溶血实验实验报告.docx

溶血实验实验报告实验目的：通过本实验认识溶血现象，并掌握溶血性实验常规的体外试管法 的基本操作实验原理：溶血是指红细胞破裂、溶解的一种现象。药物制剂引起的溶血反 应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。免疫性溶血是药物通过免疫反应 产生抗体而引起的溶血，为II型和III型变态反应；非免疫性溶血包 括药物为诱发因素导致的氧化性溶血和药物制剂引起的血液稳定性 改变而出现的溶血和红细胞凝聚等。溶血实验室观察受试物是否会引 起溶血和红细胞聚集等反应。有些药物由于含有溶血性成分或物理、化学、生物等方面的原因, 在直接注射入血管后可产生溶血现象；有些药物注入血管后可产生血 细胞凝聚，引起血液循环功能的障碍等。有些中草药含有皂苗等成分, 具有溶血作用。凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血的 药物制剂，均应进行溶血性实验。实验过程：1.2%红细胞悬液的制备取新鲜鼠血1020ml ,放入盛有玻璃珠 的三角烧瓶中振摇1。分钟或用玻璃棒搅动血液除去纤维蛋白质， 使成脱纤血液。加入生理盐水100ml ,摇匀，10001500r7min离心15分钟， 除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水按上述方法洗涤23次，至上清液不显红色为止。将所得红细胞用生理盐水配成2%的混悬液（红细胞2ml ,加生理 盐水至100ml），供试验用。2.取10ml干净玻璃试管7支，编号，1至5号管为供试品，6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管（完全溶血对照）。按表1所示，依次加入2%红细胞悬液。0。9%氯化钠溶液或蒸储水，混匀后， 立即置（37±0。5C的恒温水浴中进行温育,观察并记录各管的溶血 情况。开始每隔15分钟观察1次,1小时后，每隔1小时观察1次, 一般观察3小时。当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生时，若 受试物管中的溶液在3小时内不发生溶血和凝聚，则受试物可以注射 使用，若受试物中的溶液在3小时内发生溶血或聚集，则受试物不能 注射使用。注意事项：溶血反应发生机制复杂，目前尚无标准的临床前体内实验方法全 面评价药物制剂的溶血反应，因此在长期毒性研究中应该兼顾考虑制 剂的溶血性，注意观察溶血反应的有关指标和体征（如网织红细胞、 红细胞数、胆红素、尿蛋白、肾炎、脾脏淤血等），如出现溶血是， 应进一步研究。