《实验实训指导书》(药理学).docx

试验一药理学试验根本学问和技术试验目的：1、把握根本操作，熬炼动手、动脑力气；2、更好地把握药理学根本理论学问；3、培育科学思维。试验内容：一、药理试验的根本目的与要求二、试验动物：1、动物的选择；2、动物的标记与捉拿、固定方法；3、动物的取血方法尾尖、眼眶静脉丛、摘眼球、断头；4、动物的给药方法灌胃、腹腔、皮下、尾静脉；5、动物的麻醉方法；6、动物的处死方法。三、试验设计根本原则。试验步骤：一、药理学试验的根本目的与要求药理学试验课在药理学教学中占有格外重要的地位。药理学试验课的目的在于通过试验验证药理学的根本理论，加深理解与把握药理学的根本学问和规律；也是了解获得药 理学学问的科学途径。同时，培育学生独立思考，独立工作，科学思维的力气；培育学生动手操作、分析问题和解决问题的力气；还应培育学生对科学工作的严峻的态度、严格的要求、 严密的工作方法及实事求是的工作作风。为了到达上述目的，要求做到以下事项：1. 试验前：预习试验内容并复习相关理论学问；2. 试验时：（1） 试验分小组进展，试验前分工明确，试验时亲热协作；（2） 确定试验仪器、药品、动物与试验指导相符时，将试验器材妥当安排，正确装置、保管；（3） 试验操作按步骤进展，认真观看试验中消灭的现象，实事求是地做好记录；（4） 留意疼惜动物、节约试验药品；（5） 试验过程中保持 试验室安静、清洁。3. 试验后： 各组同学将试验动物处死，试验台擦干净，将试验方盘送回预备室； 值日生搞好试验室卫生，将死亡动物送至指定场所； 整理试验结果，经分析思考作出结论，按要求写出试验报告，按时交给指导教师。试验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料：试验动物，器材，药品5. 方法：用自己的语言简洁扼要描述出来；6. 结果：要求真实、清楚；7. 争论：将试验结果进展比较、分析；试验中有哪些缺乏之处；结果特别或失败的缘由；8. 结论：将试验结果进展归纳总结，应带有提示性质。二、试验动物1、动物的选择：药理学试验中常用的动物有青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫、狗、猴等。动物对药物的反响具有种属差异性，可依据试验目的和要求选用不同的试验动物。例如：1 小白鼠：适用于需大量动物的试验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药试验、抗炎镇痛药试验、中枢神经系统药试验、抗肿瘤药及抗年轻药试验等。（2） 大白鼠：比较适用于抗炎药物试验，血压测定、利胆、利尿药试验，也可用于进展亚急性和慢性毒性试验。（3） 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的试验。也常用于离体心脏、心房、肠管试验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的试验。（4） 家兔：常用于观看争论脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感， 也常用于体温试验，用于热原检查。（5） 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观看药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进展慢性毒性试验时，也常承受狗。（6） 猴 是接近于人类的高级动物。神经系统比较兴盛，常用于观看药物对行为的影响。猕猴的月经周期和人一样，是争论生殖课题的首选动物。另外，药临床前毒性评价，也需 要使用猴。2、动物的标记与捉拿、固定方法1动物的标记狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠和家兔多用染色法，一般用 1的苦味酸溶液黄色或 5中性红溶液红色涂于动物体表不同部位的皮毛处，代表不同号码。编号原则是先左后右，自前到后。2动物捉拿、固定方法小白鼠右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。大白鼠用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。 豚鼠豚鼠性情温存不咬人，用手握住躯干即可。家兔可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进展仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。3、动物的取血方法（1） 小鼠和大鼠颈静脉或颈动脉取血：麻醉动物，背部固定，颈部去毛，碘酒消毒，切开皮肤，分别 出动脉或静脉，将注射针平行刺入血管，渐渐回抽针栓即可取血。动脉取血时，亦可将远心 端结扎，用动脉夹夹住近心端，在动脉中心剪一小口，插入聚乙烯管，然后放开动脉夹，血液可自动流出。兔和豚鼠也常用此方法取血，手术操作与大鼠相像。尾尖取血：将鼠固定在铁丝笼或特别筒内，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾小鼠1mm 2mm；大鼠 5mm10mm，用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即从尾尖流出。小鼠每次可采血 0.1ml，大鼠每次可采血0.5ml。留意：只剪去尾尖，如剪去过多组织，反而流血少。下次取血时，只需将尾尖血痂剪掉即可。眼球取血：左手持鼠，使眼球突出，并使头向下。右手持弯曲镊，钳夹一侧眼球根部， 将眼球摘除。血液即可从断裂的眼眶动物、静脉涌出，血量约为鼠体重的45，适用 于一次性取血。眼眶后静脉丛取血：固定鼠头部皮肤，轻轻向后压迫颈部两侧，使头部静脉回流受阻， 眼球充格外突，用内径 11.5mm 的毛细血管 刺入下眼睑与眼球之间，轻轻向眼底部方向移动，血即可流入玻璃管内，一般两眼可各取一次。断头取血：用剪子剪断鼠头，马上将鼠颈部向下，提起动物，并对准已预备好的容器， 可接取所需血液。小鼠可取血约 1ml，大鼠可取血约 8ml。（2） 家兔心脏取血：将家兔背位固定，在胸骨左缘 3mm，第 34 肋间隙，触及心跳最明显部位， 以 8 号针头刺入，即可有血流入注射器内，亦可抽取，如没刺入心脏，确定要将针提到 皮下转变方向，再重刺入。耳缘静脉取血：将耳根部压紧，拔去耳缘毛，用酒精涂擦使血管扩张明显，以67 号针头，针尖向离心方向刺入，缓慢抽取血液。股动脉、静脉取血：将家兔麻醉、背位固定，手术分别出股动脉或静脉，插入套管即可依据需要量取血。4、动物的给药方法1小鼠、大鼠灌胃法(i.g.)：以左手固定鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。腹腔注射(i.p.)：以左手固定鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取 30 度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。皮下注射(s.c.)：用左手固定鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。静脉注射(i.v.)：将鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在 50热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾静脉，推入药液。2家兔灌胃：需两人合作进展。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前 肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取 8 号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会消灭动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水 中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入。 皮下、腹腔注射：给药方法根本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为 0.51.0/mg，腹腔为 1.05.0ml/mg。静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入。 5、动物的麻醉方法（1） 局部麻醉：常承受 2普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。（2） 全身麻醉：吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸取，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。留意事项：配制注射用麻醉剂，一般用蒸馏水，也可用生理盐水。静脉麻醉时，剂量要准确、浓度要适中，注射速度要缓慢，均匀。冬季作试验时，应将药液加温到动物体温水平。亲热观看动物眼睑，角膜及趾反射，避开麻醉过深引起动死亡。一旦麻醉过量，尽早实行人工呼吸等措施。6、动物的处死方法（1） 小鼠和大鼠常承受颈椎脱臼法，即用左手拇指和食指将其头部紧按在硬的物体上，右手捏住鼠尾， 用力向后牵拉，使颈椎脱位，鼠可瞬间死亡。大鼠也常用断头法处死。（2） 家兔空气栓塞法：用 50100ml 注射器，往静脉内快速注入空气，动物因血管气栓致死。家兔注射空气量为 1020ml。三、试验设计根本原则1、随机原则使每一试验对象都有同等的时机抽到试验组或比照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡全都，从而抵消非试验因素的影响。2、 比照原则（1） 组间比照：指在试验中设立假设干平行组，如空白比照等量的生理盐水和标准品比照等量典型药物。试验时留意试验组和比照组例数相等。（2） 自身前后比照：指在同一个体观看给药前后某些指标的变化，或者两种药物一前一后的穿插比较，这样既可削减个体差异，还节约了动物尤其是大动物，两种药物穿插比较时，间隔时间应参考药物的半衰期。3、重复原则即试验过程需屡次重复进展。它包含二个含义，即重复数和重现性。重复数即动物的个数， 统计学上叫“样本数”；重现性即在动物、药品、器材及环境因素等一样条件下，试验结果牢靠稳定地重复出来。试验提示:学生通过本次试验学习要求生疏、把握药理学试验中动物的选择、标记、捉拿、固定以及常用取血、给药、麻醉、处死的方法。为后续的试验操作打下良好的根底。试验思考：如何设计试验可以削减试验误差。试验二不同给药途径对药物作用的影响试验目的：观看不同给药途径对硫酸镁作用的影响。 试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、天平、lml 注射器、小鼠灌胃针头。药品：15%硫酸镁含水溶液。动物：小白鼠 2 只，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：取小鼠 2 只，分别称重并标记。一只小鼠腹腔注射15%硫酸镁溶 0.1ml/l0g； 另一只小鼠用同样剂量的硫酸镁灌胃。分别将小鼠置小笼中，观看其在15 分钟内表现有何区分。将结果填入下表：不同给药途径对硫酸镁作用的影响鼠号 体重g 药量ml/10g 给药途径给药前表现给药后表现【留意事项】1、把握正确的灌胃操作技术，不要误插气管或插破食管，前者可致窒息，后者可消灭如同腹腔注射时的吸取病症，重则死亡。2、注射后作用发生较快，需留心观看。试验提示:不同给药途径，吸取速度有差异，药物反响程度亦有差异。通过本试验使学生验证理论学问。试验思考：给药途径不同时，药物的作用为什么有的会消灭质的差异？试验三药物剂量对药物作用的影响试验目的：观看不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、粗天平、lml 注射器、小鼠灌胃针头。药品：0.1%、0.2%、0.4%戊巴比妥钠溶液。动物：小白鼠 3 只，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：取小鼠 3 只编号并以苦味酸溶液涂毛作不同记号。分别称其体重及观看小鼠正常活动状况。各鼠经腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠溶液0.2m1/l0 g，分别置于小笼中，亲热留意先后消灭的反响。将试验结果记录于下表：不同剂量戊巴比妥钠对小鼠作用的差异鼠号体重g 剂量ml/10g 埋伏期给药前表现给药后表现123【留意事项】1、小鼠对戊巴比妥钠可能消灭的反响，按由轻到重程度有：活动增加、呼吸抑制、翻正反射减弱、消逝、反射亢进、麻醉、死亡等。2、比较各鼠所消灭反响的严峻程度和发生快慢。试验提示:同一药物给药剂量不同，药物反响程度亦有差异。通过本试验使学生验证理论学问和培育学生观看力气。试验思考：了解药物的剂量和作用的关系对于进展药理试验和临床用药有何重要意义？试验四 苯巴比妥钠的抗惊厥作用试验目的：学习动物惊厥模型的复制方法；观看大剂量尼可刹米的中毒反响；把握苯巴比妥钠的抗惊厥作用。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、粗天平、lml 注射器 3 支、小鼠灌胃针头、大烧杯。药品：2.5%尼可刹米，0.5%苯巴比妥钠，生理盐水。动物：小白鼠 4 只，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：1. 取体重相近的小白鼠 4 只，称重，编号，随机分组，分为试验组和比照组。2. 试验组小鼠腹腔注射 0.5苯巴比妥钠 0.5mg/10g(0.1ml/10g)；比照组腹腔注射等体积生理盐水。3.15min 后试验组和比照组分别腹腔注射 2.5%尼可刹米溶液 0.20.3ml/10g，连续观看 20min，具体记录两组小鼠的反响状况。4.观看用药后小鼠的反响：有无兴奋、惊厥以后脚伸直为惊厥指标和死亡。将试验结果填入下表：鼠号体重药物剂量给药途径中毒量尼可刹米反响gml兴奋惊厥死亡1 号2 号3 号4 号苯巴比妥钠苯巴比妥钠生理盐水生理盐水ip ip ipip【留意事项】l.留意观看小鼠给药后的反响，如消灭竖尾、洗脸、猛烈地奔驰、撞笼、跳动等反响即为惊厥前兆。2. 腹腔注射部位要准确，否则会影响试验结果。3. 给药后应保持室内安静，避开刺激试验动物。试验提示: 尼可刹米为常用的呼吸中枢兴奋药。主要作用是直接兴奋延脑呼吸中枢，对大脑皮层、血管运动中枢和脊髓也有兴奋作用。过大剂量可引起惊厥，继而发生中枢抑制而死亡。苯巴比妥钠是一种普遍性中枢抑制药，具有良好的抗惊厥作用。通过本试验使学生验证理论 学问、培育学生观看和对试验根本机能的把握程度。试验思考：简述苯巴比妥钠的药理作用及临床应用。试验五 镇痛试验一热板法试验目的：学习镇痛的试验方法，把握吗啡或哌替啶的镇痛作用。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：智能热板仪，小动物电子秤，玻璃罩，小鼠鼠笼，lml 注射器，秒表 。药品：0.1%盐酸吗啡，生理盐水 。动物：雌性小鼠，1822g。试验步骤:1. 开机翻开智能热板仪电源开关，预热 10 分钟，至恒温指示灯亮，调整热板温度至 55±1。2. 筛选将小鼠放于热板仪上，记录痛阈值。痛阈值大于30 秒或小于 5 秒，淘汰不用。痛阈值以小鼠放于热板上至消灭添后足所需时间为标准。时间单位为秒。取已筛选的小鼠 8 只，随机分为比照组和试验组，每组4 只。按“筛选”所示方法，分别测定、记录给药前比照组和试验组的痛阈值。比照组ip. 生理盐水 0.1ml/10g试验组ip. 0.1%盐酸吗啡 0.1ml/10g测定、记录给药后 15 min、30min、45min 比照组和试验组的痛阈值，对于痛阈值大于 60 秒的小鼠，马上取出，以 60 秒计。计算给药前后比照组和试验组的平均痛阈值。留意事项：1. 热板法个体差异大，试验动物应预先筛选，一般以苦痛反响在 30s 内者为敏感鼠，可供试验用。2. 小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热时阴囊松弛，易与热板接触而影响试验结果。3. 用药后小鼠痛阈值超过 60s 者，应马上取出，防止足部烫伤而影响试验结果，其痛阈值按 60s 计算。4. 室温以 15左右为宜，过低动物反响迟钝，过高则敏感。5. 热板温度应保持在 55左右。附：智能热板仪使用 SOP1 开机翻开电源开关，机器自检，电源指示灯亮。2设置温度按下“温度”按钮，进入温度设定，此时间标移动到设定温度值处，系统默认目标温度为 55。通过“<”或“>”按钮，调整上升或降低所需温度，按“确定”键确认。本试验温度为 55。3. 设置日期按下“日期”按钮，进入日期设定，通过“<”或“>”按钮，调整日期和时、分、秒。按“确定”键确认。4. 预热本仪器需预热 10 分钟。5开头试验放入动物在热板上的同时，按下外接按钮或“启/停”按钮，系统自动开头计时、编号， 等观看到动物舔后足后，再次按下外接按钮或“启/停”按钮，计时完毕，此时，可从液晶 屏读取痛阈值。6查询先停顿试验，再按下“查询”按钮，可查询每个编号动物的痛阈值，用“<”或“>”按钮选择编号。按“确认”按钮，可退出查询状态。试验提示: 将小鼠置于预先加热到 55的金属板上，以热刺激小鼠足部可产生苦痛反应，通过测定小鼠痛阈(以消灭舔后爪的时间为指标)，比较给药组与比照组小鼠痛阈的差异，给药后痛反响时间延长 1 倍以上者，视为有镇痛作用。二化学刺激法试验目的：观看哌替定与阿司匹林对化学物质刺激致痛的影响。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：天平，鼠笼，lml 注射器 3 支，5 号针头，灌胃器。药品：0.7%醋酸溶液，0.2%哌替定溶液，0.4阿司匹林悬液，生理盐水。动物：小鼠，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：1. 取体重相近的小鼠 6 只，称重，编号，随机分为甲、乙、丙 3 组。2. 观看小鼠正常活动。3. 给药：甲组小鼠腹腔注射 0.2%哌替定溶液 1ml/10g，乙组 0.4阿司匹林悬液灌胃0.15ml/10g、丙组等体积生理盐水腹腔注射，记录给药时间。4. 给药后 30min，各组小鼠均腹腔注射 0.7%醋酸溶液 0.1ml/10g，观看 15min 内各组消灭扭体反响的动物数。将试验结果记录填写入下表：组别药物鼠数扭体反响数无扭体反响数镇痛百分数P 甲哌替定乙阿司匹林丙生理盐水注：药物镇痛百分率(P)给药组无扭体反响的动物生理盐水组无扭体反响的动物数×100P=生理盐水组扭体反响的动物数留意事项:1. 醋酸应在临用时配制，如放置过久，作用明显减弱。2. 室温不能低于 10，否则不易发生扭体反响。3. 给药组比比照组削减扭体发生率 50以上才能认为有镇痛作用。4. 小鼠体重轻，扭体反响发生率低。试验提示：某些化学物质(如酒石酸锑钾溶液、醋酸溶液、缓激肽等)注入小鼠腹腔内可刺激腹膜引起深部、大面积且长期的苦痛，致使小鼠产生扭体反响，表现为腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起等。假设试验组与比照组相比，扭体反响发生率削减50%以上者，认为该药物有镇痛作用。试验思考：1. 阐述哌替啶镇痛作用机制及其临床应用。2. 试述哌替定和阿司匹林作用的异同点？试验项六急支糖浆镇咳试验试验目的：把握小鼠引咳的病理模型及镇咳作用机制。学习用氨水引咳的方法；观看急支糖浆的镇咳作用。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、天平、棉花、大烧杯、注射器、灌胃器。药品：急支糖浆、生理盐水、浓氨水。动物：小鼠，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：取小鼠 4 只，随机分成 2 组，分别为急支糖浆 0.3ml/10g，以生理盐水为空白比照，灌胃给药后 15 分钟，置于布满氨气的烧杯中观看小鼠15 分钟内咳嗽埋伏及咳嗽次数。观看并记录结果：编号1234体重注射药物剂量咳嗽次数 咳嗽埋伏期【留意事项】1. 每只小鼠放入烧杯中时都要换棉球，而且浓氨水的量要准确。棉球的大小、松紧程度要适中，尽量全都。氨水 35 滴，不行浓度太高。烧杯不必倒扣。2. 观看并记录小鼠咳嗽时,最好要两个人在不同的角度同时进展观看,并且视线要与小鼠的嘴在同一水平,以免漏记。小鼠咳嗽很难听到声音，因此应留意观看，表现为猛烈腹肌收缩并张嘴。3. 埋伏期即把棉球放入后至第一次咳嗽的时间；试验提示：引咳刺激最常用的是化学物质刺激、机械刺激和电刺激。由于化学刺激物时作 用于呼吸道的感受器反射地引起咳嗽，凡能抑制咳嗽中枢或降低呼吸感受其敏感性的药物均能收到镇咳作用。小鼠吸入氨水后，刺激呼吸道粘膜感受器，反射性地引起咳嗽。试验思考：咳嗽发生的缘由是什么？除了氨水引咳外，还有什么其他方法？试验七耐缺氧试验试验目的：验证心得安普萘洛尔抗心肌缺氧作用。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、天平、广口瓶、注射器、灌胃器。药品：心得安，NaOH，Na CO23动物：小鼠，体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：1、分组、称重、标记：取小白鼠4 只，分为 2 组。2、给药：甲组灌胃心得安 0.2ml/10g，乙组灌胃等量生理盐水。3、15 分钟后甲乙两组小鼠分别取一只放入同一广口瓶，记录盖上盖子至小鼠呼吸停赶忙间。4、自己设计试验表格记录试验结果。【留意事项】1、小鼠在密闭环境中表现如嘴唇发紫，呼吸加促即为缺氧，留意观看。2、NaOH，Na2CO3 参与量不行太多，防止NaOH苛性钠烧灼小鼠爪及尾。参与目的是中和小鼠呼吸过程中产生的CO2，防止小鼠CO2 中毒。试验提示：试验思考：普萘洛尔有哪些药理作用？试验八 药物对凝血时间的影响试验目的：观看几种药物缩短或延长凝血时间的作用；学习测定小鼠凝血时间的方法。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：1 ml 注射器、5 号针头、毛细玻管内径 lmm、载玻片、弯头眼科镊子、秒表、鼠笼、棉球。药品：25g/l 止血敏溶液、100u/ml 肝素溶液、生理盐水。动物：小鼠 6 只， 体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：1. 毛细玻管法：取小鼠 6 只，称重后随即分成 3 组，做好标记。1、2 号小鼠腹腔注射止血敏 0.5mg/10g按 0.2ml/10g 给药；3、4 号小鼠腹腔注射肝素 20u/l0g按 0.2ml/10g 给药；5、6 号小鼠腹腔注射等容量(0.2m1/10g)生理盐水。30min 后，以毛细玻管作眼眶内毗穿刺，猎取长约5cm 的血柱。然后每隔 30s 折断毛细玻管一小截，观看有无粘丝状物凝血丝消灭。记录从毛细玻管采血至消灭凝血丝的时间，即为凝血时间。2. 玻片法：作眼眶内毗穿刺取血，分别滴两滴于清洁载玻片的两端血滴直径约5mm 左右。每隔30s 用枯燥针头挑动血液一次，有细丝消灭为凝血，记录凝血时间以两滴血的凝血时间均数计算。3、综合全班试验结果，分别计算三组小鼠的平均凝血时间，将结果填人下表。药物对小鼠凝血时间的影响药物动物数凝血时间min对凝血时间的影响(只)毛细玻管法玻片法止血敏肝素生理盐水【留意事项】1. 本试验宜在 15一 20室温进展。温度过低，凝血时间则延长。2. 如不便进展小鼠尾静脉注射，肝素亦可腹腔注射，但剂量须增加4 倍。3. 玻片法因混入的组织液较多，加之每次挑动，凝血时间可缩短，故准确性较差。试验提示：试验思考：酚磺乙胺和肝素对凝血时间各有何影响？作用机制如何？有哪些临床应用。试验九 药物对肠蠕动的影响试验目的：测定墨汁在胃肠道内的移动速度，观看药物对胃肠蠕动功能的影响。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：手术剪、眼科镊、直尺、l ml 注射器、小鼠灌胃器、鼠笼。药品：20%硫酸镁溶液、0.003%甲基硫酸斯的明溶液、0.02%硫酸阿托品溶液、生理盐水以上药物每 100m1 药液中加墨汁 2m1)。动物：小鼠 4 只， 体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：取空腹 12h 的小鼠 4 只，称重、标记。分别按以下方法灌胃给药：1 号鼠 20%硫酸镁 40mg/10g；2 号鼠 0.003%甲基硫酸斯的明 0.006mg/10g; 3 号鼠 0.02%硫酸阿托品0.04mg/10g；4 号鼠等容量0.2m1/10g生理盐水。给药后 40min 将小鼠颈椎脱臼处死， 马上剖腹，将小肠从幽门至回盲部全段剪下，剔除肠系膜，将肠管拉成直线，放于试验台上， 测量墨汁推动距离和小肠总长度。按以下公式计算墨汁推动百分率。墨汁推动距离cm墨汁推动百分率 x 100%小肠总长度cm将所测数据填人下表：药物对小鼠肠蠕动的影响鼠号 药物墨汁推动距离cm 小肠总长度cm 墨汁推动百分率1 硫酸镁2 斯的明3 阿托品4 生理盐水【留意事项】1. 给药量必需准确。2. 每鼠灌药与处死时间必需全都。3. 剪取肠管要避开牵拉，否则会影响测量长度的准确性。4. 肠管内墨汁推动可能有中断现象，应以推动最远处为测量终点。试验提示：试验思考：联系试验结果，争论所用药物对肠道平滑肌的作用及临床用途。试验十 肝脏功能状态对药物作用的影响试验目的：观看肝功能损害对戊巴比妥钠作用的影响；学习筛试肝功能保护药的方法。试验内容： 试验器材、药品和动物的预备器材：鼠笼、天平、注射器1ml、小鼠灌胃器、组织剪。药品：5%四氯化碳油溶液、0.3%戊巴比妥钠溶液、生理盐水。动物：小鼠 4 只， 体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：1、取正常小鼠和肝功能已被破坏的试验前48h 皮下注射 5%四氯化碳油溶液 0.1ml/10g 鼠各 2 只，称其体重。2、分别由腹腔注射0.3%戊巴比妥钠溶液 0.15m1/l0g45 mg/kg，观看动物反响。记录各鼠的翻正反射消逝的埋伏时间从腹腔注射该药到翻正反射消逝的间隔时间和持续时间从翻正反射消逝到翻正反射恢复的间隔时间。小鼠糊涂后，颈椎脱臼处死，剖取肝脏， 比较两组动物肝脏大小、颜色及充血程度。3、将试验结果整理记录下表：肝功能损害对戊巴比妥钠的影响组别鼠号体重给药时间翻正反射作用持续时间 肝脏肉眼观看正常组12肝损伤组 34【留意事项】g消逝时间 恢复时间min1. 如室温在 20以下，应给麻醉小鼠保暖，否则动物将因体温下降，代谢减慢而不易糊涂。2. 四氯化碳是一种肝脏毒物，其中毒动物常被作为中毒件肝炎的动物模型，用于观看肝脏功能状态对药物作用的影响及筛选和试验肝功能保护药。其油溶液可用植物油配制；亦可用甘油配成 5%的制剂，试验前 24h 皮下注射 0.08m1/l0g。3. 四氯化碳中毒小鼠的肝脏比较肿大，有的充血，有的变成灰黄色，触之有油腻感，其小叶比正常肝脏更清楚。试验提示： 试验思考：1. 为什么损害肝脏的小鼠注射戊巴比妥钠后作用维持时间延长？2. 争论肝功能与临床用药的关系。试验十一抗疲乏作用试验试验目的：学习小白鼠游泳抗疲乏试验方法，了解人参蜂王浆抗疲乏作用。试验内容：试验器材、药品和动物的预备器材：恒温水浴箱、1g 铅块、鼠笼、天平、注射器1ml、小鼠灌胃器。药品：人参蜂王浆口服液、生理盐水。动物：小鼠 4 只， 体重 1822g，雌雄不拘。试验步骤：取小鼠 4 只，体重 1822g，雌雄均可，称重后随即分两组，一组为给药组，灌胃赐予人参蜂王浆 0.03ml/g，比照组给等容积生理盐水，用药后30min，将小鼠尾附加1g 铅块，后将小鼠放入调好的恒温水浴箱中，水温25±1,水深 20cm，观看小鼠放入水中至溺死的时间，最终汇总全部试验结果，进展统计学处理。【留意事项】1. 每鼠负重铅块绑缚尾中部，没鼠距尾根部距离要相等。2. 避开鼠尾绞附一起。试验提示：以小鼠游泳为抗疲乏指标，补益药等具抗疲乏作用的药物可延长小鼠游泳时间。试验思考：1、人参蜂王浆抗疲乏作用如何？2、解释人身蜂王浆为何具此作用？试验体会:试验报告:1、集中全班各组数据进展统计学检验。2、设计试验报告表格。试验十二传出神经对兔血压的影响试验目的：观看传出神经系统药物对血压的影响和该系统药物之间的相互作用。试验内容：试验器材、药品和动物的预备器材：注射器、手术台、小剪刀、手术刀、气管套管、粗线、动脉夹、动脉套管、检压剂、心电图机、止血钳、滴定管。药品：20%乌拉坦、生理盐水、0.01%肾上腺素、0.01%去甲肾上腺素、0.005%异丙肾上腺素、0.5%酚妥拉明、0.1%心得安、0.5%肝素、生理盐水。动物：家兔。试验步骤：1、家兔称重后，以 20%乌拉坦 5ml/kg 麻醉后，将动物仰卧位固定于手术台上。2、剪去颈部毛，切开颈部正中皮肤，于气管旁分别出一侧颈总动脉，将远心端结扎， 在距 35cm 的近心端处，用动脉夹夹住动脉，阻断血流，然后在靠近结扎线处用眼科剪刀剪一小口，将其连于微动力感受器并已布满0.5%肝素钠的动脉套管朝向心方向插入颈总动 脉内，并扎紧。3、缓慢放开动脉夹，描记正常血压，待血压稳定后开头沿耳缘静脉给药，每给一种药物应待前一种药物作用完全消逝后，再给下一种药物。10.01%肾上腺素 0.3ml/kg20.01%去甲肾上腺素 0.3ml/kg30.005%异丙肾上腺素 0.3ml/kg40.5%酚妥拉明 0.3ml/kg 缓慢注入， 0.01%肾上腺素 0.3ml/kg50.1%心得安 0.3ml/kg 缓慢注射。【留意事项】1、麻醉药不宜超量，且亲热留意试验动物的呼吸状况。2、试验所用药物溶液均应在临用前配制，以确保试验结果。试验提示：血压的变化主要受每分输出量、外周阻力、体循环血量充盈压三个因素的影响。传出神经系统药物通过拟似或拮抗神经递质，作用于分布在心血管上的肾上腺素受体或胆碱受体，来影响心肌收缩力、血管舒缩程度和循环血量充盈程度进而上升或降低血压。试验思考：1、比较拟肾上腺素药对血压、心率的影响有何不同，分析其作用原理。2、比较拟胆碱药对血压、心率的影响有何不同，分析其作用原理。试验体会:试验报告:1、集中全班各组数据进展统计学检验。2、设计试验报告表格。