免疫球蛋白M（IgM）测定（免疫比浊法）作业指导书.docx

免疫球蛋白M (IgM)测定(免疫比浊法)作业指导书1 .原理分析原理是液相免疫沉淀散射比浊终点测定法。抗血清用缓冲液稀释后加到 一份病人血清中，经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光。散射光结 果和血清中的IgM浓度成正比。2 .标本采集：2. 1标本米集前病人准备：受检者空腹2.2标本种类：血清或血浆2 . 3 标本要求：取被检者静脉血2ml,室温放置不超过4小时，分离血清备 用。3 .标本储存：待测标本在2-8存放不超过24小时，-20不超过三个月，-70 长期保存。避免反复冻融。4 .标本运输：室温运输5 .标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血不能作测定。6 .试剂6.1 试剂名称：免疫球蛋白M检测试剂盒6. 2试剂生产厂家：xx诊断试剂公司7. 3 包装规格：60Test/kit8. 4试剂盒组成：缓冲液30ml空白缓冲液30ml抗血清试剂0.5ml定标液0. 5ml磁卡1张7.仪器设备：7. 1 仪器名称：Orion TurboxR plus特定蛋白分析仪7. 2仪器厂家：xx集团公司9. 3仪器型号：Turbox plus8.操作步骤：8. 1试剂配制：8. 1. 1抗血清应用液准备：吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中，轻轻混匀，应 用液2-8可保存12个星期。8. 1. 2空白缓冲液：液体待用。8. 1. 3定标液：用0. 9%NaCL进行1： 51稀释。定标液根据IFCC提供的材料CRM470 进行标定。8. 2收集与处理样品：样品用0. 9%Nacl进行1： 51稀释。8 . 3为每一份样本测定准备一份样品空白，同样，为定标液另外准备一份定标液 空白。9 .4准备两份定标液测定（定标完成后，标准曲线数据存储在磁卡内。下次检测 如使用同批试剂，可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息）。8. 5如下准备各比色管：定标液 空白定标液 测定样品 空白样品 测定样品1150ul150ul定标液150ul150ul空白缓冲液500ul500ul抗血清应用500ul500ul液8. 6轻轻摇动混匀，室温18-25放置30±5分钟。10. 7仪器测试步骤：参见TurboxR特定蛋白分析仪作业指导书。11. 果计算：仪器直接计算并打印结果。12. 临床意义：IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是一种高效能抗体、能固定补体，具有溶菌、抑菌、中和病毒作用。IgM是初次免疫应答反应中最早出现的抗体。临床上常以测定IgM的增高作为某些传染病的早期诊断。11.参考范0.63-2. 77g/L12. 质量控制：建议使用厂家或临检中心提供的免疫球蛋白M质控液和临床标本同时检测，结果必须在控制范围内。13.操作性能：迅速简便、灵敏度高、重复性好、特异性高。14.超出范围结果处理:线性测定范围：0. 3-6. 0g/,如果结果超过6. Og/L,那么将样品用0.9%NaCl行1： 2 (1 + 1)稀释后再进行测定，结果乘以2。15. 其它 15. 1试剂中含有0.1%的叠氮钠作为保护剂，叠氮钠易和铅铜急剧化合生成易爆 炸的金属叠氮化合物，因此试剂一旦有溢出须用大量的水冲去。.15. 2当要丢弃包括所有的实验材料和试剂时，须经121c 一个小时的高压灭菌。15. 3定标液中的含有来源于人血清的材料，已经测定HCV、HBsAg和HIV抗体阴 性，应仍然视为传染源。15.4骨髓瘤的病变蛋白会干扰免疫球蛋白的测定，这时候建议用免疫电泳法进行校正。