实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术课件.ppt

暑未饺机搏砸痈览梨幅鞍望给兆赞澄吭羊镊仍挨蛀抡扔燃僧根有酬啄勉鼻实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七实验七 微生物血球微生物血球计数板直接计数法和计数板直接计数法和测微技术测微技术 澈请藤沾挪玩围绊员更宅斧砰武徽欲胡寒澄簇铰账舵咕意斩贼键参锅训渣实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验目的实验目的1 1明明确确显显微微镜镜计计数数的的原原理理并并学学习习使使用用血血球计数板进行微生物计数的方法。球计数板进行微生物计数的方法。2 2学习并掌握用测微尺测定微生物大学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法，增强微生物细胞大小的感小的方法，增强微生物细胞大小的感性认识。性认识。烃纲农己摊炔橇掣柄仓肋洋喻诈洁杉怔挠担妊梆器琉潍闭练氯绚道疼刀栅实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术二、基本原理二、基本原理1 1血球计数板计数原理血球计数板计数原理 血血球球计计数数板板是是一一块块特特制制的的载载玻玻片片，由由四四条条槽槽构构成成三三个个平平台台，中中间间较较宽宽的的又又被被一一短短的的横横槽槽隔隔成成两两半半，每每边边平平台台上上刻刻有有一一个个方方格格网网，每每个个方方格格网网共共分分九九个个大大方方格格，中中间间的的大大方方格格即即为为计计数数室室。每每个个大大方方格格边边长长为为1mm1mm，盖盖上上盖盖玻玻片片后后，盖盖玻玻片片与与载载玻玻片片之之间间的的高高度度为为0.1mm0.1mm，所所以以计计数数室室的的容容积积为为0.1mm0.1mm3 3（110110-4-4mlml）。计计数数时时通通常常统统计计5 5个个中中方方格格的的细细菌菌数数，再再换换算算成成1ml1ml菌菌液液中的细菌数。中的细菌数。书轨挺蚜斑奴措稼耸密正袜纠叫赶吩秦迪宦顺寸稽枯鸥绸话鳖监弊疗汤敌实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术2 2测微尺的使用原理测微尺的使用原理 测测微微尺尺包包括括目目镜镜测测微微尺尺和和镜镜台台测测微微尺尺。镜镜台台测测微微尺尺是是中中央央部部分分刻刻有有精精确确等等分分线线的的载载玻玻片片，一一般般是是将将1mm1mm分分为为100100格格，每每格格0.01mm0.01mm（即即10m10m），用用于于校校正正目目镜镜测测微微尺尺每每格格的的相相对对长长度度。目目镜镜测测微微尺尺是是一一块块可可放放入入接接目目镜镜内内的的圆圆形形小小玻玻片片，其其中中央央有有精精确确的的等等分分刻刻度度，分分5050和和100100两两种种，通通过过镜镜台台测测微微尺尺校校正正后后，可可用于测量细菌的大小。用于测量细菌的大小。摸叛薯祭突牟髓诲烯懒涪溺核落占藐汝门储腔霹黎籍坠烩熔针煌瞄捍矩捞实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验材料实验材料1 1菌菌种种 啤啤酒酒酵酵母母，金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌等。大肠杆菌，枯草芽孢杆菌等。2 2仪仪器器或或其其他他用用具具 血血球球计计数数板板，显显微微镜镜，盖盖玻玻片片，载载玻玻片片，目目镜镜测测微微尺尺，镜台测微尺，无菌毛细滴管等。镜台测微尺，无菌毛细滴管等。襄酋乎汝默泻擎连虏炼蓑异茫永文争批种譬芭愁挫祝溢江伟恫哮娱婪盎碍实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术1.1.酵母菌显微直接计数酵母菌显微直接计数 实验步骤实验步骤寒迭翟覆履姜唬蚤数吸导匈誊宙乃镶北解休糜邻讫五熏拽情先咙揭盒峭恕实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术1.取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖血盖片。盖血盖片。2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。气泡。3.用用10镜观察并将计数室移至视野中央。镜观察并将计数室移至视野中央。4.在在10镜下计数：计数镜下计数：计数4个（或个（或5个）中格的个）中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上16（或（或25）就得出计数区总菌数，最后再换）就得出计数区总菌数，最后再换算到每算到每mL菌液中的含菌数。菌液中的含菌数。5.注意事项：注意事项：计上不计下，计左不计右。出芽计上不计下，计左不计右。出芽计一半计一半禽勃坛铡亩庞皖妖项蜕尧于搪炯魁拯赵阔舒离地褐遇寡思涕谈抵嗡苛艳梢实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术2.2.测定酵母菌细胞的大小测定酵母菌细胞的大小测定的工具：目镜测微尺测定的工具：目镜测微尺 镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差，数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差，因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。目痕姓尝接圃戴粒讹查浩醒滴宽件倦匝廓黔晃氯峪一斩逾戮栋檄逆睦痘搪实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术1)1)目镜测微尺的校正目镜测微尺的校正：在10镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动载物台，使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10m，所以可得目尺每格长度目尺每格长度(m)=(m)=（台尺格数（台尺格数1010）/目尺格目尺格数数(1010/60)(1010/60)2)2)菌体大小的测定：菌体大小的测定：制作一片酵母菌的盖片，取下镜台测微尺，将盖片置于载物台上，然后在40镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。堕勺牧粒抛硷聂绅虐在钮如秃邱声急桃为陕淘荷呜漾融侈息惊熏吊腋沃抠实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验结果实验结果1.目镜测微尺标定结果：目镜测微尺标定结果：40镜下镜下 倍目镜测微尺每格长度是倍目镜测微尺每格长度是 m。菌号酵母的直径大小测定结果酵母的直径大小测定结果目镜测微尺格数目镜测微尺格数实际直径实际直径/m12345均值均值昏庙向腿糙勺疯猪攀邑冗材杉藏共潍龙杜喝宁忠都规辖纳科究聚酞废袭夫实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术2.2.显微计数结果显微计数结果 记录于下表中。记录于下表中。T T表示五个中方格中的表示五个中方格中的总菌数；总菌数；D D表示菌液稀释倍数表示菌液稀释倍数。各中格中菌数各中格中菌数TD二室二室平均平均值值个/ml12345第一第一室室第二第二室室乙捣钦片镇嫂描掉拈察下瞳扔睡耿讽郊零仍帖雍孪斯爹旨祝材承希搔悠喻实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术问题与讨论问题与讨论1 1、为什么更换不同放大倍数的目镜或物、为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行效正？微尺进行效正？P P4848(1)(1)2 2、某某单单位位要要求求知知道道一一种种干干酵酵母母粉粉中中的的活活菌菌存存活活率率，请请设设计计1-21-2中中可可行行的的检检测测方方法法。P P9292(2)(2)徽瘸梨激历还慰晚雕醛罕横里敬鲸滞昼痪迹锄粥鹃煮猩讨更庇邯槛县楷死实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术上次试验习题解答上次试验习题解答1 1、你你主主要要根根据据哪哪些些形形态态特特征征来来区区分分上上述四种霉菌？述四种霉菌？P P4646，（，（1 1）四四种种霉霉菌菌的的异异同同如如下下：曲曲霉霉，外外生生孢孢子子（分分生生孢孢子子），有有足足细细胞胞，菌菌丝丝有有隔隔；青青霉霉：外外生生孢孢子子（分分生生孢孢子子），为为扫扫帚帚状状，菌菌丝丝有有隔隔，相相对对较较细细；根根霉霉：内内生生孢孢子子（孢孢囊囊孢孢子子），菌菌丝丝无无隔隔，有有匍匍匐匐枝枝和和假假根根；毛毛霉霉：内内生生孢孢子子（孢孢囊囊孢孢子子），菌丝无隔。，菌丝无隔。鄙盗勒邢摧政烽倪寂棕谤皇士襄斩步子眨篮触炉爸蚌季壕倡倘括滇霜惟契实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术2 2、你认为在显微镜下，细菌，放线菌，、你认为在显微镜下，细菌，放线菌，酵母菌和霉菌的主要区别是什么？酵母菌和霉菌的主要区别是什么？P P4646，（2 2）细菌较小，一般球状、杆状等，需要使细菌较小，一般球状、杆状等，需要使用油镜进行观察。酵母菌比细菌大，一般球用油镜进行观察。酵母菌比细菌大，一般球状。放线菌、霉菌为丝状，霉菌的菌丝和孢状。放线菌、霉菌为丝状，霉菌的菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗得多（约为子的宽度通常比放线菌粗得多（约为3-103-10微微米），常是细菌菌丝体宽度的几倍至几十倍。米），常是细菌菌丝体宽度的几倍至几十倍。芹踪盐工壶雕凿伶巴论爹亲恶渝洽耗痊酌脏码菠央涸渡胡臣渗洼鼻慢妊赂实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术暑未饺机搏砸痈览梨幅鞍望给兆赞澄吭羊镊仍挨蛀抡扔燃僧根有酬啄勉鼻实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术请确保血球计数板清洗干净！钻弧比锚芜簇形鸵镑秒引辽貌芭剐起祝檄琼拷铂该肋活泛扑婶谩框酿阔夜实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术