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北京市售食用植物油植物甾醇构成及含量分析屠瑞莹;吴国华;罗仁才;赵榕;李兵;范赛;刘伟;赵海燕【摘 要】目的 应用超高效液相色谱(UPLC)测定北京市售食用植物油中的 4 种植物甾醇,争论植物甾醇在食用植物油中的构成及含量.方法 选择市售 56 份单一组分食用植物油和 7 份调和油样品,承受超高效液相色谱法测定菜油甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇和 -谷甾醇含量.结果 六类单一组分食用植物油中,玉米油和菜籽油甾醇总量最高,平均为 8 916.6 和 8 811.1 g/g.六类植物油均含有 -谷甾醇和菜油甾醇,且均不能全部检出全部 4 种甾醇.结论 不同类单一组分食用植物油中植物甾醇含量和百分比例各不一样,同类植物油植物甾醇比例根本全都.【期刊名称】首都公共卫生【年(卷),期】2023(012)002【总页数】5 页(P84-88)【关键词】植物甾醇;植物油;超高效液相色谱【作 者】屠瑞莹;吴国华;罗仁才;赵榕;李兵;范赛;刘伟;赵海燕【作者单位】100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013, 北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心;100013,北京市疾病预防掌握中心/北京市预防医学争论中心【正文语种】中 文【中图分类】R151.3;Q946.48植物甾醇是一大类构造和生化特性与胆固醇相像的甾醇类物质1，广泛存在于植物的根、茎、叶和果实中2。争论说明，植物甾醇具有预防动脉粥样硬化、促进胆固醇的降解代谢等诸多生理活性3-4。已被广泛了解并用于食品、药品等领域5。绝大多数植物油都含有植物甾醇，其中的植物甾醇主要以谷甾醇为主，其次为豆甾醇和菜油甾醇。我国主要的几种食用植物油如大豆、葵花籽、菜籽、米糠等， 植物甾醇含量一般为 310 mg/g6。食用植物油是植物甾醇含量较为丰富的食品之一，也是人体摄取植物甾醇极其重要的途径7。2023 年 3-9 月,对 56 份市售单一组分食用植物油进展测定，承受赵海燕等8建立的方法测定 4 种主要植物甾醇，得到各类食用植物油植物甾醇分布特征，同时测定 7 份食用调和油中甾醇含量。1 试验材料与方法1.1 原料与试剂1.1.1 样原来源： 包括大豆、葵花籽、橄榄、玉米、花生、菜籽油的 56 份食用植物油样品和 7 份调和油样品分别购于北京市超市、农贸市场、专卖店。1.1.2 试剂： 甲醇(色谱纯，Feshir 公司)，乙醇(色谱纯，Dikma 公司)，冰醋酸(分析纯，国药集团化学试剂)；试验用水均为超纯水(美国 Millipore 公司超纯水器制备)。1.1.3 标准品: 豆甾醇标准品(美国 Chromadex 公司，#ASB-00019357-100)，菜籽甾醇标准品(美国 Chromadex 公司，#ASB-00002359-025)，菜油甾醇标准品(美国 Chromadex 公司，#ASB-00003072-025)，-谷甾醇标准品(美国Chromadex 公司，#ASB-00019285-025)。1.1.4 标准储藏液： 准确称量菜籽甾醇、豆甾醇、-谷甾醇标准品各 0.010 0 g， 菜油甾醇 0.0050 g，分别置于 10.0 mL 的容量瓶中，乙醇溶解定容。菜籽甾醇、豆甾醇和 -谷甾醇浓度为 1.0 mg/mL，菜油甾醇浓度为 0.5 mg/mL，-20 保存。使用前用甲醇稀释成混合标准中间液，其中菜籽甾醇、豆甾醇、-谷甾醇浓度为 0.2 mg/mL，菜油甾醇浓度为 0.1 mg/mL。1.1.5 标准系列： 分别准确取混合标准中间液 100、250、500、750 和 1 000 L 于 10.0 mL 容量瓶中乙醇定容。得到菜籽甾醇、豆甾醇和 -谷甾醇的标准系列浓度为 2.0、5.0、10.0、15.0 和 20.0 g/mL，菜油甾醇浓度为 1.0、2.5、5.0、7.5 和 10.0 g/mL。1.2 仪器 Waters 超高效液相色谱仪(ACQUITY UPLC)，配有 PDA 检测器；离心机(MIKRO-22，Hetticr 公司)；IncuShaker 台式恒温振荡器。1.3 测定步骤1.3.1 样品预处理： 样品混合均匀后备用。1.3.2 样品处理： 称量 1.000 g 左右食用植物油样品于 50 mL 塑料离心管中，加入 15.0 mL 乙醇混匀，再参加 5.0 mL 50% 氢氧化钾溶液，置于恒温振荡器中 60 振荡 1 h，取出后放至室温，参加 5.0 mL 无水乙酸，待其冷却后乙醇定容至 50.0 mL。-20 冷藏 2 h 后取出，10 000 r/min 离心 10 min，得到样品处理液。1.3.3 仪器测定： (1)液相色谱条件：色谱柱：Endoavorsil C18 色谱柱(100×2.1 mm，1.8 m)；流淌相：甲醇；检测波长：205 nm；流速：0.3 mL/min；柱温： 35 ；进样量：2 L。(2)标准溶液测定：将 1.1.5 得到的标准溶液上机测定。(3) 样品溶液测定：将 1.3.2 得到的样品处理液上机测定。1.3.4 方法适用性试验： (1) 标准曲线及检出限：将 1.1.5 配制的标准系列上机测定， 以 4 种植物甾醇的浓度为横坐标，响应值为纵坐标绘制标准曲线。(2)周密度试验：从六类植物油中选取 1 份大豆油样品和 1 份菜籽油样品进展周密度试验，平行测定六次，计算 4 种甾醇的相对标准偏差。(3)准确度试验：以大豆油为基质样品进行了回收率的测定，其中菜籽甾醇、豆甾醇、菜油甾醇的加标量为 0.500 mg/g，-谷甾醇的加标量为 1.000 mg/g，试验重复 6 次，计算每种植物甾醇的回收率和相对标准偏差。1.3.5 结果计算： 线性回归方程由 Waters ACQUITY 自带软件拟合计算。每类单一组分食用植物油分别测定各样品的甾醇含量，结果取平均值，计算公式如下： 植物甾醇含量式中，xi 为某份样品的植物甾醇含量，n 为某类单一组分食用植物油的全部样品数量。2 结果与争论2.1 质量掌握2.1.1 方法适用性试验2.1.1.1 标准曲线及检出限结果： 4 种植物甾醇在浓度范围内的标准曲线线性关系良好(表 1)。表 1 方法的回归方程及检出限甾醇分类线性范围/g·mL-1 回归方程相关系数 r 方法定性限/g·g-1 方法定量限/g·g-1 菜油甾醇 1.0 10.0Y=5.67e+003x+1.34e+0030.999918.354.9 菜籽甾醇 2.020.0Y=4.12e+003x+1.65e+0030.999925.576.5 豆甾醇 2.020.0Y=4.83e+003x+5.02e+0030.999919.157.3-谷甾醇 2.020.0Y=4.42e+003x+6.79e+0030.999926.278.62.1.1.2 周密度试验结果： 试验说明大豆油样品的 -谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇的相对标准偏差分别为 0.5%、2.8%和 1.4%，菜籽油样品的 -谷甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇的相对标准偏差分别为 1.1%、0.8%和 2.0%。2.1.1.3 准确度试验结果： 试验说明 -谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇回收率分别为 87.3%、98.3%、89.8%和 96.1%，相对标准偏差(RSD)分别为 0.9%、0.8%、3.2%和 3.5%。2.1.1.4 方法适用性试验结果： 结果说明标准曲线的线性关系良好，周密度、准确度结果满足，此方法适用于植物油中 4 种植物甾醇的测定。2.1.2 样品检测的质量掌握： 为确保检测结果的准确性，承受加标回收试验。以大豆油样品为基质，菜籽甾醇、豆甾醇、菜油甾醇的加标量为 0.250 mg/g，-谷甾醇的加标量为 0.500 mg/g，重复试验 6 次。试验结果-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇回收率分别为 85.3%、95.5%、91.2%和 95.0%，相对标准偏差(RSD)分别为 1.2%、0.7%、2.4%和 3.3%。2.2 六类单一组分植物油中 4 种植物甾醇含量 甾醇总量以玉米油和菜籽油含量最高，平均甾醇总量为 8 916.6 和 8 811.1g/g，橄榄油中的甾醇总量最低，平均甾醇总量为 2 415.2 g/g(表 2)。表 2 食用植物油中各类植物甾醇含量/g·g-1 油品分类样品数量总植物甾醇菜油甾醇菜籽甾醇豆甾醇 -谷甾醇大豆油 154035.6(3207.44552.3)1249.6(952.3 1408.4)Tr1073.6(910.51186.1)1712.4(1331.11981.8)葵花籽油75226.9(4871.35722.8)1677.2(1578.41874.6)Tr918.4(793.91145.3)2631.3(2499.02974.3)橄榄油 72415.2(2056.72661.1)1075.0(895.11243.0)TrTr1340.2(1161.61449.5)玉米油138916.6(7074.09735.5)2503.9(1971.12765.9)Tr1092.5(856.01338.8)5320.2(4246.96131.3)花生油 82764.4(2417.42945.0)700.7(652.4732.0)Tr473.2(450.3503.0)1590.6(1314.71747.1)菜籽油 68811.1(8356.19119.3)3616.8(3512.93734.7)943.1(891.9 969.9)Tr4251.1(3914.44517.1)注：“Tr”表示低于方法的检出限或未检出。2.3 六类单一组分植物油中 4 种植物甾醇的构成比 不同类食用植物油中植物甾醇的构成比例各不一样。六类植物油均为 -谷甾醇的构成比例最高，菜油甾醇次之。大豆油相比其他几种油含有更高比例的豆甾醇，文献争论中也常以大豆油为原料提取豆甾醇9。菜籽甾醇只在菜籽油中检出，其构成约为 10%，但菜籽油未检出豆甾醇。橄榄油只含有菜油甾醇和 -谷甾醇。六类植物油均含有 -谷甾醇和菜油甾醇，并且均不能全部检出全部 4 种甾醇(表 3 和图 16)。除玉米油中的豆甾醇之外，各组分构成比例的 RSD 值均在 10%以内(表 3)，说明不同品牌的同类植物油中各植物甾醇的构成比例根本全都。表 3 食用植物油中各类植物甾醇的构成比例/%油品分类菜油甾醇菜籽甾醇豆甾醇-谷甾醇构成比例 RSD 构成比例 RSD 构成比例 RSD 构成比例 RSD 大豆31.04.540026.65.4642.42.68 葵花籽 32.16.020237.64.3250.32.49 橄榄44.46.09000055.64.86 玉米 28.14.070012.312.1259.64.22 花生25.45.310017.27.9357.44.68 菜籽 41.13.4210.73.900048.22.76图 1 大豆油色谱图图 2 葵花籽油色谱图图 3 橄榄油色谱图图 4 玉米油色谱图图 5 花生油色谱图图 6 菜籽油色谱图2.4 食用调和油中植物甾醇的含量 7 份调和油样品中总植物甾醇含量范围是 4 212.06 781.0 g/g，高于橄榄油、花生油总植物甾醇水平。7 份调和油样品均检测出菜油甾醇、豆甾醇和 -谷甾醇，菜油甾醇的含量范围是 1 319.72 137.2 g/g，豆甾醇的含量范围是 641.71 081.3 g/g，-谷甾醇的含量范围是 1811.03 684.0 g/g。此外，调和油 2 和调和油 7 检测出四种植物甾醇，相比单一组分植物油含有更多种类的植物甾醇(表 4)。表 4 市售调和油中植物甾醇的含量/g·g-1 油品分类总植物甾醇菜油甾醇菜籽甾醇豆甾醇 -谷甾醇调和油 1(食用调和油)4328.91443.70910.71974.5 调和油 2(食用调和油)5139.11748.1241.5876.62272.9 调和油 3(花生调和油)4212.01319.7Tr1081.31811.0 调和油 4(橄榄葵花油)4531.21234.9Tr713.02583.3 调和油 5(鱼油调和油)6781.02137.2Tr959.83684.0 调和油 6(橄榄葵花油)5633.31969.5Tr913.32750.5 调和油 7(食用调和油)6394.82310.2396.4641.73046.5注：“Tr”表示低于方法的检出限或未检出。3 结论承受超高效液相色谱法测定北京市售食用植物油中的 4 种植物甾醇，得到了 56 份单一组分食用植物油所含甾醇的含量和构成比例，同时，检测了 7 份食用调和油中的植物甾醇含量。测定结果对于各类食用植物油中植物甾醇成分的深入开掘和食用油的养分配比，为开展精细化膳食指导具有乐观意义。参考文献1 SABEVA N S, MXPHAUL C M, LI X G, et al. Phytosterols differentiallyinfluence ABC transporter expression, cholesterol effluxand inflammatory cytokine secretion in macrophage foamcells J. J Nutr Biochem, 2023, 22(8): 777-783.2 MOGHADASIAN M H, FROHLICH J J. Effects of dietary phytosterolson cholesterol metabolism and atherosclerosis: clinical andexperimental evidence J. Ame J Med, 1999, 107(6): 588-594.3 盛漪, 华伟, 谷文英. 植物甾醇降胆固醇生理功能及其争论进展J. 粮食与油脂,2023,(12): 25-26.4 MARANGONI F, POLI A. Phytosterolse and cardiova-scular healthJ. Pharmacol Res, 2023, 61(3): 193-199.5 杨春英, 刘学铭,陈智毅, 等. 气相色谱-质谱联用法测定 14 种食用植物油中的植物甾醇J. 中国粮油学报, 2023, 28(2): 123-128.6 崔杨棣. 油脂中甾醇资源开发及其在甾体药物工业中的应用J. 粮食与油脂, 1997, (4): 25-31.7 高蓓, 章晴, 杨悠悠, 等. 食用植物油鉴伪争论进展J. 食品安全质量检测学报, 2023, 6(7): 2789-2794.8 赵海燕, 詹未, 李兵, 等. 超高效液相色谱法同时测定食用植物油中的 4 种植物甾醇J. 中国食品卫生杂志, 2023, 28(2): 223-226.9 李万林, 钟姣姣, 冯巩, 等. 大豆油中植物甾醇提取工艺及抗氧化活性争论J. 大豆科学, 2023, 33(5): 731-734.
