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    分子课后习题答案.pdf

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    分子课后习题答案.pdf

    参 考 答 案 绪 论 1.你 对 现 代 分 子 生 物 学 的 含 义 和 包 括 的 研 究 范 围 是 怎 么 理 解 的?提 示:分 子 生 物 学 是 从 分 子 水 平 研 究 生 命 本 质 的 一 门 新 兴 的 学 科,是 研 究 核 酸、蛋 白 质 等 生 物 大 分 子 的 结 构 与 功 能,并 从 分 子 水 平 阐 述 蛋 白 质 与 核 酸、蛋 白 与 蛋 白 之 间 相 互 作 用 的 关 系 及 其 基 因 表 达 调 控 机 理 的 学 科。2.分 子 生 物 学 发 展 前 景 如 何?提 示:分 子 生 物 学 是 当 前 生 命 科 学 中 发 展 最 快 并 正 与 其 他 学 科 广 泛 交 叉、渗 透 的 重 要 前 沿 领 域。分 子 生 物 学 是 一 个 非 常 年 轻 的 学 科,但 是 有 丰 富 的 历 史,并 且 以 惊 人 的 速 度 发 展。分 子 生 物 学 的 发 展 速 度 和 其 强 有 力 的 技 术 使 很 多 学 者 认 为 它 是 一 场 革 命。今 后 几 十 年 药 物 和 农 业 的 发 展 很 大 程 度 上 依 赖 于 分 子 生 物 学 家 对 基 因 的 操 纵,这 场 革 命 将 涉 及 到 每 个 人 的 生 活。所 以 我 们 正 在 从 事 一 项 尖 端 的 有 重 要 意 义 的 研 究。哈 佛 大 学 的 F.H.Westheimer教 授 说 到:“后 四 十 年 的 知 识 革 命 可 能 发 生 在 生 物 学 领 域,今 天 如 果 有 人 对 分 子 生 物 学 一 无 所 知,简 直 令 人 无 法 想 象。”3、谈 一 谈 你 对 人 类 基 因 组 计 划 完 成 的 社 会 意 义 和 科 学 意 义 的 认 识?提 示:人 类 基 因 组 计 划 在 科 学 上 的 目 的,是 测 定 组 成 人 类 基 因 组 的 30亿 个 核 甘 酸 的 序 列。从 而 奠 定 阐 明 人 类 所 有 基 因 的 结 构 与 功 能,解 读 人 类 的 遗 传 信 息,揭 开 人 类 奥 秘 的 基 础。由 于 生 命 物 质 的 一 致 性 与 生 物 进 化 的 连 续 性,这 就 意 味 着 揭 开 生 命 最 终 奥 秘 的 关 键,也 就 是 人 类 基 因 组 计 划 的 所 有 理 论、策 略 与 技 术,是 在 研 究 人 类 这 最 为 高 级、最 为 复 杂 的 生 物 系 统 中 形 成 的。规 模 化 就 是 随 着 人 类 基 因 组 计 划 的 启 动 而 诞 生,随 着 人 类 基 因 组 计 划 的 进 展 成 功 而 发 展 的“基 因 组 学”。生 物 学 家 第 一 次 从 整 个 基 因 组 的 规 模 去 认 识、去 研 究,而 不 是 大 家 分 头 一 个 一 个 去 发 现,基 因 研 究 将 是 基 因 组 学 区 别 于 基 因 组(genetics)与 所 有 涉 及 基 因 的 学 科 的 主 要 地 方。基 因 组 规 模 也 改 变 了 经 典 的 实 验 室 规 模,改 变 了 原 有 的 实 验 方 式,这 也 许 是“国 际 人 类 基 因 组 计 划”只 有 6 个 正 式 成 员 国 与 16个 中 心 的 原 因 之 一。生 物 的 序 列 化 即 生 命 科 学 以 序 列 为 基 础。这 是 新 时 代 的 生 命 科 学 区 别 于 以 前 的 生 物 学 的 最 主 要 的 特 点。随 着 人 类 基 因 组 序 列 图 的 最 终 完 成,SNP(单 核 甘 酸 多 态 性,即 序 列 差 异)的 发 现 以 及 比 较 基 因 组 学 古 代 DNA、食 物 基 因 组 计 划”、“病 原 与 环 境 基 因 组 计 划”(主 要 是 致 命 致 病 学)以 及 与 之 有 关 的 人 类 易 感 性 有 关 序 列 的 推 进,有 科 学、经 济、医 学 意 义 的 主 要 物 种 的 基 因 组 序 列 图 都 将 问 世。我 们 从 序 列 中 得 到 的 信 息,已 经 比 到 现 在 为 止 的 所 有 生 物 研 究 积 累 的 信 息 还 要 多。生 物 学 第 一 次 成 为 以 数 据(具 体 的 序 列 数 据)为 根 据 与 导 向,而 不 是 再 以 假 说 与 概 念 为 导 向 的 科 学。即 使 进 化 这 一 生 命 最 实 质 的 特 征 以 及 进 化 的 研 究,都 把 因 多 种 模 式 及 其 他 生 物 的 基 因 组 序 列 为 基 础。古 代 DNA的 研 究,也 不 再 是 因 时 间 与 过 去 了 的 环 境 而 惟 一 不 能 在 实 验 室 重 复 的 进 化 研 究,从 而 揭 示 生 命 进 化 的 奥 秘 与 古 今 生 物 的 联 系。这 就 帮 助 人 们 更 好 地 认 识 人 类 在 生 物 世 界 中 的 关 系。染 色 体 与 DNA名 词 解 释 半 保 留 复 制(简 称 复 制)(semiconservative replication):亲 代 双 链 DNA以 每 条 链 为 模 板,按 碱 基 配 对 原 则 各 合 成 一 条 互 补 链,这 样 一 条 亲 代 DNA双 螺 旋,形 成 两 条 完 全 相 同 的 子 代 DNA螺 旋,子 代 DNA分 子 中 都 有 一 条 合 成 的“新”链 和 一 条 来 自 亲 代 的 旧 链,称 为 半 保 留 复 制。2、解 旋 酶(helicase):是 一 类 通 过 水 解 ATP提 供 能 量,使 DNA双 螺 旋 两 条 链 分 开 的 酶,每 解 开 一 对 碱 基,水 解 2 分 子 ATP。3、单 链 DNA结 合 蛋 白(single-strand binding protein,SSB):是 一 类 特 异 性 和 单 链 区 DNA结 合 的 蛋 白 质。它 的 功 能 在 于 稳 定 DNA解 开 的 单 链,阻 止 复 性 和 保 护 单 链 部 分 不 被 核 酸 酶 降 解。4、DNA聚 合 酶(DNA polymerase):指 以 脱 氧 核 甘 三 磷 酸 为 底 物,按 5-3 方 向 合 成 DNA的 一 类 酶,反 应 条 件:4 种 脱 氧 核 甘 三 磷 酸、悔+、模 板、引 物。DNA聚 合 酶 是 多 功 能 酶,除 具 有 聚 合 作 用 外,还 具 有 其 它 功 能,不 同 DNA聚 合 酶 所 具 有 的 功 能 不 同。5、DNA连 接 酶(DNA ligase):是 专 门 催 化 双 链 DA中 缺 口 共 价 连 接 的 酶,不 能 催 化 两 条 游 离 的 单 链 DNA链 间 形 成 磷 酸 二 酯 键。反 应 需 要 能 量。6、复 制 叉(replication fork):复 制 中 的 DNA分 子,末 复 制 的 部 分 是 亲 代 双 螺 旋,而 复 制 好 的 部 分 是 分 开 的,由 两 个 子 代 双 螺 旋 组 成,复 制 正 在 进 行 的 部 分 呈 丫 状 叫 做 复 制 叉。7、前 导 链(leading strand):在 DNA复 制 过 程 中,以 亲 代 链(3-5 为 模 板 时,子 代 链 的 合 成(5-3)是 连 续 的.这 条 能 连 续 合 成 的 链 称 前 导 链。8、冈 崎 片 段(Okazaki fragment):在 DNA复 制 过 程 中,以 亲 代 链(5-3)为 模 板 时,子 代 链 的 合 成 不 能 以 3-5 方 向 进 行,而 是 按 5-3 方 向 合 成 出 许 多 小 片 段,因 为 是 冈 崎 等 人 研 究 发 现,因 此 称 冈 崎 片 段。由 许 多 冈 崎 片 段 连 接 而 成 的 子 代 链 称 为 后 随 链。9、后 随 链(lagging strand):由 许 多 冈 崎 片 段 连 接 而 成 的 子 代 链 称 为 后 随 链。10 逆 转 录(reverse transcription):以 RNA为 模 板 合 成 DNA的 过 程。11、突(mutation):基 因 组 DNA顺 序 上 的 任 何 种 改 变 都 叫 做 突 变。分 点 突 变 和 结 构 畸 变。12、光 裂 合 酶 修 复(又 称 光 复 活)(photoreactivation):可 见 光 将 光 裂 合 酶 激 活,它 分 解 DNA上 由 紫 外 线 照 射 而 形 成 的 喀 咤 二 聚 体,使 它 们 恢 复 成 两 个 单 独 的 嗑 咤 碱。13、切 除 修 复(excision repair):在 一 系 列 酶 的 作 用 下,将 DNA分 子 中 受 损 伤 部 分 切 除,以 互 补 链 为 模 板,合 成 出 空 缺 的 部 分,使 DNA恢 复 正 常 结 构 的 过 程。14、重 组 修 复(recombination repair):DNA在 有 损 伤 的 情 况 下 也 可 以 复 制,复 制 时 子 代 链 跃 过 损 伤 部 位 并 留 下 缺 口,通 过 分 子 间 重 组,从 完 整 的 另 一 条 母 链 上 将 相 应 的 核 甘 酸 序 列 片 段 移 至 子 链 缺 口 处,然 后 用 再 合 成 的 多 核 甘 酸 的 序 列 补 上 母 链 的 空 缺,此 过 程 称 重 组 修 复。15、诱 导 修 复 和 应 急 反 应(induction repair and SOS response)(SOS 修 复):由 于 DNA 受 到 损 伤 或 复 制 系 统 受 到 抑 制 所 诱 导 引 起 的 一 系 列 复 杂 的 应 急 效 应,称 为 应 急 反 应。SOS反 应 主 要 包 括 两 个 方 面:DNA损 伤 修 复(SOS修 复 或 称 诱 导 修 复)和 诱 变 效 应。SOS修 复 是 一 种 易 出 差 错 的 修 复 过 程,虽 能 修 复 DNA的 损 伤 而 避 免 死 亡。但 却 带 来 高 的 变 异 率。问 答 题 试 述 Meselson和 Stahl关 于 DNA半 保 留 复 制 的 证 明 实 验。提 示:将 E.coli放 入 以 15NH4cl为 唯 一 氮 源 的 培 养 基 中 连 续 培 养 十 几 代,使 所 有 DNA分 子 标 记 上 15N;W 15N标 记 的 E.coli再 放 入 普 通 的 14N培 养 基 中 培 养,在 细 胞 生 长 一 代、二 代、n 代 的 时 间 间 隔 内 采 样;采 用 氯 化 空 色 密 度 梯 度 离 心 分 离 DNA,并 用 紫 外 照 相 技 术 检 测 DNA所 在 位 置;结 果 如 下:其 结 果 确 切 地 证 明 DNA以 半 保 留 方 式 复 制。描 述 大 肠 杆 菌 DNA聚 合 酶 I在 DNA生 物 合 成 过 程 中 的 作 用。提 示:E.coli DNA聚 合 酶 I 是 多 功 能 酶,具 有:DNA聚 合 酶 活 性,能 按 模 板 要 求,以 5f 3 方 向 合 成 DNA,在 DNA复 制 中,常 用 以 填 补 引 物 切 除 后 留 下 的 空 隙;5-3外 切 酶 活 性,DNA复 制 后 期,用 于 切 除 RNA引 物;3-5外 切 酶 活 性,用 以 校 对 复 制 的 正 确 性,当 出 现 错 配 碱 基 时,切 除 错 配 碱 基 直 到 正 确 配 对 为 止;DNA聚 合 酶 I 不 是 DNA复 制 和 校 正 中 的 主 要 聚 合 酶,它 的 功 能 主 要 是 修 复。试 述 DNA复 制 过 程,总 结 DNA复 制 的 基 本 规 律。提 示:以 E.coli为 例,DNA复 制 过 程 分 三 个 阶 段;起 始:从 D NA上 控 制 复 制 起 始 的 序 列 即 起 始 点 开 始 复 制,形 成 复 制 叉,复 制 方 向 多 为 双 向,也 可 以 是 单 向,若 以 双 向 进 行 复 制,两 个 方 向 的 复 制 速 度 不 一 定 相 同。由 于 DNA聚 合 酶 不 能 从 无 到 有 合 成 新 链,所 以 DNA复 制 需要 有 含 3-011的 引 物,引 物 由 含 有 引 物 酶 的 引 发 体 合 成 一 段 含 3 10个 核 甘 酸 的 RNA片 段;延 长:DNA复 制 时,分 别 以 两 条 亲 代 DNA链 为 模 板,当 复 制 叉 沿 DNA移 动 时,以 亲 代 3-5 链 为 模 板 时,子 链 的 合 成 方 向 是 5-3,可 连 续 进 行,以 亲 代 5-3 链 为 模 板 时,子 链 不 能 以 3-5 方 向 合 成,而 是 先 合 成 出 许 多 5-3 方 向 的 冈 崎 片 段,然 后 连 接 起 来 形 成 一 条 子 链;终 止:当 一 个 冈 崎 片 段 的 3-OH与 前 一 个 冈 崎 片 段 的 5-磷 酸 接 近 时,复 制 停 止,由 DNA聚 合 酶 I切 除 引 物,填 补 空 隙,连 接 酶 连 接 相 邻 的 DNA片 段。DNA复 制 时,由 DNA解 旋 酶(又 称 解 链 酶)通 过 水 解 ATP获 得 能 量 来 解 开 DNA双 链,并 沿 复 制 叉 方 向 移 动,所 产 生 的 单 链 很 快 被 单 链 结 合 蛋 白 所 覆 盖,防 止 DNA的 变 性 并 保 护 其 单 链 不 被 降 解,复 制 叉 前 进 过 程 中,双 螺 旋 产 生 的 应 力 在 拓 扑 异 构 酶 的 作 用 下 得 到 调 整。DNA复 制 基 本 规 律:复 制 过 程 为 半 保 留 方 式;原 核 生 物 单 点 起 始,真 核 生 物 多 点 起 始,复 制 方 向 多 为 双 向,也 有 单 向;复 制 方 式 呈 多 样 性,(直 线 型、Q 型、滚 动 环 型 等);新 链 合 成 需 要 引 物,引 物 RNA长 度 一 般 为 几 个 10个 核 甘 酸,新 链 合 成 方 向 5-3,与 模 板 链 反 向,碱 基 互 补;复 制 为 半 不 连 续 的,以 解 决 复 制 过 程 中,两 条 不 同 极 性 的 链 同 时 延 伸 问 题,即 一 条 链 可 按 5-3方 向 连 续 合 成 称 为 前 导 链,另 一 条 链 先 按 5-3方 向 合 成 许 多 不 连 续 的 冈 崎 片 段(原 核 生 物 一 般 长 1000-2000个 核 甘 酸,真 核 生 物 一 般 长 100-200个 核 甘 酸),再 通 过 连 接 前 连 接 成 完 整 链,称 后 随 链,口 前 导 链 与 后 随 链 合 成 速 度 不 完 全 一 致,前 者 快,后 者 慢;复 制 终 止 时,需 切 除 前 导 链、冈 崎 片 段 的 全 部 引 物,填 补 空 缺,连 接 成 完 整 DNA链:修 复 和 校 正 DNA复 制 过 程 出 现 的 损 伤 和 错 误,以 确 保 DNA复 制 的 精 确 性。DNA的 损 伤 原 因 是 什 么?提 示:自 身 复 制 过 程 中 发 生 的 错 误:外 界 环 境 的 影 响,如 物 理 因 素(紫 外 线、X 一 射 线 辐 射 等),化 学 因 素(各 种 诱 变 剂、抗 菌 素 等)。造 成 啥 咤 碱 基 形 成 聚 合 体,发 生 碱 基 错 配、缺 失 和 插 入。试 列 表 比 较 常 染 色 质 DNA与 端 粒 DNA的 复 制。常 染 色 质 DNA复 制 与 端 粒 DNA复 制 的 比 较 表:常 染 色 质 DNA复 制 端 粒 DNA复 制 酶 DNA聚 合 酶 等 一 些 复 制 必 须 酶 端 粒 酶(逆 转 录 酶)模 板 常 染 色 质 DNA RNA时 间 最 先 最 后 生 物 学 功 能 确 保 遗 传 信 息 传 代 完 成 线 性 染 色 体 末 端 复 制,防 止 遗 传 信 息 的 丢 失 第 三 章 一、L 前 体 分 子;加 工;内 含 子;外 显 子;5;3;CCA;内 含 子;外 显 子;自 动 催 化;2.内 切 核 酸 酶;RNA;tRNA;5 端;前 体 RNA;3.真 核 生 物 中 的 5SrRNA;原 核 生 物 中 的 mRNA;4.核 心 启 动 子;上 游 启 动 子 元 件:5.m7GpppNinNm;PolyA;6.自 体 催 化,异 体 催 化;、选 择 性 剪 接(也 叫 可 变 剪 接):从 一 个 mRNA前 体 中 通 过 不 同 的 剪 接 方 式(选 择 不 同 的 剪 接 位 点 组 合)产 生 不 同 的 mRNA剪 接 异 构 体 的 过 程,而 最 终 的 蛋 白 产 物 会 表 现 出 不 同 或 者 是 相 互 拮 抗 的 功 能 和 结 构 特 性,或 者,在 相 同 的 细 胞 中 由 于 表 达 水 平 的 不 同 而导 致 不 同 的 表 型。增 强 子:DNA上 能 使 和 它 连 锁 的 基 因 转 录 频 率 明 显 增 加 的 序 列。转 录 单 位:DNA链 上 从 启 动 子 直 到 终 止 子 为 止 的 长 度 称 为 一 个 转 录 单 位。个 转 录 单 位 可 以 包 括 一 个 基 因,也 可 以 包 括 几 个 基 因。Pribnow区:原 核 生 物 转 录 起 始 区-10bp附 近 的 一 组 5-TATAT序 列,是 启 动 子 的 一 部 分,由 Pribnow首 先 发 现 的。R N A 的 编 辑:某 些 RNA,特 别 是 mRNA前 体 中 插 入、删 除 或 取 代 一 些 核 甘 酸,导 致 DNA编 码 的 遗 传 信 息 发 生 改 变。小 分 子 RNA:是 真 核 生 物 转 录 后 加 工 过 程 中 RNA剪 接 体(spilceosome)的 主 要 成 分,参 与 mRNA前 体 的 加 工 过 程。现 在 发 现 有 五 种 snRNA,其 长 度 在 哺 乳 动 物 中 约 为 100-215个 核 甘 酸。snRNA 一 直 存 在 于 细 胞 核 中,与 40种 左 右 的 核 内 蛋 白 质 共 同 组 成 RNA剪 接 体,在 RNA转 录 后 加 工 中 起 重 要 作 用。内 含 子:是 基 因 内 的 非 编 码 序 列,不 出 现 在 成 熟 的 RNA分 子 中,在 转 录 后 通 过 加 工 被 切 除。大 多 数 真 核 生 物 的 基 因 都 有 内 含 子。核 心 酶:通 常 由 5 个 亚 基 组 成;。,B,6 和 两 个 a 亚 基,可 写 作 a 28 B。含 有 5 个 亚 基 的 酶 叫 全 酶 a 26 B。,失 去。亚 基 的 叫 核 心 酶(a 2B B)。剪 接 体:由 snRNA和 蛋 白 质 组 成 的 核 糖 核 酸 蛋 白(核 蛋 白)复 合 物。其 功 能 是 结 合 内 含 子 两 端 的 边 界 序 列,协 助 RNA的 剪 接 加 工。核 酶:具 有 催 化 功 能(酶 的 作 用)的 RNA分 子。核 酶 能 起 作 用 的 结 构,至 少 含 有 3 个 茎(RNA分 子 内 配 对 形 成 的 局 部 双 链),1至 3个 环(RNA分 子 局 部 双 链 鼓 出 的 单 链)和 至 少 有 13个 一 致 性 的 碱 基 位 点。三、1.I型 内 含 子、II型 内 含 子、RnaseP、锤 头 型 核 酶 2.mRNA直 接 负 责 蛋 白 质 的 产 生,翻 译 完 成 后 即 可 降 解,由 于 功 能 的 差 异,稳 定 性 也 不 同,在 不 同 的 组 织 中 半 衰 期 也 会 有 差 别。rRNA参 与 核 糖 体 的 组 装,而 核 糖 体 是 一 个 相 对 稳 定 的 结 构,因 此 rRNA比 较 稳 定;tRNA参 与 翻 译 过 程,主 要 功 能 是 携 带 氨 基 酸 到 达 核 糖 体,在 完 成 一 次 携 带 功 能 后 不 可 能 降 解 而 需 要 继 续 下 一 轮 的 氨 基 酸 的 转 运 工 作。tRNA和 rRNA分 子 的 大 多 数 碱 基 形 成 了 分 子 内 碱 基 配 对,而 mRNA较 少 分 子 内 碱 基 配 对,mRNA的 核 甘 酸 长 度 远 远 大 于 tRNA和 rRNA,3.(1)四 种 方 式:拼 接 产 物 缺 失 一 个 或 儿 个 外 显 子;拼 接 产 物 保 留 一 个 或 几 个 内 含 子 作 为 外 显 子 的 编 码 序 列;外 显 子 中 存 在 5 剪 接 位 点 或 3 剪 接 位 点,从 而 部 分 缺 失 该 外 显 子;内 含 子 中 存 在 5 剪 接 位 点 或 3 剪 接 位 点,从 而 部 分 内 含 子 变 为 编 码 序 列(2)选 择 性 剪 切 是 基 因 工 程 的 基 础 方 法,应 用 的 是 限 制 性 内 切 酶,因 为 酶 具 有 专 业 性,M以 在 一 条 DNA或 RNA母 链 中 根 据 人 类 意 愿 剪 取 一 段 目 的 基 因,该 过 程 既 为 选 择 性 剪 切。mRNA既 信 使 RNA,发 生 在 翻 译 阶 段,基 因 工 程 中 通 过 剪 切 特 定 的 DNA片 段 导 入 载 体 中 再 导 入 受 体,再 通 过 细 胞 培 养 技 术,得 到 有 特 定 性 状 个 体。4.真 核 生 物 mRNA有 5 端 帽 子 结 构(m7G)和 3 端 的 Poly(A)尾 巴 真 核 细 胞 的 前 mRNA有 许 多 内 含 子(会 被 加 工 剪 接 为 成 熟 的 mRNA翻 译 真 核 细 胞 的 mRNA多 是 单 顺 反 子,即 一 条 mRNA编 码 一 条 多 肽 5.其 前 体 是 核 内 不 均 一 RNA(hnRNA)hnRNA分 子 中 大 约 只 有 10%的 部 分 转 变 成 成 熟 的 mRNA,其 余 部 分 将 在 转 录 后 的 加 工 过 程 中 被 降 解 掉。hnRNA加 工 过 程 包 括:(1)剪 接;转 录 合 成 的 hnRNA需 经 过 剪 接、切 掉 内 含 子 部 分,然 后 再 将 外 显 子 部 分 拼 接 起 来。该 过 程 有 多 种 酶 活 性 物 质(包 括 snRNA)参 与。(2)5 末 端 加 帽;m7Gpp-pmnNp,称 为“帽”。在 细 胞 核 内 进 行 的,从 真 核 生 物 帽 子 结 构 形 成 的 复 杂 可 以 看 出,生 物 进 化 程 度 越 高,其 帽 子 结 构 越 复 杂。5端 帽 子 结 构 的 重 要 性 在 于 它 是 mRNA做 为 翻 译 起 始 的 必 要 的 结 构,对 核 糖 体 对 mRNA的 识 别 提 供 了 信 号,还 可 能 增 加 mRNA的 稳 定 性,保 护 mRNA免 遭 5 外 切 核 酸 酶 的 攻 击。(3)3 末 端 加 尾 mRNA前 体 分 子 的 3,末 端 有 一 段 保 守 序 列,由 特 异 的 核 酸 内 切 酶 切 去 多 余 的 核 甘 酸,然 后 在 多 聚 A 聚 合 酶 的 催 化 下,由 ATP聚 合 生 成 多 聚 A 尾。polyA可 能 与 mRNA从 细 胞 核 转 送 到 细 胞 质 有 关,对 真 核 mRNA的 翻 译 效 率 有 促 进 作 用,并 能 稳 定 mRNA结 构,保 持 一 定 的 生 物 半 衰 期。(4)碱 基 修 饰 mRNA分 子 中 有 少 量 稀 有 碱 基(如 甲 基 化 碱 基)是 在 转 录 后 经 化 学 修 饰(如 甲 基 化)而 形 成 的。6.一 般 原 核 生 物 启 动 子 主 要 由 4 个 部 分 组 成:-35序 列、-10序 列、转 录 起 点、-35序 列 和-10序 列 间 的 距 离。-35序 列 为 RNA聚 合 酶。因 子 的 识 别 位 点。-10序 列 为 RNA聚 合 酶 牢 固 结 合 位 置 并 在 此 解 链,形 成 开 放 起 始 复 合 物。真 核 生 物 有 3 种 转 录 方 式:(1)RNA聚 合 酶 I的 启 动 子,主 要 由 两 部 分 组 成:核 心 启 动 子 足 以 使 转 录 起 始,上 游 调 控 元 件 可 以 大 大 的 提 高 核 心 启 动 子 的 转 录 起 始 频 率。(2)RNA聚 合 酶 H 的 启 动 子,主 要 负 责 蛋 白 质 基 因 和 部 分 核 小 RNA的 转 录。由 转 录 起 始 位 点、TATA box和 CAAT box以 及 上 游 启 动 子 成 分,如 增 强 子、沉 默 子 等 组 成。(3)RNA聚 合 酶 HI基 因 的 产 物 是 tRNA,5SrRNA,U6RNA等,又 可 分 3 类:位 于 基 因 内 部,没 有 TATA盒 框,由 内 部 转 录 控 制 区 组 成,如 5SrRNA基 因;位 于 基 因 上 游,有 两 个 基 本 成 分 近 端 顺 序 元 件 和 TATA盒;混 合 启 动 子,既 含 有 如 5SrRNA基 因 的 内 控 区,又 有 如 U6RNA基 因 的 上 游 启 动 子。7.同:都 以 DNA为 模 板,都 以 核 甘 酸 为 原 料,都 是 从 5-3 方 向 合 成,都 遵 循 碱 基 互 补 配 对 原 则,产 物 都 是 多 聚 核 甘 酸 异:复 制 所 需 的 底 物 为 脱 氧 核 甘 三 磷 酸,转 录 的 底 物 为 核 甘 三 磷 酸;复 制 中 A-T 配 对,转 录 中 是 A-U 配 对;RNA聚 合 酶 DNA聚 合 酶 不 同;复 制 要 引 物,转 录 不 要;复 制 得 到 与 模 板 链 互 补 的 DNA链,转 录 得 到 的 是 与 模 板 互 补 的 RNA链;转 录 过 程 中,只 有 一 条。8.(1),逆 转 录 酶 是 一 类 存 在 于 RNA病 毒 中 具 有 RNA-DNA逆 转 录 活 性 的 特 殊 蛋 白 质。由 它 催 化 转 录 合 成 的 DNA称 为 互 补 DNA(cDNA)、通 常 情 况 下,细 胞 内 的 转 录 是 由 DNA到 RNA的,所 得 RNA为 信 使 RNA(mRNA)供 蛋 白 质 合 成 作 模 板 用。而 在 部 分 RNA病 毒 中,要 实 现 自 身 的 扩 增,必 须 具 有 DNA,因 此 先 由 RNA逆 转 录 合 成 cDNA再 由 cDNA转 录 出 RNA,逆 转 录 酶 可 用 于 RT-PCR,将 RNA转 变 为 DNA后 扩 增,以 获 得 RNA的 序 列。、逆 转 录 酶 是 多 功 能 酶,具 有 RNA酶,连 接 酶,聚 合 酶 活 性.9.RNA拼 接 的 类 型:类 型 I 自 我 剪 接。特 点 是 只 要 1价、2 价 阳 离 子 和 鸟 背 存 在 即 可 自 行 发 生,无 需 提 供 能 量 和 酶 的 催 化。类 型 n 自 我 剪 接。特 点 是 能 自 我 剪 接,但 不 需 要 鸟 背。核 mRNA拼 接 体 的 拼 接。特 点 是 由 内 含 子 自 我 催 化 完 成。核 tRNA的 酶 促 拼 接。特 点 是 需 要 内 切 酶 和 连 接 酶 等,需 要 消 耗 能 量。10.DNA复 制 时,后 随 链 的 合 成 需 要 连 接 酶 将 一 个 冈 崎 片 段 的 5端 与 另 一 冈 崎 片 段 的 3 端 连 接 起 来,而 RNA的 合 成 是 从 转 录 起 点 开 始 沿 5-3 一 直 合 成 的,因 此 不 需 要 DNA连 接 酶。11.提 供 转 录 终 止 信 号 的 一 段 DNA序 列,叫 终 止 子。协 助 RNA聚 合 酶 识 别 终 止 子 的 蛋 白 质 辅 助 因 子,叫 终 止 因 子。Rh。结 合 在 新 合 成 的 RNA链 上,借 助 消 解 NTP所 获 得 能 量 沿 RNA链 移 动。RNA酶 遇 到 终 止 子 发 生 暂 停,使 Rho得 以 追 上 酶,并 与 之 相 互 作 用,造 成 释 放 RNA。12.(DRNA聚 合 酶 I催 化 产 生 前 体 rRNA的 合 成;RNA聚 合 酶 I转 录 产 物 是 45SrRNA,经 过 剪 接 修 饰 生 产 除 5SrRNA外 的 各 种 rRNA,真 核 生 物 的 rRNA基 因 是 一 类 中 度 重 复 的 基 因,拷 贝 数 都 在 数 百 个 至 数 万 个,人 类 rRNA基 因 约 为 300个 拷 贝。RNA聚 合 酶 II催 化 前 体 mRNA的 合 成。RNA聚 合 酶 HI催 化 产 生 前 体 tRNA,经 过 加 工 后 成 为 成 熟 tRNA13列 举 一 个 已 知 的 DNA序 列 编 码 一 种 以 上 蛋 白 质 的 三 种 方 法。答 案:给 定 的 一 段 DNA序 列 可 以 以 下 述 方 式 编 码 两 种 或 两 种 以 上 的 蛋 白 质:(1)可 读 框 中 在 核 糖 体 结 合 位 点 之 后 含 有 多 重 起 始 位 点;(2)以 一 两 个 碱 基 的 移 码 方 式 出 现 重 叠 的 可 读 框;(3)不 同 的 剪 接 方 式,例 如,选 择 不 同 的 外 显 子 组 合 成 不 同 的 mRNA。14.mRNA只 占 总 RNA的 3%5%,这 主 要 是 有 以 下 两 个 原 因:由 于 需 要 大 量 的 核 糖 体 和 稳 定 的 tRNA群,因 此 mRNA合 成 量 比 其 他 RNA的 量 要 少:由 于 对 内 切 酶 与 外 切 核 酸 酶 敏 感,mRNA容 易 自 发 地 降 解,所 以 在 原 核 细 胞 中 mRNA的 半 衰 期 只 有 2 15分 钟,真 核 细 胞 中 也 只 有 4一 24小 时。15.此 序 列 太 长 不 可 能 是 tRNA。如 果 它 是 rRNA,应 该 含 有 许 多 特 殊 元 件,如:假 尿 喀 嗟 和 5一 甲 基 胞 喀 嚏;同 时 应 具 有 可 以 形 成 发 夹 环 的 反 向 重 复 序 列。如 果 是 mRNA则 应 有 AUG起 始 密 码 子、一 段 相 应 的 氨 基 酸 密 码 子 和 一 个 相 应 的 终 止 密 码 子 构 成 的 可 读 框。第 四 章.一、名 词 解 释 1、翻 译:指 将 mRNA链 上 的 核 甘 酸 从 一 个 特 定 的 起 始 位 点 开 始,按 每 3 个 核 甘 酸 代 表 一 个 氨 基 酸 的 原 则,依 次 合 成 一 条 多 肽 链 的 过 程 2、遗 传 密 码:指 信 使 RNA(mRNA)分 子 上 从 5端 到 3端 方 向,由 起 始 密 码 子 A U G 开 始,每 三 个 核 甘 酸 组 成 的 三 联 体。它 决 定 肽 链 上 某 一 个 氨 基 酸 或 蛋 白 质 合 成 的 起 始、终 止 信 号 3、开 放 阅 读 框:mRNA上 由 起 始 密 码 子 开 始,到 终 止 密 码 子 结 束 的 氨 基 酸 序 列 被 称 为 一 个 开 放 阅 读 框 4、遗 传 密 码 的 简 并 性:由 一 种 以 上 的 密 码 子 编 码 同 一 个 氨 基 酸 的 现 象 5、同 义 密 码 子:编 码 相 同 氨 基 酸 的 几 个 不 同 的 密 码 子 6、起 始 密 码 子:指 导 蛋 白 质 合 成 起 始 位 点 的 密 码 子,最 常 见 的 起 始 密 码 是 AUG7、终 止 密 码 子:任 何 tRNA分 子 都 不 能 正 常 识 别 的,但 可 被 特 殊 的 蛋 白 结 合 并 引 起 新 合 成 的 肽 链 从 翻 译 机 器 上 释 放 的 密 码 子。存 在 三 个 终 止 密 码 子:UAG UAA UGA8、摆 动 学 说:密 码 子 与 反 密 码 子 的 配 对 中,前 两 对 严 格 遵 守 碱 基 配 对 原 则,第 三 对 碱 基 有 一 定 的 自 由 度,可 以 摆 动,因 而 使 某 些 tRNA可 以 识 别 一 个 以 上 的 密 码 子 9、同 工 tRNA:结 合 相 同 氨 基 酸 的 不 同 tRNA10、校 正 tRNA:通 过 反 密 码 子 区 的 改 变 将 正 确 的 氨 基 酸 携 带 到 肽 链 上,抵 消 突 变 效 应,合 成 正 常 的 蛋 白 质 11、无 义 突 变:是 编 码 某 一 氨 基 酸 地 三 联 体 密 码 经 碱 基 替 换 后,变 成 不 编 码 任 何氨 基 酸 地 终 止 密 码 UAA、UAG或 UGA,使 合 成 提 前 终 止,形 成 一 条 不 完 整 的 多 肽 链 12、中 性 突 变:基 因 中 一 对 碱 基 对 发 生 改 变,引 起 mRNA上 密 码 子 的 改 变,但 多 肽 链 中 相 应 位 点 发 生 的 取 代 并 不 影 响 蛋 白 质 的 功 能 13、移 码 突 变:在 正 常 地 DNA分 子 中,碱 基 缺 失 或 增 加 非 3 地 倍 数,造 成 这 位 置 之 后 的 一 系 列 编 码 发 生 移 位 错 误 的 改 变,产 生 无 功 能 的 蛋 白 质,这 种 现 象 称 移 码 突 变 14、错 义 突 变:是 编 码 某 种 氨 基 酸 地 密 码 子 经 碱 基 替 换 以 后,变 成 编 码 另 一 种 氨 基 酸 地 密 码 子,从 而 使 多 肽 链 的 氨 基 酸 种 类 和 序 列 发 生 改 变 15、回 复 突 变:突 变 体(mutant)经 过 第 二 次 突 变 又 完 全 地 或 部 份 地 恢 复 为 原 来 的 基 因 型 和 表 现 型 16、起 始 因 子:参 与 蛋 白 质 合 成 起 始 阶 段 的 特 异 性 蛋 白 质,原 核 起 始 因 子 有 3种(IF1、IF2、IF3),真 核 起 始 因 子 有 多 种 17、释 放 因 子:识 别 终 止 密 码 子 引 起 完 整 的 肽 链 和 核 糖 体 从 mRNA上 释 放 的 蛋 白 质 18、信 号 肽:引 导 蛋 白 质 跨 膜 进 入 内 质 网 的 信 号,通 常 指 被 运 入 内 质 网 内 腔 的 蛋 白 质 的 氨 基 末 端 的 一 段 序 列 19、信 号 序 列:在 起 始 密 码 后 面 的 一 段 编 码 疏 水 性 氨 基 酸 序 列 的 RNA区 域 20、分 子 伴 侣:一 类 在 序 列 上 没 有 相 关 性 但 有 共 同 功 能 的 蛋 白 质,它 们 在 细 胞 内 帮 助 其 他 含 多 肽 的 结 构 完 成 正 确 的 组 装,而 且 在 组 装 完 毕 后 与 之 分 离,不 构 成 这 些 蛋 白 质 结 构 执 行 功 能 时 的 组 份 21、SD序 列:在 原 核 生 物 mRNA起 始 密 码 子 AUG上 游 10个 碱 基 左 右 处,有 一 段 富 含 喋 吟 的 碱 基 序 列,能 与 核

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