在于厌氧性原生动物和厌氧性真菌中。功 能:为鞭毛的运动提供能量。第 二 节 酵 母 菌酵母菌(yeast)指能发酵糖类的各种单细胞真菌酵母 菌 的5个 特 点:个体以单细胞状态存在多数以出芽方式繁殖能发酵糖类产能细胞壁常含甘露、聚糖生活在含糖量较高,酸度较大的水生环境中一、酵母菌与人类的关系酵母菌主要分布在偏酸、含糖的环境中,约 有500多 种,与人类关系密切,被誉为“家养微生物人类几乎天天离不开酵母菌,如酒类生产、面包制作、乙醇和甘油发酵,提取辅酶A,细胞色素C,凝血质和维生素等。在基因工程中扮演重要角色,作为模式真核微生物,被用来表达外源蛋白质,被称为“工程菌只有极少数能引起人和动物的疾病,如鹅口疮、阴道炎或肺炎等。二、细胞的形态和构造酵母菌为典型的真核微生物,是细菌大小从1 0倍(2.5-10 x4.52 1 )有球形、卵圆状、椭圆状、柱状和香肠状等。(-)细胞壁细胞壁厚25nm,主要成分为“酵母纤维素”,芽痕周围有少量几丁质。甘露聚糖(mannan),外 层,分枝状聚合物酵母纤维素 葡 聚 糖(glucan),内 层,分枝状聚合物,赋予机械强度(三 明治)蛋 白 质:葡聚糖 酶,甘露聚糖酶等多种酶。(二)细胞膜膜也为三层结构,主要成份为蛋白质(50%类 脂(40%)和少量糖。蛋 白 质:蛋白及一些酶类(甘油的单、双、三酯 磷脂酰胆碱(卵 磷 脂)膜成分 类 脂1甘油磷酯磷脂酰乙醇胺 光麦角苗醇(维生素D的 前 体)一 VD2f提取留 醇.酵母苗醇糖 类:甘露聚糖等(三)细胞核酵母菌有多孔核膜包裹起来的定形细胞核(是贮藏遗传信息的地方),如S.cerevisiae核中含有17条染色体,为12.052Mb,共6500个基因。另 外,在线粒体,2“质粒和一些线状质粒中也含有DNA。2”质 粒 是1967年在S.cerevisiae中 发 现,为闭合环状超螺旋DNA分 子,长约6kb),每个细胞含60-100个,该质粒可用于基因调控研究,和酵母菌转化的载体。见酵母菌细胞构造图三、酵母菌的繁殖方式及生活史 芽殖 无 性 裂殖 节泡子酵母菌的 产无性泡子 掷泡子繁 殖 方 式 原垣泡子有性产子囊泡子(-)无性繁殖无性繁殖酵母菌也称假酵母菌(psedo-yeast)1 .芽 殖(budding)这是酵母菌最常见的繁殖方式,芽殖后如果不立即分离,会出现假菌丝(藕节 状)或真菌丝(竹节状卜芽体或芽泡子(budding spore)的形成:(1)水解酶使要形成芽体的部分细胞壁变薄。(2)大量新细胞物质包括核物质在芽体部位上堆积。(3)在与母细胞交界处形成一块由葡聚糖、甘露聚糖和几丁质组成的隔壁。(4)分 离 后,母细胞留下一个芽痕(budscar),子细胞留下一个蒂痕(birthscar)2.裂 殖(fission)以类似细菌二分裂方式繁殖,只有少数菌如此。3 .产生无性泡子少数菌以此种方式繁殖形 成:(1)细胞上长出小梗(2)在梗上产生掷(智)泡子(3)成 熟 后,喷射出泡子(二)有性繁殖以形成子囊和子囊泡子方式进行有性繁殖形 成:(1)两个性别不同细胞伸出一管状原生质突起(2)突起相融合形成通道(3)然后质配(plasmogamy 核 配(caryogamy)(4)减数分裂形成4或8个子核(5)与每个核与周围原生质结合,在表面形成一层泡子壁,成为子囊泡子,原有营养细胞成为子囊。(三)酵母菌生命周期(life cycle)不同的酵母菌生命周期可分为3类:1 .营养体既能以单倍体也能二倍体形式存在以S.cerevisiae(酿酒酵母)为代表,见生命周期图2 .营养体只能以单倍体形式存在以Schigosaccharomyces octosporus(八泡裂殖酵母)为代表,见生命周期图3 .营养体只能以二倍体形式存在以Sacharomycodes ludwigii(路德类酶母)为代表,见生命周期图四、酵母菌的菌落菌落与细菌类似,较 湿 润,较 透 明,较 光 滑,质 地 均 匀,但在细菌菌落大,透明度差一点,颜色单一。第 三 节 丝状真菌丝状真菌(filamentous fungi)-俗称霉菌(mould,mold),指菌丝体发达,不产生大型肉质子实体的真菌。一、分布及人类的关系分布极广,凡有有机物存在的地方就有霉菌存在,能将复杂有机物如纤维素,木质素等彻底分解转化,成为绿色植物重新利用的养料,促使了整个地球的生物圈循环。对工农业生产、医疗等有密切关系:(1)工 业 上:能生产机酸(柠檬酸、葡萄糖酸等)酶制剂(淀粉酶、蛋 白 酶x抗 生 素(青霉素、头泡霉素、灰黄霉素)以及一些维生素(核黄素卜(2)食 品 上:制作酱油、干酪等。(3)霉 变:引起食品、纺织品、皮革、木材等霉变。(4)病 原 菌:是植物的主要病原菌,也可引起动物和人体传染病,如皮肤癣,少数还可产生毒素(黄曲霉毒素)二、细胞的形态和构造(-)菌丝及其延伸1 .形 态:霉菌营养体的基本单位是菌丝(hypha,hypha)3-10”,比细菌或放线菌粗110倍,可分为两大类:无隔菌丝和有隔菌丝。2 .菌丝细胞的构造:菌丝细胞靠不断延伸进行生长,在菌丝上分为几个区域:(1)延伸区和硬化区:胞壁的内层为几丁质,外层为蛋白质。(2)亚顶端区(次生壁区):内层几丁质,中层蛋白质,外层葡聚糖蛋白网层。(3)隔 膜 区:由菌丝内壁向内延伸成环片状构造。见菌丝生熟图(-)菌丝体的各种分化形式菌丝体(mycelium,mycelia)-由许多菌丝相互交织而成的一b菌丝集团,可分为两大类,营养菌丝体(Vegetalive mycelium),伸入营养基质内部,吸取营 养,气生菌丝体(aerial mycelium),伸展到空间,产泡子。菌丝体在适应环境的过程中,演化出多种特化构造。r假根 吸 取 养 料、吸器附着胞附着附着技(特化营养菌