抗生素类药物的分析(2).ppt

第九章第九章抗生素类药物的分析抗生素类药物的分析应化教研室应化教研室孟小华孟小华主要内容主要内容-内内酰胺胺类药物分析物分析12氨基糖苷氨基糖苷类药物分析物分析3四四环素素类药物分析物分析抗生素的定义：抗生素的定义：抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。有特异抑制作用的化学物质的总称。抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。内酰胺类、氨基糖苷类、内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、四环素类、大环内酯类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类林可霉素类、其他抗生素类林可霉素类、其他抗生素类抗生素的分类抗生素的分类（按结构与性质）：（按结构与性质）：内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素青霉素类青霉素类头孢菌素类头孢菌素类一、结构与性质一、结构与性质青霉素青霉素氨苄西林氨苄西林阿莫西林阿莫西林头孢氨苄头孢氨苄内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素与碱金属与碱金属(Na+、K+)成盐成盐1.1.酸性酸性 易溶于水易溶于水 化学性质化学性质内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素与有机碱成盐与有机碱成盐难溶于水、易溶于有机溶剂难溶于水、易溶于有机溶剂 普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素青霉素钾青霉素钾内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素2.旋光性旋光性头孢菌素类头孢菌素类C6C7青霉素类青霉素类C3C5C6 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素3.紫外吸收特征紫外吸收特征 头孢菌素类头孢菌素类母核有共轭体系母核有共轭体系青霉素类青霉素类母核无明显母核无明显UV多数有苯环取代基多数有苯环取代基内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素4.内酰胺环不稳定内酰胺环不稳定 不稳定性因素不稳定性因素 四元环张力大四元环张力大酰胺键易水解酰胺键易水解Na+K+内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素1.K+、Na+反应反应+0.1%四苯硼钠四苯硼钠+Ac白白+醋酸氧铀锌醋酸氧铀锌黄黄 焰色焰色鲜黄色鲜黄色焰色焰色紫色紫色二、鉴别试验二、鉴别试验内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素（1）羟肟酸铁反应）羟肟酸铁反应NaOH2.呈色反应呈色反应氨苄西林氨苄西林-紫红紫红;头孢氨苄头孢氨苄-褐色褐色-内酰胺内酰胺 H2NOH羟肟酸羟肟酸 高铁离子高铁离子HCl有色络合物有色络合物内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素头孢菌素类头孢菌素类（2）硫酸）硫酸-硝酸的呈色反应硝酸的呈色反应头孢氨苄头孢氨苄 头孢噻吩钠头孢噻吩钠 头孢噻肟钠头孢噻肟钠 亮黄亮黄 H2SO4-HNO3黄色黄色红棕红棕(3)茚三酮茚三酮反应反应-氨基酸、羟胺、伯胺氨基酸、羟胺、伯胺内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素H2OH2O蓝紫色蓝紫色内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素3.沉淀反应沉淀反应在过量在过量在过量在过量HClHCl或或或或有机溶剂中溶解有机溶剂中溶解有机溶剂中溶解有机溶剂中溶解青霉素钠青霉素钠青霉素钾青霉素钾H+青霉素青霉素白白红红普鲁卡因普鲁卡因青霉素青霉素普鲁卡因普鲁卡因青霉素青霉素重氮化重氮化-偶合反应偶合反应+H+三、含量测定三、含量测定碘量法、汞量法、酸碱滴定法碘量法、汞量法、酸碱滴定法紫外紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法可见分光光度法、高效液相色谱法内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素空白试验空白试验消除降解杂质的干扰消除降解杂质的干扰对照试验对照试验消除试验可变因素的影响消除试验可变因素的影响1.碘量法碘量法青霉素族青霉素族头孢菌素族头孢菌素族OH-水解水解S（还原性）（还原性）I2（过量定量）（过量定量）氧化氧化-还原反应还原反应水解反应水解反应(按化学计算量进行按化学计算量进行)内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素pH=4.5内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素供试品供试品WTNaOH水解产物水解产物过量过量I2Na2S2O3VTVT0对照品对照品WSVsVs0测定方法测定方法 含量已知为含量已知为S供试品供试品WT过量过量I2Na2S2O3【计算示例计算示例】称头孢氨苄供试品称头孢氨苄供试品0.1060g，按中国药典，按中国药典（1995）测定含量，消耗硫代硫酸钠滴定液）测定含量，消耗硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）12.68mL，空白试验消耗，空白试验消耗24.86mL，另，另称头孢氨苄对照品（含量称头孢氨苄对照品（含量99.89%）0.1020g，同时测定，同时测定，消耗硫代硫酸钠滴定液（消耗硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L）13.16mL，空白空白试验消耗试验消耗24.86mL,求头孢氨苄供试品的百分含量。求头孢氨苄供试品的百分含量。内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素青霉素族青霉素族空白试验空白试验2.汞量法汞量法(电位滴定法电位滴定法)内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素碱性碱性水解、酸化水解、酸化青霉噻唑酸青霉噻唑酸脱羧脱羧水解水解青霉醛青霉醛青霉胺青霉胺R-SHHg2+(RS)2Hg第一次电位突变第一次电位突变Hg2+第二次电位突变第二次电位突变青霉胺络汞青霉胺络汞RSH:Hg2+=2:1RSH:Hg2+=1:1以未经水解的样品作空白测定以未经水解的样品作空白测定NaOHpH4.6脱羧脱羧Hg(NO3)2pH4.6青霉胺络汞青霉胺络汞Hg(NO3)2pH4.6内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素水解水解测定及计算测定及计算内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素样品样品水解水解硝酸汞滴定硝酸汞滴定V样（总）样（总）V降降硝酸汞滴定硝酸汞滴定样品样品【计算示例计算示例】称取水分含量为称取水分含量为5%的青霉素供试品的青霉素供试品50.0mg，按药典规定测定总青霉素含量时，用去硝酸，按药典规定测定总青霉素含量时，用去硝酸汞滴定液（汞滴定液（0.02mol/L）6.97mL,。另称取上述供试品。另称取上述供试品500.0mg，按药典规定测定降解物含量时，用去硝酸汞，按药典规定测定降解物含量时，用去硝酸汞滴定液（滴定液（0.02mol/L）1.33mL，求供试品中青霉素的，求供试品中青霉素的百分含量。百分含量。内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素中和中和原理：原理：内酰胺环可被碱定量水解内酰胺环可被碱定量水解内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素3.酸碱滴定法酸碱滴定法水解水解两步滴定法两步滴定法-COOHNaOH-COONa 中性中性内酰胺内酰胺NaOH定量过量定量过量HCl滴定滴定剩余碱剩余碱空白试验空白试验消除试剂的干扰消除试剂的干扰（1）酸水解法（铜盐法）酸水解法（铜盐法）320360nm4.紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素青霉素族青霉素族青霉素族青霉素族pH=4水解水解青霉烯酸青霉烯酸（不稳定）（不稳定）Cu2+青霉烯酸络铜青霉烯酸络铜320nm A320（2）硫醇汞盐法）硫醇汞盐法青霉烯酸硫醇汞盐青霉烯酸硫醇汞盐青霉素族青霉素族咪唑咪唑HgCl2325-345nm1碘与青霉噻唑酸的反应是在碘与青霉噻唑酸的反应是在A强酸性中进行强酸性中进行B在强碱性中进行在强碱性中进行CpH=4.5缓冲液中进行缓冲液中进行D中性中进行中性中进行2-内酰胺类抗生素可用的鉴别方法为内酰胺类抗生素可用的鉴别方法为A沉淀反应沉淀反应B焰色反应焰色反应C茚三酮茚三酮反应反应D羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应思考题思考题3汞量法测定汞量法测定内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素A、以硝酸汞为滴定剂、以硝酸汞为滴定剂B、电位法指示终点、电位法指示终点C、滴定出现二个突跃、滴定出现二个突跃D、以第一个突跃为滴定终点、以第一个突跃为滴定终点E、青霉素分子不与汞盐反应、青霉素分子不与汞盐反应5青霉素具有下列哪类性质青霉素具有下列哪类性质A含有手性碳，具有旋光性含有手性碳，具有旋光性B分子中的环状部分无紫外吸收，但侧链部分有紫外吸收分子中的环状部分无紫外吸收，但侧链部分有紫外吸收C分子中的环状部分在分子中的环状部分在260nm处有强紫外吸收处有强紫外吸收D具有碱性，不能与无机酸形成盐具有碱性，不能与无机酸形成盐青霉素和头孢菌素都具有旋光性，因为青霉素分子中含青霉素和头孢菌素都具有旋光性，因为青霉素分子中含有有个手性碳原子，头孢菌素分子含有个手性碳原子，头孢菌素分子含有个手性碳原子。个手性碳原子。4-内酰胺类药物含量测定的方法有内酰胺类药物含量测定的方法有A高效液相色谱法高效液相色谱法B硫醇汞盐法硫醇汞盐法C电位配位滴定法电位配位滴定法D碘量法碘量法思考题思考题