DB15∕T 3035-2023 向日葵抗黑斑病水平室内鉴定技术规程(内蒙古自治区).pdf

ICS 65.020.01 CCS B 16 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 3035 2023 向日葵抗 黑 斑病水 平室内鉴 定技术规 程 Technical code of practice for indoor identification of sunflower resistance to black spot 2023-05-11 发布 2023-06-11 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 3035 2023 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定起草。本文件 由内 蒙古 自治 区农 牧厅提 出。本文件 由内 蒙古 自治 区农 业标准 化技 术委 员会（SAM/TC 20）归 口。本文件 起草 单位：内蒙 古 农业大 学、内 蒙古 自治 区 农牧业 技术 推广 中心、内 蒙古自 治区 农牧 业科 学院、内 蒙古 自治 区农 业标 准化技 术委 员会。本文件 主要起 草人：张文 兵、赵 素梅、张键、路妍、韩升 才、苏 雅杰、融晓 君、张 智芳、高红 宇、仇凯、段钧 雷、贺琪、朝 鲁、白 佳琦、张 之为、孔 祥久、贾硕、刘 雪英。DB15/T 3035 2023 1 向 日葵抗 黑斑病水 平室内 鉴定技术 规程 1 范围 本文件 规定 了室 内向 日葵 黑斑病 抗性 鉴定 方法 和抗 病性评 价标 准。本文件 适用 于室 内抗 向日 葵黑斑 病品 种鉴 定。2 规范性 引用 文件 本文件 没有 规范 性引 用文 件。3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。向日葵 黑斑 病 sunflower black spot 由向日 葵链 格孢（Alternaria helianthi）引 起向 日 葵真菌 病害。注：向日葵黑斑病症状见附录A。4 病原菌 制备 菌株选 择 根据所 鉴定 品种 推广 应用 区域选 择能 代表 该区 域病 原菌致 病力 水平 的优 势菌 株。培养基 PDA 培 养基。病原菌 培养 将向日 葵黑 斑病 菌在PDA 平 板活化5 d 7 d 后，从 菌 落边缘 挑取 菌块 接入 麦麸 培养基（麦 麸，加入适量的 水，装入 小罐 头瓶，高压 湿热 灭菌30 min，冷却到 室温 备用），用于 快速扩 繁大 量的 分生 孢子。252 培养，菌 丝长 满 罐头瓶 后用 清水 冲洗 麦麸 培养基，4 层纱 布过 滤获 得 分生孢 子液。血 球计 数板计数，将分 生孢 子液 的浓 度调至1105个/mL 后备 用。5 向日葵 黑斑 病抗 性鉴 定 对照品 种 以龙食 葵11 号作 为感 病对 照品种。DB15/T 3035 2023 2 向日葵 种植 将向日 葵种 子播 种在 装有 无菌土13 cm 13 cm 的营 养钵中，每个品 种播 种5 钵，每 钵播 种5粒，25 2，16 h光照/8 h 黑 暗条件 下培 养，待向 日葵 有4片 真叶 时开 始进 行喷 雾 接种。接种方 法 将黑斑 病菌 体配 成孢 子浓 度为1 105 孢子/mL 的悬 浮液。采用 喷雾 法接 种10 mL孢子 液于 向日 葵 叶片上，25 2 条件 下，黑暗 保湿24 h，后置 于25 2，16 h光照/8 h 黑暗 条件 下培 养，8 d后进行 观察。每 个处 理15 株幼苗，3 次重 复。病害调 查及 病情 指数 计算 根据向 日葵 的发 病程 度，分为0、1、3、5、7、9级共6个 级别，其 分级 标准 如 下：a)0 级：无病 症；b)1 级：褐色、圆 形小 的散 状斑点 占总 叶面 积 的 1%；c)3 级：圆形 变褐 斑占 总叶 面积 的 1%10%，下 层叶 片被侵 染；d)5 级：圆形 变褐 斑占 总叶 面积 的 11%25%，植物 一 半的叶 片被 侵染；e)7 级：圆形 变褐 斑连 接聚 集，占 总叶 面积 的 26%50%，植 物2 3 叶片 被侵 染；f)9 级：暗褐 色斑 点聚 集，侵染超 过总 叶面 积 50%，几乎所 有叶 片被 侵染。根据各 向日 葵品 种接 种后 的发病 级别，按 照下 面的 公式（1）计算 病情 指数。DI=(A B)C9 100（1）式中：DI 病 情指 数；A 各级 病叶 数；B 相对 级数 值；C 调查 总叶 数。抗性级 别划 分 向日葵 黑斑病 抗性 水平抗 病性鉴 定以病 情指 数为基 础，利 用下面 的公 式（2）计算相 对抗性 指数，通过相 对抗 性指 数进 行划 分，划 分标 准见 表1。K=DIy/Dick X=1-K（2）式中：K 相对 病情 指数；DIy 鉴 定品 种平 均病 情指数；Dick 对照 品种 平均 病 情指数；X 相对 抗性 指数。DB15/T 3035 2023 3 表1 向日葵 黑斑 病抗 性水 平划 分标准 抗病型 相对抗性指数 免疫（I）X=1 高抗（HR）0.8 X 1 中抗（MR）0.6 X 0.8 中感（MS）0.3 X 0.6 高感（HS）X 0.3 DB15/T 3035 2023 4 A A 附录A（资料 性）向日葵 黑斑 病症 状 向日葵 黑斑 病可 危害 叶片、叶柄、茎 和花 瓣，尤 以危 害叶片 为主。叶片 发病 初 期，病斑 为褐 色斑 点，逐渐扩 大呈 圆形，病 斑暗 褐色且 中心 灰白，边 缘有 黄绿色 晕圈，直 径5 mm 20 mm，相 邻病 斑易 扩大 汇合（见 图A.1）；叶 柄、茎 部染病 后病 斑黑 褐色，圆 形、椭 圆形 或梭 形（见图A.2），由下 向上 蔓延，天气潮湿 时病 斑上 生出 一层 淡褐色 霉状 物，为 菌的 分生 孢子梗 及分 生孢 子。病 情严 重时，叶 柄上 布满 病斑，叶片上 病斑 联合 成片，叶 柄和叶 片一 起干 枯。茎 部 病斑最 长可 达140 mm，病 斑连结 成片，染病 后期 茎 秆全部变 成褐色。花 托感病 形成圆 形病斑，稍 凹陷。花瓣染 病，病 斑椭 圆形或 梭形，褐色，中央 灰白色，具同心 轮纹，病斑 扩展 使 花瓣枯 死。葵 盘染 病后 病 斑圆形 或梭 形，具 同心 轮 纹，褐色、灰褐 色或 银灰 色，中心灰 白色（见图A.3），病斑扩 大汇合，全 葵盘呈 褐色，病斑上 长一 层灰褐 色霉状 物。病 原菌 还可 以侵染向 日葵 的种 子，被侵 染的种 子出 现棕 黑色 斑点，发芽 率降 低，播种 后种 苗出现 症状。图A.1 向日 葵黑 斑病 叶部 症状 图A.2 向日 葵黑 斑病 叶柄 症状（左）和 茎病 症状（右）DB15/T 3035 2023 5 图A.3 向日 葵黑 斑病 盘部 症状