骨髓巨核细胞计数规程医学心理学特种医学_医学心理学-基础医学.pdf

骨秽巨核细胞计数规程 1.实验原理 用瑞氏染色法，对制备好的骨髓片进行染色，低倍镜下（必 要时转油镜确认）以 1.5cmX 3cm 为单位面积，计数巨核细 胞数，并加以分类。2标本釆集：2.1 骨髓穿刺部分：一般取胸骨、棘突、骼骨前、悄或后悄 等部分，两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。穿刺部分不同，取 材可能有明显的差异，必要时可做多部位取材，以便能得到 更准确的分析数据。2.2 骨髓采集量：一般不超过 0.2ml,否则易于稀释。2.3 骨髓取材满意的几项指标：2.3.1 抽取骨髓时，患者有特殊酸痛感。2.3.2 骨髓涂片应有骨髓小粒。2.3.3 显微镜下可见骨髓特有细胞成分，如巨核细胞、浆细 胞、网状细胞、组织嗜碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞等。3.标本储存：取材后应立即推制成骨髓薄片，并尽快送检。4.标本运输：保持干燥，室温运输。5.标本拒收的标准：重度血稀，无骨髓特有细胞成份标本。6.实验材料：瑞氏血细胞染色液 7.实验仪器：7.1 仪器名称：OLYMPUS 显微镜 7.2 仪器厂家：北京普利生公司骨髓细胞分析软件系统 7.3 仪器型号：OLYMPUS CH30&操作步骤：8.1 骨髓片瑞氏染色：将制好的干燥骨髓涂片平置于染色架 上，滴加瑞氏染色液 A液 35 滴使其迅速盖满骨髓膜，然后 加瑞氏染色 B液 3-5 滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使 A、B染液充分混匀，染色 1-2 分钟（气温低或涂片较厚时可适 当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。8.2 巨核细胞计数：将瑞氏染色干燥后的骨髓片，用低倍镜 计数巨核细胞，并按原始巨核细胞、幼稚巨核细胞、颗粒型 巨核细胞、产板型巨核细胞、裸核型巨核细胞分类记录，计 数面积以 1.5cmX 3cm 为一单位面积。9.质量控制：每 30 份样本，抽两份样本进行室内工作人员 比对分析，要求差异在 10%以内。10 临床意义：10.1 参考值:巨核细胞参考值 735 个/1.5cmX3cm 面积。分类：原始巨核细胞 0,幼稚巨核细胞 00.05,颗粒型巨核 细胞 0.10-0.27,产板型巨核细胞 0.44-0.60,裸核型巨核细胞 0.08-0.30o 10.2 原始巨核细胞增多见于巨核细胞白血病（M7）,幼稚型 巨核细胞比例增多见于特发性血小板减少性紫癫的急性型，颗粒型巨核细胞增多比例增多见于特发性血小板减少性紫 癫的积计数巨核细胞数并加以分类标本釆集骨髓穿刺部分一般取胸骨棘突骼骨前悄或后悄等部分两岁以内小儿主张用胫骨穿刺穿刺部分不同取材可能有明显的差异必要时可做多部位取材以便能得到更准确的分析数据骨髓采集量一般不超有细胞成分如巨核细胞浆细胞网状细胞组织嗜碱细胞幼稚红细胞幼稚细胞等标本储存取材后应立即推制成骨髓薄片并尽快送检标本运输保持干燥室温运输标本拒收的标准重度血稀无骨髓特有细胞成份标本实验材料瑞氏血细胞染色液好的干燥骨髓涂片平置于染色架上滴加瑞氏染色液液滴使其迅速盖满骨髓膜然后加瑞氏染色液滴轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使染液充分混匀染色分钟气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间用自来水冲去染液待干巨核细胞计数将慢性型。巨核细胞减少见于巨核细胞系统再生障碍及某 些白血病。11.变异的潜在来源 11.1 取材不当，骨髓成份被血液稀释。11.2 涂片过厚或过薄，影响巨核细胞计数。11.3 低倍镜下漏数小巨核细胞。12.操作注意事项：12.1 骨髓取材禁忌症：血友病、严重凝血因子缺之症。12.1 取材量不能过多，一般不超过 0.2ml,以防血稀。12.3 取材后，必须立即涂片，因骨髓液中纤维蛋白原含量高,会很快凝固，影响涂片。12.4 推好的髓片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞 变形。12.5 根据髓膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时 间，使染色效果满意。12.6 镜检时循序检查切勿漏检，必要时用油镜确认。13.参考文献 积计数巨核细胞数并加以分类标本釆集骨髓穿刺部分一般取胸骨棘突骼骨前悄或后悄等部分两岁以内小儿主张用胫骨穿刺穿刺部分不同取材可能有明显的差异必要时可做多部位取材以便能得到更准确的分析数据骨髓采集量一般不超有细胞成分如巨核细胞浆细胞网状细胞组织嗜碱细胞幼稚红细胞幼稚细胞等标本储存取材后应立即推制成骨髓薄片并尽快送检标本运输保持干燥室温运输标本拒收的标准重度血稀无骨髓特有细胞成份标本实验材料瑞氏血细胞染色液好的干燥骨髓涂片平置于染色架上滴加瑞氏染色液液滴使其迅速盖满骨髓膜然后加瑞氏染色液滴轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使染液充分混匀染色分钟气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间用自来水冲去染液待干巨核细胞计数将