药物制剂分析 药物分析 教学课件.ppt

第十二章 药物制剂分析Analysis of drugs in pharmaceutical preparationsAnalysis of drugs in pharmaceutical preparations 第一节 药物制剂分析的特点 Special feature 第二节 片剂和注射剂的分析 General detection in Tablets&Injection 第三节 片剂和注射剂中药物的含量测定 Assay Interferences&their elimination 第四节 复方制剂分析 Assay of compound preparations第一节 药物制剂分析的特点 防治和诊断疾病的需要 保证药物用法和用量的准确 增强药物的稳定性 药物使用、贮存和运输的方便 延长药物的生物利用度 降低药物的毒性和副作用Special features(一)检查内容不同一般原料药项下的检查工程不需重复检查，只检查在制备和储运过程中产生的杂质及制剂相应的检查工程。例：盐酸普鲁卡因注射剂中“对氨基苯甲酸 阿司匹林片“水杨酸(二)质量控制要求不同1.含量要求范围不同2.杂质限度要求不同3.含量测定方法不同盐酸氯丙嗪含量测定 原料：非水滴定法 片剂：UV法(测 254nm)注射剂：UV法(测 306nm)制剂含量测定：强调选择性、要求灵敏度高 原料含量测定：强调准确度、精密度(三)含量测定的计算方法不同原料药制剂1.原料药含量测定的计算容量分析法 应用例如 精密称取青霉素钾供试品，按药典规定用剩余碱量法测定含量。先参加，回滴时消耗的HCl为，空白试验消耗的盐酸液。每1ml氢氧化钠液(0.1mol/L)相当于的青霉素钾，求供试品的含量。1.2 UV法1.2.a 直接测定应用例如对乙酰氨基酚的含量测定方法为：取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数()为715计算，即得。假设样品称样量为m(g)，测得的吸收度为A，那么含量百分率的计算式为1.2.b 对照法应用例如利血平的含量测定方法为：对照品溶液的制备 精密称取利血平对照品20mg，置100ml量瓶中，加氯仿4ml使溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5m1，置50ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备 精密称取本品，照对照品溶液同法制备。精密量取对照品溶液与供试品溶液各5ml，各加硫酸滴定液与新制的0.3%亚硝酸钠溶液，摇匀，置55水浴中加热30分钟，冷却后，各加新制的5%氨基磺酸铵溶液，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀；另取对照品溶液与供试品溶液各5ml，除不加0.3%亚硝酸钠溶液外，分别用同一方法处理后作为各自相应的空白，照分光光度法，在3902nm的波长处分别测定吸收度，供试品溶液的吸收度为，对照品溶液的吸收度为，计算利血平的百分含量。2.片剂含量测定的计算2.1 容量分析方法应用例如取司可巴比妥钠胶囊标示量为20粒，除去胶囊后测得内容物总重为，称取，按药典规定用溴量法测定。参加溴液0.1 mol/L 25ml，剩余的溴液用硫代硫酸钠液滴定到终点时，用去。空白试验用去硫代硫酸钠液。按每1ml 溴液相当的司可巴比妥钠，计算该胶囊中按标示量表示的百分含量。2.2 UV法3.注射剂含量测定的计算3.1 容量分析方法应用例如维生素C注射液规格2ml：的含量测定：精密量取本品2ml，加水15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液滴定，至溶液显兰色并持续30秒钟不褪，消耗。每1ml碘滴定液相当于的C6H8O6。计算维生素C注射液的标示量%。3.2 UV法应用例如中国药典1990年版规定维生素B12注射液规格为m1，含量测定如下：精密量取本品，置25ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，置lcm石英池中，以蒸馏水为空白，在3611nm波长处吸收度为，按 为207计算维生素B12按标示量计算的百分含量应用例如用异烟肼比色法测定复方己酸孕酮注射液的含量。当己酸孕酮对照品的浓度为50g/ml，按中国药典规定显色后在380nm波长处测得吸收度为。取标示量为250mg/ml(己酸孕酮)的供试品2ml配成100ml溶液，再稀释100倍后，按对照品显色法同样显色，测得吸收度为。求供试品中己酸孕酮的含量为标示量的多少？制剂含量测定中，应考虑取样问题辅料对含量测定的干扰与排除复方制剂中各成分互相干扰其含量测定及其措施要有适宜的分析方法与一定的准确度，以保证制剂的质量。第二节 片剂和注射剂的分析片剂的检查工程【重量差异】(weight variation)【崩解时限】(disintegration)【含量均匀度】(content uniformity)【溶出度】(dissolution)【释放度】General detection in Tablets&Injection一、片剂的检查工程一重量差异(weight variation)按规定称量方法测得片剂每片的重量和平均片重之间的差异程度。检查方法 取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重，再分别准确称定每片的重量，计算每片片重与平均片重差异的百分率，即重量差异。结果判断 超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度的1倍。二崩解时限(disintegration)固体制剂在规定的介质中，以规定的方法进行检查，崩解溶散并通过筛网所需时间的限度不溶性的包衣材料或破碎的胶囊壳除外。结果判断 取药片6片检查，如有1片不合格，应另取6片复试，均应符合规定。三含量均匀度(content uniformity)小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片(个)含量符合标示量的程度。适用范围 每片/个标示量10 mg或主要含量5片重的片剂、胶囊或注射用无菌粉末 其余制剂中每片/个标示量2 mg或主要含量70标示量(Q)二、注射液的检查工程注射液系指药物与适宜的溶剂或分散介质制成的供注入体内的溶液、乳状液或混悬液，以及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂。溶剂 最常用的水性溶剂为注射用水，亦可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液。非水溶剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。常用的油溶剂为注射用大豆油。其质量应符合大豆油(供注射用)的标准。其他溶剂必须平安无害，用量应不影响疗效。附加剂 附加剂一般有渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂等。抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等。常用的抑菌剂及其浓度(g/ml)为苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。抑菌剂用量应能抑制注射液内微生物的生长。加有抑菌剂的注射液，仍应用适宜的方法灭菌。注射量超过5ml的注射液，添加的抑菌剂必须特别审慎选择。供静脉(除另有规定外)或椎管注射用的注射液，均不得添加抑菌剂。【装量】【装量差异】【可见异物】【无菌】【热原】/【细菌内毒素】【不溶性微粒】一装量为保证注射用量不少于标示量，灌装标示装量为50ml与50ml以下的注射液时，应按下表适当增加装量。除另有规定外，供屡次用量的注射液，每一容器的装量不得超过10次注射量，增加装量应能保证每次注射用量。注射液的标示装量为2ml或2ml以下者取供试品5支，2ml以上至10ml者取供试品3支，10ml以上者取供试品2支开启时注意防止损失，将内容物分别用相应体积的枯燥注射器及注射针头抽尽，然后注入标化的量具内，在室温下检视；测定油溶液或混悬液的装量时，应先加温摇匀，再用枯燥注射器及注射针头抽尽后，同前法操作，放冷至室温检视，每支注射液的装量均不得少于其标示量。注射液的标示装量为50ml以上至500ml的按最低装量检查法(附录 F)检查，应符合规定。检查方法二装量差异供试品5瓶(支)的中每瓶(支)的装量与平均装量相比，应该符合规定。如有一瓶(支)不符合规定，应该另取10瓶(支)复试，均应符合规定。凡检查含量均匀度的注射用无菌粉末，一般不再检查装量差异。三可见异物 存在于注射液、滴眼液中，在规定条件下目视可以观察到的不溶性物质，其粒度或长度通常大于50m。灯检法 光散射法结果判断溶液型静脉用注射液、注射用浓溶液和滴眼剂20支(瓶)供试品中，均不得检出可见异物，如检出可见异物的供试品不超过1支(瓶)，应另取20支(瓶)同法检查，均不得检出。混悬型注射液和混悬型滴眼液20支(瓶)供试品中，均不得检出色块/纤毛等可见异物。四无菌检查注射剂以及其他要求无菌的药品是否无菌的一种方法。对检查无影响的供试品 直接接种法 供试品对检查有干扰 薄膜过滤法五热原/细菌内毒素 内毒素为外源性致热原，可激活中性粒细胞，使之释放出内源性热原质，作用于体温调节中枢引起机体发热。热原家兔法 细菌内毒素鲎试剂法原理 鲎的血变形细胞中含有高分子量凝固酶原和凝固蛋白原。前者经内毒素激活转化为具有活性的凝固酶，通过凝固酶的酶解作用将凝固蛋白原转变为凝固蛋白，凝固蛋白通过交联酶作用相互聚合而形成牢固的凝胶。第三节 片剂和注射剂中药物的含量测定一、常见干扰及排除 糖类 硬脂酸镁 抗氧剂 参加掩蔽剂 加酸分解 参加弱氧化剂氧化 利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱的差异进行测定 溶剂油 有机溶剂稀释法 萃取法 柱色谱法一糖类淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是固体制剂的稀释剂，具有复原性，干扰氧化复原滴定：高锰酸钾法、溴酸钾法等。FeSO4原料药采用KMnO4法FeSO4片剂 采用铈量法应用例如【含量测定】取本品约，精密称定，加稀硫酸与新沸过的冷水各15ml溶解后，立即用高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)滴定至溶液显持续的粉红色。每1ml高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)相当于的FeSO47H2O。【含量测定】取本品10片，置200ml量瓶中，加稀硫酸60ml与新沸过的冷水适量，振摇使硫酸亚铁溶解，用新沸过的冷水稀释至刻度，摇匀，用枯燥滤纸迅速滤过，精密量取续滤液30ml，加邻二氮菲指示液数滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于mg的FeSO47H2O。固体制剂常用的润滑剂，以硬脂酸镁(C36H70O4Mg)和棕榈酸镁(C32H62O4Mg)为主的混合物。l 配位常数：被测离子配位常数：被测离子-EDTA Mg2+-EDTA，不干扰，不干扰l 调节调节pH或选择适宜的指示剂或选择适宜的指示剂l ，酒石酸，酒石酸(草酸草酸)可掩蔽。可掩蔽。二硬脂酸镁Mg2+干扰EDTA配位滴定；硬脂酸根干扰高氯酸非水滴定。干扰作用干扰消除方法硬脂酸根、苯甲酸盐、羧甲基纤维素钠干扰高氯酸滴定干扰消除方法l被测药物含量硬脂酸含量，干扰可以忽略；l 脂溶性有机碱性药物，碱化萃取别离后，滴定。无水草酸的醋酐溶液，与硬脂酸镁的镁离子形成沉淀，且游离的硬脂酸在醋酐溶液中不显酸性，以孔雀绿为指示剂，高氯酸为滴定液，适用于叔胺类药物或含氮杂环类药物的片剂测定。硫酸奎宁片Quinine Sulfate Tablets【含量测定】取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量约相当于硫酸奎宁，置分液漏斗中，加氯化钠与氢氧化钠溶液10ml，混匀，精密加氯仿50ml，振摇10分钟，静置，分取氯仿液，用枯燥滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，加醋酐5ml与二甲基黄指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显玫瑰红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于的(C20H24N2O2)2H2SO42H2O。应用例如【含量测定】取本品约2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml与结晶紫指示液12滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于的(C20H24N2O2)2H2SO4。三抗氧剂常用抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠及维生素C等碘量法溴量法铈量法亚硝酸钠法3.1 参加掩蔽剂丙酮或甲醛维生素C注射液 Vitamin C Injection【含量测定】精密量取本品适量约相当于维生素C，加水15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于的C6H8O6。安乃近注射液 Metamizole Sodium Injection【含量测定】精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥形瓶中，加乙醇2ml、水与甲醛溶液，放置1分钟，加盐酸溶液，摇匀，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定控制滴定速度为每分钟35ml，至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于的C13H16N3NaO4SH2O。应用例如3.2 加酸分解 Na2S2O3+2HCl 2NaCl+H2S2O3(加热)SO2+H2O NaHSO3+HCl NaCl+H2SO3(加热)SO2+H2O应用例如磺胺嘧啶钠注射液Sulfadiazine Sodium Injection本品为磺胺嘧啶钠的灭菌水溶液。【规格】(1)2ml0.4g (2)5ml1g【含量测定】精密量取本品适量(约相当于磺胺嘧啶钠0.6g)，照永停滴定法(附录A)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每 1ml亚 硝 酸 钠 滴 定 液(0.1mol/L)相 当 于 的C10H9N4NaO2S。永停滴定法用作重氮化法的终点指示时，调解R1使加于电极上的电压约为50mv。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液(1 2)15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液或0.05mol/L)迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。盐酸普鲁卡因胺注射液 Procainamide Hydrochloride Injection 本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液。【规格】(1)1ml0.1g (2)2ml0.2g (3)5ml0.5g (4)10ml1g【含量测定】精密量取本品5ml，加水40ml与盐酸溶液(12)10ml，迅速煮沸，立即冷却至室温，照永停滴定法(附录 A)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于的C13H21N3OHCl。3.3 参加弱氧化剂氧化(H202和HNO3)要求参加的弱氧化剂能将抗氧剂(亚硫酸盐等)氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。306nm243nm3.4 UV吸收谱差消除干扰盐酸异丙嗪片【含量测定】取本品10片，除去包衣后，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸异丙嗪)，置200ml量瓶中，加盐酸溶液(9 1000)适量，振摇15分钟使盐酸异丙嗪溶解，再加盐酸溶液(9 1000)稀释至刻度，用枯燥滤纸滤过，精密量取续滤液10 ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照 紫外-可见分光光度法附录 A，在249nm的波长处测定吸收度，按C17H20N2SHCl的吸收系数()为910计算，即得。盐酸异丙嗪注射液【含量测定】精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，用盐酸溶液(91000)稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置另一100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法附录 A，在299nm的波长处测定吸收度，按C17H20N2SHCl的吸收系数()为108计算，即得。甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液(USP)(USP)Menadiol Sodium InjectionMenadiol Sodium Injection本品为灭菌水溶液。含苯甲酸或苯酚抑菌剂及焦亚硫酸钠。本品为灭菌水溶液。含苯甲酸或苯酚抑菌剂及焦亚硫酸钠。【含量测定】精密移取本品适量，用盐酸稀释配制为每【含量测定】精密移取本品适量，用盐酸稀释配制为每1ml1ml含甲萘氢醌二磷酸酯钠含甲萘氢醌二磷酸酯钠5050 g g的溶液，取上述溶液的溶液，取上述溶液10ml10ml置于置于60ml60ml分液漏斗中，用分液漏斗中，用15ml15ml三氯甲烷提取三次，三氯甲烷提取三次，弃去有机层，取水层离心别离后作为供试液，于弃去有机层，取水层离心别离后作为供试液，于290nm290nm处测定其吸收值处测定其吸收值A290nmA290nm。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定，按计算含量，即得。照品同法测定，按计算含量，即得。萃取别离后萃取别离后UVUV测定测定3.5 其它方法四溶剂油 脂溶性药物(如甾体激素类)常配制成油溶液。溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响：溶液浑浊，影响UV测定、容量滴定、HPLC测定。有机溶剂稀释法适用范围 药物标示量高，稀释倍数大或测定溶剂对油溶解性好，溶剂油对测定无干扰。应用例如癸氟奋乃静注射液 Fluphenazine Decanoate Injection本品为癸氟奋乃静的灭菌油溶液。【规格】1ml25mg【含量测定】精密量取本品5ml约相当于癸氟奋乃静，加冰醋酸20ml，振摇，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于的C32H44F3N3O2S。复方己酸羟孕酮注射液Compound Hydroxyprogesterone Caproate Injection本品为己酸羟孕酮和戊酸雌二醇的灭菌油溶液。【规格】1ml己酸羟孕酮250mg与戊酸雌二醇5mg【含量测定】照高效液相色谱法附录 D测定。色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(8515)为流动相；流速每分钟；检测波长为225nm。己酸羟孕酮与戊酸雌二醇的别离度应符合要求。测定法用内容量移液管精密量取本品，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为戊酸雌二醇供试品溶液；精密量取，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为己酸羟孕酮供试品溶液；取此两种供试品溶液各10l，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积。另分别取戊酸雌二醇与己酸羟孕酮对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解并定量稀释制成每1ml约含己酸羟孕酮与戊酸雌二醇各的溶液，作为对照品溶液，取对照品溶液10l，依法测定，按外标法以峰面积计算，即得。萃取法本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液。【规格】(1)1ml10mg (2)1ml25mg (3)1ml50mg 【含量测定】HPLC测定 ODS柱；甲醇-水(7030)流动相；检测波长254nm。柱效和别离度应符合要求。内标溶液的制备 取苯丙酸诺龙约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。测定法 用内容量移液管精密量取本品适量(约相当于丙酸睾酮50mg)，置50ml 量瓶中，用乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml 置具塞离心管中，在温水浴内使乙醚挥散；用甲醇振摇提取4次(第13次各5ml，第4次3ml)，每次振摇10分钟后离心15分钟，并用滴管将甲醇液移置25ml 量瓶中，合并提取液，精密参加内标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度，摇匀，取510l 注入液相色谱仪，测定，即得。丙酸睾酮注射液 Testosterone Propionate Injection 柱色谱法USP测定丙酸睾酮注射液油溶液反相正相丙酸睾酮，甾醇，三萜类丙酸睾酮乙醇稀释紫外测定二、含量测定应用例如一盐酸苯海拉明制剂的含量测定盐酸苯海拉明 Diphenhydramine Hydrochloride本品为N,N-二甲基-2-(二苯基甲氧基)乙胺盐酸盐。含量测定方法1.原料药测定【含量测定】取本品约g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐4ml溶解后，再加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于29.18 mg的C17H21NOHCl。按枯燥品计算，含C17H21NOHCl不得少于99.0%。2.片剂含量测定2.1 酸性染料比色法(2000版)原理 碱性药物在酸性条件下与酸性染料溴甲酚绿结合生成有色的离子对，经氯仿提取后，在415nm波长处有最大吸收，利用比色法测定含量。【性状】本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显白色【规格】25 mg 含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NOHCl)应为标示量的93.0%107.0%。【含量测定】对照品溶液的制备精密称取盐酸苯海拉明对照品50mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣后精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海拉明50mg)置100ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。溴甲酚绿溶液的制备 取溴甲酚绿50mg，加氢氧化钠溶液溶解后，加邻苯二甲酸氢钾溶液50ml，盐酸溶液，加水稀释成100ml，摇匀，滤过，pH值为。测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置分液漏斗中，各加水5ml与溴甲酚绿溶液，摇匀，分别精密加氯仿10ml，振摇提取3分钟，静置分层后，分取氯仿液至具塞离心管中，离心(2500转/分)10分钟，取澄清的氯仿液，照分光光度法(附录 B)，在415nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。2.2 高效液相色谱法(2005版)【含量测定】照高效液相色谱法(附录D)测定 色谱条件与系统适用性试验 用氰基键合相硅胶为填充剂；以乙腈-水-三乙胺()用冰醋酸调节pH值至为流动相；检测波长为258 nm。理论塔板按盐酸苯海拉明峰计算不低于5000。盐酸苯海拉明峰与相邻杂质峰的别离度应符合要求。测定法 取本品20片，除去包衣后精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海拉明50 mg)，置100 ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸苯海拉明对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1 ml中约含有0.5 mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。3.注射剂含量测定【性状】本品为无色的澄明液体【规格】1ml:20 mg 含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NOHCl)应为标示量的95.0%105.0%。阴离子外表活性剂滴定法两相滴定法 (2000版)反相高效液相色谱法 (2005版)阴离子外表活性剂烷基磺酸盐滴定法 原理 使用阴离子外表活性剂(Anion Surfactant)溶液作为滴定剂的方法。常用于呈阳离子态的有机碱性药物的含量测定。终点前终点时【含量测定】精密量取本品适量(约相当于盐酸苯海拉明20mg)，置具塞锥形瓶中，加水20ml，加氯仿50ml与稀硫酸5ml，再加二甲基黄-溶剂蓝19混合指示液1ml，用磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海拉明对照品约20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的量(ml)的比值计算，即得。阴离子外表活性剂滴定法测定的其它药物 克霉唑软膏、栓、溶液 盐酸胺碘酮片 硝酸益康唑软膏 盐酸氯丙那林片(含量及均匀度)盐酸苯海索片(含量及均匀度)盐酸苯海索片(Benzhexol Hydrochloride Tablets)【含量测定】取本品25片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海索20mg)，置具塞锥形瓶中，加水8ml、稀硫酸3ml和氯仿25ml，再加二甲基黄-亚甲蓝混合指示液，用磺基丁二酸钠二辛酯溶液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海索对照品20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯溶液的量(ml)的比值计算，即得。二盐酸吗啡制剂的含量测定盐酸吗啡 Morphine Hydrochloride本品为17-甲基-3-羟基-4,5-环氧-7,8-二脱氢吗啡喃-6-醇盐酸盐三水合物。三阿片中吗啡的含量测定阿 片 Opium本品为罂粟科植物罂粟的未成熟蒴果被划破后渗出的乳状液经枯燥制成。其主要成份为吗啡、可待因、罂粟碱、那可汀、蒂巴因。【性状】本品为棕色或暗棕色膏状物。新鲜品略柔软，存放日久，那么变坚硬或脆。臭特殊，味即苦。含量限度：含吗啡按无水吗啡(C17H19NO3)计算，不得少于9.5%。【含量测定】照高效液相色谱法(附录D)测定 色谱条件与系统适用性试验 用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸二氢钾溶液-庚烷磺酸钠水溶液-乙腈(5:5:2)为流动相；检测波长为220 nm。理论塔板按吗啡峰计算不低于1000。固相萃取柱色谱适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充物；以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。精密量取浓度为每1ml中含的吗啡对照品，置处理后的固相萃取柱上，同法洗脱，用5ml量瓶收集至刻度，摇匀。分别精密量取该洗脱液与含量测定项下的对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。洗脱液与对照品色谱图中吗啡峰面积的比值应在之间。测定法 (SPE柱准备)取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3:1)与水5ml冲洗，再用pH值约为9的氨水溶液冲洗至流出液pH值约为9(碱性)，待用。(供试品溶液的制备)取本品约5g，研细(过五号筛)，精密称取约1g,置200ml量瓶中，加5%醋酸溶液适量，超声处理30分钟使吗啡溶液，取出，放至室温，用5%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液，置上述固相萃取柱上，加氨溶液(12)2滴(调pH9)，摇匀(碱化供试液上SPE柱)，待溶剂滴尽后，用水20ml冲洗，加含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脱，收集洗脱液，摇匀，精密吸取洗脱液10l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取吗啡对照品适量，精密称定，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释成每1ml约含吗啡的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。第四节 复方制剂分析复方制剂 含有2个或2个以上药物成分的制剂。分析特点 不仅要考虑制剂附加剂对测定的影响，同时要考虑药物成分之间的相互影响。选定测定方法后：各成分的测定相互不干扰，那么不须别离，直接测定。各成分的测定相互干扰，须别离后分别测定。测定方法选择原那么：在确保专属、准确、灵敏的情况下，尽量选择简便、易行、经典的方法。Assay of compound preparations应用例如一复方对乙酰氨基酚片的含量测定处方 对乙酰氨基酚 阿司匹林 咖啡因1.容量法法(USP)色谱条件色谱柱：ODS流动相：水-甲醇-冰醋酸 (69:28:3)检测波长：275nm柱温：45oC流速：二复方磺胺甲噁唑片的含量测定本品每片中含磺胺甲噁唑(C10H11N3O3S)应为0.360，含甲氧苄啶(C14H18N4O3)应为。【处方】磺胺甲噁唑 400g 甲氧苄啶 80g 制 成 1000片 SMZ、TMP在氢氧化钠液中吸收光谱图 1.双波长分光光度法(2000)法(2005)色谱系统 色谱柱：ODS 流动相：水-乙腈-三乙胺 (799:200:1)检测波长：240nm三复方炔诺孕酮片的含量测定