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食品中微生物检测能力验证结果 打开文本图片集 摘 要：为提高食品微生物检测实力，靖边县食品检验检测中心参与CNAS组织的微生物检测实力验证，对PTA菌落总数、沙门氏菌样品进行检测鉴定，均得到满足结果。 关键词：食品;微生物;实力验证;菌落数;沙门氏菌1 材料方法1.1 检测样品检测对象是3个冷冻干燥样品，分别是PTA菌落总数、沙门氏菌PTB-1，沙门氏菌PTB-21。分别在样品中加入10 mL生理盐水，混合匀称即为待测原液。培育基包括平板计数琼脂（PCA）、沙门氏菌显色培育基等;细菌微量鉴定管包括赖氨酸生化管、氰化钾比照管、蛋白胨水等;肠炎沙门氏菌阳性标准菌株，由中国工业微生物菌种保管中心供应;革兰氏阴性菌鉴定卡，来源于法国梅里埃公司;沙门氏菌诊断血清，来源于天润药物公司。1.2 仪器设备检测仪器包括生物平安柜、细菌鉴定仪、生化培育箱、全自动微生物鉴定/药敏分析系统等。1.3 PTA菌落数计数方法在PTA菌落总数原液中，取1 mL菌液加入9 mL生理盐水，匀称混合制成1×10-1稀释液;经梯度稀释制成1×101×10-6 7个稀释样品。运用无菌吸管，从每个稀释液中取出1 mL，置于无菌平皿中，并吸取1 mL空白稀释液作为比照。每个平皿倾注1520 mL的PCA，冷却处理后，在凝固琼脂表面覆盖一层薄PCA，防止充满菌落生长。琼脂凝固后，翻转平板，在36 条件下培育48 h，取出后计数。1.4 沙门氏菌鉴定方法根据指导书将10 mL样品原液转到225 mL的BPM增菌液上，并进行阳性比照，在36 条件下培育18 h。取1 mL前增菌培育物，在10 mLTTB内进行转种，在42 条件下培育18 h;另取1 mL前增菌培育物在10 mL SC内进行转种，在36 条件下培育18 h。分别时，运用接种环取TTB、SC增菌液各一环，接种在BS、HE琼脂、XLD琼脂以及沙门氏菌显色培育基上，在36 条件下培育18 h。2 结果分析2.1 PTA菌落数选择菌落数在350730 CFU/mL的10-1稀释度平板4个，计算平均值作为菌落总数，结果显示为580 CFU/mL。检测操作时，运用的平板计数琼脂来源于2个厂家，每个稀释度做4个平板，可在菌体浓度未知时，防止漏检现象，保证检测结果的精确性2。取4个培育基的平均值，即580 CFU/mL，得到比分值（Z）为0.8，满意"Z|2的要求，是满足的结果。2.2 沙门氏菌2.2.1 培育结果PTB-1在HE上培育出粉红色菌落，在BS平板上培育出灰黑色菌落，在XLD平板上培育出黄白色菌落。PTB-2在BS平板上培育出黑色菌落，在HE平板上培育出黑色菌落，在XLD平板上培育出黑色菌落。2.2.2 生化试验根据国家标准“食品微生物检验沙门氏菌检验”，开展生化试验，分别菌株的结果见表1，其中阳性为“+”，阴性为“-”。分析可知，PTB-1初步鉴定为非沙门氏菌，PTB-2、阳性比照组初步鉴定为沙门氏菌属。2.2.3 生化鉴定在沙门氏菌显色培育基上，选择至少3个典型的可疑菌落，接種TSI、NA，在36 条件下培育18 h，利用全自动微生物生化鉴定/药敏分析系统进行鉴定。取PTB-1、PTB-2、阳性比照菌株，接种在TSA平板上，在37 条件下培育18 h，运用生理盐水制成菌悬液，测定菌液浓度，并进行系统鉴定。结果显示，全自动细菌鉴定仪的报告中，PTB-2是沙门氏菌书的可能性为101%，鉴定等级是相当好;PTB-1是肠杆菌，可能性为101%，鉴定等级是相当好;阳性标准菌株是沙门氏菌属，可能性为101%，鉴定等级是相当好。2.2.4 血清学鉴定取少量纯培育被检菌苔，运用沙门氏菌诊断血清进行鉴定，开展玻片凝集试验，结果显示完全符合。2.2.5 鉴定报告综合生化鉴定、血清学鉴定结果，得出结论：样品PTB-1沙门氏菌，未检出;样品PTB-2沙门氏菌，检出。本次检测结果和CNAS指定值是满足的结果。3 结语本次检测实力验证中，采纳多种检验方法，例如多平行样本、多稀释度样品，保证了检验结果的精确性。检测中心的结果，均和CNAS指定值符合，检验中的阅历总结如下：PTA菌落数检验中，运用不同厂家生产的PCA，且稀释度样品要匀称混合;平板计数琼脂凝固后，再覆盖一层薄琼脂，能避开菌落扩散;沙门氏菌属检验中，要留意视察不同平板上的菌落特征，避开漏检;同时运用显色培育基、全自动卫生区生化鉴定/药敏分析系统，能进一步提高检验结果的精确性。通过本次验证，可增加试验室的检验实力和竞争力，不断提升检验技术水平。参考文献1潘芳妮.浅析食品微生物检验内容及检测技术J.大科技，2022，（32）：266-267.2姜俊丽.微生物检测技术在食品平安检测中的运用与发展探讨J.中国保健养分，2022，29（32）：136-137.第5页 共5页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页