实习六食品中人工合成色素的测定行业资料食品饮料_行业资料-食品饮料.pdf

实习六 食品中人工合成色素的测定 （一）原理 聚酰胺是一种高分子化合物，又称“尼龙 6”，在酸性条件下可与水容性酸性染料牢固 结合；在碱性条件下则可解吸色素，用纸层析法或薄层层析法进行分离鉴别后，再与标准比 较予以定性、定量。（二）试剂 1 聚酰胺粉（尼龙 6）200 目 2 正丁醇 3 无水乙醇 4 1%氨溶液 5 乙醇-氨液（9：1）6 20%柠檬酸 7 0.1%色素标准贮备液 (1mg/ml):精确称取商品色素胭脂红、苋菜红 0.1 克容于蒸馏 水，稀释至 100 毫升。8 展开剂（临用现配）正丁醇：无水乙醇：1%氨水（6：2：3）（三）仪器 9 沙氏漏斗-G3 10抽滤瓶：500ml 11 100 ml，500 ml 12血红蛋白吸管 13展开缸 14玻璃水泵 15带塞刻度比色管：10 ml 16恒温水浴 17量筒：25 ml，50 ml 18天平 19吹风机 20吸管：1 ml 21白瓷蒸发皿 22中速层吸滤纸 23温度计 24 PH 试纸 25玻璃棒 26滴管 (四)操作方法 1.样品处理（汽水类样品）：将样品用两个杯子反复倾倒 2 100 次除去 CO，精确吸取样 品 50 ml 放入 100 ml 烧杯中，加热到 70，备用。1 2吸附去杂质：称取聚酰氨粉 1g，加少量水调成糊状后倒入前处理的 70的样品中，充分搅拌使样液色素全部被吸附，将样液全部移入沙氏-G3 漏斗抽滤，用 300ml 70 PH=4 的蒸馏水分多次洗涤沉淀物，至洗液与原蒸馏水 PH 相同为止（洗涤过程必须充分搅拌，使 所用的洗涤液与聚酰氨粉充分接触）。3.解吸:用乙醇氨溶液 15mlf 分三次洗涤色素，解吸过程时时搅拌直至滤出液无色为止并收集全部解吸液。4浓缩:将色素解吸液置于蒸发皿中在 80水浴上浓缩至 0.5-1ml，转入 10ml 刻度试管中，用少量 50%乙醇洗涤蒸发皿，洗液并入并入刻度试管中。5 纸层析定性 :为了判断样品中存在有几种色素以及是什么色素，必须进行纸层析进行 鉴定。经上述浓缩后样品色素溶液于新华中速层析滤纸（8cm*16cm）距底边 2cm 的基线上点 样点样点的直径应不超过 2 毫米为宜，样点间距离以及左右纸边各距 2 厘米。点样量 20 微 升，同时根据样品颜色点上色素标准溶液点作对照。用展开剂在展开槽展开（展开前层析缸 及滤纸先用相应的溶剂系统平衡 10 分钟后再展开）。待溶剂前沿到达离起始线 12cm 处，将 滤纸取出于空气中晾干，测量各色素点的 Rf 值，于标准色素 Rf 值对照确定何种色素（以标 准色素斑点 Rf 值衡量样品各色素斑点的 Rf 值是否于标准点在同一条直线上，色素的颜色是 否 完 全 一 致，就 可 确 定 样 品 色 素 属 于 何 种 色 素）。Rf（比 移 值）=斑 点 移 动 距 离/溶 剂 前 沿 距 离 所使用的展开剂有：1)正丁醇无水乙醇 1%氨水=6 2 3 2)正丁醇吡啶 1%氨水=6 3 4 3)异丁醇无水乙醇水=3 2 2 6纸层析定量：将纸色谱的条状色斑剪下，用少量热水洗涤数次，洗液移入 10ml 比色 管中，并加水稀释至刻度，作比色测定用。分别吸取 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4ml 胭脂红或苋菜红色素标准液分别置于 10ml 比色 管中，各加水稀释至刻度。目视比色。（五）结果计算 X（g/kg，g/L）=A/（m*V2/V 1）式中 A：测定样液中色素的含量（mg）m：样品质量或体积（g，ml）2 牢固结合在碱性条件下则可解吸色素用纸层析法或薄层层析法进行分离鉴别后再与标准比较予以定性定量二试剂聚酰胺粉尼龙目正丁醇无水乙醇氨溶液乙醇氨液柠檬酸色素标准贮备液水稀释至毫升展开剂临用现配正丁醇无水乙醇精恒温水浴量筒天平吹风机吸管白瓷蒸发皿中速层吸滤纸温度计试纸玻璃棒滴管四操作方法样品处理汽水类样品将样品用两个杯子反复倾倒品放入烧杯中加热到备用次除去精确吸取样吸附去杂质称取聚酰氨粉加少量水调成糊状后倒入洗液与原蒸馏水相同为止洗涤过程必须充分搅拌使所用的洗涤液与聚酰氨粉充分接触解吸用乙醇氨溶液分三次洗涤色素解吸过程时时搅拌直至滤出液无色为止并收集全部解吸液浓缩将色素解吸液置于蒸发皿中在水浴上浓缩至转入刻 V1：样品解吸后总体积（ml）V2：样液点纸体积（ml）3 牢固结合在碱性条件下则可解吸色素用纸层析法或薄层层析法进行分离鉴别后再与标准比较予以定性定量二试剂聚酰胺粉尼龙目正丁醇无水乙醇氨溶液乙醇氨液柠檬酸色素标准贮备液水稀释至毫升展开剂临用现配正丁醇无水乙醇精恒温水浴量筒天平吹风机吸管白瓷蒸发皿中速层吸滤纸温度计试纸玻璃棒滴管四操作方法样品处理汽水类样品将样品用两个杯子反复倾倒品放入烧杯中加热到备用次除去精确吸取样吸附去杂质称取聚酰氨粉加少量水调成糊状后倒入洗液与原蒸馏水相同为止洗涤过程必须充分搅拌使所用的洗涤液与聚酰氨粉充分接触解吸用乙醇氨溶液分三次洗涤色素解吸过程时时搅拌直至滤出液无色为止并收集全部解吸液浓缩将色素解吸液置于蒸发皿中在水浴上浓缩至转入刻