高考生物大二轮专题突破练习专题九中学教育高考_中学教育-高考.pdf

学习好资料 欢迎下载 考纲要求 1.酶在洗涤等方面的应用(A)。2.制备和应用固相化酶(A)。3.发酵食品加工的基本方法(A)。4.微生物的分离和培养(A)。5.实验：(1)探究酶在洗涤方面的应用(b)；(2)酵母细胞的固定化技术(b)；(3)腐乳的制作(a)；(4)果酒和果醋的制作(b)；(5)微生物的分离与培养(b)；(6)DNA 的粗提取与鉴定(b)。构建网络 考点一 微生物的利用 1有关微生物实验的基本方法(1)制备培养基：计算称量溶化灭菌倒平板。(2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。(3)倒平板操作：待培养基冷却至 50 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。(4)平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。如图：学习好资料 欢迎下载 2微生物的分离与培养(1)分离方法：选择培养基。(2)某种微生物的分离 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 a筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。b计数方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。c过程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。分解纤维素的微生物的分离 a实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。b流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。(3)鉴定方法 鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌指示剂变红，则该菌能分解尿素 鉴定纤维素分解菌 错混诊断 1在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基上的细菌含量(2014 新课标，39(1)改编)()2某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013 江苏，18C)()3纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011 新课标，39(2)改编)()4在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(2011 重庆，2A)()5检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在 300 以上的实验组和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 平板进行计数(2009 安徽，6D)()6培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013 江苏，18A 改编)()题组一 从微生物的实验室培养进行命题 1(2014 新课标，39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将 1 mL 水样稀释 100 倍，在 3 个平板上用涂布法分别接入 0.1 mL 稀释液；经适当培养后，3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次 及 以 后 划 线 时，总 是 从 上 一 次 划 线 的 末 端 开 始 划 线。这 样 做 的 目 的 是_。(3)示意图 A 和 B 中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。答案(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8107(2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧 营养物质 解析(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 mL 稀释液中平均有(393837)/338 个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为 38/0.1380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为 3801003.8104，则每升水样中活菌数目为 3.81041 0003.8107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图 A 和图 B 可以看出：A 培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B 培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。题组二 从微生物培养基的组成成分及纯化方法进行命题 2(2014 四川，10)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的 选 择 培 养 基 只 能 以 苯 磺 隆 作 为 唯 一 碳 源，其 原 因 是_。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配制成_保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。答案(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素 母液(3)接种环 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理，缺少空白对照 解析(1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。根据题和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因此，需要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调节植物细胞脱分化和再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(4)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。3(2013 新课标，39)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在 37 培养箱中培养 24 h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有 A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 A_；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素 B_；含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小，说明_；含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素 D 的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。答案(1)划线(平板划线)稀释涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感 不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对 A 的弱 耐药菌(4)A 解析 微生物纯化的方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。根据微生物的特点对其进行一系列浓度梯度稀释，然后用涂布法接种于固体培养基表面，然后在适宜条件下培养；抗生和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 素是由真菌产生的，可以抑制生长、繁殖或杀死细菌等致病菌的一类物质，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明有抗生素 A 的地方该致病菌受到抑制；B 的周围没有透明圈，说明致病菌对抗生素 B 不敏感，通过 C 的透明圈要比 A 的透明圈小，说明该致病菌对 C 的敏感性比 A 的弱；D 出现了透明圈，说明该致病菌对 D 敏感，但是在透明圈上出现一个菌落，又排除杂菌污染，判断此菌落的微生物对抗生素 D 产生了耐药性。根据以上分析，为达到抗菌的目的，最好选择抗生素 A。用选择培养基分离微生物的方法(1)在基础培养基中加入抗性物质。举例：加高浓度食盐分离金黄色葡萄球菌；加青霉素分离酵母菌和细菌。(2)通过改变培养基的成分。举例：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存。培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的 CO2制造有机物生存。(3)利用培养基的特定成分。举例：当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。当纤维素为唯一碳源时，分离纤维素分解菌。考点二 传统发酵技术的应用 果酒、果醋、腐乳的制作 果酒 果醋 腐乳 原理 无氧：酿酒 C6H12O6 酶2CO22C2H5OH；有氧：酿醋 C2H5OHO2 酶CH3COOHH2O 蛋白质 蛋白酶小分子肽氨基酸；脂肪 脂肪酶甘油脂肪酸 控制条O2 无氧 有氧 有氧 和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 件 温度 1825 3035 1518 实验流程图 让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制 错混诊断 1醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2014 广东，4A)()2酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(2014 广东，4B)()3泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(2014 广东，4C)()4腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶(2014 广东，4D)()5某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵(2012 江苏，14B 改编)()6在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸(2012 江苏，21B改编)()7在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量(2012 江苏，21D 改编)()8在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在 45 处(2010 北京，1AD 改编)()题组 从果酒、果醋和腐乳制作进行命题 1(2014 江苏，24)同学设计了如图所示的发酵装置，下列有关叙述不正确的是(多选)()某 A该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵 B该装置便于果酒发酵中产生的气体排出 C去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸 D去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似 答案 ABD 解析 A 项，该装置中注水的弯曲部分可阻止空气进入，能用于果酒发酵。B 项，果酒发酵产生的 CO2可溶解在弯管的水中，CO2量多时可进一步通过水排出。C 项，醋酸菌是好氧菌，和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 因没有将无菌空气通入发酵液中，故去除弯管中的水后也不能满足底层发酵液中醋酸菌有氧呼吸的需求。D 项，去除弯管中的水后，该装置的弯管部分既能排出 CO2，也能防止空气中的微生物进入，与巴斯德的鹅颈瓶作用类似。2下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是()A参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体 B果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋 C在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与 D在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量 答案 C 解析 参与果酒发酵的酵母菌是真核生物，有线粒体；参与果醋发酵的醋酸菌是原核生物，无线粒体。果酒制成后将装置转移至温度较高的环境中，同时要通入无菌空气，可制作果醋。在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐增加盐量。3腐乳，又称豆腐乳，是我国著名的民族特产发酵食品之一。其滋味鲜美，酱香宜人，制作历史悠久，品种多样，主要有红方腐乳、酱腐乳和白腐乳等，而红曲酱腐乳既具有红方腐乳适宜的天然红曲色泽，又具有酱腐乳特有的浓郁的酱香味，深受人们的喜爱，具有广阔的市场前景。某兴趣小组按照以下工艺流程制作红曲酱腐乳，请据图回答：毛霉孢子悬浮液 红曲酱卤 豆腐切块接菌搓毛腌坯装坛兑汤发酵 成品(1)现代科学研究表明，许多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_，它是一种丝状真菌。(2)传统的制作过程中，豆腐块上生长的毛霉来自_。而现代的腐乳 生产 是在 严格的 无菌 条件 下，将优良 的毛 霉菌 种接 种在 豆 腐上，这 样可 以_ _。(3)搓 毛 是 将 长 满 菌 丝 的 白 坯 用 手 扶 抹，让 菌 丝 裹 住 坯 体，其 目 的 是_ _。(4)在逐层加盐腌坯的过程中，随层数的加高而_盐量，接近瓶口处要_铺一些。和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载(5)红曲酱卤是红曲、面酱、黄酒按一定的比例配制而成的，加入黄酒的作用是_ _。答案(1)毛霉(2)空气中的毛霉孢子 避免其他菌种的污染，以保证腐乳的质量(3)防止腐乳烂块(4)增加 多(5)可以抑制微生物的生长，能使腐乳具有独特的香味 解析(1)豆腐发酵有多种微生物参与，其中毛霉起主要作用，毛霉是一种丝状真菌。(2)传统制作中，豆腐上的毛霉来自空气中的毛霉孢子，现代腐乳生产是在无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，以避免其他菌种的污染，保证腐乳的质量。(3)搓毛促进毛霉覆盖整块腐乳，以防止其他微生物的污染导致腐乳烂块。(4)加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐变硬，在后期制作中不会过早酥烂。同时盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。(5)加酒可以抑制微生物的生长，以防腐乳烂块，同时能使腐乳具有独特的香味。1.果酒和果醋发酵装置的设计思路(1)酵母菌繁殖需要氧气，醋酸菌是好氧细菌，则果酒制作前期和果醋制作整个过程都需要氧气；酵母菌产生酒精时是厌氧的，则在充气口处应该设置开关。(2)发酵过程中产生 CO2，需要设置排气口；为了防止空气中微生物污染，排气口应该连接一个长而弯曲的胶管。(3)为便于取样及监测发酵情况，需要设置出料口。2制作果酒、果醋、腐乳的比较 项目 酵母菌 醋酸菌 毛霉 生物学分类 真核生物 原核生物 真核生物 代谢类型 异养兼性 厌氧型 异养需氧型 异养需 氧型 生产应用 酿酒、发面 酿醋 制作腐乳 氧的需求 前期需氧，后期厌氧 一直需氧 一直需氧 和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 考点三 酶的应用 1加酶洗衣粉的洗涤原理 种类 洗涤原理 洗涤实例 蛋白酶 可将蛋白质分解为易溶解或分散于洗涤液中的小分子的肽或氨基酸 血渍、奶渍及各种食品中的蛋白质污垢 脂肪酶 把脂肪水解为较易溶解的甘油和游离的脂肪酸 食品的油渍、人体皮脂、口红 淀粉酶 能使淀粉迅速分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖等 来自面条、巧克力等的污垢 纤维素酶 使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果 2.固定化酶和固定化细胞的比较 固定化酶 固定化细胞 固定酶的种类 一种 一系列 适用方法 化学结合法、物理吸附法 包埋法 特 优点 酶既可与反应物结合，又可与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用 成本低，操作容易 点 缺点 一种酶只能催化一种或一类化学反应 可能导致反应效率下降 实例 固定化葡萄糖异构酶 固定化酵母细胞 错混诊断 1玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用固定化技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本(2014 山东，35(3)()2反应产物对固定化酶的活性没有影响(2013 江苏，6B)()3相同 pH 时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉(2012 江苏，16C)()4利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物(2009 江苏，3D)()5刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液(2010 江苏，25A)()6在酶的制备和应用中，透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化(2011 江苏，和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 15B)()题组一 从酶在洗涤剂中的应用进行命题 1(2014 江苏，18)下列关于加酶洗衣粉的叙述，正确的是()A高温易使酶失活，因此冷水洗涤去污效果应该比温水好 B洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用 C在 pH 低于 7.0 的自来水中，碱性蛋白酶依然能起作用 D洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用 答案 C 解析 A 项，酶有最适温度，加酶洗衣粉的酶在水温为 4560 C 时能充分发挥洗涤效果。B 项，如果将酶直接加入到洗衣粉中，洗衣粉中的表面活性剂能影响碱性蛋白酶的活性，甚至使酶失活。C 项，加酶洗衣粉中的酶是经过特殊处理的，能耐酸、耐碱，可忍受表面活性剂和较高的温度。D 项，加酶洗衣粉中的酶的作用是催化衣物上的污渍分解，使其容易从衣物上脱落下来。2洗衣粉是人们日常生活所必需的，有位同学对加酶洗衣粉的作用很感兴趣，为此做了以下探究实验。实验过程：用天平称取加酶洗衣粉若干份，每份 5 g。制作被牛奶(主要含蛋白质、脂肪)和蓝墨水主要成分：阿拉伯树胶(植物纤维)、鞣酸与硫酸亚铁处理过的同一布料若干份(污渍大小以滴管滴数为准)。取 2 只 500 mL 烧杯，依次编号为 A、B，分别加入 200 mL 水和一份已称好的洗衣粉，放入 10 水浴锅中，并且搅拌。取 2 块被牛奶和蓝墨水处理过的布料各一份，分别同时放入烧杯中，用玻璃棒搅拌并用秒表记录除去污渍所需时间。然后，分别以水浴锅温度依次为 20、30、40、50、60、70、80，重复步骤，记录除去污渍所需要的时间，结果如表所示。不同温度下除去不同污渍所需时间/min 水温/10 20 30 40 50 60 70 80 奶渍 48 43 28 12 6 4 12 17 蓝墨水 93 86 80 72 68 67 81 105(1)请以温度为横坐标，酶促反应速率为纵坐标画出除去奶渍实验的大致情况图：和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 (2)解释在同一水温下除去两种污渍时间不同的可能原因是_。(3)此加酶洗衣粉不适宜洗涤下列哪些衣料？_。棉织品 毛织品 腈纶织品 蚕丝织品 涤纶织品 锦纶织品(4)请你为上述探究实验命题_。(5)上述探究过程(至)隐含了科学探究的_和_两个步骤。(6)上述实验涉及两项对照关系，一项是针对_的成分对照，另一项是针对_的条件对照。这里的条件对照与一般实验空白对照的区别是_。答案(1)如图 (2)加酶洗衣粉含有蛋白酶和脂肪酶，酶具有专一性，且不同酶的活性受温度影响不同(3)(4)探究不同温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响(5)提出假设 设计实验(6)不同底物 不同温度 条件对照组互为对照(或互为实验组)解析 加酶洗衣粉中添加了多种酶制剂，如碱性蛋白酶制剂和碱性脂肪酶制剂等，这些酶适宜温度不同，而且不适合洗涤蛋白质类纤维织物如羊毛、蚕丝等，因为酶能破坏蛋白质结构。该实验探究不同底物及不同温度对酶活性的影响，既可以根据底物不同设置对照，也可以根据温度不同设置对照。题组二 从酶的固定化技术进行命题 3下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母细胞的活化配制 CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞(1)在_状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复_状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时_。固定化细胞技术一般采用_法，而固定化酶常用_法和和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 _法。(2)影响实验成败的关键步骤是_。海藻酸钠溶化过程的注意事项是_。如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目_。如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明_。(3)该实验中 CaCl2溶液的作用是_。答案(1)缺水 正常的生活 体积会增大 包埋 化学结合 物理吸附(2)配制海藻酸钠溶液 小火加热(或间断加热或小火间断加热)，不断搅拌 较少(海藻酸钠浓度偏高)制作失败(3)使胶体聚沉(或形成稳定的结构)解析(1)在缺水的状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积会增大，以免涨破容器或溢出。固定化细胞技术一般采用包埋法，固定化酶常用化学结合法和物理吸附法。这是因为细胞体积大，而酶分子很小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。(2)影响实验成败的关键是配制海藻酸钠溶液，这是因为如果海藻酸钠浓度过高，很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验结果。(3)CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉。4固定化酶是从 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。如图甲、乙、丙为部分研究结果。请分析回答：(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是_。(2)乙图曲线表明浓度为_的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠溶液浓度较低时，酶活力低的原因是_ _。(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 _次，之后酶活力明显下降。(4)使用固定化酶的优点有哪些？_ _。(5)固定小麦酯酶采用双重固定法，这是因为_ _。答案(1)固定化酶比游离酶对温度变化的适应性更强且应用范围较广(2)3%海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足(3)3(4)既能与反应物接触，又能与产物分离；可以反复利用(5)酶分子很小，容易从包埋材料中漏出 固定化酶和固定化细胞的主要方法 名称 原理 图示 包埋法 将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中 化学结合法 利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上 物理吸附法 通过物理吸附作用，把酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或离子交换树脂等载体上 考点四 DNA 的粗提取与鉴定 DNA 的粗提取和鉴定方法(1)操作流程 选取材料破碎细胞，获取含 DNA 的滤液去除滤液中的杂质DNA 的析出与鉴定。(2)材料的选取：选用 DNA 含量相对较高的生物组织。(3)破碎细胞 动物细胞：易破碎，可通过吸水破裂。植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。(4)除去杂质的方法 方法一：利用 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度的不同，通过调节 NaCl 溶液的浓度除去溶于和不溶于 NaCl 溶液中的杂质。和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 方法二：利用 DNA 对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应 1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏 DNA。方法三：利用 DNA 对高温的耐受性，将滤液放在 6075 的恒温水浴箱中保温 1015 min，使蛋白质变性沉淀而 DNA 分子还未变性。(5)DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)，静置 23 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。(6)DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。错混诊断 1关于高中生物学实验的基本原理，提取组织 DNA 是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异(2013 北京，5B)()2用菜花替代鸡血作为实验材料进行“DNA 的粗提取与鉴定”，其实验操作步骤相同(2011 江苏，19D 改编)()3用不同浓度 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去除蛋白质(2009 江苏，23B)()4 利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色(2011 江苏，19C)()题组 对 DNA 的粗提取与鉴定进行命题 1(2014 江苏，16)下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是()A酵母和菜花均可作为提取 DNA 的材料 BDNA 既溶于 2 mol/L NaCl 溶液也溶于蒸馏水 C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物 DDNA 溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝 答案 C 解析 A 项，原则上含 DNA 的生物材料都可作为提取 DNA 的材料，只是 DNA 含量高的材料成功的可能性更大。B 项，DNA 在 2 mol/L 的 NaCl 溶液和蒸馏水中溶解度都较大。C 项，向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，鸡血细胞会吸水破裂，玻棒搅拌会加快血细胞的破裂，但在蒸馏水中不会析出 DNA。D 项，DNA 溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热，待冷却后变蓝色。2(2013 江苏，4)某同学用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验，下列操作错误的是()A加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 和培养实验探究酶在洗涤方面的应用酵母细胞的固定化技术腐乳的制作果酒和果醋的制作微生物的分离与培养的粗提取与鉴定构建网络考点一微生物的利用有关微生物实验的基本方法制备培养基计算称量溶化灭菌倒平板无菌技术主培养基表面连续划线的操作将聚的菌种逐步稀释分散到培养基的表面稀释涂布平板法先将菌液进行一系列的梯度稀释后涂布平板在稀释度足够高的菌液里聚在一起的微生物将被分散成单个细胞从而在培养基表面形成单个菌落如图学数筛选菌株利用选择培养基筛选菌株计数方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数法过程土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察分解纤维素的微生物的分离实验原理即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌流程土壤取样选择培学习好资料 欢迎下载 B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNA C加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 答案 A 解析 本题可用排除法进行解答。破碎植物细胞时，加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，